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通过病毒样颗粒（"纳米刀片"）在永生化和原代细胞中递送Cas9 / sgRNA核糖核蛋白复合物
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Delivery of the Cas9/sgRNA Ribonucleoprotein Complex in Immortalized and Primary Cells via Virus-like Particles (“Nanoblades”)
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通过病毒样颗粒（"纳米刀片"）在永生化和原代细胞中递送Cas9 / sgRNA核糖核蛋白复合物

DOI:
10.3791/62245-v

•

09:23 min

•

March 31, 2021

•

, , ,
1LBMC, Laboratoire de Biologie et Modélisation de la Cellule Univ Lyon, ENS de Lyon, Université Claude Bernard Lyon 1, CNRS, UMR 5239, INSERM, U1210, Lyon, 69007, France, 2CIRI, Centre International de Recherche en Infectiologie Univ Lyon, Inserm, U1111, Université Claude Bernard Lyon 1, CNRS, UMR5308, ENS de Lyon, F-69007, Lyon, France

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:56Nanoblade Preparation
  • 02:45Concentration of Nanoblades on a Sucrose-Cushion
  • 04:16Monitoring Cas9 Loading Within Nanoblades and Transduction of Cells
  • 06:24Results: Characterization of Nanoblades
  • 08:29Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

我们开发了一种简单且廉价的方案，可在病毒样颗粒中加载Cas9 /单向导RNA（sgRNA）核糖核蛋白复合物。这些被称为"纳米刀片"的颗粒允许在不朽和原代细胞以及体内有效地递送Cas9 / sgRNA复合物。

Tags

Keywords: Cas9SgRNARibonucleoproteinVirus-like ParticlesNanobladesGenome EditingHEK 293T CellsTransfectionUltracentrifugationSucrose Gradient

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