A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:04Introduction
- 00:42Short Tandem Target Mimic (STTM) Fragment Amplification
- 01:40STTM Purification
- 02:22T4 DNA Polymerase Reaction Mix Preparation
- 03:13Potato Virus X (PVX)-Based microRNA (miRNA) Silencing (VbMS) Vector Construction
- 04:55T4 DNA Polymerase Reaction Setup and STTM Cloning
- 07:21Potato Virus-X-Based VbMS Assay
- 10:07Results: Representative VbMS of miR165/166 in Tetraploid Potato Species
- 11:16Conclusion
Мы представляем подробный протокол для системы глушения микроРНК (VbMS) на основе вируса картофеля X (PVX) для функциональной характеристики эндогенных микроРНК (миРНК) в картофеле. Целевые мимические (ТМ) молекулы интересующей миРНК интегрированы в вектор PVX и временно экспрессируются в картофеле, чтобы заглушить целевое семейство миРНК или миРНК.
