Protocol
NOT: Burada yapılan tüm işlemler sunulan ve onaylanan IACUC (Araştırma Uyum Ofisi) tarafından ve NIH yönergeleri izleyerek yapılmıştır bulundu. Davranışsal testler paradigma kullanılır Fareler naif ve diğer testler için kullanılan değildi. Bu protokolde kullanılan, C57BL / 6 vahşi tipli ve olmayan fareler 9 daha önce tarif edilmiş ve burada sunulan veriler bu yazıda vardır.
Test Odası ve Açık Alan Aparatı 1. Hazırlık
- Dört aktivitesi odadan oluşan bir çoklu birim açık alan labirent (OFM) kullanarak, bu analizi (Şekil 1) için kullanılmıştır. Her bölme ölçülen 50 sm (uzunluk) 50 cm (genişlik) 38 cm (yükseklik) x beyaz yüksek yoğunluklu ve gözenekli olmayan plastikten yapıldığı x.
- Labirent duvarları pürüzsüz iken yürüme sırasında çekiş için labirentin zemin doku. Labirent kadran bu testin amacı tamamen boştu. Bu proto geri kalanı dikkate alınaraksütun, yukarıda tarif edilen labirent tek kadran OFM göstermek için kullanılacaktır.
- Önceki konu fare tarafından sol herhangi bir koku ipuçları kaldırmak için kullanmadan önce% 95 Etanol ve sonraki testlerde önce odasına silin.
- Etanol fareler test önce tamamen buharlaşmasına izin verin. Bu, her test oturumu arasında 5-10 dakika sürebilir.
- Bu analiz için, kayıt ve fare hareketi değerlendirmek için PanLab / Harvard Aparatı SMART Video Takip yazılımı kullanın.
NOT: Herhangi bir ticari bir video izleme kamera ve yazılım açık alan labirent sonuçları Test konuyu takip etmek ve değerlendirmek için kullanılabilir. Son kullanıcı kalibre nasıl anlamak ve her analiz için kullanılan yazılımı çalıştırmak için çok önemlidir. Kamera ve yazılım doğru üreticinin talimatlarına göre kalibre zaman olursa olsun, video kamera ve kullanılan izleme yazılımı, en iyi sonuçlar elde edilir. - Test i gerçekleştirinna standart labirent aparatı ve yazılımı çalıştırmak için gerekli bilgisayar içeren yeteneğine oda yaktı. Tavana takarak ya da kamera lensi tüm labirent alanı (Şekil 2) görmek için izin veren herhangi bir yüksek destek sistemini kullanarak ya labirent üzerinde video kamera Askıya.
- Testin insan yönetici olarak, farelerin davranışlarını etkilemek şekilde değil labirent denek tamamen gözlemlenemeyen olması için odada yeterince yer olduğundan emin olun.
2. Etkinlik Tedbir Yazılımı Hazırlama
- Video Takip yazılımını açın.
- Yazılım açıldıktan sonra, "Veri Toplama" sekmesine ve bu seçeneği açmak için tek tıklama altında bulunan "Tek konu izleme" seçeneği imleci.
- Ekranın alt kısmında bulunan "Statik Arkaplan" seçeneğini seçin.
- Seçtikten sonra "Statik Arkaplan" seçti olduğunun, o önce denek ilavesinden labirent bir görüntü almak için yazılımı kullanmak için gereklidir. Bunu yapmak için, ekranın ve tek bir tıklama alt kısmında bulunan "Fotoğraf" butonuna imleci.
NOT: Yazılım izleme sürecinde alınan görüntüden çıkarılacaktır denek olmadan senaryo resmini çekecektir. Bu sadece nesnenin hareket yazılımı ile analiz ile sonuçlanmaktadır. - Yukarıda alınan arka plan görüntüsü tamamen ekranın alt kısmında bulunan "Test" butonuna imleci hareket ve bir kez tıklayarak takip yazılımı tarafından kaldırıldığını onaylayın. Arka plan görüntüsü tamamen izleme görüntüden kaldırılır eğer bir katı beyaz alan gösterilir. Aydınlatma koşulları değiştirmek veya labirent yanlışlıkla hareket ise, iki görüntü mükemmel uyuşmuyorsa belirten bu alanda kara "gölgeler" göreceksiniz. Bu durumu düzeltmek için, sadece ste tekrars 2.4 yukarıda.
