이 기사는 생쥐를 이용한 위식도 역류의 수술 절차를 보여줍니다. 이러한 모델은 위식도 역류 질환 및 잠재적으로 배럿 식도 및 식도암 연구의 메커니즘 및 치료법에 유용한 도구입니다.
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이 논문에서
요약
초록
여러 가지 수술 절차가 동물에게 위식도 역류를 유도하는 것으로 보고되었습니다. 여기에서는 위 내용물, 십이지장 내용물 또는 혼합 내용물의 역류를 유도하기 위해 마우스를 사용한 세 가지 수술 모델을 보고합니다. 수술 절차와 일반 원칙은 상세히 설명되었습니다. 수술 경험이 있는 연구자라면 짧은 연습 기간 후에 이 기술을 잡을 수 있어야 합니다. 수술 후 대부분의 마우스는 생존할 수 있으며, 인간과 유사한 역류성 식도염이 발생할 수 있습니다. 그러나 마우스와 인간의 식도 사이에는 조직학적 차이가 있으며, 이는 이러한 수술 모델의 고유한 한계입니다. 배럿 식도 및 선암에 대한 연구에 사용하는 경우, 이러한 절차는 유전자 변형과 결합되어야 할 수도 있습니다.
서론
위식도 역류질환 (GERD)은 원위 식도의 위 또는 위십이지장 내용물에 장기간 노출되어 발생하는 만성 질환입니다1. 이러한 유해한 역류물에 장기간 노출되면 식도 상피 내의 고유 방어 기전이 손상되어 식도염2이 발생합니다. 바렛 식도는 만성 역류의 배경에서 발생하며, 식도 선암종의 위험이 증가한 전암 병변입니다3,4. 임상적으로 중요하지만, GERD, 바렛 식도 및 선암종의 메커니즘은 아직 잘 이해되지 않고 있습니다.
동물 모델은 인간 질병의 병인, 병리, 분자 메커니즘, 예방 및 치료에 대한 연구에 필수적입니다. 현재까지 다양한 GERD, 바렛 식도 및 선암종 동물 모델이 모델 동물을 사용하여 개발되었습니다5,6. 쥐 식도는 상피가 층상 편평 상피로 되어 있어 인간 식도와 조직학적으로 유사합니다. 쥐 식도는 각화와 점막하선의 부재 측면에서 인간 식도와 다르지만, 상대적으로 유지 비용이 낮고 정교한 유전자 변형이 가능하기 때문에 매력적인 모델 동물입니다. 쥐에서 GERD, 바렛 식도 및 선암종을 모델링하는 데는 두 가지 접근법이 일반적으로 사용됩니다: 역류 수술과 유전자 변형입니다. 역류 수술은 역류를 유도하는 가장 좋은 방법이고, 유전자 변형은 분자 변화를 모방합니....
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프로토콜
모든 동물 실험 기관 동물 케어 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다.
1. 마우스 준비
- 을 통해 마우스를 사용합니다 ~ 체중 20g 또는 수술 연령 6 ~ 위의 주.
- 수술 전, 쥐에게 실험 차우와 물 광고 무제한을 제공하고 12시 12분 시간의 명암주기를 유지한다.
- 머리 깎기와 수술 영역을 면도. 80 밀리그램 / kg 케타민, 12 밀리그램 / kg 자일 라진의 복강 내 주사하여 마우스를 마취. 이 용량은 몇 분 안에 잠에 마우스를두고 다음과 같은 외과 적 치료에 대한 충분한 마취를 제공합니다.
- 발바닥이 끼 때 각막 반사와 사지 수축의 부재에 따라 적절한 마취를 확인합니다. 건조를 방지하기 위해 눈에 안과 연고를 윤활 적용합니다.
- betadine 용액으로 피부를 소독.
2. 위 역류 모델 (그림 1B)
- 위 확인항문을 가리키는 검상 돌기에서 시작 ~ 2cm의 중간 선 절개.
- 중간 선을 통해 복강을 엽니 다. 가위와 노출을 향상시키기 위해 칼 모양을 제거합니다.
- 별도의 간 및 위장 사이의 결합 조직을 잘라. 결찰 및 주....
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결과
대부분의 마우스는 (> 95 %)이 수술을 견딜 수. 수술 전후 기간 동안 사망의 주요 원인은 마취제의 과다, 출혈 및 알 수없는 이유를들 수있다.
수술 후 4 주> 십이지장 역류과 위 역류 또는 혼합 역류> 80 % 마우스와 90 %의 마우스는 살아남을 수 있습니다. 이 기간 동안, 마우스는 주로 식도 협착과 먹을 수없는 사망. 이 마우스는 심한 스트레스 (구부리고 자세, 활동, 구토, 침몰 한 눈, 발성 등)의 흔적을 보여 안락사 될 필요가있다. 일반적으로 항생제 투여와 의료 죽어에서이 마우스를 저장할 수 없습니다. 마우스는 일반적으로 수술 후 그램의 부부 십이지장 역류와 특히 자신의 체중을 잃게됩니다. 그럼에도 불구하고 체중은 회복 이후에 증가한다.
마흔 주 수술 후, 십이지장 역류와 위 및 혼합 역류와> 70 % 마우스와> 80 % 마우스는 살아남을 수 있습니다. 지속이 기간.......
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토론
다양한 수술 모델은 설치류에서 위, 십이지장 및 혼합 역류을 모방하기 위해 설립되었다. 여기에 설명이 세 가지 절차는 수술 후 생존의 합리적인 가격과 장기적인 실험에 적합하다. 수술 경험이있는 연구원은 연습의 짧은 기간 후에 기술을 파악 할 수 있어야한다.
출혈은 수술, 간, 위, 및 혈관의 부주의 한 손상 사이의 결합 조직의 분리시 간 열상 전 마취제의 복강 내 주사에 기인 할 수있다. 이것은 가능한 한 피해야한다. 배터리 구동 미니 소작 적절한 경우 지혈하는데 사용될 수있다. 기관 및 조직이 조작 될 때 과도한 극력 피해야 연신. 핀셋의 끝은면으로 포장 될 수있다, 또는면 팁 핀셋을 대체하기 위해 젓가락처럼 사용할 수있다. 마우스 식도는 두 개의 층 또는 두 개의 & #이8220; 관 ", 외부 붉은"근육 관 "과 내부 희끄무레"상피 관 ". 절개는 식도에 이루어질 때, 양 층은 절개 할 필요가있다. 봉합은 균등하게 반대.......
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공개 사항
저자 중 한 명(XC)은 위식도 역류병과 관련된 기초 연구를 지원하는 Takeda Pharmaceutical Company Ltd로부터 자금을 받았습니다. 이 기사에서 사용된 시약이나 기기 중 이 회사에서 생산한 것은 없습니다.
감사의 글
우리는 중국 국가자연과학기금(NO. 81400590), 미국 국립보건원(U54 CA156735) 및 다케다 제약 주식회사(MA-NC-D-156)의 연구 보조금으로 지원을 받고 있습니다.
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재료
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| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
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| Micro Needle Holder 5.125" Curved Lock.6 mm | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Reflex 9 mm Wound Clip Applier | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| Reflex 9 mm Wound Clips Box Of 100 | Roboz Surgical Instrument Co. (Gaithersburg, MD) | ||
| PRONOVA Poly (hexafluoropropylene-VDF) Suture 8-0 | Ethicon US, LLC | ||
| Ringer's solution | Henry Schein, Inc. | ||
| ketamine | Henry Schein, Inc. | ||
| xylazine | Henry Schein, Inc. |
참고문헌
- Kandulski, A., Malfertheiner, P. Gastroesophageal reflux disease--from reflux episodes to mucosal inflammation. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 9 (1), 15-22 (2012).
- Orlando, R. C. The integrity of the esophageal m....
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