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마이크로RNA 클러스터 네트워크 분석을 위한 CRISPR 유전자 편집 도구
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Biology
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JoVE Journal Biology
CRISPR Gene Editing Tool for MicroRNA Cluster Network Analysis
DOI:

10:40 min

April 25, 2022

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:58Preparation of CRISPR Gene Editing and Guide RNA Design to Generate miRNA Cluster Knockout Cell Lines
  • 02:06Generation of Stable Lentiviral Cell Lines Carrying the DOX-Inducible Cas9 Expression Cassette
  • 03:20Performing CRISPR Reactions by Cas9 Induction and Synthetic Guide RNA Transfection of Cells Using a High-Throughput Format
  • 07:22PCR Genotyping of CRISPR Cell Lines Using Crude Cell Lysates
  • 08:37Results: High-Throughput CRISPR Experimental Design to Generate Multiple miR-888 Cluster Deletion Combinations
  • 09:51Conclusion

Summary

Automatic Translation

이 프로토콜은 단일 실험 내에서 35kb만큼 큰 고유한 miRNA 클러스터 부재 결실 조합을 운반하는 유전자 변형 세포주 패널의 신속한 생성을 가능하게 하는 마이크로RNA 클러스터 네트워크 분석을 위한 고처리량 클러스터 규칙적인 간격 간 짧은 팰린드로믹 반복(CRISPR) 유전자 편집 워크플로우를 기술합니다.

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