Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Bilinçli Kemirgenler Böbrek Fonksiyon Transkutanöz Değerlendirmesi

Published: March 26, 2016 doi: 10.3791/53767

Introduction

Glomerüler filtrasyon hızı (GFH), genel böbrek fonksiyonunu değerlendirmek için en iyi parametredir. GFR belirlemek için altın standart inulin 1 olarak eksojen böbrek belirteçlerin, idrar veya plazma klerensi dayanır. Ancak, bu işlemler zaman alıcı ve karmaşık, onun analiz için seri kan ve / veya idrar örnekleri ve posterior laboratuvar deneyleri koleksiyonu gerektiren bulunmaktadır. Buna ek olarak, bu yöntemler, ölçüm tekrar edilebildiği zaman ve frekans sayısının sınırlandırılması, hayvanlar için invazif ve streslidir. , Alternatif yaklaşımların bir dizi GFR belirlemek için klasik prosedürler basitleştirmek için geliştirilmiştir, ama yine de idrar ve plazma örnekleme 2-4 güvenmek ve / veya böbrek hemodinami ve fonksiyonu 7 etkilediği bilinen derin anestezi 5,6 gerektirir 8. kreatinin gibi metabolizmanın son ürünleri, aynı zamanda yaygın böbrek fonksiyonunu tahmin etmek için kullanılır. Bununla birlikte, Accur bilinmektedirBu endojen belirteçlerin ACY dahası, bunları analiz etmek, idrar ya da kan örneklemesi de vazgeçilmezdir, optimal değildir ve.

Burada bilinçli hayvanlarda böbrek fonksiyonlarını değerlendirmek için bir transkutanöz metodoloji tarif eder. Bu yöntem, geleneksel yöntemlerle ve sadece minimal invaziv daha basit ve daha hızlıdır. minyatür bir optik cihaz ve dış böbrek markör floresein izotiosiyanat (FITC) -sinistrin kullanarak bu teknik, ile, plazma veya idrar numunesi ve test malzemesi tatbikinden cerrahi kateterizasyon olmayan bir gerek kalmadan hemen hemen gerçek zamanlı olarak böbrek fonksiyonunu belirlemek mümkündür. Bu özelliklerinden dolayı, yöntem aynı hayvanda sıralı ölçümleri gerçekleştirmek için uygundur.

FITC sinistrin hiçbir tübüler reabsorbsiyonu veya sekresyon ile glomerülden serbestçe göre filtrelenmiş bir böbrek işaretleyici vardır. minyatür cihazın optik kısmı iki ışık yayan diyotlar heyecanlandırmak (LED) oluşuruygulanan işaretleyici ve bir fotodiyot deri yoluyla yayılan floresan algılamak için. Kaydedilen veri cihazı entegre iç belleğinde saklanır ve FITC sinistrin eliminasyon kinetik eğrilerini oluşturmak için de kullanılabilir. Güç, küçük bir şarj edilebilir lityum pil ile beslenir. Cihaz ve bireysel bileşenleri hakkında daha fazla ayrıntılı bilgi için Schreiber ve ark., 9 bakın. Cihaz kolayca optik bileşenler için şeffaf bir pencere taşıyan bir çift taraflı yapışkan bir yama kullanılarak hayvan gövdesinin üzerine monte edilir. Sonuçlar kayıt dönemi sona erdikten sonra kolayca kullanılabilir.

yöntem ve burada sağlanan protokol ile, mevcut altın standart araştırma değil, aynı zamanda klinik alanda değil, sadece GFR belirlemek için yerini alabilecek bir gelecek vaat eden teknolojiyi tanıtmak.

Protocol

protokolü geliştirmek için gerekli deneyler ulusal kurallara uygun yapılmış ve yerel etik bilim komitesi (Regierungspräsidium Karlsruhe) tarafından onaylanmıştır.

FITC sinistrin enjeksiyon solüsyonu hazırlanması 1.

  1. Bir stok çözeltisi hazırlamak üzere fizyolojik tuzlu su içinde FITC sinistrin çözülür. sıçanlarda 5 mg / 100 g BW FITC sinistrin tercih ise farelerde önerilen doz, 7.5 mg / 100 g vücut ağırlığı (BW) 'dir. fareler için 40 mg / ml arasında bir konsantrasyonda hazırlarken fareler için, 15 mg / ml FITC sinistrin stok çözeltisi ihtiva eden bir çözelti hazırlayın.
    Not: FITC sinistrin stok çözeltisi önceden hazırlanan ve ışıktan korunan -20 ° C'de saklanabilir.

