Protocol
MERK: Alle prosedyrer utført her ble forelagt og godkjent av IACUC (Office of Forskning Compliance) og ble utført følgende NIH retningslinjer. Mus brukes i atferds testing paradigmet var naiv og ikke brukes til andre tester. C57BL / 6 Wild Type og Knock Out mus som brukes i denne protokollen er blitt beskrevet tidligere 9 og dataene som presenteres her er fra det manuskriptet.
1. Klargjøring av Testing rommet og Open Feltet Apparatus
- Bruke en multippel enhet åpent felt labyrint (OFM) som består av fire kamre aktivitet ble anvendt for denne analysen (figur 1). Hvert kammer målt 50 cm (lengde) x 50 cm (bredde) x 38 cm (høyde) og ble laget av hvit høy tetthet og ikke-porøs plast.
- Tekstur gulvene i labyrinten for veigrep når ambulation mens labyrint vegger var glatt. Maze kvadranter var helt tom for formålet med denne testen. I betraktning av resten av denne protocol, vil en enkelt kvadrant av labyrinten som er beskrevet ovenfor anvendes for å demonstrere OFM.
- Tørk av kammeret med en 95% etanol før bruk og før påfølgende tester for å fjerne eventuelle duft spor igjen av den forrige emne mus.
- La etanol for å fordampe fullstendig før testing av mus. Dette kan ta 5-10 min mellom hver testøkt.
- For denne analysen bruker SMART Video Tracking programvare fra PanLab / Harvard Apparatus å registrere og evaluere musen bevegelse.
MERK: Enhver kommersiell video sporing kameraet og programvaren kan brukes til å spore testpersonen og evaluere resultatene fra det åpne feltet labyrint. Det er svært viktig for sluttbrukeren å forstå hvordan å kalibrere og kjøre programvaren som brukes for hver enkelt analyse. Uavhengig av videokameraet og sporing programvare som brukes, men best resultat oppnås når kameraet og programvaren er riktig kalibrert i henhold til produsentens instruksjoner. - Utføre testingen jegna standard opplyst rom stand til å inneholde labyrinten apparater og datamaskinen som kreves for å kjøre programvaren. Suspendere videokameraet over labyrinten enten ved å feste den til taket eller ved å bruke noen forhøyet støttesystem som gjør at kameralinsen for å se hele labyrinten området (figur 2).
- Som den menneskelige administrator av testen, sørg for å ha nok plass i rommet for å være helt uobserverbare av forsøkspersonene i labyrinten for ikke å påvirke atferden til mus.
2. Klar Programvaren måle aktivitet
- Åpne video Tracking programvare.
- Når programvaren er åpnet, flytter du markøren til "Single-motivsporing" alternativet ligger under "Data Acquisition" -fanen og enkelt klikk for å åpne dette alternativet.
- Velg "Static Bakgrunn" alternativet nederst på skjermen.
- Etter å ha valgt "Static Bakgrunn" er valgten, er det nødvendig å bruke programvaren for å ta et bilde av labyrinten før tilsetning av forsøkspersonene. For å gjøre dette, flytter du markøren til "Foto" knappen nederst på skjermen og enkelt klikk.
MERK: Programvaren vil ta et bilde av scenariet uten testpersonen som vil bli trukket fra bildet tatt under sporingsprosessen. Dette resulterer i bare bevegelse av emnet som blir analysert av programvaren. - Bekrefte at bakgrunnsbildet tatt ovenfor er helt fjernet av sporing programvare ved å flytte markøren til "Test" -knappen nederst på skjermen og klikke én gang. En solid hvite feltet vises hvis bakgrunnsbildet er helt fjernet fra sporingsbilde. Hvis lysforholdene endre eller labyrinten tilfeldigvis blir flyttet, vil du se svart "skygger" i dette feltet indikerer de to bildene ikke helt sammenfallende. For å bøte på denne situasjonen, bare gjenta step 2.4 ovenfor.
