Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Neuroscience
Click here for the English version

Neuroscience

Генерация местных СА1 γ колебаний тетанических стимуляции

Published: August 14, 2015 doi: 10.3791/52877
Automatic Translation
1, 1, 1
1The Florey Institute of Neuroscience and Mental Health, University of Melbourne

Summary

Колебания фундаментальные свойства сети и модулируются болезни и наркотиков. Изучение мозга ломтик колебания позволяет характеристику выделенных сетей в контролируемых условиях. Протоколы предназначены для подготовки острых срезах мозга для вызывания ca1 γ колебания.

Abstract

Нейронной сети колебания важные особенности активности мозга в норме и патологии и может модулироваться в диапазоне используемых в клинике препаратов. Протокол предоставляется создать модель для изучения СА1 γ колебания (20 - 80 Гц). Эти γ колебания устойчивы, по крайней мере 30 мин и зависит от возбуждающих и тормозных синапсов деятельности в дополнение к активации кардиостимулятора токов. Tetanically стимулированные колебания имеют ряд воспроизводимых и легко поддающихся количественной оценке характеристик, включая счета спайка, длительность колебаний, задержки и частоты, что доклад по сети государства. Преимущества электрически стимулированных колебаний включают стабильность, воспроизводимость и эпизодический приобретение позволяет надежную характеристику функции сети. Эта модель СА1 γ колебаний может быть использован для изучения клеточных механизмов и систематически исследовать, как нейронная сеть деятельность изменены болезни и наркотиков.Заболевание состояние фармакологии могут быть легко включены с помощью срезах мозга от генетически модифицированных или инвазивных животных моделях для того, чтобы выбор препаратов, которые специально направлены механизмов болезни.

Introduction

Мозг сети колебания происходят в пределах отдельных частотных диапазонах, которые коррелируют с поведенческими государств. У грызунов, гиппокампа θ колебания (5 - 10 Гц) наблюдается во время разведочных поведения 1,2, в то время как γ колебания (20 - 80 Гц) ассоциируются с различными когнитивными процессами, в том числе восприятия и внимания 3,4. Синхронный γ сетевую активность также вовлечен в патологии расстройств, таких как эпилепсия, шизофрения 5,6. Например, γ колебания думал соответствуют областям коркового эпилептического очага 5,7,8 и могут быть использованы в качестве маркеров pharmacosensitivity или сопротивления, два важных областей исследования в эпилепсии исследованиях 9.

Гиппокампа ломтик мозг модель, которая была широко используется для исследования сетевой активности 10-12. Различные протоколы были разработаны для создания γ колебания в срезах мозга, что, как правило, яnvolve фармакологическая модуляция таких, как низкая Mg 2+, 4-аминопиридин (4AP), бикукуллина и каиновой кислоты 12-17. Недостатки фармакологически вызвали колебаний в том, что они происходят случайным после применения препарата и не надежно генерируется или стабильным во времени. Электрически срабатывает γ колебания преодолеть многие из этих проблем, а также имеют то преимущество, что временно заблокированы стимулирующего случае позволяет эпизодической записи и анализа. Вот протокол описывается для генерации СА1 γ колебания, предоставляя тетаническое стимуляции рогового ORIENS в гиппокампе срез.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Все эксперименты на мышах были утверждены этики животных комитета Флори институт.

