Journal
/
Biochemistry
/
Rutinemæssig indsamling af kryo-EM-datasæt i høj opløsning ved hjælp af 200 KV transmissionselektronmikroskop
JoVE Journal
Biochemistry
This content is Free Access.
JoVE Journal Biochemistry
Routine Collection of High-Resolution cryo-EM Datasets Using 200 KV Transmission Electron Microscope

Rutinemæssig indsamling af kryo-EM-datasæt i høj opløsning ved hjælp af 200 KV transmissionselektronmikroskop

DOI:
10.3791/63519-v

•

09:49 min

•

March 16, 2022

•

, , , , , , , , ,
1Materials and Structural Analysis Division,Thermo Fisher Scientific, 2Max Planck Institute of Biochemistry, Molecular Structural Biology, 3Materials and Structural Analysis Division,Thermo Fisher Scientific

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:27Grid Loading, Mapping, and Selection of Best Cryo-EM Grids for Data Collection
  • 02:36Setting up a Data Collection Session in the Single Particle Analysis Software
  • 05:44Final Microscope Alignments Before Starting Data Collection
  • 07:15Results: Gallery of Grids, Cryo-EM Reconstruction of Apo-Ferritin, and Effect of Energy Filtering on Cryo-EM Images
  • 08:56Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Kryo-EM-kort over makromolekyler i høj opløsning kan også opnås ved hjælp af 200 kV TEM-mikroskoper. Denne protokol viser de bedste fremgangsmåder til indstilling af nøjagtige optikjusteringer, dataindsamlingsordninger og udvælgelse af billedbehandlingsområder, der alle er afgørende for en vellykket indsamling af datasæt i høj opløsning ved hjælp af en 200 kV TEM.

Tags

Keywords: Cryo-EM200 KV TEMHigh-resolutionProtein StructureProtein ComplexesMolecular MechanismsStructure-based Drug DesignApoferritinProteasomeAuto GridsLiquid NitrogenAutomated Data CollectionAtlasEPU

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/63519?article_type=v

Metode til at visualisere og analysere membran interagerende proteiner af Transmission Electron Microscopy
check_url/63519?article_type=v

High-resolution single particle analyse fra elektronkryo-mikroskopi billeder ved hjælp af SPHIRE
check_url/63519?article_type=v

Cryo-EM og enkeltpartikelanalyse med Scipion
check_url/63519?article_type=v

Forberedelse af prøvestøttefilm i transmissionselektronmikroskopi ved hjælp af en støtteflådsblok
check_url/63519?article_type=v

Forberedelse af lameller fra glasagtige biologiske prøver ved hjælp af et dobbeltstrålescanningselektronmikroskop til kryo-elektrontomografi
check_url/63519?article_type=v

Forberedelse af højtemperaturprøvegitre til Cryo-EM
check_url/63519?article_type=v

Micropatterning Transmission ElektronMikroskopiGitre til direkte cellepositionering i hele celle kryo-elektrontomografi arbejdsprocesser
check_url/63519?article_type=v

Kvantificering af subcellulær glykogenfordeling i skeletmuskelfibre ved hjælp af transmissionselektronmikroskopi
check_url/63519?article_type=v

En robust arbejdsgang for behandling af kryo-elektronmikroskopi (cryo-EM) med cryoSPARC, RELION og Scipion
check_url/63519?article_type=v

Fremme af højopløsningsbilleddannelse af virussamlinger i væske og is

Read Article