Introduction
Miljøberikelse (EE) er en eksperimentell paradigme brukes til å utforske effekten av en kompleks og utfordrende miljø som ikke stresse dyrene en. EE er en dyr bolig teknikk består av økt plass, fysisk aktivitet og sosiale interaksjoner, som igjen øker sensoriske, kognitive, motoriske og sosiale stimulering to. Igloer, løpehjul, skål hjul, rør labyrinter og andre objekter i bomiljø fremme dette sensorisk kognitiv, sosial og motorisk stimulering ved å fremme utforskning og samhandling. Utformingen av objektene i kabinettet endres jevnlig for å presentere en ny miljø, som musene blir tvunget til å tilpasse seg. Denne strategien gir svake og kortvarige utfordringer som induserer en fordelaktig, godartet, og sunn adaptiv respons, kjent som eustress, i motsetning til en mer aversive, fiendtlig miljø eller mistilpasset nød 3,4. Ved å fremme eustress og begrense skadelig nød, musviser forskjellige gunstige fenotyper.
EE er en pålitelig eksperimentell modell med et bredt spekter av applikasjoner, som samtidig er fri for elementer som tradisjonelt er tenkt som en stressende. Effektene av EE på gnagere har blitt studert i mer enn et halvt århundre. På begynnelsen av 1960-tallet studier viste at kortikale kolinesterase nivåer redusert og subkortikale kolinesterase nivåer økt hos rotter som ble plassert i miljøer med økt boareal, økt antall rotter, og en rekke av treleker, labyrinter og plattformer 5,6. I tillegg er EE forbundet med mange adaptive forandringer i hjernen, adferd, og metabolisme i mus av forskjellig alder og genetiske bakgrunner. Derfor, er en nyttig EE paradigme for et bredt omfang av eksperimenter å studere effekten av miljøet på mus. EE-effekter kan observeres hos mus så raskt som en-ukes eksponering, og kan sees hos dyr så gammel som atten måneder 7. EE er ofte used i nevrovitenskap og neurobehavioral eksperimenter for å studere gjenoppretting av funksjon, læring og hukommelse 2. Dessuten har EE betydelig innvirkning på fenotypen av en rekke toksin-indusert og transgene dyremodeller av humane nevrologiske sykdommer som Huntingtons sykdom, Alzheimers sykdom, Parkinsons sykdom, epilepsi, slag, og mer to.
Men i løpet av årene har det vært uoverensstemmelse med anriking design som gjør sammenligninger mellom studier fra ulike laboratorier vanskelige. For eksempel, hver av undersøkelser vedrørende EE effekter relativt til humane nevrologiske sykdommene som er nevnt ovenfor, hadde varierende parametere til anriking. Studien på Huntingtons sykdom ligger 4-6 mus i store merder (44 x 28 x 12,5 cm 3) som inneholder pappesker, tunneler, og sengetøy, samt tre- og plastgjenstander som ble endret hver to dager 8,9. En av studier gjort på Alzheimer# 8217; s ligger 20 mus i et større bur (1 m 3) inneholder to løpehjul, plastrør, pappesker og reirmateriale som ble endret eller omorganisert ukentlig 10. Mange oppsett av EE har lignende temaer som objekter for å kjøre på eller gjemmer seg i, men antall mus per EE bolig, stue, og den perioden av skiftende miljøet varierer mye.
Inkonsekvent design av EE har ført til mislykket replikering av EE-effekter. Våre data om kreft og metabolisme sammen tyder på at kombinasjonen av stimuleringer som er gitt i den følgende detaljerte EE huset protokoll føre til betydelige anti-kreft og anti-fedme effekter 14,15. Men forskjellen på EE-innstillinger vedtatt av ulike laboratorier kan påvirke utfallet av EE, som er sett i ett mislykket forsøk på å gjenskape EE effekter på vekst av spesifikke kreftsvulster implantert i mus 11. De ulike resultatene kan skyldes en rekke årsaker som spenner from forskjellige vekstrater på tumorcellekulturer til den type vaskemidler som brukes til rengjøring av huset utstyret 11. For å gjenskape resultatene sett i våre eksperimenter, er en spesiell utforming av berikelse og husdyrhold nødvendig. Følgende prosedyre beskriver EE boliger som vil tillate andre forskere å kunne gjenskape vår effektive berikelse modell.
Protocol
Prosedyrene som er beskrevet nedenfor er godkjent av Institutional Animal Care og bruk Committee (IACUC) av Ohio State University.
