Tüm primat beyin genelinde hedef proteinlere büyük ölçekli İmmuno gömerek yeni doku istihdam ve belirli bir zamanda birden fazla serbest bölümleri toplu boyama için yaratıcı cihazların kullanımı ile kombine yöntemler kesit mümkündür.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Tüm Maymun Beyin Büyük Ölçekli Protein Algılama için Toplu immün
Bu makalede
Özet
Özet
Immünhistokimyasal (İHK) hedef proteinlerin tespiti için en yaygın kullanılan laboratuvar teknikleri biridir
Protokol
Immunohistochemisty çeşitli deneysel hayvan modellerinde beyin protein ifade tanımlamak için en yaygın olarak kullanılan tekniklerin biridir. Benzer beyin büyüklüğü ile kemirgenler ve diğer ortak deneysel modeller beyinlerinde sistematik immünohistokimyasal işlemleri yürütmek nispeten kolaydır. Ancak, bütün bir maymun beyin çapında İmmuno prosedürleri yürütmek için nasıl kapsamlı bir hesap sağlar bilgimizi yayınlanmış hiçbir çalışma yoktur. Aşağıda, çeşitli hedef proteinlerin büyük ölçekli immünohistokimyasal tespiti için bütün bir maymun beyni nasıl hazırlamak için ayrıntılı bir açıklama. Bu çalışma, ticari ve akademik çalışmaların arasındaki işbirliğinin bir sonucu....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Mümkün bütün bir maymun beyin proteinlerin büyük ölçekli algılama yapan bu yordamı iki kritik adımlar vardır. Bir NSA özel bilgi kalır gömme ve kesit protokolü. Diğer HistoTools tarafından sağlanan boyama yemekleri ve sepetler. Ikincisi, belirli bir zamanda çok sayıda (~ 40) bölümleri kolay ve hızlı kullanım sağlar. Aynı zamanda beyin genelinde tüm bölümleri düzgün tedavi için gerekli olan araçları sağlar ve bilimsel bir ses histolojik tedavi için yapar. Buna ek olarak, gömülü yerlerinden kullanılması, kurutulmuş ve dak.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların beyan edecek herhangi bir çıkar çatışması yoktur.
Teşekkürler
Frank Ervin, Roberta Palmour ve primat çalışmaları devam eden desteği, Batı Hint Adaları, St Kitts bulunan Davranış Bilimleri Vakfı Laboratuar personeline teşekkür ediyoruz. Kanada Sağlık Araştırmaları (AC) ve Ulusal Mühendislik ve Kanada Araştırma Konseyi (MP) Enstitüleri işletme hibeleri - Bu çalışma Frajil X Araştırma SZ Kanada Vakfı (FXRFC) ve bir burs ile desteklenmiştir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| anti-FMRP monoklonal antikor | Chemicon International | MAB2160 | Fikse edilmiş dokuda antijen geri kazanımı gerektirir. |
| anti-NeuN monoklonal antikor | Chemicon International | MAB377 | Y/A |
| anti-Neurofilament H monoklonal antikor | Sternberger Monoclonals Inc. | SMI32 | Y/A |
| Antijen Maske Açma Solüsyonu | Vector Laboratories | H-3300 | Y/A |
| Normal at serumu | Invitrogen | 16050122 | 500 mL |
| Biyotinize Anti-Fare IgG (H+L), at kaynaklı | Vector Laboratories | BA-2000 | |
| VECTASTAIN ABC Kiti (Standart) | Vector Laboratories | PK-4000 | 1.5 mg |
| Yüzen kesitler için boyama kabı | HistoTools | 10009 | 12 x 65 mm |
| Boyama taşıma sepeti | HistoTools | 10012 | büyük (12 x 65 mm kaba uygundur) |
| Triton X-100 | Fisher Scientific | P8514B | Y/A |
| DAB | Fisher Scientific | AC11209-0050 | Y/A |
Kaynaklar
- Guide to the Care and Use of Experimental Animals. Olfert, E. D., Cross, B. M., McWilliam, A. A. , Canadian Council on Animal Care. Ottawa. (1993).
- Devys, D., Lutz, Y., Rouyer, N., Bellocq, J. P., Mandel, J. L. The FMR-1 protein is cytoplasmic, most abundant in neurons and appears normal in carriers of ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
