כאן אנו מציגים פרוטוקול המתאר זלוף מחומצן במכונה מחוץ למקום של שתלי כבד מתורם. מאמר זה מכיל פרוטוקול שלב אחר שלב לרכישה והכנת שתל הכבד לזלוף מכונה, הכנת נוזל הזלוף, הפעלת מכונת הזלוף וביצוע זלוף מכונה נורמותרמית מחומצנת של שתל הכבד.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
כאן אנו מציגים פרוטוקול המתאר זלוף מחומצן במכונה מחוץ למקום של שתלי כבד מתורם. מאמר זה מכיל פרוטוקול שלב אחר שלב לרכישה והכנת שתל הכבד לזלוף מכונה, הכנת נוזל הזלוף, הפעלת מכונת הזלוף וביצוע זלוף מכונה נורמותרמית מחומצנת של שתל הכבד.
בניגוד לשימור קונבנציונלי סטטי הקר (0-4 מעלות צלזיוס), זלוף מכונה באתרו לשעבר עשוי לספק שימור טוב יותר של כבדי תורם. זלוף הרציף של איברים מספק את ההזדמנות כדי לשפר את איכות איבר ומאפשר הערכת כדאיות באתרו לשעבר של כבדי תורם לפני ההשתלה. מאמר זה מספק וידאו צעד אחר צעד לפרוטוקול באתרו לשעבר זלוף normothermic מכונה (37 מעלות צלזיוס) של כבדי תורם אנושיים באמצעות מכשיר המספק זלוף pulsatile לחץ וטמפרטורה מבוקרת של העורק הכבד וזלוף הרציף של וריד השער. נוזל זלוף הוא מחומצן על ידי שתי oxygenators קרום סיב חלול והטמפרטורה יכולה להיות מוסדרת בין 10 ° C ו 37 מעלות צלזיוס. במהלך זלוף, הפעילות המטבולית של הכבד, כמו גם את מידת פגיעה יכולה להיות מוערכת על ידי הניתוח ביוכימי של דגימות שנלקחו מנוזל זלוף. זלוף מכונת הוא כלי מאוד מבטיחכדי להגדיל את המספר של כבדים המתאימים להשתלה.
השיטה הנוכחית של שימור איברים בהשתלת כבד היא לשטוף את עם והאחסון הבא של כבדי תורם בקור (0-4 מעלות צלזיוס) שימור נוזלים (כגון האוניברסיטה ויסקונסין פתרון או פתרון היסטידין-טריפטופן-ketoglutarate). שיטה זו נקראת אחסון סטטי כקר (SCS). למרות שקצב חילוף החומרים של כבדים ב0-4 מעלות צלזיוס הוא נמוך מאוד, יש עדיין ביקוש לרקמת 0.27 μmol חמצן / דקה / g כבד, שלא יכול להיות מסופקת ב1 SCS. השיטה המקובלת של SCS, ולכן, תוצאות במידה מסוימת של פגיעה (נוספת) של כבדי תורם. בעוד סכום זה של פציעת שימור הוא לא בעיה בכבד תורם באיכות טובה, זה יכול להיות גורם קריטי והגבלה בכבדים הכי מוצלח שכבר סבלו במידה מסוימת של פגיעה בתורם. מסיבה זו, כבדי....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול זה אושר על ידי הוועדה הרפואית האתית (Medisch Ethische Toetsingscommissie) מאוניברסיטת המרכז הרפואי חרונינגן, הולנד.
1. הכנת נוזל זלוף
הערה: הנפח הכולל של נוזל זלוף מוכן לזלוף המכונה normothermic על פי פרוטוקול זה הוא 2,233 מיליליטר וosmolarity הממוקד של נוזל זלוף היא 302 mOsmol / L.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
12 כבדים אנושיים שנדחו להשתלה מסיבות שונות שימשו למחקר לאחר קבלת הסכמה מדעת ממשפחות התורמים. מאפייני התורמים מתוארים בטבלה 2. הכבדים מהתורמים האנושיים עברו פרפוזיה נורמותרמית למשך 6 שעות באמצעות הפרוטוקול המתואר במאמר זה. איכות השתלי הכבד הוערכה על ידי ניטור ההומוגניות המקרוסקופית של פרפוזיית הכבד (איור 2A-D). ההמודינמיקה של הכבדים הוערכה על ידי ניטור השינויים בזרימות העורקיות והפורטליות. נצפתה עלייה ראשונית בזרימות בעורק הכבד ובווריד הפורטלי ולאחר מכן ה.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
סרטון זה מספק פרוטוקול שלב אחר שלב לזלוף מכונה נורמותרמית של כבד מתורם אנושי באמצעות מכשיר המאפשר זלוף כפול מבוקר לחץ דרך עורק הכבד ווריד הפורטל. תוך כדי ביצוע פרוטוקול זה, לא התרחשו כשלים טכניים במכונת הזלוף וכל השתלים היו מחומצנים היטב. הכבדים המנופחים מחוץ למקום היו בעלי המודינמיקה יציבה והיו פעילים מבחינה מטבולית, כפי שהוגדר על ידי ייצור מרה16,17.
זהו פרוטוקול מבוסס היטב לזלוף מכונה של כבד מתורם אנושי. לטכניקה זו מספר יתרונות פוטנציאליים על פני השיטה הקונבנציונלית של SC.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
למחברי כתב היד הזה אין ניגוד אינטרסים לחשוף.
עבודת מחקר זו נתמכה כספית על ידי מענקים שניתנו על ידי Innovatief Actieprogramma Groningen (IAG-3), Jan Kornelis de Cock Stichting ו-Tekke Huizingafonds, כולם בהולנד. אנו מעריכים את כל מתאמי ההשתלות ההולנדים על זיהוי הכבדים הפוטנציאליים שהושלכו וקבלת הסכמה מדעת.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| Liver Assist | Organ Assist | OA. Li.Li.140 | מכשיר זלוף |
| Liver Assist חבילה חד פעמית | Organ Assist | OA. Li.DP.540 | סט חד פעמי וקנולות |
| מרדית' מס' 8 | Vygon Nederlands BV | 1362082 | צינורית צינור המרה |
| אלבומין אנושי 200 גרם/ליטר / ALBUMAN | Sanquin | 15522598 | 100 מ"ל |
| תזונה פרנטרלית שונה | Baxter Nederland B.V. | N14G30E | 7.35 מ"ל |
| מולטי ויטמינים לעירוי / CERNEVIT | בקסטר אינטרנשיונל בע"מ | 9800927 | 7 μ l |
| יסודות קורט מרוכזים לעירוי / NUTRITRACE | B. Braun Melsungen AG | 14811332 | 7.35 מ"ל |
| מטרונידזול 5 מ"ג/מ"ל | Baxter Nederland B.V. | 98181882 | 40 מ"ל |
| Cefazoline / SERVAZOLIN | Sandoz B.V. | 15611337 | 2 מ"ל |
| אינסולין מהיר פעולה | ספקים | 20 מ"ל | |
| סידן גלוביונט, תמיסה תוך ורידית 10%, 137.5 מ"ג/מ"ל | Sandoz | 97038695 | 40 מ"ל |
| סטרילי H2O | Fresenius Kabi Nederland B.V. | 98084453 | 51.3 מ"ל |
| NaCl 0.9% | Baxter Nederland B.V. | 15262510 | 160 מ"ל |
| הפרין 5,000 IE/ml למתן IV | LEO Pharma B.V. | 98026178 | 4 מ"ל |
| סודיום ביקרבונט 8.4% | B. Braun Melsungen AG | 97973874 | הכמות תלויה ב-pH |
| תאי דם אדומים ארוזים (ב-SAGM) | בנק הדם (Sanquin) | N0012000 | 750 מ"ל |
| בנק דם פלזמה קפוא טרי | (Sanquin) | N04030A0/N04030B0 | 900 מ"ל |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.