- Etter å ha bekreftet bakgrunn innstillinger, bruker Timing muligheten til å konfigurere hvordan tiden styres under oppkjøpet. For å gjøre dette, flytter du markøren til "Configuration" og klikk én gang på "Timing" overskriften. Bruk den nyåpnede vinduet for å gå inn eksperimentelle parametre.
- For denne protokollen, valgte "Programmert tid" alternativet som 10 min tracking periode. Still "latenstid" til 5 sek for å gi brukeren tid til å plassere musen i sentrum av labyrinten og bevege seg bort før oppstart av sporing. Tast inn "Acquisition tid" på 10 minutter for varigheten av testen. Still "Stopp kontroll" satt til "Når programmert tid (10 min) er over" som automatisk slår av kameraet og sporingsfunksjonen i programmet.
- Flytt markøren til "Close" -knappen etter at alle timings har blitt satt til å lukke vinduet. Du er nå klar til å begynne testening prosedyre.
3. Administrasjon av Open Felt Test
MERK: programvarepakke som brukes i denne protokollen tillater sporing av opp til 16 individuelle mus på en gang. For enkel gjennomføring og som nevnt ovenfor, protokollen diskutert her er for en enkelt mus ved hjelp av en enkelt kvadrant av OFM. For utstyret i bruk for denne protokollen, kan maksimalt fire individuelle mus spores ved hjelp hver kvadrant av labyrinten. Hvis benytte en multi-kabinett labyrint, etter å plassere det første emnet mus i sitt definerte kvadrant, plasserer de resterende mus inn i deres respektive labyrint kvadranten for sporing analyse. Ved anvendelsen av denne protokollen, vil ytterligere instruksjon være spesifikke for en enkelt kvadrant av labyrinten.
- Ta med mus i hjem bur fra sine boliger rom for å teste seg. Tillat musene akklimatiseres til prosedyren rommet i minst 30 minutter før start av testen.
- Fjerne en enkelt mOuse fra hjemmet buret ved å forsiktig gripe halen og plasserer musen i midten av det åpne feltet labyrint mens samtidig aktivering av SMART programvare ved enkelt å trykke på startknappen for å begynne å spore musen bevegelse. Det er vanlig for musen til å bevege seg umiddelbart til de perifere vegger av labyrinten og tidspunktene for frigivelse og relativ fangst av musen skal falle sammen for å ta opp denne bevegelsen.
- Tillate fri og uavbrutt motivets bevegelse mus hele respektive kvadranten av labyrinten for en enkelt 10 min periode i løpet av denne tiden, vil sporingsprogramvare registrere bevegelse (figur 3).
- På slutten av testperioden, plukke opp emnet musen forsiktig, fjerne den fra labyrinten og returnere det til sitt hjem buret.
- Før rengjøring av labyrinten, visuelt telle fecal Boli pellets stede i labyrinten og manuelt registrere tallene for videre analyse.
- Fjern alle ekskrementpelletene og tørk opp alle flekker av urinering. Spray gulvet og veggene i labyrinten kvadranten med 95% etanol og tørk av med en ren papirhåndkle. Tillat etanoloppløsningen til fullstendig tørr før testing andre mus.
- Gjenta prosedyren med neste musen.
4. Måling og analyse av atferd under Testing Prosedyre
MERK: For måling, er tre aspekter av åpne feltet adferd karakteriseres gjerne bruke denne protokollen (se diskusjon). En kort instruksjon om hvordan du får tilgang til disse målingene i videoen sporing programvare følger.
- Fra hovedskjermbildet i SMART programvare, flytter du markøren til "soner" -fanen og enkelt klikk "Definition" for å åpne Zone Editor.
- Følg de detaljerte instruksjonene i SMART programvare brukerhåndboken definerer soner eller rutenett å overlappe på sporings stier. Her ble den programvare som benyttes for å definere en 5 x 5 rutenett av 10 cm kvadrater som dekker gulvet av labyrinten (
- Fra hovedskjermbildet i SMART programvare, flytter du markøren til "Analysis" -kategorien og enkelt klikk for å åpne dataanalyse vinduet.
