A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Introduction
- 00:42Saccharomyces cerevisiae Cell Culture
- 02:00EdU Labeling
- 02:40Cell Fixation and Permeabilization
- 03:20Click-It Reaction for Cytometry Analysis
- 06:32Results: Using EdU Labeling to Determine the S-Phase Duration in Saccharomyces cerevisiae
- 07:56Conclusion
Vi beskriver to komplementære protokoller for nøjagtigt at bestemme S-fasevarighed i S. cerevisiae ved hjælp af EdU, en thymidinanalog, som inkorporeres in vivo og detekteres ved hjælp af klikkemi ved mikroskopi og flowcytometri. Det giver mulighed for let karakterisering af varigheden af DNA-replikation og oversete replikationsfejl hos mutanter.