- Arka plan ayarlarını onayladıktan sonra, zaman satın alma sırasında kontrol edilir şekilde yapılandırmak için Zamanlama seçeneğini kullanın. Bunu yapmak için, "Yapılandırma" sekmesine imleci ve "Zamanlama" başlığı üzerine bir kez tıklayın. Deneysel parametreleri girmek için yeni açılan penceresini kullanın.
- Bu protokol için, 10 dakika izleme dönemi olarak "Programlanmış zaman" seçeneğini seçtim. Labirentin merkezindeki fare koyun ve izleme başlamadan önce uzaklaşmaya kullanıcı zaman tanımak 5 sn "Gecikme dönemi" olarak ayarlayın. Test süresince 10 dakika "Edinim zaman" komutu kullanılabilir. "Programlanmış zaman (10 dk) bittiğinde" kamerayı otomatik olarak ve yazılım izleme fonksiyonunu kapanacaktır hangi set "Dur kontrolü" olarak ayarlayın.
- Tüm zamanlamaları penceresini kapatmak için ayarlanmış edildikten sonra "Kapat" düğmesine taşıyın. Şimdi Testi başlatmak için hazırızprosedürü ing.
Açık Alan Testi 3. İdaresi
NOT: Bu protokolde kullanılan yazılım paketi tek seferde 16 adete kadar tek tek farelerin izlenmesine olanak sağlar. Tamamlanması kolaylığı için ve yukarıda sözü edildiği gibi, burada açıklanan protokol OFM tek bir kadranı ile tek bir fare içindir. Bu protokol için kullanım ekipmanı için, 4 ayrı farelerin maksimum labirent her kadranda kullanılarak izleniyor olabilir. Çok muhafaza labirent kullanan varsa, tanımlanmış kadranda ilk konu fare yerleştirdikten sonra, analiz izleme kendi labirent kadranda içine kalan fareler yerleştirin. Bu protokolün amaçları için, daha fazla talimat labirent tek kadranda özgü olacaktır.
- Test odasına onların konut odadan evlerinde kafeslerde fareler getirin. Farenin teste başlamadan önce 30 dakika en az prosedür odasının havasına alışmalan izin verir.
- Tek bir m kaldıryavaşça kuyruğunu tutarak ev kafesinden OUSE ve aynı zamanda fare hareketi izlemeye başlamak için Başlat düğmesini tek tıklayarak SMART yazılım aktive ederken açık alan labirentin ortasında fare koyun. Fare labirent çevresi duvar ve tahliye zamanlaması hemen hareket ve fare yakalama izleme Bu hareketi kaydetmek için aynı olmalıdır normaldir.
- , Izleme yazılımı hareketi kaydeder ve bu süre içinde bir tek 10 dakikalık bir süre (Şekil 3) için labirent ilgili kadranda boyunca konu fare serbest ve kesintisiz hareketine izin.
- Test süresi sonunda, nazikçe konu fare pick up labirent çıkarırken ve ev kafesine geri.
- Labirent temizlik öncesinde, görsel labirent mevcut dışkı boli pelet saymak ve manuel daha fazla analiz için numaralarını kaydedin.
- Tüm fekal pelet çıkarın ve idrar tüm noktalar silin. Zemin ve% 95 etanol ile labirent çeyrek duvarlarını Sprey ve temiz bir kağıt havlu ile silin. İzin etanol çözeltisi önce diğer farelere test için tamamen kuru.
- Bir sonraki fare ile işlemi tekrarlayın.
4. Ölçme ve Test Prosedürü sırasında Davranış Analizi
NOT: ölçüm için, açık alan davranış üç yönü kolayca (tartışma) Bu protokolü kullanılarak karakterize edilir. Video izleme yazılımı bu ölçümleri erişmek için nasıl kısa bir yönerge izler.
- SMART yazılımın ana ekranında, Bölge Düzenleyicisi'ni açmak için "Bölgeler" sekmesine ve tek bir tıklama "tanımı" imleci.
- SMART yazılım Kullanım Kılavuzunda ayrıntılı talimatlar izleme yolları üzerinde bindirmek için bölgeleri veya ızgaraları tanımlıyorsunuz izleyin. Burada, yazılım labirentin zemin kaplama 10 cm kareler 5 x 5 ızgara (tanımlamak için kullanılan
- SMART yazılımın ana ekranında, "Analiz" sekmesine imleci ve tek Veri Analizi penceresini açmak için tıklayın.