1. Установка для резки Brain фрагменты

  1. Подготовка режущей раствора, содержащего (мм) 125 холин-Cl, 2,5 KCl, CaCl 2, 0,4, 6 MgCl 2, 1,25 NaH 2 PO 4, 26 NaHCO 3, 20 D-глюкозы, насыщенный карбогена газа (95% O 2 -5 % искусственный спинномозговой жидкости СО 2) и (ACSF) записи раствора, содержащего (мм) 125 NaCl, 2,5 KCl, CaCl 2, 2, 2 MgCl 2, 1,25 NaH 2 PO 4, 26 NaHCO 3, 10 D-глюкозы, насыщают карбогена. Поместите режущий решение на льду держать его холодно.
  2. Замораживание около 400 мл раствора режущего и смешать вместе с 100 мл размороженной режущего раствора для создания суспензии льда. Пузырь с карбогена (95% O 2, 5% CO 2) при скорости потока приблизительно 0,5 л / мин через небольшой Cтрубки алибер или спеченного стекла, чтобы произвести устойчивый, но мягкий поток пузырьков.
  3. Приготовьте 250 мл химический стакан с повышенной вставкой нейлон сетки, на которой срезах мозга будет размещена. Залейте ACSF, чтобы покрыть сетку примерно на 2 см и пузырь с карбогена, убедившись, что пузыри не непосредственно нарушить область ломтик холдинга. Важно также, что нет пузырьков воздуха в нейлоновую сетку, так что, если они присутствуют удалить их. Это будет удерживающей камеры и выдерживают при комнатной температуре (20 - 25 ° C).
  4. Макет рассекает инструменты в том числе большой ножницами, небольшой ножницами, малых и больших микро шпателей, и больших и малых пар щипцов и охладить их на льду. Поместите vibratome ткани резки блока на льду на площади алюминиевой фольги. Получить 2 части 6 см фильтровальной бумаги, одним лезвием бритвы края, и стакан 25 мл, наполненный суспензии резки решения, а также.
  5. Заполните второй контейнер со льдом, и лежал кусок ткани папэ на льду и поместить 12 см культуры блюдо на вершине. Заполните культуры блюдо с режущим решение суспензии льда и пузырь с карбогена. Это контейнер, в котором осуществляется с рассечение мозга.
  6. Подготовка vibratome. Удалить свежий обоюдоострым лезвием бритвы (использовать свежие лезвия каждый раз) из упаковки и спрей с 80% этанола, затем деионизированной воды. Вырезать 3 мл пластиковой пипетки передачи в точке, где она начинает сужаться. Это будет использоваться для передачи срезах мозга. Изгиб иглы 27 G у основания примерно 45 ° и прикрепить к 1 мл шприца. Это будет использоваться, чтобы управлять во время резки ломтиками.