- Flytt markøren til "File" fanen og åpne Zone fil opprettet ovenfor.
- Flytt markøren til "Configuration" fanen og åpne "Track Analysis" alternativet. Dette vil åpne "Single-faget analyse konfigurasjon" -vinduet.
- Flytt markøren til "Standard" -kategorien og flytte "reist distanse" parameter fra Tilgjengelige Parametere boksen (venstre side) til Inkludert Parametere boksen (høyre side).
- Flytt markøren til "Soner Transitions" -fanen og flytte alle relevante parametere til Inkludert Parametere boksen som ovenfor.
- Pass på at "Full Track" er merket av nederst i vinduet.
- Move markøren til OK-knappen og lukk Single-faget analyse konfigurasjonsvinduet.
MERK: Avhengig av analysen du ønsker å utføre, kan mange andre alternativer velges i dette vinduet til å hente data fra analysen. Les den detaljerte brukerhåndboken for ditt spesifikke program for å finne ut hvilke parametere som er viktigst for analyse av dataene.
- Under kategorien Fil øverst til venstre i programvinduet, åpner enkelt fag spor vinduet og plassere en hake ved siden alle spor som blir analysert. Flytt markøren til Check Mark-knappen øverst i vinduet, og klikk for å lukke Track Explorer-vinduet.
- Flytt markøren til "Go" -knappen i Data Analysis vinduet og enkelt klikk for å initiere analyse av spordata.
- Analyse av data kan sendes ut som enten ASCII tekstfiler eller det kan være direkte eksporteres til et Excel-regneark. Bruk utgangs verktøy av programmet du bruker til å sende ut data til eget bruk.
MERK: Total distanse og tid tilbrakt i angitte soner vil bli sendt ut følgende data analyse fremgangsmåten ovenfor. Igjen, er det understreket at tiltak for å nå disse målene representert her vil variere avhengig av brukerens programvare som brukes. Men selve dataene og tolkningen av resultatene bør være lik uavhengig av programvare benyttet. Det er også verdt å merke seg at testadministrator skjevhet er fjernet fra denne protokollen som alle innsamlede data kvantifiseres data målt av programvaren og ikke administrator. Dermed er det ingen qualifiable element til de innsamlede dataene som beskrevet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Det gjennomsnittlige antall individer per stammen av mus som ble testet i de fleste tilfelle er omtrent 20 til å generere tilstrekkelig statistiske relevans. Imidlertid kan dette tallet være i området fra 8 til 30, avhengig av muse tilgjengelighet. Avhengig av måling eller sammenligninger som kreves, er det også fordelaktig å anvende alderstilpassede individer.
Det første og kanskje viktigste bestemt parameter for å måle i det åpne feltet Maze er total ambulerende avstand. Mens måleenheten er irrelevant for sammenligningsformål, er det oftest uttrykt som en metrisk måling (cm). I de eksperimentelle data presentert her (Figur 5), villtype (WT) eller normale C57BL / 6 mus viser tilsvar ambulerende evnen til en bestemt utslags C57BL / 6 mus-stamme (KO). Når samlede lengden er lik mellom stammer eller behandlinger, er ytterligere analyse av emosjonelle atferd forenklet fordi bevegelsesaktivitet blir effektivt fjernet fra EQUAsjon. Dersom det er betydelige forskjeller i bevegelsesevne musene testet, ytterligere analyser som soneoppføringer eller tid tilbrakt i visse utpekte soner av labyrinten kan være skjev på grunn av inaktivitet i stedet for belastningsskader eller behandlingseffekter. Teknikker eksisterer for å gjøre rede for ulik bevegelsesaktivitet, men disse er som oftest bestemt til problemstillingen.
