השתלת אפיתל פיגמנט רשתית במודל פרימטים לא אנושי למחלות רשתית ניוונית

טראומת עובר במהלך השתלת שתל אפיתל פיגמנט רשתית יכול לגרום לתוצאות חזותיות גרועות. שיטה מוצעת זו יכולה להפחית את הסבירות של קרעי גבעול בהשוואה לטכניקות קונבנציונליות. השיטה המוצעת מטפלת בגורמים רבים התורמים לטראומה גחמת, כולל שחרור הידבקויות תת-רשתיות, הדמיה טובה יותר של שכבות רשתית וכוחות גזירה משיקים במהלך היווצרות bleb.

טכניקה זו, הכוללת טיפול מקדים פלסמינוגן תוך-ויטמין, מיקרוסקופ משולב היווצרות bleb רשתית מונחית OCT, וטמפונדה נוזלית perfluorocarbon נוזלית באמצעות צינורית נשא כפול מייצר את הסבירות של טראומה גחמת עם הליך עדין יותר. מי שידגימו את ההליך יהיו ד"ר זנפינג ליו, עמית מחקר בכיר, ומר דניאל סו לין וונג, עוזר מחקר, שניהם ממעבדה. פרופ' גופאל לינגאם, יועץ בכיר, ידגים גם הוא את נהלי הניתוח.

כדי להתחיל, להשתמש במספריים Vannas לחיתוך הלחמית ליד הלימבוס עבור peritomy הלחמית 360 מעלות ולבצע ניתוח קהה כדי להגדיל את peritomy. השתמש בלהב מיקרו vitreoretinal 25 מד לעשות חתך שלושה מילימטר בסקלרה בשעה שמונה בשעה בעין ימין או ארבע בערב בעין שמאל. הכנס צינורית עירוי יציאה בצד מותאם אישית 25 מד ותפר באמצעות תפר ויקריל 7-0.

לאחר אישור המיקום התוך-תכליתי, התחל את עירוי תמיסת המלח המאוזנת והגדר את המערכת כדי לשמור על הלחץ התוך עיני של 20 מיליליטר של כספית. השתמש trocar שטוח ראש שטוח 25 מד כדי לחרוט את הסקלרה בשעה שתיים בעין ימין או 10 בערב בעין שמאל. הכנס אור נברשת 25 מד לתוך trocar שטוח הראש ולאבטח את האור עם סרט דביק.

כוונן את מקור האור לכ- 60% בצע סקלרוטומיה נוספת בשעה 10 עבור עין ימין או שתיים עבור העין השמאלית כפי שהוכח. מניחים תפר בצורת U Vicryl 7-0 סביב sclerotomy מבלי לקשור את הקשרים. הכנס את trocar vitrectomy דרך sclerotomy.

בצע את vitrectomy סביב נמל הכניסה, ואחריו vitrectomy הליבה קצרה עם מקסימום של 5, 000 חתכים לדקה ושאיפה מקסימלית ב 400 מילימטרים של כספית. הזריקו 20 עד 50 מיקרוליטרים של טרימצינולון להדמיה טובה יותר של הזגוגית. הפרד את הגוף הזגוגי מהרשתית כדי לגרום לניתוק זגוגי אחורי.

מקם את הגפנים מעל הדיסק האופטי כדי לאפשר אינדוקציה עדינה של הניתוק הזגוגי האחורי. שמור על vitrector רק על שאיפה לכל היותר 400 מילימטרים של כספית מבלי לערב כל חיתוך. במידת הצורך, השתמש במלקחיים התוך עיניים של 25 מד כדי לקרוע את קליפת המוח הזגוגית להקלה על הניתוק.

פתח את קרום היאלויד האחורי עם החותך ולהסיר את החצאית הזגוגית המנותקת עד לבסיס הזגוגית. שאפו כל טרימצינולון שנותר על פני הרשתית. הזריקו מיליליטר אחד עד שני מיליליטר של נוזל perfluorocarbon כדי לכסות את הקוטב האחורי עד לרשתית הקדמית והמרכזית ההיקפית.

הזן את העין עם צינורית הזרקה תת יבשתית. השתמש או 25 על 41 מד מותאם אישית כפול נשא הזרקת צינורית או 25 על 38 מד הזרקת צינורית הזרקה תת-יבשתית מחובר מזרק 250 מיקרוליטר להזרקה תת-רשתית. הגדר את הלחץ התוך עיני לאפס עד ארבעה מילימטרים של כספית.

בצע בעדינות הזרקה תת-רשתית של BSS כדי לגרום לניתוק רשתית מקומי. ברגע שהבלבן חוצה את הגומה, תפסיק להזריק שטויות. צור bleb שני מכיוון נפרד.

למזג את שני blebs לנתק לחלוטין את הגומה. אפשר את פונקציית הטומוגרפיה של קוהרנטיות אופטית תוך ניתוחית כדי לדמיין היווצרות bleb, להבטיח כי סריקות הקו והקוביות נמצאות במצב בחדות גבוהה כדי לרכוש תמונה בגומה. הגדל את החתך של הרשתית ל 1.5 מילימטרים עם זוג מספריים vitreoretinal 25 מד אנכי כדי לאפשר גישה למרחב subretinal להשתלה.

הגדר את הלחץ התוך עיני ל 50 מילימטרים של כספית. השתמש צינורית קצה סיליקון מוברש כדי להסיר את נוזל perfluorocarbon. השתמש בסכין חתך 1.4 מילימטר כדי להאריך את sclerotomy.

הזן מכשיר לולאה 20 מד הרחבה ולהסיר את אפיתליה פיגמנט רשתית מארחת תת עינית על ידי גירוד. הכנס את קצה מכשיר היורה דרך sclerotomy ולעבור דרך חלל הזגוגית בלחץ תוך עיני של 20 מילימטרים של כספית. הזריקו את השתל לכיוון החלל התת-יבשתי דרך קצה הרטינוטומיה שנוצרה ממשטח הרשתית כאשר צד נושא התא פונה לקרום ברוקס והקסנוגרפט הפונה לצולי האור.

דמיינו את מיקום השתל על ידי הפעלת פונקציית טומוגרפיה של קוהרנטיות אופטית תוך ניתוחית. התאם את מיקום השתל עם צינורית הזרקת תת-רשתית או מספריים תוך עיניים מעוקלות 25 מד כדי להבטיח שהשתל מונח שטוח על קרום ברוקס בחלל התת-יבשתי עם רשתית מעל רשתית שלמה, כמו גם ממוקם רחוק מהרטינוטומיה שנוצרה ולא פוגע באתר רטינוטומיה. השתמשו בצינורית קצה סיליקון מוברש לחילופי נוזלים-אוויר ושאפו בעדינות את הנוזל התת-רשתי מהניתוק הרשתית המלבין וקצה הרטינוטומיה עד שהרשתית מחוברת מחדש מעל השתל.

לאחר מכן כדי לסיים את הניתוח, סגור את sclerotomy יציאת העבודה באמצעות תפר ויקריל ממוקם מראש 7-0. ניהול 0.05 מיליליטר לשני מיליגרם של טרימצינולון ללא חומרים משמרים תוך-ויטמין בשעה שמונה. הסר את הנברשת ואת צינורית עירוי.

תסגור את הסקלרוטומיות האלה עם תפרי ויקריל. למשש את העין כדי להבטיח כי הלחץ התוך עיני הוא בטווח המקובל. הזרקו אוויר מסונן או BSS באמצעות מחט 30 מד במידת הצורך.

הדמיה in vivo של העין השמאלית תת-עינית פיגמנט פיגמנט אפיתל השתלת שתל אפיתל על שיטות הדמיה שונות נערכה עד שלושה חודשים. צילום הפונדוס הצביע על כך שהשתל המושתל בגומה לא היגר עם הזמן. הדמיית הפלואורסצנטיות האוטומטית של פונדוס הראתה שינויים מינימליים בהיפר-פלואורסצנטיות אוטומטית החופפת לשתל האפיתל של הפיגמנט הרשתית.

אנגיוגרפיה פלואורסצ'ין בשלב מוקדם ומאוחר לא הראתה שום דליפה סביב השתל. תמונות טומוגרפיה קוהרנטיות אופטית מקולרית הראו שימור של שכבות הרשתית החיצונית על השתל ככל שהזמן התקדם, מה שמרמז על הפונקציונליות של תאי האפיתל פיגמנט הרשתית. הכתמת HE הראתה שכבות רשתית שלמות ללא ראיות לדמעות מיקרו.

טומוגרפיה קוהרנטיות אופטית תוך ניתוחית מאפשרת הדמיה של מידות bleb ואת קרע הגומה הפוטנציאלית תוך ניתוחית במהלך ניתוק הגומה. נוכחות של קרע יכול להפריע היווצרות bleb. ההצלחה של היווצרות bleb נכונה צוין על ידי היעדר קרע.

להערכה פונקציונלית של הרשתית, הערכות אלקטרורטינוגרמה שדה מלא של העין אפיתל אפיתל הפיגמנט הרשתית קסנוגרפט בוצעו. היעדר הידרדרות משמעותית בצורת הגל האלקטרו-ארטינוגרמית מצביע על כך שתפקודם של קולטני האור של מוט וחרוט נשמר עם הקסנוגרפטים. במהלך היצירה של bleb רשתית מקומית, לעשות את זה בעדינות רבה כמו כל שינוי פתאומי במהירות סילון יכול להוביל קרעים גומה.

ביצוע צעד זה לאט הוא המפתח להפחתת פגיעה בגומה. הדמיה מולטימודלית כולל פלואורסצנטיות אוטומטית של פונדוס, אנגיוגרפיה פלואורסצ'ין וטומוגרפיה של קוהרנטיות אופטית יחד עם מחקרים אלקטרופיזיולוגיים יכולים לספק תובנה גדולה יותר על שרידות השתל וגורמים המשפיעים עליו.