2. Резка Мозговые фрагменты

  1. Обезболить мышь (P16 - P18) с 2% изофлуран или локально утвержденного метода. После индукции обезглавить животное с большим ножницами и падение головой в 12 см культуры блюдо, которое содержит ыми суспензии резки решение. Суспензия должна полностью погрузиться в головубыстрое охлаждение.
  2. Держите переднюю часть головы с одной стороны пилинг кожи и соединительной ткани вперед к носу. Использование маленькие ножницы сократить соединительной ткани, чтобы выявить основную череп. Затем снимите мышцы вышележащих спинной части черепа и шеи.
  3. Удалить мозг от черепа сначала обеспечить переднюю часть черепа с большими щипцами, а затем сделать две боковые разрезы через кость обе стороны от затылочного отверстия, используя маленькие ножницы (фиг.1, порезы, обозначенные A1 и A2).
    1. Сделайте еще ​​один разрез между глазами (только передняя часть темени) (рис 1, вырезать помечены В) затем тщательно вырезать вдоль стреловидного шва вперед и отражают сокращение черепа разделы, раскрывающие мозг (рисунок 1, вырезать помечены C).
    2. Используйте маленькую лопаточку, чтобы выкопать мозг и место на культуральной чашке. Будьте в курсе CRANМВЛ нервы на нижней аспекте мозга, которые будут должны быть разорваны, это может быть сделано с помощью меньшего размера микро шпателя. Использование больших шпателя передачи мозг в стакан 25 мл, наполненную суспензии резки раствора.
  4. Подготовка полушарие мозга для нарезки.
    1. Поместите один кусок фильтровальной бумаги диаметром 6 см в нижней части свежей культуральной чашке затем заполнить со свежим раствором суспензии резки и пузырь. Использование большего шпателем в положение мозг, вентральной стороной вниз, на фильтровальную бумагу. Возьмите новый и очищенный одного края лезвия бритвы и сократить мозг, чтобы удалить мозжечок, а затем сделать разрез по средней линии, чтобы отделить мозг в двух полушариях.
  5. Подготовка блока vibratome ткани.
    1. Возьмите охлажденную блок vibratome ткани, высушить поверхность, и поместите каплю клея цианакрилатного в середине и равномерно на приблизительный размер мозга. Используйте маленькую лопаточку, чтобы манипулировать одним измозговые полушария на большой микро шпателем так медиальной стороне мозга вниз.
    2. Сенсорный край шпателем на границе головного мозга на второй лист фильтровальной бумаги, чтобы удалить как можно больше раствора, как это возможно. Слайд мозг от крупных шпателем с использованием меньшего шпателя, чтобы направлять его на клей.
    3. Безопасный режущий блок в vibratome камеры и заполнить камеру с режущей раствора суспензии и пузырь, обеспечивая мозг полностью погружен. Поверните режущий блок так, брюшная сторона мозга сталкивается лезвие.
  6. Нарезка мозг.
    Примечание: Каждый vibratome является уникальным, так следуйте инструкциям производителя.
    1. Установите толщину среза до 450 мкм, и обеспечить лезвие вибрирует, как она движется через мозг со скоростью примерно 0,3 мм / с. Вырезать полностью через мозг от брюшной стороны к поверхности коры, это будет производить весь мозг сагиттальных, которые могут бе используется для электрофизиологических записей. Ломтики будет выпускаться в поперечном направлении медиально и, как правило, 3 - 4 ломтики могут быть вырезаны из каждого полушария.
    2. Если база ломтик лифтов использовать согнутую 27 G иглу нежным прессы ломтик вниз. Поскольку каждый ломтик разрезать, используйте пипетки передачи, чтобы переместить его на платформу в удерживающей камере, где они жизнеспособны до 8 часов.