Som total ambulerende avstanden mellom de to musestammer var lik, var vi i stand til å analysere thigmotaxis, eller tendensen av en gjenstand for å forbli nær vegger, i WT versus KO mus (figur 6). Graden av thigmotaxis har blitt validert som et mål på angstskapende oppførsel i mus 10. Thigmotaxis øker som angst nivåer stige. Bruke SMART programvare, ble individuelle soner kledde på stiene reist av mus (figur 3) og tid i indre soner versus ytre soner beregnet og presentert som en funksjon av total tid (10 min) i than labyrint. I dette tilfellet, KO-mus viste signifikant høyere angstskapende oppførsel WT enn deres motstykker. En representativ for banen kan sees i figur 4, hvor WT mus banen passerer de midtre områder av labyrinten ved en mye høyere frekvens enn det gjør KO mus som forblir i nærheten av veggene av labyrinten, selv om den tilbakelagte avstanden for både mus er lignende. Vi kan konkludere fra dette at KO mus utviser høyere angst knyttet atferd enn gjør WT mus.
For ytterligere å støtte øket angst nivåer i KO-mus, fekal boli igjen i labyrinten etter 10 min testperioden ble talt ved observatøren når testpersonen var fjernet (figur 13). Etter den populære oppfatning at svært emosjonelle dyr utviser økt avføring, KO mus vise betydelige økninger i fekal boli til stede i forhold til WT mus. Dette samsvarer med nivåene av thigmotaxis målt i KO mus og indikerer tha t knock-out mus brukt i denne studien viste økt emosjonalitet og angst i forhold til sine WT kolleger.
Figur 1. Eksempel på en fire kvadrant OFM. Den OFM avbildet ble hentet fra San Diego Instruments og ble brukt i alle testprosedyrer er beskrevet. Dimensjoner på en kvadrant av labyrinten er i centimeter og hver kvadrant er identifisert (Q1-Q4).
Figur 2. Eksempel på overhead kamera visning av en fire kvadrant OFM. Bildet som vises er representative av kamerabildet anerkjent av SMART programvare før sporing prosedyrer. Hver kvadrant er merket (Q1) gjennom (Q4) og vil inneholde et enkelt muse for sporing.
Figur 3. Sammenligning av gode stier for WT og KO mus. Representative spor for enten WT eller KO mus vises. Hvert spor representerer den totale distanse som tilbakelegges av emnet under 10 min periode av testen. Startpunktet (B) og endepunktet (E) av sporings er indikert. WT eksempel sporet krysser inn i midtpartiet av labyrinten med jevne mellomrom mens KO sporet forblir tett nærhet til veggene i labyrinten indikerte økt thigmotaxis eller angst-relaterte oppførsel.
Figur 4. Zone overlegg brukes til å tolke sporingsdata for thigmotaxis fra OFM. Bruke SMART programvare analyse pakke, en serie på 10 x 10 cm soner var identified og brukt til å evaluere underlagt spor. Den ytre sonen besto av 16 blokker som er identifisert mens den indre sone besto av 9 blokker og er skyggelagt. Større tidsbruk i ytre soner av labyrinten føres som økt thigmotaxis og er et tegn på forsterket angst relatert atferd.
