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1Research Division,Instituto Nacional de Perinatologia, 2Department of Immunobiochemistry,Instituto Nacional de Perinatologia, 3Department of Obstetrics,Instituto Nacional de Perinatologia, 4Department of Academic Programs and Continuing Education,Instituto Nacional de Perinatologia, 5Department of Infectology and Immunology,Instituto Nacional de Perinatologia, 6Clinical Research Branch,Instituto Nacional de Perinatologia, 7Department of Nutrition and Bioprogramming,Instituto Nacional de Perinatologia, 8Department of Human Genetics and Genomics,Instituto Nacional de Perinatologia, Mexico City, Mexico
Chapters
- 00:00Introduction
- 00:46Visceral Adipose Tissue Collection and Enzymatic Digestion
- 02:10RNA Extraction from Mature Adipocytes and microRNA Quantification Assay
- 03:16Characterization of Macrophage Subsets from Stromal Vascular Fraction
- 04:42Results: Identification of Macrophages from Visceral Adipose Tissue
- 06:02Conclusion
Questo protocollo fornisce un metodo efficiente di digestione della collagenasi per l'isolamento di adipociti vitali e cellule di frazione vascolare stromale-SVF dal grasso viscerale umano in un unico processo, compresa la metodologia per ottenere RNA di alta qualità dagli adipociti e la fenotipizzazione dei macrofagi SVF attraverso la colorazione di più marcatori legati alla membrana per l'analisi mediante citometria a flusso.