3. Внеклеточные электрофизиологии Записи

  1. Монтаж кусочек в записи камеры.
    1. Использование передачи пипетки, поместите кусочек мозга в погруженном записи камеры перфузии ACSF течет по 1 - 2 мл / мин и нагревали до 32 ° С. ACSF используется для записей отличается от того, в холдинг камеры, как 2+ концентрация Mg увеличивается от 2 до 4 мм.
    2. Закрепите кусок с арфой "" (полукруглой нержавеющей стали с нейлоновыми нитями растянутых по крайней 2 - 3 мм пробелами). Местоарфа, так что пряди идут параллельно СА1. Увеличение скорости перфузии до 8 - 10 мл / мин при 32 ° С.
  2. Под микроскопом рассекает месте стимулирующий электрод и записи электрода (стеклянный электрод заполнен раствором записи ACSF) на поверхности рогового radiatum в СА1 (фиг.2А). Поместите стимулирующий электрод сначала поместите записи электрода.
  3. Стимулировать Шаффер залогов с 120 - 150 мкА амплитуды и 0,1 мс тестового импульса длительностью и наблюдать результирующее поле возбуждающим сообщению синаптическую потенциал (fEPSP) сигнала, чтобы определить здоровье ломтик (рис 2B). Стимулирующее и записи электроды могут должны быть перемещены в часть около 50 - 100 мкм от поверхности среза, чтобы получить fEPSP записи с мелких волокон волейбол и большой амплитудой. Шаффер залога вызвал fEPSPs являются стереотипными и обеспечить хороший показатель здоровья среза. Нealthy ломтики обычно показывают волокна ударом с fEPSP отношение амплитуд менее 0,3.
  4. Перемещение электродов.
    1. Использование рассекает микроскоп, переместить стимулирующий электрод к середине рогового ORIENS и перемещать записи электрод к пирамидальной слоя клеток как можно ближе к регистрирующего электрода, насколько это возможно, как показано на фигуре 3А. Стимулирующее и записи электроды, возможно, потребуется толкнул в срезе примерно 50 - 100 мкм, так что амплитуда ответа fEPSP в 120 - тест мкА импульса 150 составляет примерно 1 мВ.
  5. Создание γ колебания.
    1. Для создания γ колебания стимулируют ткани с поездом 20 х 0,1 мс импульсов поставляемых на 200 Гц. Это тетаническое стимулом может дать ответов воспроизводимых при доставке каждые 5 мин.
  6. Используйте следующие параметры записи.
    1. Масштаб усиления выходного сигнала, чтобы соответствовать диапазон входного напряженияаналого-цифровой преобразователь. Убедитесь, что максимальный ожидаемый экскурсия сигнал использует минимум 30% от диапазона входного напряжения. Будьте осторожны при установке выгоды для высоко, как сигналы могут обрезать. Необходимы для полевых записей типичный пропускная способность составляет 500 Гц с AC связи на 0,1 Гц, чтобы удалить базовой линии.
    2. Оцифровка по крайней мере 4 - 5 раз быстрее, чем угловой частоты фильтра низких частот, чтобы избежать наложения сигнала.
  7. Анализ данных.
    1. Данные фильтр высоких частот на 5 Гц, чтобы удалить любые базовые изменения. Определить шипы, используя порог производной, с минимальным отрывом событий 10 мс, характерное время событий в пике, и регрессия интервалом 7 мс, порог ~ 100 мВ / мс, и разделяющей долины 100%. Рассчитать задержки, как время, необходимое для первого идентифицированного шип происходить после окончания стимуляции артефакт. Этот анализ позволяет для характеристики числа пиков, задержки интервала между событий, и продолжительность рассчитывается какследующим образом:
    2. Рассчитать количество шипов, как общее количество шипов на колебания на каждой развертки определяется.
    3. Рассчитайте задержку колебаний. Для каждого колебания, вычесть время первого идентифицированного шипа от конца стимуляции артефакта.
    4. Рассчитайте средний интервал между событий (ISI). Определите период времени между несколькими обнаруженных шипами и среднего.
    5. Рассчитать продолжительность колебаний. Измерьте время между первым и последним обнаруженным шип в каждом колебании.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Тетанических стимуляция пластовых ORIENS генерируется надежные и воспроизводимые γ колебания (35,4 ± 2,2 Гц), рис 3B. Чтобы продемонстрировать, что колебания были получены в локальной сети СА1 входы от СА3 были разорваны путем разрезания срез в области CA2 с помощью изогнутого 32 G иглу. Свойства колебаний в нарезать кусочками не отличаются от необработанных срезов (р = 0,85; нарезать кусочками 6.16 ± 1.1 шипами, N = 6; необработанных ломтиков 5,89 ± 0,8 шипы, п = 6), указывая, что колебания локально.

Важным преимуществом этого метода является стабильность записи. Когда столбняк был доставлен в 5-минутными интервалами колебания были стабильны в течение, по крайней мере 30 мин для любого данного среза (р = 0,26 для числа шипов на 15 мин против 30 мин). Существует вариабельность между фрагментами в общем количестве шипов в пределах колебаний и других параметров. Для Dковер исследования парные эксперименты можно сделать так, что различия в исходных свойств незначительные факторы. Для изменчивости сравнений внутри ломтик может быть проблемой и может быть преодолена путем достаточно питания сравнений.