Figur 5. Total distanse i OFM. WT (n = 24) og KO (n = 27) mus ble utsatt for OFM og total distanse i centimeter for sine respektive spor ble kombinert og analysert statistisk for å visualisere eventuelle forskjeller i bevegelse og. WT og KO mus utført på samme måte i OFM når total distanse ble målt. Resultatene for de data ble uttrykt som gjennomsnitt +/- SEM Statistiske analyser (t -tests) ble utført ved hjelp av Excel 2010 (Microsoft, Redmond WA) og SAS 9.2 (SAS Institute, Cary NC). [Data er Modified fra Ramesh Babu, et.al., 2008]
Figur 6. Tid brukt i indre og ytre soner av OFM. WT (n = 24) og KO (n = 27) mus ble utsatt for den OFM og tid brukt i de indre og ytre soner av labyrinten statistisk analysert for forskjeller i mus stammer. Tidsbruk i de ytre soner av labyrinten identifisert i Figur 7 tiltak thigmotaxis eller veggbestrykende atferd og er et tegn på angst relatert atferd. KO mus viste høyere angst tiltak enn til WT basert på thigmotaxis. Resultatene for de data ble uttrykt som gjennomsnitt +/- SEM Statistiske analyser (t -tests) ble utført ved hjelp av Excel 2010 (Microsoft, Redmond WA) og SAS 9.2 (SAS Institute, Cary NC). P <0,05. [Data er endret fra Ramesh Babu, et.al., 2008]
Figur 7. Fekale Boli innskudd i OFM. WT (n = 24) og KO (n = 27) mus ble tillatt å fullføre en 10 min test i OFM før den blir fjernet fra labyrinten tilbake til oppholdskassen. Etter at musene var fjernet, ble antallet avføringer eller fekale Boli innskudd manuelt tellet ved observatøren. Økt antall boli kan være en indikasjon på økt angst og emosjonalitet av faget dyr. KO-mus oppviste en økning av fecal boli sammenlignet med WT. Resultatene for de data ble uttrykt som gjennomsnitt +/- SEM Statistiske analyser (t -tests) ble utført ved hjelp av Excel 2010 (Microsoft, Redmond WA) og SAS 9.2 (SAS Institute, Cary NC). P <0,05. [Data opprinnelig publisert i Ramesh Babu, et.al., 2008]
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
The Open Feltet Maze er en av de mest brukte plattformene i dyreatferdsstudier. En rekke viktige konvensjonelle og etologiske parametre 2,4 kan samles inn og analyseres under utførelsen av OFM. Disse dataene tillater forskeren å måle atferd som spenner fra generelle bevegelsesaktivitet til angstrelaterte emosjonelle atferd 8. Imidlertid er bruk av OFM ikke uten sine mangler. En forvirrende sak er bredt spekter av statiske variabler som kan manipuleres under enhver testøkt. Eksempler inkluderer tid, lysforhold og romanen inkludering objekt. Variasjon i forsøksprotokollen oppsett og design, som er avgjørende for å støtte et bredt spekter av applikasjoner, kan gjøre det vanskelig å sammenligne studier. Når individuell variasjon, for eksempel forskjellig bakgrunn eller transgene mus linjer og medikamentell behandling er inkludert, kan vanskelig i test sammenligninger øke enda mer. Til tross for disse problemene, OFM er fortsatt en av de mest anvendte teknikker i gnager atferdsforskning. Her diskuterer vi resultatene fra den OFM og deres analyse som gjelder mus angst og emosjonalitet.
Her er tre aspekter ved åpent felt oppførsel karakteriseres gjerne ved hjelp av denne protokoll: 1) Total distanse (i cm) i løpet av hele tidsbestemt parti av testen; 2) Thigmotaxis eller et mål på prosent av den 10 min total testtid at emnet forblir ved siden av den ytre vegg av labyrint som er indikativ for angst-lignende oppførsel; 3) Antall ekskrementpelletene (Boli) igjen i kvadrant etter at motivet er fjernet telles. Defekasjon er et negativt relatert mål på Emosjonalitetens hos gnagere 5 og kan bli brukt til å indikere nivåene av angst hos mus underlagt. En kort instruksjon om hvordan du får tilgang til disse målingene i SMART-programvaren følger.
