망막 색소 상피(RPE)는 리포푸신으로 축적된 시각 주기 부산물을 재생하여 감각 망막을 지원합니다. 이러한 제품은 자가 형광성이며 in vivo에서 정성적으로 이미지화할 수 있습니다. 여기에서는 컨포칼 스캐닝 레이저 검안경을 사용하여 RPE 리포푸신을 정량적으로 이미지화하는 방법을 설명합니다.
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이 논문에서
요약
초록
망막 색소 상피(retinal pigment epithelium, RPE)는 위에 있는 감각 망막과 나란히 배치되어 있으며 시각 시스템의 기능을 지원합니다. RPE가 수행하는 작업 중에는 식세포작용(phagocytosis)과 리소좀 유래 소기관을 통한 외부 광수용체 분절 처리가 있습니다. 저장되어 리포푸신 과립이라고 하는 이러한 분해 산물은 부분적으로 비스레티노이드로 구성되어 있으며, 이는 컨포칼 스캐닝 레이저 검안경(cSLO)을 통해 안저 자가형광으로 임상적으로 검출될 수 있는 광범위한 형광 흡수 및 방출 스펙트럼을 가지고 있습니다. 리포푸신 축적은 노화 증가와 관련이 있지만 망막의 후천성 및 유전성 퇴행성 질환 모두에서 다양한 패턴으로 발견됩니다. 따라서 망막의 축적 패턴을 연구하고 이러한 패턴을 위에 있는 감각 망막의 변화와 연관시키는 것은 망막 질환의 병태생리와 진행을 이해하는 데 필수적입니다. 여기에서는 건강한 눈과 병든 눈 모두에서 RPE 리포푸신 수치를 정량화하기 위해 cSLO를 사용하는 우리 연구실과 다른 연구실에서 사용하는 기술에 대해 설명합니다.
서론
망막 색소 상피 (RPE)는 다수의 공정 1 내지 감각 망막의 기능을 지원한다. 연령 관련 황반 변성 (AMD)은 선진국에서의 치료가 실명의 가장 중요한 원인이며, 안료의 손실 함수 위축의 손실을 포함 RPE의 변화에 의해 특징된다. AMD와 정상적인 노화에있어서, RPE는 리포 푸신 입자라고 포식 감광체 단편을 함유 형광 리소좀 유래 세포 소기관을 축적한다. RPE에 리포 푸신의 축적은 산화 적 장애를 표시 한 것으로 생각 하였지만, 최근의 연구는 RPE 형태 높은 리포 푸신 농도 2 세 눈 정상적인 유지 보여준다. AMD 및 AMD의 진행을위한 그러나, 리포 푸신 분포의 비정상적인 패턴, 리포 푸신의 특정 손실, 문서화 마커, 조직 학적 및 임상 3,4 모두
결함이 사전 처리RPE의 리포 푸신의 노래는 특정 상속 망막 변성에서 발생하는 것으로 나타났다. 스타 르가 르트 병 (STGD)을 앓고있는 환자는 결국 AMD 5에서 보이는 것과 유사한 시력 상실을 개발하고, 젊은 나이에 RPE에 리포 푸신 축적. 이러한 연구 결과는 리포 푸신 축적 자체가 독성 및 RPE 장애 6, 7을 구동 할 수 있다고 ....
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프로토콜
윤리 정책 :이 연구에 등록 된 모든 환자가 의학의 뉴욕 대학에서 승인 된 기관 검토위원회의 감독에 따라 그렇게했다.
1. 환자 선택 및 이미지를위한 초기 준비
참고 : 다음과 같은 자료가 필요 : 0.5 % tropicamide 안과 솔루션, 2.5 %의 페닐에 안과 솔루션, cSLO는 스펙트럼 영역 빛 간섭 단층 촬영 (SD-OCT) 및 내부 형광 참조 갖추고 있습니다.
- 촬영에 앞서, 적절 제조업체의 지침에 따라 데이터 수집에 대한 cSLO을 설정합니다.
- cSLO의 내부 형광 참조를 탑재합니다. 참고 : 제조 업체에서 구입 한 바와 같이 내부 형광 참조, 금속 링에 보관하고, 카메라 렌즈 바로 뒤에 배치됩니다. 다른 제조사 cSLO 사용하는 경우에서 설명되는 것과 다른 구성이있을 수있다이 프로토콜.
- 상기 cSLO에 참조를 삽입 제거하는 렌즈를 트위스트하기 위해 기계의 금속 링의 나사 및 참조를 포함하는 새로운 금속 링으로 대체.
참고 : 레이저 파워 검출기 감도 / 이득의 변동에 대한 보정을 허용하는 내부 형광 참조하면, QAF 기술에 중요하다.
- 상기 cSLO에 참조를 삽입 제거하는 렌즈를 트위스트하기 위해 기계의 금속 링의 나사 및 참조를 포함하는 새로운 금속 링으로 대체.
- 이미징 모집 환자가 일상적인 동공 확대....
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결과
이 기술은 모두 13 건강 상태 및 질병 10-12 QAF을 연구하기 위해 사용되었다. 건강한 눈 (그림 1)에서 RPE에서 방출 AF는 안저 (그림 1A)에 걸쳐 비교적 균일하게 분포되어있다. 감소 강도로 인해 황반 색소에 의해 빛의 차단에 중심 황반 지역에서 볼, 그리고 측면과 이미지의 모서리 인해 눈과 카메라의 광학에있다. 선박은 어두워 잘 획득 된 영상에서 선명한 초점이되어야한다.도 1b는도 1a에서 QAF 수준의 해당 열 맵 표현을 보여줍니다. 따뜻한 색상이 더 높은 강도의 영역에 해당하는 동안 쿨러 색상은 낮은 강도의 영역에 해당합니다. 최대 강도는 일반적으로 (도 1b에 나타낸) 제 8 획 동심 링에서 볼 수있다. 이 지역은 또한 영상 관.......
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토론
이상 RPE에 리포 푸신 분포가 증가 또는 감소 여부, 망막 질환의 민감한 마커이고, 일반적으로 관능 망막 기능의 상실과 관련된다. 여기, 우리는 망막 색소 상피 리포 푸신의 평가를 위해 QAF의 응용 프로그램을 설명합니다. 내부 형광 기준의 설립은 우리의 표준화 된 이미징 기술과 함께 가변 레이저 파워 검출기 감도 9 수정하기는 AF 수준의 신뢰성있는 정량 수 있습니다. 그것은이 방법은 약물이나 유전자 치료 등의 치료 개입의 효능을 평가 결국 진단 및 망막 질환의 모니터링에 도움, 것 우리의 목표입니다. QAF도 위험에 처한 이러한 AMD와 같은 조건에 대한 개인의 층화에 도움이된다.
우리는 망막 병리 (13)의 해석을위한 참조 도구로서 사용될 QAF 데이터의 큰 정상치를 생성했으며, 또한 몇몇 질병 STA에 QAF 설명 하였다스타 르가 르트 병 (10), 황소의 눈의 황반 병증 (12) 베스트 .......
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공개 사항
STA: 공개 없음, JPG: 공개 없음, RTS: 컨설턴트, Ocata Therapeutics.
감사의 글
우리는 우리의 협력자, 프랑소와 Delori, 토마스 버크, 그리고 토비아스 Duncker에게 감사의 말씀을 전합니다.
연구 지원 : NIH / NEI R01 EY015520 (RTS, JPG), 연구에서 무제한 자금은 실명 (RTB)을 방지한다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Spectralis HRA + OCT | 하이델베르크 엔지니어링 | ||
| 0.5% 트로피카미드 점안액 | 모든 브랜드 사용 가능 | ||
| 2.5% 페닐에프린 점안액 | 모든 브랜드 사용 가능 | ||
| 내부 형광등 참조 | Heidelberg Engineering | ||
| IGOR Pro 소프트웨어 | WaveMetrics |
참고문헌
- Strauss, O. The retinal pigment epithelium in visual function. Physiological reviews. 85, 845-881 (2005).
- Ach, T., et al. Quantitative autofluorescence and cell density maps of the human retinal pigment epithelium. In....
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재인쇄 및 허가