- "Dosya" sekmesine İmleci ve yukarıda oluşturduğunuz Bölge dosyasını açın.
- "Yapılandırma" sekmesine imleci hareket ettirin ve "Parça Analizi" seçeneğini açın. Bu "Tek konu analiz yapılandırma" penceresi açılacaktır.
- "Standart" sekmesine İmleci ve Dahil Parametreleri kutusuna (sağ taraf) Mevcut Parametreleri kutusuna (sol taraf) gelen "gitti mesafe" parametresini taşıyın.
- "Bölgeler Geçişler" sekmesine İmleci ve yukarıdaki gibi Dahil Parametreler kutusuna uygun tüm parametreleri taşıyın.
- "Tam Parça" kutu penceresinin altındaki işaretli olduğundan emin olun.
- MoOK tuşuna imleci ettik ve Tek konu analiz yapılandırma penceresini kapatın.
NOT: Gerçekleştirmek istediğiniz analizi bağlı, diğer birçok seçenek analiz maden verilerine bu pencerede seçilebilir. Parametreler verilerin analizi için en önemli olduğunu belirlemek için belirli bir program ayrıntılı Kullanıcı kitapçığını okuyun.
- Program penceresinin sol üst köşesindeki Dosya sekmesi altında, Tek konu parça penceresini açın ve tüm parçaları analiz edilen yanında bir onay işareti koyun. Pencerenin üst kısmında Check Mark düğmesini imleci hareket ettirin ve Parça Explorer penceresini kapatmak için tıklayınız.
- Veri Analizi penceresinde "git" butonuna imleci hareket ettirin ve tek parça verilerinin analizi başlatmak için tıklayın.
- Analiz verileri ya ASCII metin dosyaları olarak çıkış olabilir ya da doğrudan bir EXCEL elektronik tabloya ihraç edilebilir. Çıkış da Sizin kullandığınız yazılım programının çıkış araçlarını kullanınKendi kullanımınız için ta.
NOT: Toplam mesafe gitti ve belirtilen bölgelerde harcanan zaman, yukarıda özetlenen veri analizi adımları aşağıdaki çıkış olacaktır. Yine, bu adımlar kullanılan kullanıcı yazılımına bağlı olarak farklılık burada temsil bu ölçümleri ulaşmak olduğunu vurguladı edilmektedir. Ancak veri kendisi ve sonuçların yorumlanması kullanılan yazılım programının benzer bağımsız olmalıdır. O testi yönetici önyargı yazılım ve yönetici tarafından ölçülen verileri sayısal toplanan tüm veriler bu protokol kaldırılır da fazlalaştı. Böylece açıklandığı gibi toplanan verilere hiçbir değerlendirilemez unsur yoktur.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
çoğu durumda, test edilmiş farelerin suş başına kişilerin ortalama sayısı yeterli istatistiksel önemi oluşturmak için yaklaşık 20'dir. Yine de bu sayı fare durumuna bağlı olarak 8-30 aralığı içinde olabilmektedir. Gerekli ölçüm veya karşılaştırmalar bağlı olarak, aynı zamanda, aynı yaştaki resimleri kullanmak tercih edilir.
Açık Alan Maze ölçmek için ilk ve belki de en önemli özel parametre toplam ayaktan mesafedir. Ölçüm birimi karşılaştırma amacıyla önemsiz olsa da, çoğu zaman, bir metrik ölçüm (cm) olarak ifade edilir. Burada (Şekil 5) sunulan deneysel veriler, vahşi tipteki (WT) ya da normal C57BL / 6 fareleri, belirli bir knock-out, C57BL / 6 fare türüne (KO) 'e benzer ayaktan kabiliyetini gösterir. Geçilen toplam mesafe suşları veya tedaviler arasında benzer olduğunda lokomotor aktivite etkin bir EQUA kaldırılır, çünkü duygusal davranışların daha fazla analiz basitleştirilmişyon. Test farelerin lokomotor yeteneği önemli farklılıklar varsa labirent bazı belirlenmiş bölgelerde harcanan bölge girişleri veya zaman hareketsizlik yerine gerilme veya tedavi etkileri nedeniyle çarpık olabilir gibi diğer tür analizleri. Teknikleri eşitsiz lokomotor aktivite için hesap var ama bunlar en sık araştırma sorusu özgüdür.
