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Isolamento de núcleos de tecido inteiro usando um método detergente e sem enzimas
JoVE Journal
Biology
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JoVE Journal Biology
Nuclei Isolation from Whole Tissue using a Detergent and Enzyme-Free Method
DOI:

07:00 min

June 24, 2020

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:50Preparation for Tissue Dissection
  • 01:36Zebrafish Brain Dissection and Single Nuclei Isolation
  • 03:59FACS Based Nuclei Enrichment
  • 05:16Results: Single Nuclei Isolation and Enrichment
  • 06:04Conclusion

Summary

Automatic Translation

O isolamento de núcleos únicos depende da dissociação e da permeabilização baseada em detergente da membrana celular, passos que precisam de otimização e são propensos a introduzir artefatos técnicos. Demonstramos um protocolo detergente e sem enzimas para o rápido isolamento de núcleos intactos diretamente de todo o tecido, produzindo núcleos adequados para RNA-seq de núcleo único (snRNA-Seq) ou ATAC-seq.

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