Lokomotorisk aktivitet hos forsøkspersonene er viktigskjelne før analyse av OFM data eller for den saks skyld, alle dyr atferds labyrint. Når man sammenligner ulike stammer av mus eller ulike effekter av medikamentell behandling, er den ambulerende evne musen avgjørende. Hvis bevegelsesevne er svekket på grunn av behandlingseffekter, deretter måle aktiviteter som er avhengige av evnen av motivet som beveger seg er blitt til skamme. Derfor er første skritt i dette forsøket var å sammenligne total bevegelse mellom de to emne stammer. Ved hjelp av den gjenstand sporing av SMART-programvaren, målte vi den totale ambulatorisk distanse i labyrinten i løpet av varigheten av testen ved to forskjellige stammer av C57BL / 6-mus (figur 4). Både villtype (WT) og genetiske knock-out mus (KO) vises lignende ambulerende evne. Det var ingen statistisk forskjell i total avstand (i cm) reist med enten muselinje i hele 10 min tidsrom av forsøket. Hadde én stamme vist en betydelig forskjell i ambulation forholdtil den andre, vil en mer spesialisert undersøkelse, eventuelt ved hjelp av andre adferds paradigmer, være nødvendig for å karakterisere differansen. Imidlertid, i dette tilfellet, ambulation av de angjeldende stammene var lik slik direkte bruk av ukorrigerte OFM-avledede data for ytterligere å undersøke anxiolytiske parametere. Det bør bemerkes her som har tolket noen forskere høy aktivitet eller øke utforskende atferd som en indeks for lav emosjonalitet, mens andre forestille utforskende atferd være uavhengig av emosjonalitet 11. Man må erkjenne at forskjeller i bevegelsesaktivitet kan forvirre følelsesmessige tiltak 12. Men som total ambulerende avstanden var lik mellom musestammer som brukes her, ble aktivitetsnivået til musene adskilt fra emosjonalitet faktorer.
Oppdra oppførsel består av emne dyr som står på begge bakbeina poter i en vertikal oppreist stilling. Det er ansett som en utforskende atferd og har blitt brukt somet mål på angst i både OFM og hevede Plus Maze 13. Men det er ingen klar indikasjon på at oppdrett oppførselen enten angstdempende eller angstskapende. Noen studier tyder på økt oppdrett er i samstemmighet med økt angst nivåer i mus 14 mens andre postulere redusert oppdragelse oppførsel er et tegn på økt angst 15. Således, mens oppdrett ble ikke analysert her, avhengig av forsøksprotokoll og etiologiske parametere som ble undersøkt, merden kunne brukes til å diskriminere angstbundet oppførsel fra enkle ambulerende oppførsel.
Det har blitt foreslått at måle angst i gnagermodeller er mye mer komplisert enn å bruke en enkelt parameter i en enkelt labyrint miljø 16. Derfor kan ved hjelp av flere tester eller flere tiltak i en enkelt test styrke vurdering av resultatene. Thigmotaxis eller veggbestrykende atferd er observert i de fleste gnagerarter og er knyttet til angst relatert værehaviors. Det er mest sannsynlig knyttet til en gnager underliggende tilbøyelighet til å unngå store åpne områder eller områder av oppfattet fare 17,18. Uavhengig av den underliggende årsaken, er thigmotaxis en viktig angst bundet atferd som ofte regnes som utgangspunkt for videre spesifikk angst relaterte tester 19.
Thigmotaxis i OFM brukes til å evaluere angstdempende, anxiogene og selv ikke-farmakologisk behandling. Angst-relaterte legemidler, slik som diazepam og klordiazepoksyd har vist signifikant effekt på mus oppførsel i OFM 4 mens dopaminagonister har vist at D1 og D2 dopamin-reseptorer er involvert i anxiogene-lignende effekter på grunn av økt dopaminerg transmisjon 20. Det er også klare belastningsskader forskjeller i respons på mus angst-lignende oppførsel i OFM 21. For eksempel BALB / c-mus, en albino laboratorium avlet stamme av den felles hus mus, viser større adferdsresponstil akutt stress enn gjør C57BL / 6 mus 22. Derfor må baseline variasjon i svarene mellom fagene må tas i betraktning når du setter opp parametrene knyttet til testing paradigmer og velge hvilke arter å bruke for en bestemt problemstilling.
Det er også den populære oppfatning at svært emosjonelle dyr utviser økt avføring. Dette synet har blitt bekreftet av noen, men gyldigheten av avføring som tydelig mål på angst har blitt avhørt 23. Men siden Hall opprinnelige avhandling (1934) korrelere avførings hendelser med emosjonalitet hos gnagere, har en stor mengde litteratur om emnet bekreftet dette forholdet 2. Nyere funn har indikert at avføringer kan faktisk være en nyttig indikator på emosjonelle angstrelatert atferd i relativt korte testperioder som utføres her i motsetning til lange observasjoner (30 min) hvor forskjeller i svarene er mindre klart 21
Det er viktig å merke seg at oppførselen til mus i OFM er avhengig av deres følbare fornemmelser. Dermed noen skade eller mangel på værhår til musene kan føre til en reduksjon i målt angst bundet atferd som musene miste taktil kontakt med veggene i labyrinten og inn de sentrale delene lettere 3. Maze leting kan også være avhengig av mat eller vann deprivasjon, belysning i løpet av testprosedyren, eller til og med på fargen av labyrinten gulvet 24. Det er viktig å kontrollere disse variablene, samt eventuelle behandlingsinduserte faktorer, før tolke OFM resultater for angstrelatert atferd. Detaljert rapportering av alle testforhold i manuskripter er også avgjørende for å legge til rette for hensiktsmessige kryssstudie sammenligninger.
Også, mens her vi diskutere bruken av OFM som gjelder motor locomotion og emosjonalitet av mus undersøkt, den OFM kan også brukes til å teste andre atferd sulm som romanen objekt anerkjennelse og minne 25. Avhengig av typen av hukommelsen som blir analysert, kan tiden i labyrinten med et nytt objekt variere fra 5 min til 24 timer. Den letthet og fleksibilitet i labyrinten i det nye objektet gjenkjennelse test muliggjør testing av kort- eller langtidshukommelse, og kan brukes til selektivt å analysere effektene av akutt behandling på et bestemt stadium av minnedannelse. I konklusjonen, er det OFM en apikal test av ytelsen 26. Angst relatert atferd målt er kumulasjon av flere atferdsunderliggende prosesser. Således, når et svar er påvisbart måles, er det ofte nødvendig å undersøke den videre reaksjon til å identifisere en bestemt defekt.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Multi Unit Open Field Test | San Diego Instruments, Inc. | White 7001-0354 | Any single or multi unit open field maze can be used |
| SMART DT Tracking Software | PanLab/Harvard Apparatus | 76-0695 | Any tracking software can be utilized with this protocol |
| Sony 990x Video Camera Recorder | Sony | CCD-TRV328 | Any suitable video camera can be attached to computer for recording tracking profiles. |
References
- Hall, C. S. Emotional behavior in the rat: defecation and urination as measures of individual differences in emotionality. J. Comp. Psychol. 18, 385-403 (1934).
- Walsh, R. N., Cummins, R. A. The open field test: a critical review. Psychol. Bull. 83, 482-504 (1976).
- Prut, L., Belzung, C. The open field as a paradigm to measure the effects of drugs on anxiety-like behaviors: a review. Eur. J. of Pharm. 463, 3-33 (2003).
- Choleris, E., Thomas, A. W., Kavaliers, M., Prato, F. S. A detailed ethological analysis of the mouse open field test: effects of diazepam, chlordiazpoxide and an extremely low frequency pulsed magnetic field. Neurosci. Biobehav. Rev. 25, 235-260 (2001).
- Ramos, A. Animal Models of anxiety: do I need multiple tests. TIPS. 29, 493-498 (2008).
- Archer, J. Tests for emotionality in rats and mice: a review. Anim. Behav. 21, 205-235 (1973).
- Gray, J. A. Emotionality in male and female rodents: a reply to Archer. Brit. J. Psych. 70, 425-440 (1979).