1. Utarbeidelse av Beriket miljø Før Bolig Mus
- Rengjøring og vedlikehold instrumenter.
- Kjør den store berikelse bin (120 cm x 90 cm x 76 cm) gjennom et bur vask. En typisk Animal Facility bur vask Protokollen inkluderer 5-6 vaskesykluser, med den siste syklusen nå 82 ºC. Hele vask bør ta ca 40 min. Air-tørke bin.
- Hvis den store berikelse bin, og eventuelle andre bolig instrumenter, ikke kan sendes gjennom bur vask, så spray og tørk ned på innsiden av bin med sporicide desinfeksjonsmidler følgende produsentens instruksjoner. Tørk av bin med en vannkran fuktet papirhåndkle eller 30% etanol og tørr med et papirhåndkle for å kvitte seg med noen duft fra forrige desinfeksjonsmiddel.
- Bruk plastic tubing, igloer med skål typen hjul, og andre diverse plast Hutch lignende leker i EE. Vask disse lekene gjennom et bur vask. Hvis du ikke har tilgang til et bur vask Følg trinn 1.1.1.1.
- Bruk metallløpehjulene i EE. Vask hjulene gjennom et bur vask. Hvis malingen på hjulene begynner å falme, slik at hjulet blir bråkete når dyrene kjøre på den, bruke en liten mengde vaselin til der hjulet og axel koble til.
- Bruk trestokker i EE. Rengjør loggene ved å fjerne noen sengetøy eller annet rusk hånd. Deretter sterilisere loggene ved autoklavering dem på en tørr syklus eller tekstil syklus, som når en temperatur på 121 ° C i 15 min.
- Bruk bur mellom dimensjoner på 29 cm x 18 cm x 12,5 cm og 30,5 cm x 19 cm x 14 cm for å holde en mate- og drikker ledning rack.Cut et hull på minst 5 cm i diameter fra den fremre-bunnen av buret for mus til å gå inn og ut av fra EE. Rense disse fôring bur gjennom bur vask.
- Kjør den store berikelse bin (120 cm x 90 cm x 76 cm) gjennom et bur vask. En typisk Animal Facility bur vask Protokollen inkluderer 5-6 vaskesykluser, med den siste syklusen nå 82 ºC. Hele vask bør ta ca 40 min. Air-tørke bin.
- Sette opp miljøet
- Hell ¼-tommers maiskolbeforsøksdyr sengetøy i den store berikelse bin. Dekker hele gulvflaten av bin til en dybde på 2-2,5 cm med sengetøy.
- Plasser to eller tre stokker i et hjørne av bin. Plasser loggene i hjørnet for å beslaglegge et areal på ca 1225 cm 2. I området sekvestrert av stokkene, plassere tre igloer med skål hjul på toppen. Sørg for at hjulene ikke berører veggene i hyllen, loggene, eller hverandre, slik at det er nok plass til hjulene å spinne fritt.
- Piece sammen plastrør slik at flere våpen gren ut fra centeral tilkoblingsstykket. Plasser denne slangen i midten av hyllen.
- På to hjørner av bin, plasserer en fôring bur hver fylt med samme sengetøy som hyllen, og hullet i fronten av fôring buret bør være vendt mot midten av hyllen. På toppen av disse fôring bur en ren mat og vann trådbør plasseres for å holde mat og vann. Ikke plasser lokket på buret. Sette mat og vann i buret ledninger.
- Plasser tre metallhjul i hyllen, men ikke alt ved siden av hverandre. De tre forskjellige typer av hjul er en 11,5 cm hjul, en 20,5 cm hjul, og en 28 cm hjul. Deretter plasserer 4-5 mer plast Hutch lignende leker eller tunneler over hele berikelse bin.
- Dekk bin med micro-isolator filterpapiret. Bruk bindemiddel klipp til klipp filterpapiret til bin.
- Nyhet er viktig for EE. Bruk dette oppsettet som rammen av EE variere plassering av nevnte bur, gjenstander og leker for å skape en ny miljø for dyrene.
2. Boliger dyrene
- Avle dyr for eksperimenter i vanlig laboratorie bolig og ikke EE. Eventuelt plassere dyrene i EE så tidlig som 21 dagers alder ved avvenning. Genotype og øre slag / tag dyr før EE bolig.
- Når du plassererdyr inn i berikelse bin fra en standard bur, plassere buret i bin på siden, slik at dyrene kan bevege seg fritt fra standard bur til berikelse bin. Ikke la de hekkende materialer for å bli overført til berikelse bin.
