بروتوكول عزل فعال للاللمفاوية البائية والتائية من بلاطي اللوزتين الإنسان

Farzaneh Assadian; Karl Sandström; Göran Laurell; Catharina Svensson; Göran Akusjärvi; Tanel Punga

doi:10.3791/53374

يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

بروتوكول عزل فعال للاللمفاوية البائية والتائية من بلاطي اللوزتين الإنسان

15.7K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/53374

⸱

نوفمبر 16, 2015

Farzaneh Assadian¹ , Karl Sandström² , Göran Laurell² , Catharina Svensson¹ , Göran Akusjärvi¹ , Tanel Punga¹

¹Department of Medical Biochemistry and Microbiology, Uppsala Biomedical Center, Uppsala University, ²Department of Surgical Sciences, Otolaryngology and Head & Neck Surgery, Akademiska sjukhuset

في هذه المقالة

ملخص

تعتبر اللوزتين الحزنية < p class = 'jove_content'> مصدرا غنيا للخلايا الليمفاوية B و T. نقدم هنا بروتوكولا سهلا وفعالا وسريعا لعزل الخلايا الليمفاوية B و T من اللوزتين الحنكية البشرية. تم تكييف الطريقة الموصوفة خصيصا لدراسات المسببات الفيروسية لالتهاب اللوزتين المعروف باسم التهاب اللوزتين.

الملخص

تشكل اللوزتان

جزءا من جهاز المناعة مما يوفر خط الدفاع الأول ضد مسببات الأمراض المستنشقة. عادة ما يشير مصطلح "اللوزتين" إلى اللوزتين الحنكية الموجودة في الجدران الجانبية للجزء الفموي من البلعوم. توفر اللوزتين الحنكية التي تمت إزالتها جراحيا مصدرا مناسبا يمكن الوصول إليه للخلايا الليمفاوية B و T لدراسة التفاعل بين مسببات الأمراض الأجنبية والجهاز المناعي المضيف. يصف بروتوكول الفيديو هذا تشريح ومعالجة اللوزتين الحنكية البشرية التي تمت إزالتها جراحيا ، متبوعا بعزل مجموعات الخلايا البائية والتائية الفردية من نفس عينة الأنسجة. نقدم طريقة تفصل بكفاءة بين الخلايا الليمفاوية B و T اللوزتين باستخدام بروتوكول تقارب يعتمد على الأجسام المضادة. علاوة على ذلك ، نستخدم الطريقة لإثبات أن الفيروس الغدي البشري يصيب على وجه التحديد جزء الخلايا التائية للوزتين. ينطبق البروتوكول المعمول به بشكل عام على عزل مجموعات الخلايا التائية للوزتين بكفاءة وسرعة لدراسة دور أنواع مختلفة من مسببات الأمراض في الاستجابات المناعية للوزتين.

المقدمة

اللوزتين عبارة عن مجموعات من الأنسجة اللمفاوية غير المغلفة بشكل كامل والتي تقع تحت الظهارة في الجهاز الهضمي العلوي وتلامس معها. عادة ما يشير مصطلح "اللوزتين" إلى اللوزتين الحنكية الموجودة في الجدران الجانبية للجزء الفموي من البلعوم. تشكل اللوزتان الحنكيان المزدوجتان مع اللوزتين البلعومية الأنفية (اللحمية ) واللوزتين البوقيتين المزدوجة واللوزتين اللسانية ما يسمى ب "حلقة والديير". هذا الأخير مسؤول عن الاتصال الأولي بين مسببات الأمراض المستنشقة أو المبتلعة والأنسجة اللمفاوية في الجهاز الهضمي^{الهوائي 1،2}. في الواقع ، أظهرت العديد من التقارير أنه يمكن اكتشاف كل من المستضدات البكتيرية والفيروسية في عينات أنسجة اللوزتين الحنكية^2-6.