2. Hayvan hazırlanması

  1. Herhangi bir deneyde kendi giriş önce en az bir hafta süreyle hayvan alıştırıldı.
  2. 5 L / dk O 2% 5 izofluran kullanılarak hayvan anestezisi
  3. Hayvan düzgün yavaş ve derin olur onun nefes, gözlemleyerek anestezi olduğundan emin olun ve bir parmak yanıt eksikliği ile yanıtsızlık doğrulayın.
  4. Hayvan uykuda sonra, 2 L / dk O 2 doğum hızında% 2.5 izofluran anestezi azaltmak ve BW alır.
  5. Bir elektrikli tıraş makinesi kullanarak hayvanın arka kanadını kürk çıkarın. 3 cm x 6 cm boyutları vardır çift taraflı yapışkan yama, tarafından işgal edilecek alanın biraz daha büyük bir alanı tıraş.
  6. Daha sonra kalan kürk çıkarmak için kısa bir süre (2-3 dk) için epilasyon kremi uygulayın.
  7. krem tamamen kaldırılmıştır kadar krem ​​kendisi floresan olabileceğinden, iyice yıkayın.
    Not: tahriş / ödem üretebilir olarak hayvanın deri çizilmesini kaçının. depilated alan cilt üzerinde pigmentasyon gösterilirse, olmayan bir pigmentli nokta kadar büyük bir alanı tıraşCihazın optik kısmı bulunur. Anestezi maruziyeti en aza indirmek için önceden 24 saat tıraş tavsiye edilir.

3. Aygıt Hazırlık

  1. Koruyucu folyo ile ters kısmını bırakarak şeffaf pencereden (Şekil 1) Yukarıdaki optik kısmını konumlandırılması, çift taraflı yapışkan yama bir yüzüne böbrek fonksiyonlarını ölçmek için optik sürücüyü yerleştirin.
    Not: küçük kemirgenlerde çalışırken, Şekil 2'de gösterildiği gibi, yamanın boyutunu azaltır.
  2. Şekil 3'te gösterildiği gibi, pil uygun büyüklükte çift taraflı yapışkan bir bandın parça eklemek.

Animal cihazda 4. Sabitleme

  1. hayvanın vücut ağırlığına göre enjeksiyon uygun hacimde hesaplayın.
  2. Daha önce bölümlerde 2.1-2.3 gösterildiği gibi izofluran ile hayvan anestezisi.
  3. boru şeklinde elastik bandaj gazlı bez o bir parça kesinf, çift taraflı yapışkan bir yama genişliğinden daha uzun yaklaşık 1 cm kullanılır.
  4. ortaya traş bölgeyi terk, sırtında hayvan ve yerin başının üzerinde elastik bandaj gazlı bez çekin.
    Alternatif sadece yapışkan bant kullanarak cihazı düzeltmek, ancak cihazda aşırı basınç farkında olmak Not:.
  5. cihazdaki ilgili bağlantı noktasına pil konektörü takarak cihaza aküyü bağlayın. Bundan sonra yama parçasının koruyucu folyoyu çıkarın ve cihaz (Şekil 4A) üst yüzeyinde bir pil monte edin. Pilin düzgün şekilde cihazın yanıp sönmeye başlar olduğunu kontrol ederek takılı olduğundan emin olun.
    Not: Sıçanlarda, batarya da diğer cihazı (Şekil 4B), yapışkan yama doğrudan bağlı olabilir.
  6. işletme cihazı ile yamadan koruyucu kapağı çıkarın ve tutarak hayvanın sırtında traş alan üzerine yerleştirindoğru tespit edilinceye kadar s kenarları.
  7. Yamanın yapışkan yüzeye yapışan boru şeklindeki elastik bandaj gazlı bez (Şekil 5) cihazı örtün.
  8. Düzgün uzuvlar serbestçe hareket sağlayarak, hayvanın karın boru şeklindeki bandaj germek.
  9. Daha iyi bir tespitin ve cihazın korunması için, cihazın şeklini takip ve pilin telleri kapsayan yapışkan bant bir şerit uygulanır.
  10. cihazın üzerinde baskı olmadan 1 dakika, 3 için arka plan ölçmek

5. FITC sinistrin Yönetim ve Ölçülmesi Prosedürü

  1. Gerekirse, enjeksiyon veya tüm prosedür boyunca bir sıcaklık kontrollü ısıtıcı plaka önce ılık su ile hayvanın kuyruk ısıtın.
  2. FITC sinistrin stok çözeltisinin uygun bir hacmi, kuyruk damarından aracılığıyla enjekte edilir. Enjeksiyon hacmi, hayvan BW bağlıdır ve bu nedenle, her bir cons için hesaplanmalıdırBölüm 1.1 geçen, arzu edilen doza ve ihtiyat çözeltisinin yoğunluğu, idering.
  3. Tüm FITC sinistrin çözüm intravenöz ve subkutan uygulanır emin olun.
    Not: Alternatif olarak, FITC sinistrin kemirgenlerde veya fareler retro orbital enjeksiyon yoluyla enseden çıkıldı önceden implante bir kateter kullanılarak tatbik edilebilir.
  4. hareketin eserleri tanıtmak gibi özenle, güçlü hareketleri ve cihaz üzerinde herhangi bir baskı kaçınarak kendi ev kafesine hayvan dönün.
  5. Hayvan rahatsız olduğunu önlemek için sakin bir yerde ev kafes yerleştirin.
  6. Farelerde ve 2 saat sıçanlar üzerinde çalışan en az 1 saat boyunca ölçün. Bu dönemde, optik cihaz deri yoluyla FITC sinistrin tarafından yayılan floresan ölçecek.
    Not: Kayıt döneminde hayvan başına barındırılması gerekir. Ayrıca su temini yanı sıra çıkıntılıBöyle tel kapağı gibi yapılar nedeniyle nesnelerle darbelere karşı elektronik cihaz ve hareket eserler zedelememek için çıkarılması gerekir.

6. Aygıt Kaldırmayı

  1. kayıt dönemi sona erdiğinde, anestezi olmadan aygıtı kaldırmak; Bununla birlikte gerekirse, 2 dakika boyunca 5 L / dakika O 2 sevk oranında% 5 izofluran altında kısa bir süre için hayvan anestetize.
  2. Dikkatle, daha sonra boru şeklindeki bandaj, ilk yapışkan bant çekin.
  3. Yavaşça deriden çift taraflı yapışkan yama ayırmak ve normal ev kafesine hayvan dönün.

Veri dışarı 7. Oku

  1. bataryayı cihazdan ayırın ve yapışkan düzeltme ekini kaldırmak.
    Not: Yeni bir ölçüm başlayıncaya kadar veri cihazda saklanır. Pil takıldığında depolanan veriler yeni kayıtlar ile yazılır. Bu nedenle, veri indirmeden önce bataryayı yeniden yokcihazı. Pilin yanlışlıkla reconnections yönelik bir 10 sn ödemesiz vardır.
  2. Bir mikro USB kablosu kullanarak bir PC'ye bağlayın ve verilen yazılımı kullanarak veri indirmek. çıktı dosyası açıldı ve bir elektronik tablo programı ile modifiye edilebilir bir .csv dosyası.
  3. optik aygıt için özel bir yazılım ile veri dosyasını açın ve yazılım protokollerini kullanarak eliminasyon kinetiği eğrisi oluşturmak.
  4. optik cihazla birlikte verilen yönergeleri izleyerek eğri analiz edin. Kısaca, verilerin değerlendirilmesi için, sırasıyla fareler ve sıçanlarda, arka plan sinyali önce FITC sinistrin yönetimini ölçülmüş ve genellikle 15 dakika ve bolus enjeksiyondan sonra 45 dk meydana işaretleyici, üstel atılımı fazının başlangıcını işaretlemek set .
    Not: Yazılım otomatik olarak 1-karş tarafından belirlenen bir R2 değeri ile birlikte FITC sinistrin yarı ömrünü (t 1/2), gösterecektirtment modeli. t 1/2, bir dönüşüm faktörü 9,10 ile GFR hesaplamak için kullanılabilir.

Representative Results

Deri ölçüm kurulumu çok kolay ve hızlı: Cihaz pil hazırlanır, çift taraflı yapışkan yama (Şekil 1) yerleştirilir ve (Şekil 2) gerekirse boyutu ayarlanır (Şekil 3) ve bağlı (Şekil 4).

Böbrek fonksiyonlarını değerlendirmek için bu yöntem zaten plazma klirensi 9,11,12 geleneksel yaklaşımla karşılaştırıldığında farklı türlerde onaylanmıştır. Burada ortaya protokol izlenerek, Schreiber ve arkadaşları. tüm gruplar için deri ölçüm ve plazma klirensi arasında son derece benzer sonuçlar gösteren farklı fare modellerinde tekniğinin geçerliliğini göstermiştir (Tablo 1) 9 okudu. Bu çalışmada elde edilen t 1/2 fare belirli yarı ampirik dönüşüm kullanılarak GFR dönüştürüldüfaktör.

böbrek fonksiyonlarının deri değerlendirme tutarlılığı farelerin farklı suşları kullanılarak kanıtlanmıştır. Aynı hayvanda 3 gün içinde Sıralı ölçümler 3,0-6,2% 13 sapmaların katsayısı gösterdi. Bu çalışmada orada GFR hiçbir dönüşüm oldu ama sonuç ifade ve t 1/2 açısından doğrudan yorumlanmıştır.

neredeyse gerçek zamanlı olarak sonuçlar imkanı bu yöntemin en büyük avantajlarından biridir. Kayıt döneminden sonra, sonuçlar analiz için hemen kullanılabilir ve verilen yazılım FITC sinistrin atılımı eğrisini anında (Şekil 6) görüntüler. Şirketinden GFR bakımından dönüştürülmüş, böbrek fonksiyonunu değerlendirmek için parametre olarak kullanılabilir FITC sinistrin t 1/2 elde edilebilir, aynı yazılım içinde. Şekil 7 1/2 artar etkilenir zaman. Tipik olarak, ölçülen eğri arka arka plan seviyesine gelmek ve eğri altında kalan bir artış alanı sunuyor değildir. Aynı hayvanda, post-yaralanma öncesi gelen ölçümler nedeniyle azalmış atılımı nedeniyle marker birikimi maksimum floresan yoğunluğunda bir artış yaşayabilirsiniz. Böbrek yetmezliği varlığında, FITC sinistrin ve transkütan ölçülen eğri nedeniyle ileri derecede bozulmuş fonksiyonun (Şekil 7B) bir kararlı durum gösterebilir.

Farklı sağlık durumu ile kemirgenler birçok suşları minyatür cihazın kullanımı bu tekniğin d uygun ve değişiklikleri saptamak kadar hassas olduğunu göstermiştirue böbrek hastalığı ve yaşlanmaya. Tablo 2 bu yöntemle bugüne kadar incelenen fare modelleri bir özetini gösterir.

Şekil 1
Çift taraflı yapışkan yama cihazın Şekil 1. Yerleştirme. Cihaz yapışkanlı yama konumlandırma şeffaf pencere optik kısmını monte edilir.

şekil 2
Şekil 2. Küçük ebatlı kemirgenler için yapışkan yama uyarlama. Küçük hayvanlarda kullanım için yama boyutunu azaltmak için tavsiye edilir. A: Düzgün yama kesmek için bir rehber olarak aygıtı kullanın. B: İstenen boyut elde edildikten sonra, cihaz yama yapışkan yüzeyinde yerleştirilebilir. Pkira, bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayın.

Şekil 3,
Pilin Şekil 3. hazırlanması. Cihaza pili takmak için, çift taraflı yapışkan yama (A ve B) küçük bir parça kesip pil (C) yüzey üzerine yerleştirin. Bir görmek için buraya tıklayınız Bu rakamın daha büyük bir versiyonu.

Şekil 4,
Ölçüm sırasında pilin Şekil 4. Bağlantı ve yerleştirme. (A) azalan boşluk, fare gibi küçük kemirgenler, batarya cihazın üst kısmında yerleştirilmelidir. Pil C daha büyük hayvanlar için (B)Bir sonraki cihaza yerleştirilir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 5,
Bir sıçan boru şeklinde elastik bandaj gazlı bez Şekil 5. Yerleştirme. Tübüler bandaj hayvan konforu için bacaklarda serbest dolaşımı ile müdahale etmeden çift taraflı yapışkan yama kapsamalıdır. Büyük halini görmek için tıklayınız bu figür.

Şekil 6,
FITC sinistrin bir eliminasyon eğrisi Şekil 6. Örnek görüntüsü. FITC sinistrin tarafından üretilen sinyal transcu saptanırspontan olarak ve cihazın dahili bellekte depolanır. Kaydedilen veriler bir PC'ye indirilen, yazılım görüntüdeki sunulan birine karşılaştırılabilir bir eğri oluşturur. X ekseni zaman [dk] ölçüm süresini temsil ederken Y ekseni, enjekte FITC sinistrin işaretleyici tarafından yayılan kaydedilen floresan [AU] gösterir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 7,
Böbrek fonksiyon bozukluğu olan hayvanlarda FITC sinistrin bir eliminasyon eğrisi Şekil 7. Temsilcisi görüntü. (A) azaltılmış böbrek fonksiyonu hayvanlarda FITC sinistrin eliminasyon eğrisi genellikle içinde taban çizgisini ulaşmak için eğri ve yetersizlik altında bir artış alanı gösterir Normal ölçüm periyodu . Transkütan ölçülen eğri böbrek yetmezliği gösteren sabit bir durum gösterebilir ağır engelli hayvanlarda (B). Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

tablo 1
Geleneksel plazma klerensi karşılaştırarak deri ölçüm Tablo 1. Doğrulama. Böbrek fonksiyonlarının deri ölçümü farklı fare modellerinde onaylanmıştır (sağlıklı ve tek taraflı (UNX) C57BL / 6-129 SV fareler ve hematopoietik fare modeli (nefrektomi plazma temizlenmesinde kıyasla PCY)). Değerler ± SD araçlardır. GFH, glomerüler filtrasyon hızı 9.

/53767/53767table2.jpg "/>
Tablo 2. Fare modelleri deri ölçümü kullanılarak çalışıldı UNX, tek taraflı olarak böbrekleri.; ACE, anjiotensin dönüştürücü enzim; T gumodwt / ağırlık, transgenik uromodulin nakavt, SD, Sprague Dawley sıçan; PKD, polikistik böbrek hastalığı.

Discussion

Bu yazıda bir minyatür cihaz ve eksojen böbrek işaretleyici FITC sinistrin kullanarak bilinçli kemirgenlerde böbrek fonksiyonunu belirlemek için yordam açıklanır. Daha önce belirtildiği gibi, bu yöntem, üriner ve plazma klirensi, geleneksel prosedürler ile karşılaştırıldığında pek çok avantaja sahiptir. Bunlardan biri, hayvan stres sarf malzemeleri, zaman açısından büyük tasarruf sağlar ve tabii ki kan ve idrar örnekleme bağımsızlığıdır.

Tablo 2'de de gösterildiği gibi, dış kaynaklı böbrek markör FITC sinistrin deri yoluyla emilim kinetikleri ölçümü böbrek fonksiyonu ile ilgili renal patolojilerin etkisi 9,10,14-18 incelenecek sağlar. plazma temizlenmesi ya da böbrek hastalığının biyolojik değerlendirme için gerekli olan, kan örneklerinin seri toplanması, hayvan için stresli bir sıkıcı ve zaman alıcı bir araştırmacı içindir. Bu nedenle, aynı hayvan içinde ardışık ölçümler lim olmuşturhayvanlar ve metodolojik nedenlerle refahı ile sergilenemez. Deri ölçüm 13 kanıtladı içi hayvan tekrarlanabilirlik o nedeniyle hastalığın ilerlemesi veya yaşlanma böbrek fonksiyon değişiklikleri tespit etmek için ideal bir yöntem yapar. Aynı sebepten dolayı, aynı zamanda terapötik yaklaşımların etkinliğini incelemek için, son derece yararlı olabilir.

Bu teknolojinin bir başarılı bir uygulama için iki kritik adım hayvan optik cihaz ve işaretleyici doğru uygulama fiksasyonu. Cihaz uygun hareket eserler önlemek için sabitlenmelidir. hayvanın üzerine yapışma özellikleri kaybı ve sonuç olarak uygun olmayan bir tespit yol gibi bu amaç için, çift taraflı yapışkan yamanın takılıp çıkarılabilmesi önlenmesi önemlidir. yapışkan bantla kaplayarak protokol, immobilizasyon ve optik cihaz koruma belirtildiği gibi bir ADEQUAT sağlamak için etkili bir yaklaşımdıre sabitleme. FITC sinistrin bolus enjeksiyon yaparken o intravenöz ve subkutan tüm maddeyi yönetmek için çok önemlidir. subkutan dokuda işaretleyicinin bırakılması kolayca FITC sinistrin kendi renk ile üretilen bir hayvanın kuyruk çizerek san bir halka ile tespit edilebilir. Bir deri altına enjeksiyon, genellikle düz bir eğri ve uzun süreli işaretleyici atılımı süresi olarak tezahür eder. Bu yöntemin olası sınırlama teknolojisi başına kıyasla kullanılan işaretleyici daha fazla ilgilidir. Bir ödem bir hayvanın derisinde mevcut olduğunda FITC sinistrin atılımı dinamiklerini değiştirebilir ek bölmesi var gibi, böbrek fonksiyonlarının deri değerlendirme, tavsiye edilmez. Benzer şekilde, pigmente deri nedeniyle FITC sinistrin ve melanin örtüşen uyarma ve emisyon spektrumları tekniğin kullanımını kısıtlayabilir. Ancak, yer yer deri pigmentasyonu ile hayvanlarda, sorun optik koyarak çözüldüBir pigmentsiz alanda cihazın bir parçası.

Farklı hayvan türleri ve / veya yaklaşımlara prosedürü uyarlamak için böbrek fonksiyonlarının deri değerlendirmesinin farklı yönlerini değiştirmek mümkündür. Örneğin, önerilen FITC sinistrin dozu veya ölçüm uzunluğu deney hem de farklı türden ya da hayvan modelleri için hedefe bağlı olarak ayarlanabilir. Yöntemin Bu uyum zaten kemirgenler ve çeşitli sağlık sorunları olan suşların çeşitli türleri farklı türlerde başarılı uygulama tarafından teyit edilmiştir. Buna ek olarak, böbrek fonksiyonlarının deri değerlendirilmesi son zamanlarda köpek ve mükemmel sonuçlar kedilerde 12 onaylanmıştır. Bu hayvanlar ve kemirgenler arasında şüphesiz farklılıklar nedeniyle, bu çalışma, köpekler ve kediler hem FITC sinistrin uygun dozu tespit ve 4 saat yerine 1 ya da 2 saat kullanımı çok daha uzun bir ölçüm süresi uygulandıkemirgenlerde, d.

Birlikte ele alındığında, bize yardım edebilir, bu tekniğin kullanılması böbrek hastalığı ilerlemesi daha iyi anlaşılması ve tedavilerin etkisi de dahil olmak üzere, nefroloji daha doğru bilgiler elde etmek. böbrek fonksiyonlarının deri değerlendirmeye özellikleri ileride insan ve veteriner klinik alanlarda uygulanmak üzere uygun bir teknik olarak yerleştirir, ve geleneksel yaklaşımlar yerine gelecek vaat eden bir teknoloji olarak kabul edilmelidir.

Disclosures

NG FITC sinistrin üretimi patent sahibidir.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
NIC-Kidney device Mannheim Pharma & Diagnostics GmbH Software, batteries and chargers are provided together with the device/s. Orderings should be done through info@mapdiagnostics.com
FITC-sinistrin Mannheim Pharma & Diagnostics GmbH Orderings should be done through info@mapdiagnostics.com
Double-sided adhesive patch Mannheim Pharma & Diagnostics GmbH Orderings should be done through info@mapdiagnostics.com
Isis Rodent electric shaver Braun Aesculap  GT420
Isoflurane Abbott GmbH  PZN4831850
Leukosilk adhesive tape BSN medical 102200
Tubular elastic gauze bandage  MaiMed Medical GmbH 73012 There are different sizes available. Size 1 is recommended for mice.
Veet depilation cream Reckitt Benckiser PZN7768307 Sensitive skin formulation is recommended as is more gentle with the skin of the animals
Micro USB cable Samsung APCBU10BBE
Deltajonin Physiologic solution AlleMan Pharma GmbH 3366954 Alternatively, it can be used saline or PBS 

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Stevens, L. A., Levey, A. S. Measured GFR as a confirmatory test for estimated GFR. J Am Soc Nephrol. 20, 2305-2313 (2009).
  2. Katayama, R., et al. Calculation of glomerular filtration rate in conscious rats by the use of a bolus injection of iodixanol and a single blood sample. J Pharmacol Toxicol Methods. 61, 59-64 (2010).
  3. Reinhardt, C. P., et al. Functional immunoassay technology (FIT), a new approach for measuring physiological functions: application of FIT to measure glomerular filtration rate (GFR). Am J Physiol Renal Physiol. 295, F1583-F1588 (2008).
  4. Rieg, T. A high-throughput method for measurement of glomerular filtration rate in conscious mice. J Vis Exp. , e50330 (2013).
  5. Yu, W., Sandoval, R. M., Molitoris, B. A. Rapid determination of renal filtration function using an optical ratiometric imaging approach. Am J Physiol Renal Physiol. 292, F1873-F1880 (2007).
  6. Wang, E., Sandoval, R. M., Campos, S. B., Molitoris, B. A. Rapid diagnosis and quantification of acute kidney injury using fluorescent ratio-metric determination of glomerular filtration rate in the rat. Am J Physiol Renal Physiol. 299, F1048-F1055 (2010).
  7. Colson, P., et al. Does choice of the anesthetic influence renal function during infrarenal aortic surgery? Anesth Analg. 74, 481-485 (1992).
  8. Fusellier, M., et al. Influence of three anesthetic protocols on glomerular filtration rate in dogs. Am J Vet Res. 68, 807-811 (2007).
  9. Schreiber, A., et al. Transcutaneous measurement of renal function in conscious mice. Am J Physiol Renal Physiol. 303, F783-F788 (2012).
  10. Schock-Kusch, D., et al. Transcutaneous measurement of glomerular filtration rate using FITC-sinistrin in rats. Nephrol Dial Transplant. 24, 2997-3001 (2009).
  11. Schock-Kusch, D., et al. Transcutaneous assessment of renal function in conscious rats with a device for measuring FITC-sinistrin disappearance curves. Kidney Int. 79, 1254-1258 (2011).
  12. Steinbach, S., et al. A pilot study to assess the feasibility of transcutaneous glomerular filtration rate measurement using fluorescence-labelled sinistrin in dogs and cats. PLoS One. 9, e111734 (2014).
  13. Schock-Kusch, D., et al. Reliability of transcutaneous measurement of renal function in various strains of conscious mice. PLoS One. 8, e71519 (2013).
  14. Cowley, A. W. Jr, et al. Progression of glomerular filtration rate reduction determined in conscious Dahl salt-sensitive hypertensive rats. Hypertension. 62, 85-90 (2013).
  15. Giani, J. F., et al. Renal angiotensin-converting enzyme is essential for the hypertension induced by nitric oxide synthesis inhibition. J Am Soc Nephrol. 25, 2752-2763 (2014).
  16. Sadick, M., et al. Two non-invasive GFR-estimation methods in rat models of polycystic kidney disease: 3.0 Tesla dynamic contrast-enhanced MRI and optical imaging. Nephrol Dial Transplant. 26, 3101-3108 (2011).
  17. Trudu, M., et al. Common noncoding UMOD gene variants induce salt-sensitive hypertension and kidney damage by increasing uromodulin expression. Nat Med. 19, 1655-1660 (2013).
  18. Zollner, F. G., et al. Simultaneous measurement of kidney function by dynamic contrast enhanced MRI and FITC-sinistrin clearance in rats at 3 tesla: initial results. PLoS One. 8, e79992 (2013).

Tags

Tıp Sayı 109 Glomerüler filtrasyon hızı deri ölçümü böbrek fonksiyon FITC sinistrin plazma klerensi nefroloji hayvan modelleri böbrek patolojisi
Bilinçli Kemirgenler Böbrek Fonksiyon Transkutanöz Değerlendirmesi
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Herrera Pérez, Z., Weinfurter,More

Herrera Pérez, Z., Weinfurter, S., Gretz, N. Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents. J. Vis. Exp. (109), e53767, doi:10.3791/53767 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter