Journal
/
Biochemistry
/
Rensning af Tubulin med kontrollerede posttranslationale modifikationer og isotyper fra begrænsede kilder ved polymerisering-depolymeriseringscyklusser
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Purification of Tubulin with Controlled Posttranslational Modifications and Isotypes from Limited Sources by Polymerization-Depolymerization Cycles

Rensning af Tubulin med kontrollerede posttranslationale modifikationer og isotyper fra begrænsede kilder ved polymerisering-depolymeriseringscyklusser

DOI:
10.3791/61826-v

•

07:54 min

•

November 05, 2020

•

, , ,
1PSL Research University, CNRS UMR3348,Institut Curie, 2Université Paris-Saclay, CNRS UMR3348,Université Paris Sud

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:34Amplification and Lysis of Cells in Suspension Cultures
  • 02:08Amplification and Lysis of Adherent Cells and Mouse Brain Tissue Lysis
  • 03:46Sample Preparation for Analysis
  • 04:10Clarification, Polymerization, and Depolymerization of the Lysate
  • 06:27Evaluation, Quantification, and Characterization of Purified Tubulin
  • 07:19Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Denne protokol beskriver tubulinrensning fra små/mellemstore kilder såsom dyrkede celler eller hjerner med en enkelt mus ved hjælp af polymeriserings- og depolymeriseringscyklusser. Den rensede tubulin er beriget med specifikke isotyper eller har specifikke posttranslationale modifikationer og kan bruges i in vitro rekonstitutionsanalyser til at studere mikrotubuledynamik og interaktioner.

Tags

Keywords: Tubulin PurificationPosttranslational ModificationsIsotypesPolymerization-depolymerization CyclesSuspension CulturesAdherent Cell CulturesCell HarvestingLysis BufferPBS-EDTA

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/61826?article_type=v

Instrueret Protein Emballage inden ydermembranvesikler fra<em> Escherichia coli</em>: Design, produktion og oprensning
check_url/61826?article_type=v

En metode til måling af RNA<em> N</em<sup> 6</sup> -methyladenosine Ændringer i celler og væv
check_url/61826?article_type=v

Tandem affinitetsoprensning af proteinkomplekser fra eukaryote celler
check_url/61826?article_type=v

Differentialscanningskalometri - en metode til vurdering den termiske stabilitet og Kropsbygning af protein Antigen
check_url/61826?article_type=v

Isolering af Intermediate Filament Proteiner fra Multiple Musvæv til Studie Aging-associerede Post-translationelle Modifikationer
check_url/61826?article_type=v

Oprensning af biotinylerede celleoverfladeproteiner fra<em> Rhipicephalus microplus</em> Epitelceller
check_url/61826?article_type=v

Rensning af hepatocytter og sinusformet endotelceller fra mus lever Perfusion
check_url/61826?article_type=v

Profilering af Ubiquitin og Ubiquitin-lignende afhængige posttranslationelle ændringer og identificering af væsentlige ændringer
check_url/61826?article_type=v

MS2-Affinitetsrensning kombineret med RNA-sekventering i gram-positive bakterier
check_url/61826?article_type=v

Cellefraktionering af U937-celler ved isopycnic densitetsgradientrensning

Read Article