- Huset 10-20 dyr på samme alder, kjønn og genetisk belastning i EE.
3. Vedlikeholde Miljø og observere Mus under studier
- Daglig
- Stille observere dyrene etter tegn på sykdom eller nød. Hvis det er nødvendig, lett å håndtere dyrene for ytterligere å inspisere helsemessige forhold. Rekord unormale observasjoner og oppsøke helse tekniker eller veterinær ansatte hvis dyret viser forhold som krever fjerning fra forsøket.
- Gi aktuell behandling med trippel anti-biotiske salve for små sår eller skorper. Hvis et dyr må fjernes på grunn av en kronisk sykdom eller skade, fjerne dyret fra eksperimentet for aktiv dødshjelp. Hvis dyrmøte tidlig fjerning kriteriene for å føre tilsyn med dyreforsøk omsorg komité eller veterinær, ikke returnere dyrene tilbake til EE.
- To ganger i uken
- Sjekk fôr og vannstand. Sikre at fôr og vann vil vare i de neste 3-4 dagene. Rett opp løpehjul og berikelse leker slik at de er spredt, og kan brukes av mus. Bytt ut noen som er for skitten.
- Ukentlig
- Bytt ut vannflasker med rene vannflasker. Omorganisere berikelse enheter på en måte som følger oppsettet i punkt 1.2. Foreløpig er forskjellig fra oppsett av forrige uke.
MERK: Hvis et eksperiment krever dyrene å bli fjernet fra beriket miljø for en aktivitet (opptak kroppsvekt, blodprøvetaking, atferd test, etc.) er det best å omorganisere miljøet mens dyrene er borte fra berikelse bin. - Rengjør fôring merdene i EE hånd eller sende det via bur vasksom beskrevet i kapittel 1.1.5. Bytt ut wire racks som holder mat og vann med rene rister også.
- Følg instruksjonene i punkt 2.2. når du plasserer dyrene tilbake i berikelse. Spot sjekke resten av den store berikelse bin og rent, om nødvendig ved øste ut skitten kull og spre ned nye rent sengetøy.
- Bytt ut vannflasker med rene vannflasker. Omorganisere berikelse enheter på en måte som følger oppsettet i punkt 1.2. Foreløpig er forskjellig fra oppsett av forrige uke.
- Bi-ukentlig
- Mens du utfører ukentlig drifta, rydde lekene for hånd eller sende gjennom buret vask som beskrevet i kapittel 1.1.2. Hvis det er nødvendig, å plassere musene i en standard mikro isolator bur for den tid som kreves for å rengjøre.
- Månedlig
- Rengjør flertallet av kullet ut ved å bevege berikelse leker og fôring bur og øste ut kullet. Erstatte med fersk søppel. Sørg for at det er en tomme av sengetøy i alle områder av buret. Hvis det er nødvendig, å plassere musene i en standard mikro isolator bur for den tid som kreves for å rengjøre.
- Hver TreMåneder (eller slutten Experiment)
- Fjern alle sengetøy og leker og rengjøre og desinfisere berikelse bin som beskrevet i punkt 1.1.1. Hvis forsøket pågår, erstatte med nytt sengetøy, fôring bur, utvalg av leker og deretter returnere musene til bin.
- Desinfisere hele berikelse bin oftere enn hver tredje måned hvis det kreves av forskningsinstitusjon der EE ligger. Dersom dette er nødvendig og en annen stor berikelse container er tilgjengelig, sette opp ekstra berikelse container som beskrevet i kapittel 1.2. og overføre dyrene til den nye beholderen, mens den foregående blir rengjort.
4. Kontrollboforholds
- Hus dyr i kontrollgruppen i mikro-isolator bur av dimensjoner 30,5 cm x 19 cm x 14 cm. Ta med en rist i buret for å holde mat og en flaske vann, hvis buret ikke er koblet til et automatisk vanningssystem.
- Gi den samme maiskolbe sengetøy i kontroll buret som er i EE. Gi en 4 cm x 4 cm nestlet for musene å lage et reir av.
- Erstatte og / eller rengjør burene, fôring ledninger, mat og vann en gang i uken. Rent bur og wire racks gjennom bur vask eller som beskrevet i kapittel 1.1.1.1. Rengjøre burene oftere hvis dyr urinerer oftere eller hvis drikkevann lekkasjer bort sengetøy.
- Overvåke helsen til dyrene i styrehuset daglig. Forsikre dyrene har rikelig med mat og vann.
- Hus 3 ~ 5 mus av samme kjønn i vanlig mus bur. Ikke gi noen leketøy, tube, eller bur i buret.
- Institusjonelle forsøksdyr omsorg anlegget helse- og laboratorieteknikere kan gi drifta for disse kontroll mus.
- Holde dyr på en 12 timers lys / mørke syklus som er for musene i EE.
Representative Results
EE påvirker vekstfaktor uttrykk, øker nevrogenesen og overlevelse av cellene i sentralnervesystemet (CNS) 12,13. Nyere studier har vist at denne teknikken med EE fører til en bemerkelsesverdig undertrykkelse av kreft vekst i tre musecancermodeller inkludert B16 melanom, tykktarmskreft MC38 og APC min / + mus som inneholder en germline mutasjon og er svært utsatt for spontan dannelse i adenom tarmen 14. Resultatene i figur 2 bekrefter den undertrykkelse av B16 melanoma tumorvekst implantert i mus eksponert for EE i 5 uker (~ 80% reduksjon av tumormasse). Kreft vekst undertrykkelse ble selv observert hos mus når EE ble startet etter at svulsten hadde blitt etablert 14. EE resultert i større inhibering av melanom vekst i høyt fettinnhold indusert fedme mus (~ 70% reduksjon i tumormasse) enn i mus med normal vekt (~ 50% reduksjon i tumormasse) 14. EE ind uced signatur endringer i serum biomarkører inkludert robust dråpe leptin, reduksjon av IGF-1, og økning av adiponectin nivåer 14.
I tillegg har denne teknikken med EE avtar fedme, øker energiforbruket, fører til resistens mot diett-indusert fedme, og induserer et hvitt til brunt fett fenotypisk bryteren ved aktivering av hypothalamus-sympathoneural-adipocytt aksen 15. Nedgangen i fedme ble sett så tidlig som seks dager utsatt for EE (figur 3A, B) og igjen bekreftet i dyr eksponert for ee i fire uker (Figur 3C, D). Det er også viktig å merke seg at, en, anti-kreft og anti-fedme effekter assosiert med EE ikke kan tas hensyn ved fysisk aktivitet alene, og, to, kan EE effekter reproduseres ved overekspresjon av hjerne-avledet neurotrofisk faktor (BDNF ) i hypothalamus 14,15.
2874fig1.jpg "/>
Figur 1: Beriket miljø bin satt opp The beriket miljøet har et areal på 120 cm x 90 cm, og inkluderer to modifiserte bur, løpehjul, igloer med skål hjul, plastrør, trestokker og andre plast berikelse leker..
Figur 2: Beriket miljø reduserer tumorvekst i C57BL / 6 hannmus Tre uker gamle hannmus var huset i EE eller kontroll bur i 5 uker før tumorinokulering.. B16 melanomtumorvekter på 17 dager etter inokulering av 10 5 celler per dyr subkutant over den høyre flanke (n = 10 per gruppe. Students t-test, * p <0,05).
s / ftp_upload / 52874 / 52874fig3c.jpg "/> 
Figur 3: Beriket miljø reduserer fedme i C57BL / 6 hannmus Tre uker gamle mus ble utsatt for ee;. en gruppe for 6 dager, en annen for fire uker. (A) Seks dager i EE redusert fettpute vekter (n = 5 pr gruppe. Students t-test, * p <0,05). (B) Seks dager i EE redusert fettpute vekt i forhold til kroppsvekt (N = 5 pr gruppe. Students t-test, * p <0,05). (C) Fire uker i EE redusert fettpute vekter (n = 5 pr gruppe. Students t-test, * p <0,05). (D) Fire uker i EE redusert fettpute vekt i forhold til kroppsvekt (N = 5 pr gruppe. Students t-test, * p <0,05). BAT: brunt fettvev, IWAT: lyske hvitt fettvev, EWAT: epididymal hvitt fettvev,RWAT: retroperitoneal hvitt fettvev.
Discussion
De robuste effekter av EE på genuttrykk i hjernen, redusert fedme og kreft vekst hos mus avhenge sterkt av forskerens evne til å opprettholde den nye miljøet og håndtere dyrene på en måte som fremmer fysisk aktivitet, sosialt samspill, og kognitive utfordringer, men likevel ikke nød dyrene. Det er to viktigste prosessuelle skritt for å huske. Først må du huske å endre plassering av leker, gjenstander og bur hver uke. Selv om leketøy og objektene kan være det samme fra forrige uke, ble musene oppfatter omgivelsene som roman. Endre leker og gjenstander seg med forskjellige dem annenhver uke. For det andre, husk å holde miljøet rent. Hvis skittent sengetøy ikke blir fjernet, kan de økte nitrogen nivåer være en stressfaktor for dyrene.
I tillegg er det mange teknikker å merke seg i denne EE-protokollen. Bruk av ulike eller unike leker og annetdesign av plastrør labyrinter er oppmuntret. Miljøet kan være utfordrende, men bør ikke utgjøre en trussel mot dyrenes helse. Videre, pass på leker som er dysfunksjonelle, fordi de dysfunksjonelle leker øke risikoen for muse lemmer å bli fanget, eller kan være giftig for dyrene hvis konsumert ved å tygge på den. En konstant til EE er bruk av tre tallerken hjul på toppen av igloer, sequestered til et hjørne eller på siden av bin med 2-3 logger. Dette oppsettet av å kjøre skåler bak stokkene har vært til stede i alle våre berikelse studier. Når det gjelder bruk og plassering av andre gjenstander, beskrivelsen av oppsettet ovenfor er en grunnlegg blå ut av EE-oppsett. Variant av oppsettet med denne grunn rammen av plastrør, løpehjul, løping skåler, bur og logger bør gi en tilstrekkelig roman miljø å reprodusere de rapporterte resultatene.
Hvis du arbeider med transgene dyr som har diabetes eller andre stoffskiftesykdommer, betaler nær oppmerksomhet til mat og vannforbruket for å sikre at dyrene ikke går tom for mat og vann. Hvis dyrene har diabetes, vil de tisser mer, så sengetøy av EE-boliger må kanskje flekk kontrolleres og rengjøres oftere. De stedene i EE boliger som trenger sengetøy fjernet oftest er hjørnene. Husk å justere hjulene og andre leker, slik at de kan benyttes av dyrene. Dyrene er i stand til å kjøre tallerken hjul inn i sengetøy og banket kjører hjulene over. Hvis dyrene er unge, 3 til 5 ukers alder, kan de grave under merdene i EE og gjemme sammen under der, forlater forskeren clueless om hvor dyrene er. Når du fjerner skitten sengetøy, erstatte leker, eller rengjøring bur, er det foreslått å sette dyrene i en ren standard bur for ikke å stresse dem ut mens du justerer sitt miljø. Det er lettere å få alle dyrene i ett bur hvis de har færre steder å gjemme seg i environment. Derfor er fjerning av leker før binde dyr i et bur gjør prosessen enklere. Videre ikke plassere mer enn 5-6 dyr i en enkelt standard bur mens de venter på rengjøring eller justering av EE miljø. De mannlige dyr i EE kan være aggressive spesielt når EE startes i voksen alder. Derfor er det viktig å observere miljø for eventuelle sårede eller døde dyr.
I tillegg er det typisk antall dyr vi hus i EE for denne store størrelsen på beholderen er 10-20 mus. Antallet dyr som andre forskere bruker for EE varierer, ved å bruke omkring 10 eller mindre mus, og størrelsen av buret eller bin bør tas i betraktning ved bestemmelse av antall dyr til huset i EE. Å ha for mange dyr i et levende miljø kan føre til aggresjon hos hannmus. Musene vi har plassert i EE har vært av C57BL / 6 bakgrunn. Mus fra andre stammer kan være mer eller mindre aggressiv, eller mer utsatt for helseproblemer iDette EE oppsett. Dette bør tas i betraktning ved bestemmelse av dyrehold plan for mus og den anrikede miljø.
Fire uker EE huset er tilstrekkelig til å fremkalle reduksjon av fedme, dråpe av leptin nivå, og inhibering av B16 melanom vekst. Lengre EE kan føre til større virkninger på metabolismen og kreft hemming. Hvis musene gjennomgå kirurgiske prosedyrer under eller før eksponering for EE, kan de være plassert med suturer intakt. Hvorvidt dyr svarer godt til denne spesielle EE oppsett med kirurgiske stifter eller kateter intakte er ikke undersøkt. Videre er vi undersøker hvordan denne spesielle EE påvirker levetiden eller healthspan av gamle dyr. Foreløpige data tyder på at kvinnelige C57BL / 6 mus, 10 måneders alder, svare på ee på samme måte som unge mus. En begrensning av EE boliger er imøtekommende så stor bin i Dyreavdelingen plass, og fortrinnsvis i et kjønnsspesifikke rom. Dermed fremtidige studier på effstp EE på en mindre skala, samt å finne leker som er lett å rengjøre, tåler høy temperatur rengjøring og er trygge på dyr helse, vil forbedre anvendelser av EE i metabolske og kreftforskning.
Disclosures
Forfatterne erklærer ingen interessekonflikt.
Acknowledgments
Dette arbeidet ble støttet av NIH tilskudd CA163640, CA166590, og AG041250 til LC.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Large enrichment bin (120 cm x 90 cm x 76 cm) | Custom made. | Custom made. | Made of polypropylene. Edges of the bin are 1.5 cm thick. |
| Large enrichment bin alternative (120 cm x 110 cm x 76 cm) | Global Industrial | 155202 | If necessary, this bin works as an alternative to the one above. |
| Habitrail Mini tubes | Habitrail | 62720; 62705; 62725; 62715; 62054 | - |
| Plastic igloos with saucer wheels | Bio Serv | K3327; K3250 | - |
| Metal Running Wheels | Super Pet | 61392; 61394; 61396 | - |
| Manzanita Wood Gnawing Sticks, 3" | Bio Serv | W0016 | |
| Mouse Tunnels | Bio Serv | K3322 | - |
| Mouse cages that go in the large EE bin. | Lab Products Inc | 10027 Mouse Cage | - |
| Cage Klenz 180 Alkaline Cage Wash Detergent, Cage Klenz 250 Acid Detergent | Steris Life Sciences | 1K1802; 1K2502 | These detergents are used in the cage wash for the toys, large enrichment bins, and cages. |
| Sporklenz | Steris Life Sciences | 6526Q8 | Alternative sporicide/disinfectant to washing toys, bins, and cages in cage wash. |
| Bed-O-Cobs 1/4" bedding | The Andersons, Inc. | 4B | Corn cob bedding is 1/4" in diameter. |
| Nestlets for control housed mice | Ancare | Cotton squares |
References
- Cao, L., During, M. J.
- Nithianantharajah, J., Hannan, A. J. Enriched environments, experience-dependent plasticity and disorders of the nervous system. Nat. Rev. Neurosci. 7, 697-709 (2006).
- Milsum, J. H. A model of the eustress system for health/illness. Behav. Sci. 30, 179-186 (1985).
- Selye, H. Stress Without Distress. , McClelland and Stewart. Toronto. (1974).
- Krech, D., Rosenzweig, M. R., Bennett, E. L. Effects of environmental complexity and training on brain chemistry. J. Comp. Physiol. Psychol. 53, 509-519 (1960).
- Rosenzweig, M. R., Krech, D., Bennett, E. L., Diamond, M. C. Effects of environmental complexity and training on brain chemistry and anatomy: A replication and extension. J. Comp. Physiol. Psychol. 55, 429-437 (1962).
- Frick, K. M., et al. Effects of Environmental Enrichment on Spatial Memory and Neurochemistry in Middle-Aged Mice. Learn. Mem. 10 (3), 187-198 (2003).
- Dellen, A., Blakemore, C., Deacon, R., York, D., Hannan, A. J.
- Spires, T. L., et al. Environmental enrichment rescues protein deficits in a mouse model of Huntington’s disease, indicating a possible disease mechanism. J. Neurosci. 24 (9), 2270-2276 (2004).
- Jankowsky, J. L., et al. Environmental enrichment mitigates cognitive deficits in a mouse model of Alzheimer’s disease. J. Neurosci. 25 (21), 5217-5224 (2005).
- Westood, J. A., Darcy, P. K., Kershaw, M. H. Environmental Enrichment does not impact on tumor growth in mice. F1000Research. 2, 140 (2013).
- Cao, L., et al. VEGF links hippocampal activity with neurogenesis, learning. Nat. Genet. 36 (8), 827-835 (2004).
- Young, D., Lawlor, P. A., Leone, P., Dragunow, M., During, M. J. Environmental enrichment inhibits sponta- neous apoptosis, prevents seizures and is neuroprotective. Nat. Med. 5 (4), 448-453 (1999).
- Cao, L., et al. Environmental and genetic activation of a brain-adipocyte BDNF/leptin axis causes cancer remission and inhibition. Cell. 142 (1), 52-64 (2010).
- Cao, L., et al. White to brown fat phenotypic switch induced by genetic and environmental activation of a hypothalamic-adipocyte axis. Cell Metab. 14 (3), 324-338 (2011).
