הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

באתרו לשעבר Normothermic מכונת זלוף של כבדים תורמים

11.7K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/52688

⸱

26 במאי 2015

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

במאמר זה

סיכום

כאן אנו מציגים פרוטוקול המתאר זלוף מחומצן במכונה מחוץ למקום של שתלי כבד מתורם. מאמר זה מכיל פרוטוקול שלב אחר שלב לרכישה והכנת שתל הכבד לזלוף מכונה, הכנת נוזל הזלוף, הפעלת מכונת הזלוף וביצוע זלוף מכונה נורמותרמית מחומצנת של שתל הכבד.

תקציר

בניגוד לשימור קונבנציונלי סטטי הקר (0-4 מעלות צלזיוס), זלוף מכונה באתרו לשעבר עשוי לספק שימור טוב יותר של כבדי תורם. זלוף הרציף של איברים מספק את ההזדמנות כדי לשפר את איכות איבר ומאפשר הערכת כדאיות באתרו לשעבר של כבדי תורם לפני ההשתלה. מאמר זה מספק וידאו צעד אחר צעד לפרוטוקול באתרו לשעבר זלוף normothermic מכונה (37 מעלות צלזיוס) של כבדי תורם אנושיים באמצעות מכשיר המספק זלוף pulsatile לחץ וטמפרטורה מבוקרת של העורק הכבד וזלוף הרציף של וריד השער. נוזל זלוף הוא מחומצן על ידי שתי oxygenators קרום סיב חלול והטמפרטורה יכולה להיות מוסדרת בין 10 ° C ו 37 מעלות צלזיוס. במהלך זלוף, הפעילות המטבולית של הכבד, כמו גם את מידת פגיעה יכולה להיות מוערכת על ידי הניתוח ביוכימי של דגימות שנלקחו מנוזל זלוף. זלוף מכונת הוא כלי מאוד מבטיחכדי להגדיל את המספר של כבדים המתאימים להשתלה.

מבוא

השיטה הנוכחית של שימור איברים בהשתלת כבד היא לשטוף את עם והאחסון הבא של כבדי תורם בקור (0-4 מעלות צלזיוס) שימור נוזלים (כגון האוניברסיטה ויסקונסין פתרון או פתרון היסטידין-טריפטופן-ketoglutarate). שיטה זו נקראת אחסון סטטי כקר (SCS). למרות שקצב חילוף החומרים של כבדים ב0-4 מעלות צלזיוס הוא נמוך מאוד, יש עדיין ביקוש לרקמת 0.27 μmol חמצן / דקה / g כבד, שלא יכול להיות מסופקת ב1 SCS. השיטה המקובלת של SCS, ולכן, תוצאות במידה מסוימת של פגיעה (נוספת) של כבדי תורם. בעוד סכום זה של פציעת שימור הוא לא בעיה בכבד תורם באיכות טובה, זה יכול להיות גורם קריטי והגבלה בכבדים הכי מוצלח שכבר סבלו במידה מסוימת של פגיעה בתורם. מסיבה זו, כבדי....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

פרוטוקול זה אושר על ידי הוועדה הרפואית האתית (Medisch Ethische Toetsingscommissie) מאוניברסיטת המרכז הרפואי חרונינגן, הולנד.

1. הכנת נוזל זלוף

הערה: הנפח הכולל של נוזל זלוף מוכן לזלוף המכונה normothermic על פי פרוטוקול זה הוא 2,233 מיליליטר וosmolarity הממוקד של נוזל זלוף היא 302 mOsmol / L.

  1. מהרכיבים של נוזל זלוף המתואר בטבלה 1, לשמור על תאי הדם אדום האנושיים ארוז, הפלזמה קפואים ואלבומי....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

12 כבדים אנושיים שנדחו להשתלה מסיבות שונות שימשו למחקר לאחר קבלת הסכמה מדעת ממשפחות התורמים. מאפייני התורמים מתוארים בטבלה 2. הכבדים מהתורמים האנושיים עברו פרפוזיה נורמותרמית למשך 6 שעות באמצעות הפרוטוקול המתואר במאמר זה. איכות השתלי הכבד הוערכה על ידי ניטור ההומוגניות המקרוסקופית של פרפוזיית הכבד (איור 2A-D). ההמודינמיקה של הכבדים הוערכה על ידי ניטור השינויים בזרימות העורקיות והפורטליות. נצפתה עלייה ראשונית בזרימות בעורק הכבד ובווריד הפורטלי ולאחר מכן ה.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

סרטון זה מספק פרוטוקול שלב אחר שלב לזלוף מכונה נורמותרמית של כבד מתורם אנושי באמצעות מכשיר המאפשר זלוף כפול מבוקר לחץ דרך עורק הכבד ווריד הפורטל. תוך כדי ביצוע פרוטוקול זה, לא התרחשו כשלים טכניים במכונת הזלוף וכל השתלים היו מחומצנים היטב. הכבדים המנופחים מחוץ למקום היו בעלי המודינמיקה יציבה והיו פעילים מבחינה מטבולית, כפי שהוגדר על ידי ייצור מרה16,17.

זהו פרוטוקול מבוסס היטב לזלוף מכונה של כבד מתורם אנושי. לטכניקה זו מספר יתרונות פוטנציאליים על פני השיטה הקונבנציונלית של SC.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברי כתב היד הזה אין ניגוד אינטרסים לחשוף.

תודות

עבודת מחקר זו נתמכה כספית על ידי מענקים שניתנו על ידי Innovatief Actieprogramma Groningen (IAG-3), Jan Kornelis de Cock Stichting ו-Tekke Huizingafonds, כולם בהולנד. אנו מעריכים את כל מתאמי ההשתלות ההולנדים על זיהוי הכבדים הפוטנציאליים שהושלכו וקבלת הסכמה מדעת.

....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
Liver AssistOrgan AssistOA. Li.Li.140מכשיר זלוף
Liver Assist חבילה חד פעמיתOrgan AssistOA. Li.DP.540סט חד פעמי וקנולות
מרדית' מס' 8Vygon Nederlands BV1362082צינורית צינור המרה
אלבומין אנושי 200 גרם/ליטר / ALBUMANSanquin15522598100 מ"ל
תזונה פרנטרלית שונהBaxter Nederland B.V.N14G30E7.35 מ"ל
מולטי ויטמינים לעירוי / CERNEVITבקסטר אינטרנשיונל בע"מ98009277 μ l
יסודות קורט מרוכזים לעירוי / NUTRITRACEB. Braun Melsungen AG148113327.35 מ"ל
מטרונידזול 5 מ"ג/מ"לBaxter Nederland B.V.9818188240 מ"ל
Cefazoline / SERVAZOLINSandoz B.V.156113372 מ"ל
אינסולין מהיר פעולהספקים20 מ"ל
סידן גלוביונט, תמיסה תוך ורידית 10%, 137.5 מ"ג/מ"לSandoz9703869540 מ"ל
סטרילי H2OFresenius Kabi Nederland B.V.9808445351.3 מ"ל
NaCl 0.9%Baxter Nederland B.V.15262510160 מ"ל
הפרין 5,000 IE/ml למתן IVLEO Pharma B.V.980261784 מ"ל
סודיום ביקרבונט 8.4%B. Braun Melsungen AG97973874הכמות תלויה ב-pH
תאי דם אדומים ארוזים (ב-SAGM)בנק הדם (Sanquin)N0012000750 מ"ל
בנק דם פלזמה קפוא טרי(Sanquin)N04030A0/N04030B0900 מ"ל
שונים

מקורות

  1. Plaats, A., et al. Hypothermic machine preservation in liver transplantation revisited: Concepts and criteria in the new millennium. Ann. Biomed. Eng. 32 (4), 623-631 (2004).
  2. op den Dries, S., Sutton, M. E., Lisman, Y., Porte, R. J.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

גלה מאמרים נוספים

פרפוזיה אקס סיטופרפוזיה של כבד תורםפרפוזיה של העורק הכבדיפרפוזיה של הווריד השערתיאנליזה של גזי דםהכנת נוזל פרפוזיההגדרת תא איבריםהליך קניולציההערכת חיוניות