Далее, были исследованы ионные каналы и рецепторы, которые необходимы для генерации этих tetanically стимулированных СА1 γ колебаний. Фармакологическое блокада α-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазолпропионовой кислоты (АМРА) рецепторов с 20 мкМ 6-циано-7-нитрохиноксалин-2,3-дион (CNQX) (фиг.4А, В), ГАМК Через рецепторы с 20 мкМ бикукуллина (фиг.4С), я ч тока с 20 мкМ 4- (N-этил-N-фениламино) -1,2-диметил-6- (метиламино) хлорида пиримидиний (ZD7288) (рис 4D), и Т-типа Са 2+ каналы с 100 мкМ Ni 2+ (рис 4E) были независимо друг от друга в состоянии уменьшить количество шипов, генерируемых(Р <0,05; CNQX N = 6; бикукуллин п = 7; ZD7288 N = 6; Ni 2+ N = 6). Применение (2R) -амино-5-phosphonopentanoate (AP5, 20 мкМ) не влияет на количество шипов (р = 0,22; N = 5; АР5 5,9 ± 3,1 шипы, контроль, 8.3 ± 2.2 шипов), предполагая, что рецепторы NMDA не участвует в γ поколения колебаний в данном препарате.

Этот препарат является идеальным для определения сети масштаба действие лекарств. Ретигабин является клинически используется анти-эпилептик лекарства, которые открывает калиевые каналы и снижает возбудимость мембраны 18-20. Ванна применение ретигабина производится снижение дозы зависит от числа шипов в и продолжительность колебаний (рисунок 5).

Фигура 1
Рисунок 1. Схема черепа и прилегающая кожа показывая расположение разрезов, чтобы повторно телятины мозг. А1, А2, В и С отмечают местоположения сокращений, которые должны быть сделаны, чтобы открыть череп для удаления мозга. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Рисунок 2
Рисунок 2. Размещение стимулирующих и регистрирующих электродов в СА1 Шаффер залогов здоровья тест среза. () Показывает размещение стимулирующего электрода (Stim) и регистрирующего электрода (Rec). (Б) типичный пример fEPSP вызвали на 120 мкА стимуляции (волокна залп отмечены *). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы смотреть больше Версия этой фигуры.

jove_content "FO: держать-together.within-страницу =" всегда "> Рисунок 3
Рисунок 3. Конфигурация записи и стимуляции электродов, используемых, чтобы вызвать колебания. () Местонахождение стимулирующего электрода (Stim) в роговом ORIENS и записи электрода (Rec) в роговом pyramidale в СА1. (Б) типичный пример в γ колебания, вызванные тетанической стимуляции (артефакт отмечен "Стим"). Представитель след показывая количественной оценке. ISI интервал между шип. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Рисунок 4
Рисунок 4. Фармакологическая характеристика tetanically Generованные γ колебания. (A) представитель след демонстрируя эффект CNQX. Графики, показывающие эффект (B) CNQX (20 мкм, N = 6), (С) бикукуллин (20 мкМ; п = 7), (D) ZD7288 (20 мкМ; N = 6) и (Е) Ni 2+ (100 мкМ; N = 6) по количеству шипов. Данные представлены в виде парных сравнений. * Р <0,05, ** р <0,01 и *** р <0,001. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Рисунок 5
Рисунок 5. ретигабина воздействие на свойства сети. Типичные примеры, показывающие снижение сетевую активность индуцированных колебаний (А) в контрольных условиях и (В) и <сильный> (С) ретигабина. Краткое изложение эффектов, показанных в (D) Количество шип, (Е) Продолжительность колебаний, (F), чтобы задержки начала колебаний, и (G) интервала между шип (ISI). Данные представлены в виде парных сравнений. * Р <0,05. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Надежный метод для генерации ca1 γ колебания в острых срезах мозга описано. Колебания, создаваемые возникают из местного цепи благоприятной лучшую возможность для контроля и понимания нейрофизиологических основ сетевых колебаний 12. АМРА-рецепторы, рецепторы ГАМК A, I ч и Т-типа Ca 2+ каналы все необходимое для γ колебаний в этой модели. В то время как локальные колебания CA1, описанные здесь, могут быть устойчиво генерируется это зависит от обеспечения того, чтобы срезах мозга здоровы. Важным шагом является быстрое удаление головного мозга из черепа, заботясь, чтобы не проникнуть в мозг во время удаления, а затем быстрым погружением в холодную льдом раствору. В идеале время между декапитации и удаления мозга из черепа должна быть не более 30 - 60 сек, чтобы сохранить здоровье ломтик 21.

При использовании тетаническое стимуляции местных γ колебания CA1 может бытьгенерируется в стандартных физиологических растворах записи без опоры на фармакологических агентов. Это выгодно для характеристики патологий моделей заболеваний, где добавление фармакологических агентов может путать интерпретации. Например, с помощью этой модели местного СА1 активность и чувствительность к анти-эпилептических препаратов был увеличен в модели мыши генетической эпилепсии человека 22. Применение этой модели для исследования сетевую активность не ограничивается эпилепсии и может быть легко применен к других заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера, аутизм и шизофрения. В то время как фармакологические средства не требуется для генерации локальных колебаний CA1 достаточно ткани оксигенации, в результате метаболического требованию мозга ломтик 23. Высокие темпы перфузии кислорода и улучшить баланс рН в пределах среза, создавая более физиологическое среду для срезах мозга 24,25.

Еще одним преимуществом использования тетаническое стимуляции Generatсетевые колебания е, что эпизодическая экспериментальная конструкция может быть использована, что дает возможность более готовый количественный сетевых параметров деятельности, таких, как задержки в начале, длительности и шип чисел, в повторяемым способом. В отличие от химически индуцированных сетевой активности спонтанно 13,15,16,26-28 и труднее поддаются количественной оценке. Тетанической стимуляции, однако, может вызвать изменения в NMDA рецептор-зависимой синаптической пластичности, которые могут вызвать изменения в сетевой активности с течением времени. Для управления для этого и включить стабильную генерацию колебаний в течение нескольких спутанностью стимуляции изменений пластичности может быть ограничено путем повышения уровня Mg 2+. Хотя этот протокол повышает воспроизводимость это непрозрачна для любого влияния функции рецептора NMDA.

Интерфейс камеры записи может улучшить здоровье ломтик, выход лучший сигнал-шум и более низкой фокальной стимуляции интенсивности с дополнительным преимуществом небольших артефактов стимуляции. Перфорированные ChambeМетоды г записи также улучшить здоровье ломтик для долгосрочных экспериментов. Использование микро массива электродов камеры записи или патч зажим позволяет широкое поле и одну функцию нейронов, измеряемый в ходе записи, чтобы лучше исследовать механизмы, лежащие в основе γ колебания и их влияние на широком функции сети. Включение датчиков напряжения и кальция, а также методы optogenetic бы ввести дополнительные экспериментальные гибкость в записи и стимулирующих парадигм. Похожие протоколы разработаны для других областей мозга, что может быть более уместным в патологии заболевания в исследовании. Конечное использование для протокола описания здесь может быть для построения и тестирования вычислительных моделей колебаний путем объединения полевые записи с одного нейрона патч зажим и обработки изображений исследований.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Авторы не имеют ничего раскрывать.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
4-(N-Ethyl-N-phenylamino)-1,2- dimethyl-6-(methylamino) pyrimidinium chloride (ZD7288) Sigma-Aldrich Z3777
Biuculline Sigma-Aldrich 14340
6-cyano-7-nitroquinoxa- line-2,3-dione (CNQX) Sigma-Aldrich C127
Nickel Sigma-Aldrich 266965
Carbamazepine Sigma-Aldrich C4024
(2R)-amino-5-phosphonopentano-ate (APV) Tocris Bioscience 0105
Retigabine ChemPacific 150812-12-7
Choline-Cl Sigma-Aldrich C1879-5KG
KCl Sigma-Aldrich P9333-500G
NaH2PO4 Sigma-Aldrich S9638-250G
NaHCO3 Sigma-Aldrich S6297-250G
NaCl Sigma-Aldrich S7653-5KG
Glucose Sigma-Aldrich G8270-1KG
CaCl2 • 2H2O Sigma-Aldrich 223506-500G
MgCl2 • 6H2O Sigma-Aldrich M2670-500G
Electrode glass Harvard Apparatus  GC150F-10
Concentric bipolar stimulating metal electrode  FHC CBBPF75
Digital Isolator Getting Instruments Model BJN8-9V1 
Model 1800 amplifier A-M systems Model 1800 amplifier
Digitizer National Intruments NI USB-6211
Vibrotome Leica VT1200s

