Journal
/
/
Masskänslig partikelspårning för att karakterisera membranassocierad makromolekyldynamik
JoVE Journal
Biochemistry
This content is Free Access.
JoVE Journal Biochemistry
Mass-Sensitive Particle Tracking to Characterize Membrane-Associated Macromolecule Dynamics
DOI:

13:30 min

February 18, 2022

, , ,

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:43Cleaning of Microscope Slides
  • 01:48Assembly of Flow Chambers
  • 02:41Supported Lipid Bilayer (SLB) Formation
  • 03:31Imaging
  • 04:31Data Analysis
  • 10:25Results: Native and Ratiometric View of Exemplary Surfaces
  • 11:01Results: Calibration of the Mass-to-Contrast Relation for MSPT Measurements
  • 12:15Results: Deciphering Oligomer States of Membrane-Associated Proteins
  • 12:57Conclusion

Summary

Automatic Translation

Detta protokoll beskriver en iSCAT-baserad bildbehandling och enpartikelspårningsmetod som möjliggör samtidig undersökning av molekylmassan och det diffusiva beteendet hos makromolekyler som interagerar med lipidmembran. Steg-för-steg-instruktioner för provberedning, mass-till-kontrastkonvertering, filmförvärv och efterbehandling tillhandahålls tillsammans med anvisningar för att förhindra potentiella fallgropar.

Related Videos

Read Article