Journal
/
Biochemistry
/
Pulldown-analyse kombineret med co-ekspression i bakterieceller som et tidseffektivt værktøj til test af udfordrende protein-protein-interaktioner
JoVE Journal
Biochemistry
Author Produced
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Pulldown Assay Coupled with Co-Expression in Bacteria Cells as a Time-Efficient Tool for Testing Challenging Protein-Protein Interactions

Pulldown-analyse kombineret med co-ekspression i bakterieceller som et tidseffektivt værktøj til test af udfordrende protein-protein-interaktioner

DOI:
10.3791/64541-v

•

07:03 min

•

December 23, 2022

•

, , , ,
1Department of the Control of Genetic Processes, Institute of Gene Biology,Russian Academy of Sciences, 2Center for Precision Genome Editing and Genetic Technologies for Biomedicine, Institute of Gene Biology,Russian Academy of Sciences

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:56Co-Transformation of Escherichia coli
  • 02:18Expression
  • 03:21Pulldown Assay
  • 04:52Results: Bacterial Co-Expression of Differentially Tagged Proteins
  • 06:15Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Her beskriver vi en metode til bakteriel co-ekspression af differentielt mærkede proteiner ved hjælp af et sæt kompatible vektorer, efterfulgt af de konventionelle pulldown-teknikker til at studere proteinkomplekser, der ikke kan samles in vitro.

Tags

Pulldown AssayProtein-protein InteractionsCo-expressionHeterodimersProtein Complex AssemblyExpression OptimizationRapid ScreeningEscherichia ColiBacterial TransformationIPTG InductionCell LysisAffinity Purification

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Fluorescens Anisotropi som værktøj til at studere protein-protein interaktioner

Udnytte den Ethylen-frigivende forbindelse, 2-Chloroethylphosphonic Acid, som værktøj til at studere Ethylen Respons Bacteria

Brug Stillads Liposomer at Rekonstituer Lipid-proksimal protein-protein interaktioner<em> In vitro</em

Time-løst elektrosprayioniserings Brint-deuterium Exchange-massespektrometri til at studere proteiners struktur og Dynamics

Biotinylated celle-gennemtrængende peptider til at studere intracellulær Protein-protein interaktioner

Et fluorescens udsving spektroskopi Assay af Protein-Protein interaktioner på celle-celle kontakter

Anvendelse af Biolayer interferometri (BLI) til undersøgelse af protein-protein interaktioner i transkriptionen

Interaktioner med og membran Permeabilisering af hjernen mitochondrier af amyloid Fibrils

MS2-Affinitetsrensning kombineret med RNA-sekventering i gram-positive bakterier

A High-Throughput Enzyme-Coupled Activity Assay to Probe Small Molecule Interaction with the dNTPase SAMHD1

Read Article