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Buzsaki, G. Theta rhythm of navigation: link between path integration and landmark navigation, episodic and semantic memory. Hippocampus. 15 (7), 827-840 (2005).
  2. Vanderwolf, C. H. Hippocampal electrical activity and voluntary movement in the rat. Electroencephalogr. Clin. Neurophysiol. 26 (4), 407-418 (1969).
  3. Bartos, M., Vida, I., Jonas, P. Synaptic mechanisms of synchronized gamma oscillations in inhibitory interneuron networks. Nat. Rev. Neurosci. 8 (1), 45-56 (2007).
  4. Buzsáki, G., Wang, X. -J. Mechanisms of gamma oscillations. Annu. Rev. Neurosci. 35, 203-225 (2012).
  5. Kobayashi, K., et al. Cortical contribution to scalp EEG gamma rhythms associated with epileptic spasms. Brain Dev. 35 (8), 762-770 (2013).
  6. Andreou, C., et al. Increased Resting-State Gamma-Band Connectivity in First-Episode Schizophrenia. Schizophr Bull. , (2014).
  7. Alarcon, G., Binnie, C. D., Elwes, R. D., Polkey, C. E. Power spectrum and intracranial EEG patterns at seizure onset in partial epilepsy. Electroencephalogr. Clin. Neurophysiol. 94 (5), 326-337 (1995).
  8. Fisher, R. S., Webber, W. R., Lesser, R. P., Arroyo, S., Uematsu, S. High-frequency EEG activity at the start of seizures. J. Clin. Neurophysiol. 9 (3), 441-448 (1992).
  9. Kwan, P., Brodie, M. J. Early identification of refractory epilepsy. N. Engl. J. Med. 342 (5), 314-319 (2000).
  10. Traub, R. D., Kopell, N., Bibbig, A., Buhl, E. H., LeBeau, F. E., Whittington, M. A. Gap junctions between interneuron dendrites can enhance synchrony of gamma oscillations in distributed networks. J. Neurosci. 21 (23), 9478-9486 (2001).
  11. Traub, R. D., Whittington, M. A., Buhl, E. H., Jefferys, J. G., Faulkner, H. J. On the mechanism of the gamma --> beta frequency shift in neuronal oscillations induced in rat hippocampal slices by tetanic stimulation. J. Neurosci. 19 (3), 1088-1105 (1999).
  12. Whittington, M. A., Stanford, I. M., Colling, S. B., Jefferys, J. G., Traub, R. D. Spatiotemporal patterns of gamma frequency oscillations tetanically induced in the rat hippocampal slice. J. Physiol. 502 (3), 591-607 (1997).
  13. Avoli, M., Panuccio, G., Herrington, R., D’Antuono, M., de Guzman, P., Lévesque, M. Two different interictal spike patterns anticipate ictal activity in vitro. Neurobiol. Dis. 52, 168-176 (2013).
  14. Boido, D., Jesuthasan, N., de Curtis, M., Uva, L. Network Dynamics During the Progression of Seizure-Like Events in the Hippocampal-Parahippocampal Regions. Cereb Cortex. 24 (1), 162-173 (2014).
  15. Gloveli, T., Albrecht, D., Heinemann, U. Properties of low Mg2+ induced epileptiform activity in rat hippocampal and entorhinal cortex slices during adolescence. Brain Res. Dev. Brain Res. 87 (2), 145-152 (1995).
  16. McLeod, F., Ganley, R., Williams, L., Selfridge, J., Bird, A., Cobb, S. R. Reduced seizure threshold and altered network oscillatory properties in a mouse model of Rett syndrome. Neuroscience. 231, 195-205 (2013).