Iki fare suşları arasındaki toplam mesafe ayaktan benzer olarak, biz thigmotaxis analiz başardık, ya da bir konu eğilimi WT KO karşı farelerde (Şekil 6), duvarlara yakın kalması. thigmotaxis derecesi farelerde 10 anksiyojenik bir davranış ölçümü olarak doğrulanmıştır. Anksiyete düzeyleri gibi Thigmotaxis artışlar yükselir. SMART yazılımı kullanarak, bireysel bölgeler hesaplanmış ve t toplam süre (10 dk) bir fonksiyonu olarak sunulan dış bölgeler karşı iç bölgelerde harcanan farelerde (Şekil 3) ve zaman seyahat yollarında örtüldüdiye Labirent. Bu durumda, KO fareleri bunların WT göre daha önemli ölçüde daha yüksek anksiyojenik bir davranış sergilemiştir. Temsili bir geçiş yolu, WT fare yolu, hem farelerde mesafedir halde labirent duvarlarına yakın kalır KO fare yaptığından daha büyük bir frekansta bir labirent orta alanları erişir Şekil 4'te görülebileceği Benzer. Biz KO fareler WT fareler yapmak daha yüksek anksiyete ilişkili davranış sergileyen bu gelen sonucuna varabiliriz.
Daha fazla destek KO farelerde anksiyete düzeyleri artan denek (Şekil 13) çıkarıldı kez 10 dakika test süresi gözlemci tarafından sayıldı sonra, haplar fekal labirent bıraktı. WT farelere kıyasla son derece duygusal hayvanlar artmış dışkılama sergilediği popüler görünümü ardından, KO fareler dışkı boli mevcut önemli artışlar sergilerler. Bu KO farelerde ölçülen thigmotaxis düzeyleri ile ilişkilidir ve tha gösterir onların WT muadillerine kıyasla t Bu çalışmada kullanılan knock-out fareler artmış duygusallığını ve anksiyete gösterdi.
Dört kadran OFM 1. Örnek Şekil. OFM Resimde San Diego Instruments, elde edilmiş ve tarif edilen tüm test prosedürleri kullanılmıştır. Labirent bir kadranda Boyutları santimetre olan ve her kadranda (Q1-Q4) tanımlanır.
Dört kadran OFM havai kamera görüntüsü 2. Örneği Şekil. Resimdeki izleme prosedürlerine önce SMART yazılım tarafından tanınan kamera görüntüsü temsilcisidir. Her çeyrek (Q4) ile (Q1) etiketli ve izleme için tek bir fare içerecektir.
WT ve KO fareler için parça yolları Şekil 3. karşılaştırılması. WT veya KO fareler ya Temsilcisi parçalar gösterilmiştir. Her parça testi 10 dakika süre içinde konuya göre katedilen toplam mesafeyi gösterir. başlangıç noktası (B) ve izleme bitiş noktası (E) gösterilir. KO parça thigmotaxis artış veya anksiyete ile ilgili davranış olarak önerilenden labirent duvarlarına yakın yakından kalırken WT örnek parça, düzenli aralıklarla labirentin orta kısmına geçer.
Şekil OFM gelen thigmotaxis için izleme verilerini yorumlamak için kullanılan 4. Bölge bindirme. SMART yazılım analiz paketi kullanılarak, 10 x 10 cm'lik bölgelerin bir dizi olan tanımlanmışlardırd ve konu parçaları değerlendirmek için kullanılır. İç bölge 9 bloktan oluşan ederken tanımlanır ve gölgeli gibi dış bölge 16 bloktan oluşuyordu. Labirent dış bölgelerinde geçirdiği büyük zaman artan thigmotaxis olarak kaydedilir ve amplifiye Anksiyete ile ilgili davranışın göstergesidir edilir.
Şekil 5. Toplam mesafe. OFM olarak WT, seyahat (n = 24) ve birleşik KO (n = 27) bir araya getirilmiş, fareler, ilgili parça santimetre olarak OFM ve toplam mesafe tabi tutuldu ve istatistiksel ambulasyon herhangi bir farklılık görselleştirmek için analiz edilmiştir. Toplam mesafe ölçüldü zaman WT ve KO fareler OFM de benzer performans. veri sonuçları ortalama olarak ifade edildi +/- SEM İstatistiksel (t-test) Excel 2010 (Microsoft, Redmond, WA) ve SAS 9.2 (SAS Institute, Cary, NC) kullanılarak gerçekleştirilen analizler. [Bilgi değişmiş olanRamesh Babu dan d vd, 2008]
Şekil 6. gün. OFM iç ve dış bölgeleri harcanan WT (n = 24) ve birleşik KO (n = 27) fareler istatistiksel fare farkları analiz labirentin iç ve dış bölgeleri harcanan OFM ve zaman tabi tutulmuştur suşları. 7 önlemler thigmotaxis veya duvar saran davranışı Şekil tanımlanan labirent dış bölgelerinde harcanan zaman anksiyete ile ilgili davranışın göstergesidir. KO fareleri thigmotaxis göre WT daha yüksek anksiyete önlemleri sergiledi. veri sonuçları ortalama olarak ifade edildi +/- SEM İstatistiksel (t-test) Excel 2010 (Microsoft, Redmond, WA) ve SAS 9.2 (SAS Institute, Cary, NC) kullanılarak gerçekleştirilen analizler. <0.05 s. [Veri Ramesh Babu modifiye edilir, vd, 2008]
Şekil OFM 7. Fekal boli mevduat. WT (n = 24) ve KO (n = 27) fareler geri evlerine kafeslerine labirent kaldırıldı önce OFM bir 10 dakika testi tamamlamak için izin verildi. Farenin çıkarılmasından sonra, Defekasyonların veya dışkı haplar yatakların sayısı el gözlemci ile sayıldı. Boli artan sayısı, söz konusu hayvanın artan anksiyete abstre göstergesi olabilir. WT ile karşılaştırıldığında KO fareleri, dışkı Boli bir artış göstermiştir. veri sonuçları ortalama olarak ifade edildi +/- SEM İstatistiksel (t-test) Excel 2010 (Microsoft, Redmond, WA) ve SAS 9.2 (SAS Institute, Cary, NC) kullanılarak gerçekleştirilen analizler. <0.05 s. [Veri başlangıçta Ramesh Babu yayınlanan, vd, 2008]
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Açık Alan Labirent hayvan davranış çalışmalarda en yaygın kullanılan platformlardan biridir. Önemli genel ve etiyolojik parametreleri 2,4 çok sayıda toplanmış ve OFM uygulanması sırasında analiz edilebilir. Bu veriler araştırmacı anksiyete ile ilgili duygusal davranışlar 8 genel lokomotor aktivite arasında değişen davranışlarını ölçmek için izin verir. Ancak, OFM kullanımı, eksiklikler olmadan değildir. Bir karıştırıcı konu herhangi bir test oturumu sırasında manipüle edilebilir statik değişkenler geniş olduğunu. Örnekler zaman, aydınlatma koşulları ve yeni nesne dahil bulunmaktadır. Geniş bir uygulama spektrumlu desteklemek için gerekli olan deneysel protokol kurulum ve tasarım Değişkenlik, zor çalışmalar karşılaştırmak için yapabilirsiniz. Arka plan veya transgenik fare hatları ve ilaç tedavileri farklı olarak konu değişkenliği, dahil edildiğinde, deney karşılaştırmaları zorluk daha da artırabilir. Bu sorunlara rağmen, OFM kemirgen davranış araştırmalarında en yaygın uygulanan tekniklerden biridir. Fare anksiyete ve duygusallığı ile ilgili olarak burada, biz OFM elde edilen sonuçları ve bunların analizini tartışmak.
Burada, açık alan davranış üç yönü kolaylıkla bu protokolü kullanılarak karakterize edilmiştir: 1) Toplam mesafe cm (kapalı) testin tüm Zamanlı bölümü sırasında; 2) Thigmotaxis ya da 10 dakika toplam test süresi yüzdesi ölçer konusu anksiyete benzeri bir davranış göstermektedir labirent dış duvarına bitişik kalır; Kaldırılır konusu sayılır sonra kadranda sol fekal pelet (boli) 3) sayısı. Dışkılama kemirgenlerde 5 duyguların negatif ilgili ölçer ve fare konu anksiyete seviyelerini göstermek için kullanılabilir. SMART yazılım bu ölçümleri erişmek için nasıl kısa bir yönerge izler.
Test denekleri lokomotor aktivitesi için önemlidirönce OFM verilerinin analizi ya da bu konuda, herhangi bir hayvan davranışsal labirent için ayırt. Fareler veya ilaç tedavileri farklı etkileri farklı suşları karşılaştırırken, fare ayaktan yeteneği çok önemlidir. Lokomotor yeteneği tedavi etkilerine karşı büyük ölçüde tehlikeye neden olan, daha sonra karıştırılmakta hareket tabi kabiliyetine dayanır aktivitelerini ölçmek. Bu nedenle, bu deneyde ilk adım iki konu suşları arasındaki toplam hareketini karşılaştırmaktır. SMART yazılım konusu izleme özelliğini kullanarak, C57BL / 6 fareler iki farklı suşları (Şekil 4) tarafından test süresince labirent kaplı toplam ayaktan mesafe ölçüldü. Her ikisi de vahşi tipteki (WT) ve genetik nakavt fareleri (KO) içindeki ayaktan yeteneği gösterilir. Orada (cm) toplam mesafe istatistiksel fark deney 10 dakika süre boyunca her iki fare hattı ile gitti. Bir suş karşılaştırıldığında ambulasyon önemli bir fark göstermiştidiğer, muhtemelen diğer davranış paradigmaları kullanarak daha özel bir soruşturma, farkı karakterize etmek için gerekli olacaktır. Bununla birlikte, bu durumda, söz konusu soyların ambulasyon ayrıca anksiyolitik fonksiyonlarını incelemek için düzeltilmemiş OFM türetilmiş verileri eşit sağlayan doğrudan kullanımı olmuştur. Bazı araştırmacılar, yüksek aktivite yorumlanır ya da başkalarının duygusallık 11 bağımsız olma keşif davranış gebe iken düşük duygusallık bir göstergesi olarak keşif davranışı artırmak olduğunu burada belirtmek gerekir. Bir lokomotor aktivite farklılıklar duygusal önlemler 12 bulandırabilir kabul etmek vardır. Toplam ayaktan mesafe Burada kullanılan fare suşları arasında benzer olarak, ancak, farelerin aktivite düzeyleri duyarlılık faktörleri ayrıldı.
Davranışı Yetiştirme dikey dik bir konumda, her iki arka pençesi duran söz konusu hayvandan oluşur. Bu bir keşif davranış olarak kabul edilir ve olduğu gibi kullanılmıştırOFM ve Yükselmiş Artı Maze 13 hem de anksiyete bir ölçüsüdür. Ancak, davranış yetiştirme anksiyolitik ya anksiyojenik ya olduğuna dair açık bir gösterge yoktur. Bazı çalışmalar artmış göstermektedir yetiştirme diğerleri davranışı yetiştirme azalmıştır önermesiyle artarken anksiyete 15 göstergesidir farelerde 14 artmış anksiyete düzeyleri ile uyum içindedir. Deneysel protokol ve incelenen etolojik parametrelere bağlı olarak, burada analiz değildi yetiştirme iken Böylece, yetiştirme, basit ayaktan davranış anksiyete bağlantılı davranışları ayırt etmek için kullanılabilir.
Bu kemirgen modellerinde anksiyete ölçülmesi çok daha karmaşık bir tek labirent ortamında 16 tek bir parametre kullanılarak daha ileri sürülmektedir. Bu nedenle, tek bir testle birden testler veya birden fazla önlemler kullanılarak sonuçların değerlendirilmesi güçlendirebilir. Thigmotaxis veya duvar saran davranış, çok kemirgen türleri görülmektedir ve olmak ilgili anksiyete ile bağlantılıhaviors. Bu büyük olasılıkla büyük açık alanlar veya algılanan tehlike 17,18 alanları önlemek için bir kemirgen altta yatan eğilimi bağlıdır. Ne olursa olsun altta yatan nedenin, thigmotaxis genellikle daha spesifik kaygı ile ilgili testler 19 için başlangıç noktası olarak kabul edilir önemli bir kaygı-bağlantılı davranıştır.
OFM içinde Thigmotaxis anksiyolitik, anksiyojenik ve hatta non-farmakolojik tedaviler değerlendirmek için kullanılır. Dopamin agonistleri D1 ve D2 dopamin reseptörlerinin artan dopaminerjik iletimleri 20 için anksiyojenik benzeri etkilerinde rolü olduğunu göstermiştir ise diazepam ve klordiazepoksit gibi anksiyete ile ilişkili ilaçlar OFM 4 fare hareketi üzerinde önemli bir etkisi olduğunu göstermiştir. OFM 21 fare anksiyete gibi davranışa karşılık olarak açık gerilme ayrımlar vardır. Örneğin, BALB / c fareleri, ortak ev fare bir albino laboratuvar yetiştirilen suşu, daha davranışsal tepki gösterirAkut stres daha C57BL / 6 fareler 22 yapın. Türler, belirli bir araştırma sorusu için kullanılacak test paradigmaları ve seçme ile ilgili parametreleri ayarlarken nedenle, konular arasında yanıtları bazal varyasyon dikkate alınmalıdır.
Aynı zamanda son derece duygusal hayvanlar artmış dışkılama sergilediği popüler görünümüdür. Bu görüş, bazı raporlarıyla olmuştur, ancak anksiyete ayrı ölçüsü olarak dışkılama geçerliliği 23 sorgulanmıştır. Ancak, kemirgenlerde duygusallık ile dışkılama olayları ilişkilendirerek Hall'un orijinal tez (1934) beri, konuyla ilgili literatür büyük miktarda bu ilişkiyi 2 teyit etmiştir. Daha yeni bulgular yanıtlarda farklılıklar daha az nettir uzun gözlemler (30 dk) aksine Defekasyonların gerçekten burada yapılan gibi nispeten kısa bir test dönemlerinde duygusal kaygı ile ilgili davranışlar yararlı bir göstergesi olabileceğini göstermiştir 21
Bu OFM bunların dokunma hissinden bağlıdır farelerin davranışı dikkat etmek önemlidir. Fareler daha kolay 3 merkez bölümlerini labirent duvarları ile dokunsal temas kaybetmek ve girmek Böylece farelere herhangi bir hasar ya da bıyık sıkıntısı ölçülen anksiyete bağlantılı davranış azalmasına neden olabilir. Labirent keşif de test prosedürü sırasında ya da labirent kat 24 renk gıda veya su kısıtlaması, aydınlatma bağlı olabilir. Bu anksiyete ile ilgili davranışların OFM sonuçlarını yorumlama önce, bu değişkenleri, yanı sıra herhangi bir tedavi kaynaklı faktörlerin doğrulamak için önemlidir. El yazmalarında tüm test koşullarının detaylı raporlama da uygun çapraz çalışma karşılaştırmaları kolaylaştırmak için kritik öneme sahiptir.
Biz, motor hareketlilik ve farelerin araştırılmıştır duygusallığı ile ilgilidir olarak OFM kullanımını tartışmak burada iken Ayrıca, OFM da su, diğer davranışları test etmek için kullanılıryeni nesne tanıma ve bellek 25 gibi ch. Bellek tipi analiz edilen bağlı olarak, yeni bir nesne ile labirent süresi 5 dakika ile 24 saat arasında değişebilir. yeni nesne tanıma testinde labirent kolaylığı ve esneklik kısa veya uzun süreli hafızanın test için izin verir ve seçici hafıza oluşumunun belirli bir sahnede akut ilaç tedavisinin etkilerini analiz etmek için kullanılabilir. Sonuç olarak, OFM performans 26 bir apikal testtir. Ölçülen anksiyete ile ilgili davranışlar çeşitli davranışsal yatan süreçlerin kümülasyon vardır. Bir yanıt algılanabilir ölçülür kez Böylece, belirli bir kusur tespit etmek bundan başka yanıtlarını belirlemek çoğu zaman gereklidir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Multi Unit Open Field Test | San Diego Instruments, Inc. | White 7001-0354 | Any single or multi unit open field maze can be used |
| SMART DT Tracking Software | PanLab/Harvard Apparatus | 76-0695 | Any tracking software can be utilized with this protocol |
| Sony 990x Video Camera Recorder | Sony | CCD-TRV328 | Any suitable video camera can be attached to computer for recording tracking profiles. |
References
- Hall, C. S. Emotional behavior in the rat: defecation and urination as measures of individual differences in emotionality. J. Comp. Psychol. 18, 385-403 (1934).
- Walsh, R. N., Cummins, R. A. The open field test: a critical review. Psychol. Bull. 83, 482-504 (1976).
- Prut, L., Belzung, C. The open field as a paradigm to measure the effects of drugs on anxiety-like behaviors: a review. Eur. J. of Pharm. 463, 3-33 (2003).
- Choleris, E., Thomas, A. W., Kavaliers, M., Prato, F. S. A detailed ethological analysis of the mouse open field test: effects of diazepam, chlordiazpoxide and an extremely low frequency pulsed magnetic field. Neurosci. Biobehav. Rev. 25, 235-260 (2001).
- Ramos, A. Animal Models of anxiety: do I need multiple tests. TIPS. 29, 493-498 (2008).
- Archer, J. Tests for emotionality in rats and mice: a review. Anim. Behav. 21, 205-235 (1973).
- Gray, J. A. Emotionality in male and female rodents: a reply to Archer. Brit. J. Psych. 70, 425-440 (1979).
- Carola, V., D’Olimpio, F., Brunamonti, E., Mangia, F., Renzi, P. Evaluation of the elevated plus-maze and open-field tests for the assessment of anxiety-related behavior in inbred mice. Behav. Brain Res. 134, 49-57 (2002).
- Ramesh Babu, J., Seibenhener, M. L., Peng, J., Strom, A. L., Kemppainen, R., Cox, N., Zhu, H., Wooten, M. C., Diaz-Meco, M. T., Moscat, J., Wooten, M. W. Genetic inactivation of p62 leads to accumulation of hyperphosphorylated tau and neurodegeneration. J. Neurochem. 106, 107-120 (2008).
- Simon, P., Dupuis, R., Costentin, J. Thigmotaxis as an index of anxiety in mice: influence of dopaminergic transmissions. Behav. Brain Res. 61, 59-64 (1994).
- Denenberg, V. H. Open-field behavior in the rat: what does it mean. Ann. N.Y. Acad. Sci. 159, 852-859 (1969).
- Stanford, S. C. The open field test: reinventing the wheel. J. Psychopharm. 21, 134-135 (2007).
- Ennaceur, A. Tests of unconditional anxiety – pitfalls and disappointments. J. Phys. Behav. 135, 55-71 (2014).
- Borta, A., Schwarting, R. K. Inhibitory avoidance, pain reactivity, and plus-maze behavior in Wistar rats with high versus low rearing activity. J. Phys. Behav. 84, 387-396 (2005).
- Costall, B., Jones, B. J., Kelly, M. E., Naylor, R. J., Tomkins, D. M. Exploration of mice in a black and white test box: validation as a model of anxiety. Pharmacol. Biochem. Behav. 32, 777-785 (1989).
- Bouwknecht, J. A., Paylor, R. Pitfalls in the interpretation of genetic and pharmacological effects on anxiety-like behavior in rodents. Behav. Pharm. 19, 385-402 (2008).
- Webster, D. G., Baumgardner, D. J., Dewsbury, D. A. Open field behavior in eight taxa of muriod rodents. Bull. Psychonom. Soc. 13, 90-92 (1979).
- Wilson, R. C., Vacek, T., Lanier, D. L., Dewsbury, D. A. Open field behavior in muroid rodents. Behav. Biol. 17, 495-506 (1976).
- Crawley, J. N. Behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice: experimental designs and evaluation of general health, sensory functions, motor abilities and specific behavioral tests. Brain Res. 835, 18-26 (1999).
- Simon, P., Dupuis, R., Costentin, J. Thigmotaxis as an index of anxiety in mice. influence of dopaminergic transmissions. Behav. Brain Res. 61, 59-64 (1994).
- Miller, B. H., Schultz, L. E., Gulati, A., Su, A. I., Pletcher, M. T. Phenotypic characterization of a genetically diverse panel of mice for behavioral despair and anxiety. PLoS One. 5, e14458 (2010).
- Tannenbaum, B., Anisman, H. Impact of chronic intermittent challenges in stressor-susceptible and resilient strains of mice. Biol. Psych. 53, 292-303 (2003).
- Lister, R. G. Ethologically-based animal models of anxiety disorders. Pharmacol. Ther. 46, 321-340 (1990).
- Kulesskaya, N., Voikar, V. Assessment of mouse anxiety-like behavior in the light-dark box and open-field arena: role of equipment and procedure. Phys. Behav. 133, 30-38 (2014).
- Han, H., Du, W., Zhou, B., Zhang, W., Xu, G., Niu, R., Sun, Z. Effects of chronic fluoride exposure on object recognition memory and mRNA expression of SNARE complex in hippocampus of male mice. Biol. Trace Elem. Res. 158, 58-64 (2014).
- Barrow, P., Leconte, I. The influence of body weight on open field and swimming maze performance during the post-weaning period in the rat. Lab. Animals. 30, 22-27 (1996).
