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Aislamiento de células mononucleares de sangre periférica humana y células T CD4 + de pacientes con síndrome de Sézary para perfiles transcriptómicos
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Isolating Human Peripheral Blood Mononuclear Cells and CD4+ T cells from Sézary Syndrome Patients for Transcriptomic Profiling
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Aislamiento de células mononucleares de sangre periférica humana y células T CD4 + de pacientes con síndrome de Sézary para perfiles transcriptómicos

DOI:
10.3791/61470-v

•

09:08 min

•

October 14, 2021

•

, ,
1Department of Dermatology,University of Arkansas for Medical Sciences

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:17Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Isolation
  • 03:42CD4+CD45RO+ T Cell Purification
  • 05:18Chemical Activation
  • 07:00Results: Representative CD4+CD45RO+ T Cell Purity and Gene Expression Analysis
  • 08:01Conclusion

Summary

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Presentamos un protocolo sencillo para el aislamiento de células mononucleares de sangre periférica a partir de sangre total obtenida de pacientes diagnosticados con Síndrome de Sézary, seguido de selección de linfocitos T CD4+, su estimulación con forbol12-miristato13-acetato e ionóforo A23187, y preparación de ARN para el perfil transcriptómico.

Tags

Keywords: Peripheral Blood Mononuclear CellsCD4+ T CellsSézary SyndromeTranscriptomic ProfilingLymphocyte IsolationCell FractionationCell PurificationMolecular DefectsPathogenesisAnticoagulantDensity MediumBuffy CoatACK Lysis Buffer

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