Journal
/
Biology
/
Bedömning av proteininteraktioner i levande celler med FRET-sensibiliserad emission
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Assessing Protein Interactions in Live-Cells with FRET-Sensitized Emission
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Bedömning av proteininteraktioner i levande celler med FRET-sensibiliserad emission

DOI:
10.3791/62241-v

•

09:15 min

•

April 22, 2021

•

, , , , ,
1Department of Biophysics and Cell Biology, Faculty of Medicine,University of Debrecen, 2Gynecologic Oncology Division,Stanford University School of Medicine

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:12Plasmid Construction
  • 01:52Cell Culture and Transfection
  • 02:41FRET Imaging
  • 05:42Image Analysis for Detecting Absolute FRET Efficiencies Using Donor Quenching and Sensitized Emission
  • 07:01Results: Quantification of FRET Images
  • 08:28Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Förster Resonance Energy Transfer (FRET) mellan två fluoroformolekyler kan användas för att studera proteininteraktioner i den levande cellen. Här tillhandahålls ett protokoll för hur man mäter FRET i levande celler genom att detektera sensibiliserad emission av acceptorn och släckning av donatormolekylen med hjälp av konfokal laserskanningsmikroskopi.

Tags

Keywords: FRETFRET-sensitized EmissionProtein InteractionsLive-cell ImagingDonor QuenchingAcceptor Sensitized EmissionCrosstalkFluorescent ProteinsDetection EfficiencyDonor-acceptor Fusion ProteinEGFP-mCherryCell TransfectionConfocal MicroscopyEnvironmental Chamber

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/62241?article_type=v

Färgning av proteinerna i geler med Coomassie G-250 utan organiska lösningsmedel och ättiksyra
check_url/62241?article_type=v

Använda GELFREE 8100 Fraktionering System för Molekylär viktbaserad fraktionering med vätskefasen Recovery
check_url/62241?article_type=v

In vivo Detektion av protein-protein interaktioner på mikro-mönstrade ytor
check_url/62241?article_type=v

Imaging Protein-protein interaktioner In vivo</em
check_url/62241?article_type=v

iCLIP - transkriptom hela Kartläggning av protein-RNA interaktioner med individuella Nukleotid Upplösning
check_url/62241?article_type=v

4D avbildning av proteinaggregering i levande celler
check_url/62241?article_type=v

Den MultiBac Protein Complex Production Platform vid EMBL
check_url/62241?article_type=v

Protein-protein interaktioner visualiseras genom Bimolecular Fluorescens Komplettering i tobaksprotoplaster och Löv
check_url/62241?article_type=v

Undersökning av protein-proteininteraktioner i levande celler med hjälp Bioluminescence Resonance Energy Transfer
check_url/62241?article_type=v

Sondering hög densitet funktionellt protein Microarrays att upptäcka protein-proteininteraktioner

Read Article