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Um método automatizado de pontuação microscópica para o ensaio de γ-H2AX Foci em Linfócitos de Sangue Periféricos Humanos
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1Radiation Biophysics Division, Nuclear Medicine Department,iThemba LABS, 2Department of Biotechnology,University of the Western Cape, 3Department of Medical Biosciences,University of the Western Cape, 4Division of Medical Physiology, Department of Medicine and Health Sciences,Stellenbosch University, 5Biodosimetry Service, Instituto de Investigaciones Biológicas Clemente Estable and Academic Unit on Radiation Protection, Faculty of Medicine,University of the Republic, 6MetaSystems Hard & Software GmbH
Chapters
- 00:00Introduction
- 00:44Preparation of Samples
- 01:26Sample Irradiations
- 01:35Slide Preparation
- 02:17Fixation and Immunofluorescence γ-H2AX Staining
- 03:44Automated Metafer Scanning and Scoring
- 07:29Results
- 08:03Conclusion
Este protocolo apresenta a preparação do slide e a pontuação automatizada do ensaio de focos γ-H2AX em linfócitos sanguíneos periféricos. Para ilustrar o método e a sensibilidade do ensaio, linfócitos isolados foram irradiados in vitro. Este método automatizado de detecção de DSB de DNA é útil para aplicações de dosimetria biológica rápida e de alto rendimento.