- Carola, V., D’Olimpio, F., Brunamonti, E., Mangia, F., Renzi, P. Evaluation of the elevated plus-maze and open-field tests for the assessment of anxiety-related behavior in inbred mice. Behav. Brain Res. 134, 49-57 (2002).
- Ramesh Babu, J., Seibenhener, M. L., Peng, J., Strom, A. L., Kemppainen, R., Cox, N., Zhu, H., Wooten, M. C., Diaz-Meco, M. T., Moscat, J., Wooten, M. W. Genetic inactivation of p62 leads to accumulation of hyperphosphorylated tau and neurodegeneration. J. Neurochem. 106, 107-120 (2008).
- Simon, P., Dupuis, R., Costentin, J. Thigmotaxis as an index of anxiety in mice: influence of dopaminergic transmissions. Behav. Brain Res. 61, 59-64 (1994).
- Denenberg, V. H. Open-field behavior in the rat: what does it mean. Ann. N.Y. Acad. Sci. 159, 852-859 (1969).
- Stanford, S. C. The open field test: reinventing the wheel. J. Psychopharm. 21, 134-135 (2007).
- Ennaceur, A. Tests of unconditional anxiety – pitfalls and disappointments. J. Phys. Behav. 135, 55-71 (2014).
- Borta, A., Schwarting, R. K. Inhibitory avoidance, pain reactivity, and plus-maze behavior in Wistar rats with high versus low rearing activity. J. Phys. Behav. 84, 387-396 (2005).
- Costall, B., Jones, B. J., Kelly, M. E., Naylor, R. J., Tomkins, D. M. Exploration of mice in a black and white test box: validation as a model of anxiety. Pharmacol. Biochem. Behav. 32, 777-785 (1989).
- Bouwknecht, J. A., Paylor, R. Pitfalls in the interpretation of genetic and pharmacological effects on anxiety-like behavior in rodents. Behav. Pharm. 19, 385-402 (2008).
- Webster, D. G., Baumgardner, D. J., Dewsbury, D. A. Open field behavior in eight taxa of muriod rodents. Bull. Psychonom. Soc. 13, 90-92 (1979).
- Wilson, R. C., Vacek, T., Lanier, D. L., Dewsbury, D. A. Open field behavior in muroid rodents. Behav. Biol. 17, 495-506 (1976).
- Crawley, J. N. Behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice: experimental designs and evaluation of general health, sensory functions, motor abilities and specific behavioral tests. Brain Res. 835, 18-26 (1999).
- Simon, P., Dupuis, R., Costentin, J. Thigmotaxis as an index of anxiety in mice. influence of dopaminergic transmissions. Behav. Brain Res. 61, 59-64 (1994).
- Miller, B. H., Schultz, L. E., Gulati, A., Su, A. I., Pletcher, M. T. Phenotypic characterization of a genetically diverse panel of mice for behavioral despair and anxiety. PLoS One. 5, e14458 (2010).
- Tannenbaum, B., Anisman, H. Impact of chronic intermittent challenges in stressor-susceptible and resilient strains of mice. Biol. Psych. 53, 292-303 (2003).
- Lister, R. G. Ethologically-based animal models of anxiety disorders. Pharmacol. Ther. 46, 321-340 (1990).
- Kulesskaya, N., Voikar, V. Assessment of mouse anxiety-like behavior in the light-dark box and open-field arena: role of equipment and procedure. Phys. Behav. 133, 30-38 (2014).
- Han, H., Du, W., Zhou, B., Zhang, W., Xu, G., Niu, R., Sun, Z. Effects of chronic fluoride exposure on object recognition memory and mRNA expression of SNARE complex in hippocampus of male mice. Biol. Trace Elem. Res. 158, 58-64 (2014).
- Barrow, P., Leconte, I. The influence of body weight on open field and swimming maze performance during the post-weaning period in the rat. Lab. Animals. 30, 22-27 (1996).