  17. Bracci, E., Vreugdenhil, M., Hack, S. P., Jefferys, J. G. On the synchronizing mechanisms of tetanically induced hippocampal oscillations. J. Neurosci. 19 (18), 8104-8113 (1999).
  18. Main, M. J., Cryan, J. E., Dupere, J. R., Cox, B., Clare, J. J., Burbidge, S. A. Modulation of KCNQ2/3 potassium channels by the novel anticonvulsant retigabine. Mol. Pharmacol. 58 (2), 253-262 (2000).
  19. Wickenden, A. D., Yu, W., Zou, A., Jegla, T., Wagoner, P. K. Retigabine, a novel anti-convulsant, enhances activation of KCNQ2/Q3 potassium channels. Mol. Pharmacol. 58 (3), 591-600 (2000).
  20. Otto, J. F., Kimball, M. M., Wilcox, K. S. Effects of the anticonvulsant retigabine on cultured cortical neurons: changes in electroresponsive properties and synaptic transmission. Mol. Pharmacol. 61 (4), 921-927 (2002).
  21. Pomper, J. K., Graulich, J., Kovacs, R., Hoffmann, U., Gabriel, S., Heinemann, U. High oxygen tension leads to acute cell death in organotypic hippocampal slice cultures. Brain Res. Dev. Brain Res. 126 (1), 109-116 (2001).
  22. Hatch, R. J., Reid, C. A., Petrou, S. Enhanced in vitro CA1 network activity in a sodium channel β1(C121W) subunit model of genetic epilepsy. Epilepsia. 55 (4), 601-608 (2014).
  23. Lord, L. -D., Expert, P., Huckins, J. F., Turkheimer, F. E. Cerebral energy metabolism and the brain/'s functional network architecture: an integrative review. J. Cereb. Blood Flow Metab. 33 (9), 1347-1354 (2013).
  24. Hájos, N., et al. Maintaining network activity in submerged hippocampal slices: importance of oxygen supply. Eur. J. Neurosci. 29 (2), 319-327 (2009).
  25. Hájos, N., Mody, I. Establishing a physiological environment for visualized in vitro brain slice recordings by increasing oxygen supply and modifying aCSF content. J. Neurosci. Methods. 183 (2), 107-113 (2009).
  26. Boido, D., Jesuthasan, N., de Curtis, M., Uva, L. Network Dynamics During the Progression of Seizure-Like Events in the Hippocampal-Parahippocampal Regions. Cereb Cortex. 24 (1), 163-173 (2012).
  27. Antuono, M., Köhling, R., Ricalzone, S., Gotman, J., Biagini, G., Avoli, M. Antiepileptic drugs abolish ictal but not interictal epileptiform discharges in vitro. Epilepsia. 51 (3), 423-431 (2010).
  28. Stenkamp, K., et al. Enhanced temporal stability of cholinergic hippocampal gamma oscillations following respiratory alkalosis in vitro. J. Neurophysiol. 85 (5), 2063-2069 (2001).

Tags

Неврология выпуск 102 Гамма колебания CA1 гиппокампа сетевую активность противоэпилептические лекарственные средства
Генерация местных СА1 γ колебаний тетанических стимуляции
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Hatch, R. J., Reid, C. A., Petrou,… More

Hatch, R. J., Reid, C. A., Petrou, S. Generation of Local CA1 γ Oscillations by Tetanic Stimulation. J. Vis. Exp. (102), e52877, doi:10.3791/52877 (2015).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter