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Biology

मापने माउस में दबाव माप लूप्स

Published: May 2, 2016 doi: 10.3791/53810
Automatic Translation
1
1Department of Integrative Biology and Physiology, University of Minnesota

Summary

यह पांडुलिपि माउस से दबाव मात्रा डेटा के संग्रह के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल का वर्णन है।

Abstract

कारण और हृदय रोग की प्रगति को समझना जैव चिकित्सा समुदाय के लिए एक महत्वपूर्ण चुनौती प्रस्तुत करता है। माउस के आनुवंशिक लचीलापन आण्विक स्तर पर हृदय समारोह में पता लगाने के लिए महान क्षमता प्रदान करता है। माउस के छोटे आकार विस्तृत हृदय phenotyping प्रदर्शन के संबंध में कुछ चुनौतियों को पेश करता है। Miniaturization और प्रौद्योगिकी के क्षेत्र में प्रगति के अन्य माउस में संभव हृदय आकलन के कई तरीके बना दिया है। इनमें से, दबाव और मात्रा डेटा के एक साथ संग्रह है कि किसी भी अन्य साधन के माध्यम से उपलब्ध नहीं है, हृदय समारोह की एक विस्तृत चित्र प्रदान करता है। यहाँ दबाव मात्रा पाश डेटा के संग्रह के लिए एक विस्तृत प्रक्रिया में वर्णित है। शामिल सिद्धांतों माप और त्रुटि के संभावित स्रोतों अंतर्निहित की चर्चा है। संवेदनाहारी प्रबंधन और शल्य दृष्टिकोण महान विस्तार में चर्चा कर रहे हैं के रूप में वे दोनों प्राप्त करने के लिए उच्च गुणवत्ता वाले रक्तसंचारप्रकरण माप के लिए महत्वपूर्ण हैंएस। रक्तसंचारप्रकरण प्रोटोकॉल विकास और डेटा विश्लेषण के प्रासंगिक पहलुओं के सिद्धांतों को भी संबोधित कर रहे हैं।

Introduction

हृदय रोग दुनिया भर में 1 मृत्यु दर और रुग्णता का एक महत्वपूर्ण कारण बना हुआ है। दिल के रोगों के लिए नए उपचारों के विकास में विशेष रूप से कठिन चुनौतियों प्रस्तुत करते हैं। आनुवंशिकी के क्षेत्र में अग्रिम संभावना हृदय रोग के विकास के लिए संभावित आनुवंशिक योगदानकर्ताओं के एक भीड़ की पहचान करने के लिए प्रदान करते हैं। हृदय प्रणाली के एकीकृत प्रकृति की आवश्यकता है कि इन लक्ष्यों को आनुवंशिक बरकरार पशु मॉडल में मान्य किया। माउस के आनुवंशिक लचीलापन और कम लागत के आवास किसी जीन की शारीरिक भूमिका के मूल्यांकन के लिए आगे के लिए लाया है। माउस के छोटे आकार के हृदय समारोह के आकलन के लिए कुछ अद्वितीय चुनौतियों प्रस्तुत करता है। वहाँ कई रूपरेखा कि हृदय समारोह के बारे में जानकारी प्रदान कर सकते हैं, लेकिन केवल वेंट्रिकुलर दबाव और मात्रा के साथ माप दबाव मात्रा (पीवी) वेंट्रिकुलर समारोह के पाश विश्लेषण की अनुमति देता है। पीवी सभी छोरोंओउ हृदय समारोह वाहिका से इसका कनेक्शन के स्वतंत्र विश्लेषण किया जा करने के लिए; एक विशेष आनुवंशिक तत्व के कार्यात्मक भूमिका का निर्धारण करने में एक महत्वपूर्ण कारक है।

दबाव मात्रा छोरों के आकलन के लिए कई वर्षों से दोनों प्रयोगात्मक और चिकित्सकीय इस्तेमाल किया गया है और व्यापक साहित्य के बारे में मौजूद इन आंकड़ों के विश्लेषण के सेट 2,3। माउस के लिए पीवी पाश प्रौद्योगिकी के अनुकूलन murine हृदय शरीर क्रिया विज्ञान 4-6 को समझने के लिए एक महत्वपूर्ण प्रगति हुई है। कैथेटर आधारित पीवी पाश प्रौद्योगिकियों जोड़े को एक दबाव transducer और चालकता के उपयोग वेंट्रिकुलर मात्रा का अनुमान है। वेंट्रिकुलर मात्रा कैथेटर द्वारा उत्पन्न एक बिजली के क्षेत्र में परिवर्तन का परीक्षण करके निर्धारित किया जाता है। इस विधि मॉडल एक सिलेंडर के रूप में वेंट्रिकल, जो की ऊंचाई कैथेटर और त्रिज्या पर इलेक्ट्रोड के बीच की दूरी से परिभाषित किया गया है में रक्त के माध्यम से एक बिजली के क्षेत्र के चालन से गणना की हैवेंट्रिकल 7-9। प्रवाहकत्त्व संकेत कैथेटर द्वारा मापा दो घटक हैं। पहले रक्त के माध्यम से चालन है; इस वेंट्रिकल की मात्रा के साथ बदलता रहता है और प्राथमिक वेंट्रिकुलर मात्रा निर्धारित करने के लिए प्रयोग किया जाता है संकेत का गठन किया। दूसरे घटक के माध्यम से और वेंट्रिकल की दीवार के साथ चालन से यह परिणाम है। इस समानांतर प्रवाहकत्त्व कहा जाता है और आदेश पूर्ण वेंट्रिकुलर मात्रा निर्धारित करने के लिए हटा दिया जाना चाहिए। वहाँ अनुसंधान प्रयोगशाला में दबाव मात्रा डेटा के संग्रह और गणना करने और समानांतर प्रवाहकत्त्व दूर करने के लिए इस्तेमाल किया विधि के लिए दो व्यावसायिक रूप से उपलब्ध सिस्टम उन्हें 6,10,11 के बीच प्राथमिक अंतर है। प्रवाहकत्त्व कैथेटर समानांतर प्रवाहकत्त्व के गणना के लिए अतितनावी खारा के इंजेक्शन की आवश्यकता होती है। यह इंजेक्शन क्षणिक, निलय में रक्त की चालकता में परिवर्तन करते हुए दीवार की चालकता लगातार बना रहता है। इस डेटा से यह निर्धारित करने के लिए संभव हैप्रवाहकत्त्व संकेत है कि खून से निकलती है और क्या के घटक वेंट्रिकुलर दीवार से आता है। यह दृष्टिकोण मानता है कि समानांतर प्रवाहकत्त्व हृदय चक्र के दौरान भिन्न नहीं है। दाखिले के विधि बिजली के क्षेत्र में चरण परिवर्तन पर निर्भर करता है समग्र मात्रा संकेत करने के लिए वेंट्रिकुलर दीवार के योगदान का आकलन करने के लिए। इस विधि रक्त और अंतिम मात्रा निर्धारित करने के लिए मायोकार्डियम की चालकता के लिए पूर्व निर्धारित स्थिरांक की एक किस्म पर निर्भर करता है, लेकिन हृदय चक्र के दौरान समानांतर चालकता के निरंतर उपायों बनाता है। इन दोनों प्रणालियों के बाएं निलय मात्रा का अच्छा अनुमान प्रदान करते हैं और उन दोनों के बीच मतभेद physiologically महत्वपूर्ण होने की संभावना नहीं हैं। वेंट्रिकल और अन्य मान्यताओं के बेलनाकार मॉडल इन कैथेटर आधारित दृष्टिकोण अन्य तौर तरीकों के रूप में के रूप में सही नहीं प्रस्तुत करना है, लेकिन इस डेटा एक हरा-दर-धड़कन आधार है कि हृदय समारोह का भार स्वतंत्र उपायों के मूल्यांकन के लिए आवश्यक है पर प्रदान की जाती है।

प्रक्रिया यहाँ रेखांकित मेरी प्रयोगशाला में प्रयोग किया जाता है और dystrophic कार्डियोमायोपैथी 12-18 के बुनियादी pathophysiological तंत्र की जांच के अध्ययन की एक बड़ी संख्या के लिए डेटा उपलब्ध कराया गया है। प्रक्रिया नीचे उल्लिखित दो में से एक यह है कि पीवी पाश डेटा प्राप्त करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। जबकि सिद्धांतों के कई या तो दृष्टिकोण के लिए लागू कर रहे हैं, इस प्रोटोकॉल एक खुली छाती शिखर दृष्टिकोण पर ध्यान दिया जाएगा; एक बंद छाती प्रोटोकॉल कहीं और 19,20 विस्तृत किया गया है। प्रक्रिया में विस्तार से वर्णित किया जाएगा, वहीं महत्वपूर्ण व्यापक सिद्धांतों या तो हृदय या फेफड़ों के लिए कम से कम नुकसान के साथ दिल को बेनकाब करने के लिए कर रहे हैं। प्रोटोकॉल के दौरान यह याद है कि यह एक गैर-जीवन रक्षा प्रक्रिया है और यह है कि दिल का एक अच्छा प्रदर्शन होने कैथेटर के उचित स्थान के लिए महत्वपूर्ण है महत्वपूर्ण है।

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Protocol

प्रक्रियाओं इस प्रोटोकॉल में वर्णित के किसी भी प्रदर्शन से पहले, स्थानीय संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदन प्राप्त करते हैं।

1. प्रायोगिक रिग की स्थापना

नोट: यह प्रक्रिया anesthetized जानवरों पर किया जाता है और डेटा की गुणवत्ता संवेदनाहारी के समर्थन जानवर को देने की पेशकश की गुणवत्ता के लिए आनुपातिक है। यह पहला खंड विस्तार होगा उपकरण और प्रक्रियाओं के लिए आवश्यक है, जबकि इस प्रोटोकॉल प्रदर्शन माउस को संज्ञाहरण प्रदान करने के लिए।

  1. एक संवेदनाहारी प्रोटोकॉल का चयन करें। हालांकि कुछ इंजेक्शन प्रोटोकॉल के रूप में अच्छी तरह से इस्तेमाल किया गया है Inhalant anesthetics, PV-पाश विश्लेषण के प्रदर्शन के लिए कई लाभकारी गुण होते हैं। एक संवेदनाहारी शासन को चुनने के बारे में अधिक जानकारी के लिए चर्चा देखें।
  2. शल्य साइट के पास शल्य चिकित्सा की मेज या दीवार को संकुचित ऑक्सीजन टैंक सुरक्षित।
  3. अगर inhalant anesthetics का उपयोग कर, बीमा के लिए एक vaporizer का उपयोगउचित खुराक। सालाना vaporizers जांचना सुनिश्चित करने के लिए वे संवेदनाहारी गैस की उचित खुराक प्रदान कर रहे हैं। एक प्रवाह मीटर जो दर है जिस पर गैस संवेदनाहारी सर्किट में प्रवेश करती है के नियंत्रण की अनुमति देता है vaporizers कनेक्ट करें। 1.0 एल / मिनट - 0.5 पर सेट करें।
  4. 1 को संज्ञाहारी गैस निर्देशित प्रवाह) प्रेरण कक्ष, 2) एक मुखौटा है, और 3) वेंटीलेटर अनुमति देने के लिए एक कई गुना का प्रयोग करें। एनेस्थेटिक गैस सफाई गंभीर रूप से महत्वपूर्ण है और एक सक्रिय प्रणाली द्वारा किया जाना चाहिए कि एक धूआं हुड (या अन्य इसी तरह के निर्माण के बुनियादी ढांचे) में या संवेदनाहारी गैसों को दूर करने के लिए बनाया गया एक कनस्तर के माध्यम से या तो झरोखों।
    नोट: सभी स्थानीय नियमों का अनुपालन सुनिश्चित करने के लिए स्थानीय व्यावसायिक स्वास्थ्य अधिकारियों के साथ की जाँच करें।
  5. हीटिंग पैड और / या वार्मिंग दीपक का उपयोग करके मुख्य शरीर के तापमान को बनाए रखें। लगातार एक गुदा थर्मामीटर के साथ शरीर के तापमान की निगरानी। यह सक्रिय वृद्धि के लिए अनुमति देते हैं या एक शारीरिक शरीर के तापमान को सुनिश्चित करने के लिए (हीटिंग में कम हो जाती है जाएगा ͭ6; 37 डिग्री सेल्सियस) रक्तसंचारप्रकरण डेटा के संग्रह के दौरान।
  6. खून की कमी और बेसुध मात्रा घटाने प्रतिक्रिया करने के लिए तरल पदार्थ समर्थन प्रदान करें।
    1. 25% एल्बुमिन के 1 मिलीलीटर ले रही है और एक सिरिंज में 0.9% NaCl के 1.5 मिलीलीटर जोड़कर 0.9% NaCl में एल्बुमिन की एक 10% समाधान तैयार है।
    2. एक कम अवशिष्ट मात्रा intravascular कैथेटर तैयार करें।
      1. एक 0.5 इंच 30 गेज सुई की प्लास्टिक हब को कुचलने के लिए चिमटा का प्रयोग करें। सुई धारकों का प्रयोग, सुई समझ और केंद्र को हटा दें। सुई एक hemostat का उपयोग करने से शेष चिपकने वाला परिमार्जन। microbore ट्यूबिंग की लंबाई में सुई की कुंद अंत डालें। ट्यूबिंग के लिए लंबाई के कम से कम 20 इंच का प्रयोग करें।
    3. सटीक मात्रा में वितरित किए जाने की अनुमति देने के लिए एक सिरिंज पंप का प्रयोग करें।
  7. पीवी डेटा उच्च गुणवत्ता के संग्रह के लिए उचित वेंटीलेशन सुनिश्चित करें। वहाँ माउस खरीद के लिए उपलब्ध कृत्रिम सांस की एक किस्म है। दबाव नियंत्रित वेंटिलेटर बंद inhalant एक के लिए आवश्यक वातावरण प्रदान करते हैंnesthetic गैसों और प्रक्रिया के दौरान वेंटिलेशन के बेहतर नियंत्रण प्रदान करते हैं।
    1. सुनिश्चित करें कि श्वसन दबावों barotrauma को रोकने के लिए <15 सेमी एच 2 ओ सीमित हैं। श्वसन चक्र के 35% के दौरान श्वसन पल्स देने के लिए वेंटीलेटर सेट करें। 4 के स्तर पर सकारात्मक अंत निःश्वास दबाव (झलक) के प्रयोग - 5 सेमी एच 2 ओ बहुत, माउस का वेंटिलेशन में सुधार होगा फेफड़ों के श्वासरोध को रोकने और गैस विनिमय का समर्थन करके।
    2. रक्षक सर्किट में वाई-संयुक्त करने के लिए मृत अंतरिक्ष बाहर का सीमित करें। यह महत्वपूर्ण है क्योंकि माउस का ज्वार की मात्रा बहुत छोटा है और किसी भी मृत अंतरिक्ष ताजा प्रेरित हवा की डिलीवरी से घटा है।
    3. एक 20 गेज निबाह intravascular कैथेटर के बंद टिप काटने से एक माउस के आकार अंतःश्वासनलीय (ईटी) ट्यूब बनाएँ। यह आसान प्रविष्टि के लिए एक पतला बिंदु प्रदान करता है। संवेदनाहारी सर्किट के वाई-संयुक्त में कटौती अंत रखें।
    4. श्वसन में लचीला ट्यूबिंग का प्रयोग करेंसर्किट। ट्यूबिंग में किसी भी संरचनात्मक स्मृति बाहरी ताकतों संभावित माउस की airway से बाहर अंतःश्वासनलीय ट्यूब खींचने के लिए है कि पैदा करेगा।
    5. माउस न्यूनतम दर है कि अंतर्जात सांस की ड्राइव को दबा उपयोग करके सांस की दर निर्धारित करने दें। प्रति मिनट लगभग 60 साँस के एक अपेक्षाकृत धीमी गति से सांस की दर में शुरू करो।
      नोट: उचित वेंटीलेशन के साथ माउस साँस लेने के लिए बहुत कम प्रयास करने चाहिए। हालांकि, अगर वेंटिलेशन अपर्याप्त है, रक्त में सीओ 2 के buildup माउस द्वारा श्वसन प्रयास आरंभ हो जाएगा। यदि यह मनाया जाता है, सांस की दर में वृद्धि एक सीधे आगे रास्ता वायुकोशीय वेंटिलेशन बढ़ाने के लिए है। यह अक्सर बीटा एड्रीनर्जिक रिसेप्टर उत्तेजना के साथ जुड़े हृदय के काम का बोझ में उन्नयन के जवाब में सांस की दर को बढ़ाने के लिए आवश्यक है।
    6. एक बार सांस सर्किट तैयार किया जाता है, दबाव अंतःश्वासनलीय की नोक plugging (ईटी) ट्यूब द्वारा इस प्रणाली का परीक्षणएक उंगली के साथ। ≈10 CMH 2 ओ की एक airway दबाव सुनिश्चित इस परीक्षा में प्रत्येक प्रक्रिया से पहले किया जाना चाहिए।

2. शल्य दृष्टिकोण

  1. तालिका 1 से छोटे संदंश और कैंची और अन्य उपकरणों का प्रयोग करें। सभी उपकरणों काफी बढ़ाया शल्य चिकित्सा क्षेत्र में आसान उपयोग के लिए अनुमति देने के लिए छोटे हैं। शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया के कई पहलुओं के लिए पर्याप्त बढ़ाई प्रदान करने के लिए एक शल्य stereomicroscope का प्रयोग करें।
  2. प्रक्रिया के दौरान रक्तस्तम्भन अधिकतम करने के लिए एक दाग़ना का प्रयोग करें।
    नोट: वहाँ दाग़ना की व्यापक वर्गों के एक जोड़े हैं। Thermocautery एक पतली धातु तत्व है कि मांसपेशियों के ऊतकों के माध्यम से कट और खून बह रहा बंद हो जाएगा तपता है। इन पद्धतियों के शुरू में अपेक्षाकृत कम खर्चीली हैं; हालांकि यह ध्यान दें कि तार सुझावों के दोनों कमजोर और अपेक्षाकृत महंगी हैं महत्वपूर्ण है। Electrocautery प्रणालियों और अधिक खरीद करने के लिए शुरू में महंगा है, लेकिन सुझाव बहुत मजबूत हैं और जगह जाने की जरूरत नहीं होगीघ।
  3. प्रेरण और शल्य चिकित्सा की तैयारी
    1. माउस के शरीर के वजन को प्राप्त करते हैं।
    2. माउस एक प्रेरण कक्ष 5% isoflurane से भर जाता है कि में रखें।
      नोट: माउस के इस माहौल में कुछ मिनट से अधिक जीवित नहीं रह सकते। केवल 45 - 60 सेकंड के लिए माउस इसकी ठीक पलटा (जब अपनी पीठ या पक्ष पर रखा पर फ्लिप करने के प्रयास) कम करने के लिए आवश्यक हैं।
    3. एक बार ठीक पलटा खो दिया है, 2% isoflurane एकाग्रता को कम करने और मुखौटा करने के लिए संवेदनाहारी गैस खुला।
    4. जल्दी ऑपरेटिंग मेज करने के लिए माउस को हस्तांतरण और नकाब के भीतर अपनी नाक के साथ पृष्ठीय लेटना में जगह है।
    5. विद्युतदहनकर्म का उपयोग करते हैं, खारा लथपथ धुंध विद्युत जोड़े को विद्युतदहनकर्म प्रणाली की ग्राउंडिंग पैड करने के लिए माउस का उपयोग करें।
    6. सर्जिकल टेप के साथ अंग सुरक्षित। इस टेप चिपकने वाला गुण भी जब गीला प्रदान करता है।
    7. निगरानी मूल शरीर के लिए एक गुदा thermoprobe डालेंतापमान। टेप के साथ सुरक्षित।
    8. गर्दन और माउस के सीने को एक लोमनाशक लागू करें। लोमनाशक काम करने के लिए 3 मिनट, और फिर इन क्षेत्रों में एक कपास इत्तला दे दी applicator का उपयोग कर और / या प्रयोगशाला पोंछे से फर हटाने - 2 रुको।
      नोट: शल्य चिकित्सा क्षेत्र की Draping की आवश्यकता नहीं है, क्योंकि यह एक गैर-जीवन रक्षा प्रक्रिया है, लेकिन अगर इस्तेमाल किया, दाग़ना ग्राउंडिंग पैड करने के लिए सर्जन के जोखिम को सीमित करने के लिए वांछित जा सकता है।
    9. एक बार माउस सर्जरी के लिए तैयार है, एक पैर के अंगूठे चुटकी प्रदर्शन से माउस की शल्य चिकित्सा विमान का आकलन करें। एक बार एक उपयुक्त संवेदनाहारी गहराई का आश्वासन दिया माउस पहले चीरा के लिए तैयार है।
  4. मौखिक इंटुबैषेण या ट्रेकिआटमी के माध्यम से एयरवे का नियंत्रण प्राप्त करते हैं। ट्रेकिआटमी एक सुविधाजनक तरीका है कि अपेक्षाकृत प्रदर्शन करने के लिए सरल है।
    नोट: इस प्रक्रियात्मक विवरण भर में सभी दिशाओं और झुकाव सर्जन के सापेक्ष होगा।
    1. Le पर एक चीराsternal पायदान ≈ मध्य रेखा के 5 मिमी सही से देने की वेल 5 मिमी midline के छोड़ दिया ≈ करने के लिए।
    2. पहले चीरा के अधिकार बढ़त के साथ विस्तार देने के लिए एक दूसरे चीरा, एक स्तर तक विस्तार देने rostrally ≈ 2 मिमी जबड़ा के अंत करने के लिए दुम।
    3. करने के लिए ≈ 5 मिमी के मध्य लाइन के बाईं भर में एक तिहाई चीरा दूसरे चीरा के व्याख्यान चबूतरे अंत से देने बनाओ। बाईं ओर, जिसके परिणामस्वरूप त्वचा फ्लैप वापस लेना अंतर्निहित ऊतकों को बेनकाब करने के लिए।
    4. कुंद विच्छेदन से midline पर अलग कर्णमूलीय और अवअधोहनुज लार ग्रंथियों। इस श्वासनली overlying अंतर्निहित मांसलता का खुलासा होगा।
    5. दो टूक सही और बाएँ sternohyoideus मांसपेशियों श्वासनली बेनकाब करने के लिए अलग।
    6. श्वासनली के तहत 3-0 रेशम सिवनी का एक टुकड़ा ≈10 सेमी दर्रा, देखभाल करने के घेघा में शामिल नहीं करने के लिए।
    7. ट्रेकिआटमी के लिए स्थान की पहचान: सिर्फ गला के लिए दुम वहाँ पहले सांस की नली अंगूठी से पहले एक अंतर है, यह एक विचार हैएल स्थान ट्रेकिआटमी प्रदर्शन करने के लिए।
    8. वेंटीलेटर की संवेदनाहारी गैस उपलब्ध कराने और वेंटीलेटर पर चालू करने के लिए कई गुना समायोजित करें।
    9. एक उंगली से अंतःश्वासनलीय (ईटी) ट्यूब की नोक plugging द्वारा लीक के लिए जाँच करें। ≈10 cmH2O की एक एयरवे प्रेशर सुनिश्चित करें।
    10. एक छुरी के रूप में एक 20 गेज सुई का प्रयोग, श्वासनली काटकर अलग कर देना। चीरा अपेक्षाकृत चौड़ा कर, के रूप में ईटी ट्यूब सांस की नली लुमेन के ज्यादा भरना होगा।
    11. जल्दी से चल रहा है, नकाब हटाने के लिए और ध्यान से श्वासनली में ईटी ट्यूब डालें। के रूप में ऊतकों बहुत कमजोर हैं और श्वासनली की दीवार के माध्यम से तोड़ने के एक वातिलवक्ष में परिणाम कर सकते हैं यह मजबूर मत करो।
      नोट: तुरंत प्रविष्टि पर, छाती आस स्पष्ट हो जाना चाहिए।
    12. बाहर निकाला जा रहा से ईटी ट्यूब को रोकने के लिए टेप के साथ रक्षक सर्किट सुरक्षित।
    13. 3-0 सिवनी में एक भी overhand गाँठ बाँध एट ट्यूब के चारों ओर एक मुहर के रूप में।
      नोट: इस बिंदु छाती पर excursions स्पष्ट रूप से स्पष्ट किया जाना चाहिए। यदि नहीं यह आम तौर पर श्वासनली कि समस्या यह है के भीतर एट ट्यूब की स्थिति है। ईटी ट्यूब वापस खींचो और यह स्थिति बदलने के लिए, एक गाइड के रूप में श्वासनली के उन्मुखीकरण पर ध्यान केंद्रित करने की कोशिश।
  5. गले नस साइट की तैयारी
    1. छोड़ दिया लार ग्रंथियों व्याख्यान चबूतरे वाला पहलू के बल बाहरी गले नस उजागर वापस लेना।
    2. पतली मांसपेशियों (sternomastoideus) कुंद विच्छेदन के साथ नस को कवर दोटूक। यह गले नस की बाहरी सतह का खुलासा होगा।
    3. ध्यान से, ऊतक के किसी भी बड़े टुकड़े स्पष्ट हालांकि सावधानी के रूप में नस की दीवारों बहुत पतले होते हैं इस्तेमाल किया जाना चाहिए। एक बार जब यह काम पूरा हो गया है, केन्युलेशन के लिए बाद में इसे संरक्षित करने के लिए लार ग्रंथियों के साथ गले नस को कवर किया।
  6. thoracotomy; हृदय या फेफड़ों को नुकसान पहुँचाए बिना फुफ्फुस अंतरिक्ष में प्रवेश
    1. छाती के ठीक किनारे का विस्तार कवर त्वचा की बहुत दूर≈ 1.5 सेमी midline की बाईं करने के लिए जिफाएडा प्रक्रिया के स्तर पर, तो midline पार करने के लिए नीचे मूल त्वचा चीरा।
      नोट: देखभाल जब बाहरी स्तन वाहिकाओं है, जो खून बह रहा है की एक महत्वपूर्ण स्रोत हो सकता है के माध्यम से काटने से लिया जाना चाहिए। उन्हें काटने से पहले इन जहाजों cauterizing काफी हद तक इस रक्तस्राव रोकने जाएगा।
    2. कुंद विच्छेदन का उपयोग करना, अंतर्निहित मांसलता को बेनकाब करने के laterally त्वचा फ्लैप वापस लेना।
    3. उरोस्थि पोत विस्फारित संदंश का उपयोग की दुम पहलू के पास सही पक्ष पर वक्षपेशी प्रमुख की प्रविष्टि अलग। दाग़ना और मांसपेशियों में कटौती।
    4. उरोस्थि के लिए अपने लगाव के साथ वक्षपेशी प्रमुख के माध्यम से कट। कटौती किनारों दाग़ना रक्तस्तम्भन सुनिश्चित करने के लिए।
    5. अगले एक ही पक्ष पर latissimus dorsi, जो माउस के पार्श्व पहलू को कवर मांसपेशियों की एक बड़ी चादर है कमजोर। दाग़ना और इस मांसपेशी में कटौती और फिर cranially कटौती अंत वापस लेना। यह कुछ कुंद आवश्यकता हो सकती हैविच्छेदन।
      नोट: पसलियों अब स्पष्ट रूप से स्पष्ट कर रहे हैं और दिल भी कुछ माउस उपभेदों में दिखाई दे रहा हो सकता है। सबसे चूहों में, चौथे पसलियों के बीच अंतरिक्ष की दुम छमाही में सीने में प्रवेश दिल के लिए अच्छा उपयोग प्रदान करेगा। चौथे पसलियों के बीच अंतरिक्ष दूसरा सबसे दुम जगह नहीं है।
    6. सीने में प्रवेश करने के लिए, ध्यान से पसलियों के बीच मांसपेशियों की परतों के माध्यम से नीचे काटना करने के लिए तेज संदंश की एक जोड़ी का उपयोग करें।
    7. एक बार जब फुफ्फुस अंतरिक्ष खोल दिया गया है, ध्यान से कुंद इत्तला दे दी पोत dilators डालें। पोत dilators का प्रयोग, छाती दीवार पर कोमल ऊपर की ओर बल प्रदान कुंद अंत वसंत कैंची का उपयोग सावधानी से पसलियों के बीच मांसपेशियों के शेष काटकर अलग कर देना है।
    8. सबसे पहले laterally फेफड़ों पालि नीचे कटौती करने के लिए नहीं सावधान किया जा कटौती। अगली चीरा मध्यवर्ती विस्तार, लेकिन रहने 3 - midline 4 मिमी पार्श्व आंतरिक स्तन धमनी से बचने के लिए।
      नोट: आंतरिक स्तन वाहिकाओं उरोस्थि के समानांतरऔर महत्वपूर्ण खून की कमी में परिणाम अगर गलती से कटौती कर सकते हैं।
    9. ध्यान से, पसलियों के बीच मांसपेशियों की कटौती बढ़त दाग़ना ऊपर की ओर ऊतक रोल करने के लिए फेफड़ों या दिल के साथ संपर्क में आने के बिना कटौती के ऊतकों के साथ दाग़ना संपर्क अनुमति देने के लिए एक छोटे से कपास इत्तला दे दी applicator का उपयोग कर।
    10. जगह एक खारा लथपथ छोटे कपास चीरा midline की ओर इशारा करते हुए के माध्यम से applicator इत्तला दे दी। छाती दीवार आधारभूत संरचनाएं से दूर खींचने के लिए एक कोमल ऊपर की ओर कर्षण प्रदान करें। चीरा की औसत दर्जे किनारे पर छाती दीवार cauterizing और बाईं ओर midline की ≈ 1 सेमी पार्श्व समाप्त होने शुरू।
    11. बाईं ओर applicator अग्रिम इतना है कि यह दाग़ना टिप के तहत लगातार है।
    12. एक बार ऊतक को अच्छी तरह से cauterized है, कैंची का उपयोग सावधानी से उरोस्थि के माध्यम से कटौती करने के लिए। दिल के शीर्ष इस बिंदु पर स्पष्ट रूप से दिखाई जानी चाहिए।
    13. कुंद विच्छेदन का उपयोग करना, पेरीकार्डियम को बाधित और दुम रग कावा की पहचान।
    14. किसी भी रक्तस्राव के सबूत के लिए जाँच करें और अब यह दाग़ना। एक बार सभी से खून बह रहा संबोधित किया गया है, ध्यान से किसी भी draping, दाग़ना ग्राउंडिंग पैड, और खारा लथपथ धुंध को हटा दें।
  7. गले नस कैथेटर रखने
    1. ध्यान से एक 30 गेज सुई पर ट्यूबिंग फिसल द्वारा 10% एल्बुमिन युक्त सिरिंज के लिए कदम 1.6.2 में किए गए कैथेटर कनेक्ट करें।
    2. कैथेटर के माध्यम से एल्बुमिन infusing शुरू करो।
    3. कैथेटर ओरिएंट ऐसी है कि सुई, अपने दम पर गले नस पर स्थित है के साथ सुई अप बेवल। यदि आवश्यक हो, उचित उन्मुखीकरण के लिए बेवल स्थानांतरित करने के लिए ट्यूबिंग में सुई बारी बारी से करने के लिए एक सुई धारक का उपयोग करें।
    4. जब कैथेटर पूरी तरह से प्लावित है आसव बंद करो।
    5. एक संदंश के साथ कैथेटर सुई समझ। दूसरे हाथ से, लार ग्रंथि वापस लेना गले नस के दृश्य की अनुमति के लिए एक ऊतक संदंश का उपयोग करें। बाहर का कंठ आसपास के ऊतकों को कोमल कर्षण लागू करेंपोत दीवार पर तनाव पैदा नस। दृष्टिकोण का एक उथले कोण का प्रयोग, ध्यान नस में सुई डालने। पोत में 4 मिमी - सुई की नोक 3 अग्रिम।
    6. कैथेटर सुई टेप का एक टुकड़ा के साथ कैथेटर ट्यूबिंग को सुरक्षित रिहा करने से पहले, इस सीमित कर देगा सुई के किसी भी आंदोलन एक बार जारी किया।
    7. सुई जारी है और धीरे सिरिंज सवार पर वापस खींचने पुष्टि करने के लिए कि कैथेटर, पोत के लुमेन में है लाइन में रक्त visualizing द्वारा।
    8. एक बार ठीक से अंतर्निहित लार ग्रंथियों के लिए सुई संलग्न करने के लिए शल्य चिकित्सा गोंद के साथ कैथेटर को सुरक्षित तैनात हैं।
    9. कुल मात्रा की गणना संचार हो। अगर कोई महत्वपूर्ण खून की कमी नहीं थी 5 μl / जी शरीर के वजन का एक मात्रा पर्याप्त होगा। अगर वहाँ infusing 6 महत्वपूर्ण खून की कमी थी - 6.5 μl / g आवश्यक हो सकता है। 15 मिनट - प्रवाह की दर ऐसी है कि पूरे अर्क 10 में पूरा हो जाएगा सेट करें।
  8. में पीवी कैथेटर नियुक्तिदिल का बायां निचला भाग
    1. ऊपर वर्णित शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया के दौरान, एक सिरिंज एक नमकीन घोल युक्त पीवी कैथेटर जगह इसे संतुलित करने की अनुमति है।
    2. बस प्लेसमेंट के लिए पहले, माउस के बगल में सिरिंज और कैथेटर चलते हैं। दिल के रूप में लगभग एक ही ऊंचाई पर कैथेटर टिप के साथ, दबाव पढ़ने शून्य।
    3. एक खारा लथपथ छोटे कपास का उपयोग applicator इत्तला दे दी, दिल पैंतरेबाज़ी एपेक्स के दृश्य की अनुमति।
    4. एक 25 गेज सुई का प्रयोग, एक चाकू चीरा के रूप में संभव के रूप में शीर्ष के केंद्र के पास हैं।
    5. सुई को हटाने के बाद, जल्दी से चीरा के माध्यम से कैथेटर डालने। यह कैथेटर डालने के लिए अधिक बल नहीं ले, तो संयम दिखाने के लिए जब वेंट्रिकल में कैथेटर को आगे बढ़ाने करता है। कभी कभी यह एक अतिरिक्त वार चीरा प्रदर्शन करने के लिए आवश्यक है। यदि यह आवश्यक है, दिल को नुकसान को कम करने के लिए प्रारंभिक स्थान के पास बाद में चीरा प्रदर्शन करने की कोशिश करते हैं।
      नहींई: एक बार कैथेटर वेंट्रिकल में उन्नत है फाइनल प्लेसमेंट गंभीर रूप से महत्वपूर्ण है। वेंट्रिकुलर दबाव ट्रेसिंग एक कम डायस्टोलिक प्रेशर (<10 एमएमएचजी) और एक उच्च सिस्टोलिक दबाव से स्पष्ट हो जाएगा (> इस बिंदु पर 80 एमएमएचजी)। आदर्श रूप में, कैथेटर बाहरी इलेक्ट्रोड सिर्फ वेंट्रिकल के भीतर के साथ वेंट्रिकल में केन्द्रित किया जाएगा। कैथेटर की स्थिति में ठीक समायोजन PV-पाश डेटा देख, पक्षों के बीच ≈ 90 डिग्री कोण के साथ एक बॉक्स के आकार का पता लगाने के लिए देख कर किया जा सकता है।

3. प्रक्रियात्मक जानकारी

नोट: एक बार कैथेटर एक संक्षिप्त अवधि स्थिरीकरण जगह में है (10 - 15 मिनट) पशु शल्य तीव्र तनाव से कुछ से उबरने के लिए और तरल पदार्थ के अर्क के लिए समय की अनुमति के लिए अनुमति देने के लिए आवश्यक है। इस अवधि के बाद स्थिरीकरण वास्तविक प्रोटोकॉल शुरू कर सकते हैं।

  1. एक बार जब पीवी कैथेटर रखा गया है और शल्य चिकित्सा हेरफेर नहीं रह गया है,1% ≈ के रूप में संज्ञाहरण की गहरी शल्य चिकित्सा विमान के लिए जरूरत कम है isoflurane नीचे बारी।
    1. इस अवधि के दौरान, ध्यान से माउस की निगरानी सुनिश्चित करने के लिए कि संज्ञाहरण की एक उचित स्तर बनाए रखा है। ध्यान से किसी भी आंदोलन का आकलन; सांस की मांसपेशियों के आंदोलन हाइपोवेंटिलेशन के स्तर पर पता चलता है और वेंटिलेटर के सांस की दर में वृद्धि से संबोधित किया जा सकता है। अंग या मूंछ के हिल के आंदोलन के संकेत हैं कि माउस भी प्रकाश हो रही है और अधिक संवेदनाहारी की आवश्यकता है।
      नोट: उपचार है कि इस प्रोटोकॉल के साथ संयोजन में इस्तेमाल किया जा सकता है के क्रमपरिवर्तन की एक विस्तृत विविधता हैं। इन उपचार के कई दवाओं के अर्क की आवश्यकता होगी। यह मृत अंतरिक्ष की मात्रा को प्रभावी ढंग से प्रबंधन करने के लिए आवश्यक है। समाधान स्विच दूसरे के लिए एक सिरिंज पंप की सुई से कैथेटर ट्यूबिंग फिसलने से पूरा किया जा सकता है। कैथेटर ट्यूबिंग की अनुमति देता है शीघ्र ही पहले अर्क के अंत से पहले यह कर लोड करने के लिएअगले दवा के साथ। यह कैथेटर ट्यूबिंग भीतर मात्रा में पता करने के लिए समाधान स्विच के समय को निर्धारित करने के लिए आवश्यक है। लाइन में एक छोटा सा हवाई बुलबुले की शुरूआत के अर्क स्विच के सटीक समय निर्धारित करने की अनुमति देता है; इस बुलबुले शिरापरक संचलन में संचार अच्छी तरह से सहन किया है।
  2. दिल की लोडिंग की स्थिति प्रीलोड कम करने और बढ़ती afterload से बदल।
    1. दिल को शिरापरक वापसी अवरुद्ध करके प्रीलोड कम करें। इस तैयारी में, कल्पना और दुम रग कावा रोक देना रूप में यह दिल को डायाफ्राम से गुजरता है। 3 सेकंड - स्थायी नहीं 2 से अधिक आसानी से और अपेक्षाकृत जल्दी से इस रोड़ा प्रदर्शन करना। 2 सेकंड - एक सौम्य पेट संपीड़न स्थायी 1 प्रदर्शन से क्षणिक बाएं निलय afterload बढ़ाएँ।
    2. दिल की लोडिंग में इन परिवर्तनों के दौरान किसी भी विरूपण साक्ष्य वेंटीलेटर द्वारा शुरू समाप्त करने के लिए श्वास को थामने।
  3. मात्रा संकेत वीं का उपयोग कर जांचनाई प्रवाहकत्त्व कैथेटर। इन प्रक्रियाओं के प्रवेश प्रौद्योगिकी का उपयोग कर कैथेटर के साथ आवश्यक नहीं हैं।
    1. समानांतर प्रवाहकत्त्व की गणना करने के अतितनावी खारा (20% NaCl) के 10 μl - प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल के बाद 5 इंजेक्षन।
    2. कैथेटर को हटाने और एक heparinized सिरिंज में बाएं वेंट्रिकल से रक्त ड्राइंग द्वारा खून ले लीजिए। इस खून ज्ञात मात्रा के cuvettes में रखें और प्रवाहकत्त्व को मापने के लिए कैथेटर का उपयोग करें।
    3. क्युवेट चालकता उपायों का उपयोग करने के लिए मात्रा प्रवाहकत्त्व संकेत कन्वर्ट करने के लिए और समानांतर प्रवाहकत्त्व पूर्ण मात्रा कैथेटर द्वारा मापा को परिभाषित करने के लिए आवश्यक है।
  4. एक बार जब प्रोटोकॉल पूरा हो गया है, रग कावा और महाधमनी संलग्नक के transection के बाद दिल को हटाने के द्वारा माउस euthanize।

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Representative Results

परंपरा के मुताबिक, मात्रा चित्रा 1 में वाई अक्ष पर एक्स अक्ष और दबाव पर साजिश रची है। दबाव मात्रा छोरों मात्रा के खिलाफ साजिश रचने के दबाव से उत्पन्न एक आयत के समान होना चाहिए, ऊर्ध्वाधर किनारों दबाव में isovolumic परिवर्तन (यानी प्रतिनिधित्व करने, जब दोनों माइट्रल और महाधमनी वाल्व बंद हो जाती हैं)। वेंट्रिकुलर माइट्रल वाल्व और ऊपरी क्षैतिज भाग के माध्यम से भरने महाधमनी वाल्व के माध्यम से खाली वेंट्रिकुलर का प्रतिनिधित्व नीचे क्षैतिज प्रतिनिधित्व करता है। 90 की एक स्वस्थ जंगली प्रकार माउस बाएं निलय के दबाव में - 12,000 एमएमएचजी / सेक (सामान्य रक्तसंचारप्रकरण मापदंडों के पर्वतमाला के लिए 1 टेबल देखें) - 110 एमएमएचजी अधिक से अधिक डी पी / 8000 के डीटी के साथ उम्मीद कर रहे हैं। तालिका में प्रदान की सामान्य सीमाओं जंगली प्रकार C57BL / 10 और C57BL / 6 चूहों से प्राप्त मूल्यों के आधार पर कर रहे हैं; हालांकि, यह ध्यान दें कि वहाँ उपभेदों 21 के बीच महत्वपूर्ण मतभेद रहे हैं कि महत्वपूर्ण है। प्रक्रिया ओयहाँ utlined बाएं वेंट्रिकल के भीतर कैथेटर की स्थिति के लिए एक शिखर वार चीरा के उपयोग पर केंद्रित है। एक अन्य लोकप्रिय दृष्टिकोण कैथेटर सही मन्या धमनी में कैथेटर प्रविष्टि निम्न महाधमनी वाल्व के माध्यम से प्रतिगामी डालने के लिए है। लाभ में है कि यह सामान्य इंट्रा-वक्ष के दबाव के रखरखाव में जिसके परिणामस्वरूप एक बंद छाती के साथ किया जा सकता है, के रूप में प्रतिगामी दृष्टिकोण; हालांकि, जानवरों अक्सर इस प्रक्रिया जो इस लाभ को सीमित करता दौरान हवादार रहे हैं। बंद छाती दृष्टिकोण सीमा, निलय के भीतर कैथेटर उन्मुखीकरण पर नियंत्रण जबकि खुले सीने दृष्टिकोण वेंट्रिकल के भीतर कैथेटर पैंतरेबाज़ी करने के लिए अधिक से अधिक क्षमता प्रदान करता है। कैथेटर की प्रतिगामी प्रविष्टि के साथ एक संभावित समस्या बहिर्वाह ट्रैक रुकावट के लिए संभावित है। माउस महाधमनी का व्यास 0.8 से 1.2 मिमी 22,23, व्यावसायिक रूप से उपलब्ध दबाव मात्रा कैथेटर के व्यास से 0.33 (1.0 फ्रेंच) 0.47 मिमी पर्वतमाला बदलता रहता है (1.4 Freएनसीएच)। एक बड़े और छोटे महाधमनी के संदर्भ में इन कैथेटर के सापेक्ष आकार चित्रा 2 में चित्रित कर रहे हैं। बहिर्वाह पथ कैथेटर महाधमनी पार करके अवरुद्ध के अंश छोटे दिलों में एक महत्वपूर्ण मुद्दा बन सकता है और जब प्रदर्शन को ध्यान में रखा जाना चाहिए छोटे दिल में पीवी पाश अध्ययन करता है। वहाँ माप के कई कलाकृतियों कि पीवी डेटा, सबसे आम में से एक के विश्लेषण जटिल हो सकता है कैथेटर फंसाने है। इस सिस्टोल के अंत की संभावना एक इल्लों से भरा हुआ मांसपेशियों या वेंट्रिकल के भीतर अन्य गतिशील संरचना (चित्रा 3) द्वारा दबाव transducer के प्रत्यक्ष संपीड़न से उत्पन्न पर दबाव में एक कील के रूप में स्पष्ट है। यह समस्याग्रस्त है, क्योंकि निर्धारण करने सिस्टोलिक समारोह के लिए सबसे अधिक तरीकों अधिकतम दबाव का उपयोग करें। कैथेटर फंसाने साथ सिस्टोलिक दबाव और दबाव की अधिकतम व्युत्पन्न (डी पी / डीटी) डेटा सेट से बारीकी से जांच की जानी चाहिए और विश्लेषण सार्थक डेटा प्राप्त करने के बदले जाने की जरूरत हो सकती है।

दबाव मात्रा छोरों हृदय समारोह का आकलन करने के लिए प्रोटोकॉल की एक विस्तृत विविधता में इस्तेमाल किया जा सकता है। ये β एड्रीनर्जिक उत्तेजना 12,14,16,17 के माध्यम से हृदय रिजर्व का आकलन शामिल है। दवाओं की एक विस्तृत विविधता हृदय शरीर क्रिया विज्ञान पर किसी भी तीव्र प्रभाव का आकलन करने के लिए संचार हो सकता है। एयरवे के नियंत्रण के लिए भी बदल गैस के मिश्रण हृदय समारोह पर हाइपोक्सिया और / या एसिडोसिस के प्रभाव को अनुमति देने का प्रशासन सीधे 24-27 संबोधित करने की अनुमति देता है। इसके अलावा, इस पीवी डेटा का विश्लेषण भी बाएं वेंट्रिकल की निष्क्रिय गुण है, जो विभिन्न रोग राज्यों 12 में काफी बदला जा सकता है की एक विस्तृत मूल्यांकन प्रदान कर सकते हैं।

पैरामीटर सामान्य परिसर
सिस्टोलिक दबाव 90 - 110 एमएमएचजी
आकुंचन दाब 4 - 10 एमएमएचजी
अधिकतम डी पी / डीटी 8000 - 12,000 एमएमएचजी / सेक
न्यूनतम डी पी / डीटी -8.500 - -12.000 एमएमएचजी / सेक
ताउ 5 - 6 सेकंड
हृदय गति 550 - 600 बीपीएम
हृदयी निर्गम 10 - 13 मिलीग्राम / मिनट
इंजेक्शन फ्रैक्शन 40 - 60%

टेबल 1. चयनित रक्तसंचारप्रकरण पैरामीटर के लिए सामान्य मूल्यों।

आकृति 1
चित्रा 1:। एक जंगली प्रकार C57BL / 10 माउस प्रतिनिधि डेटा कि प्रक्रियाओं का उपयोग एकत्र किया गया था में थी वर्णित से प्रतिनिधि दबाव मात्रा लूप्सएस पांडुलिपि। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र 2
चित्रा 2: महाधमनी व्यास और संभावित बहिर्वाह ट्रैक रुकावट के महत्व की योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व माउस महाधमनी के सापेक्ष आकार और चूहों के लिए व्यावसायिक रूप से उपलब्ध दबाव मात्रा कैथेटर की योजनाबद्ध ड्राइंग।। इन आंकड़ों बहिर्वाह ट्रैक बाधा पर विचार जब एक प्रतिगामी कैथेटर प्रविष्टि के दृष्टिकोण का उपयोग कर छोटे चूहों का आकलन करने के महत्व को रेखांकित। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र तीन
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Discussion

इस प्रक्रिया में तीन महत्वपूर्ण कदम उठाए हैं: 1) अंतःश्वासनलीय ट्यूब और उचित वेंटीलेशन, 2) कंठ चतुर्थ कैथेटर की नियुक्ति, और 3) बाएं वेंट्रिकल में पीवी कैथेटर के उचित स्थान की नियुक्ति। उचित सांस की दर का निर्धारण जीवन रक्षक प्रणाली प्रदान करने का एक महत्वपूर्ण हिस्सा है। होश में चूहों आम तौर पर तेजी से उथले साँस के साथ वायुकोशीय वेंटिलेशन बनाए रखें। सामान्य तौर पर, हवादार चूहों बहुत बड़ा ज्वार की मात्रा होगा। इस प्रकार एक धीमी सांस की दर की आवश्यकता है। यह महत्वपूर्ण है क्योंकि बहुत कम वेंटिलेशन सांस एसिडोसिस में परिणाम होगा और बहुत अधिक वेंटिलेशन, दोनों की स्थिति है कि हृदय समारोह में बदल जाएगा सांस की क्षारमयता को बढ़ावा मिलेगा। श्वसन दर के अनुकूलन का एक आसान तरीका माउस के श्वसन प्रयास से संकेत लेते हैं और सबसे कम श्वसन दर है कि anesthetized माउस से श्वसन प्रयास समाप्त उपयोग है।

पीवी पाश की एक महत्वपूर्ण विशेषताविश्लेषण हृदय समारोह के महत्वपूर्ण अवसाद के बिना संज्ञाहरण का पर्याप्त स्तर बनाए रखने के लिए है। वहाँ कई संवेदनाहारी शासनों कि सफलतापूर्वक पीवी पाश विश्लेषण करने के लिए लागू किया जा सकता हैं। inhalant और इंजेक्शन anesthetics: इन दो व्यापक श्रेणियों में विभाजित किया जा सकता है। इस बाद समूह के भीतर मिश्रण है कि इस्तेमाल किया जा सकता है की एक किस्म कर रहे हैं, हालांकि, इन मिश्रण के कई संभावित कार्डियो-अवसादग्रस्तता प्रभाव 19 है। इंजेक्शन कॉकटेल की, urethane आधारित anesthetics कम से कम कार्डियो-अवसादग्रस्तता प्रभाव 4,19 है। Urethane के लिए कर्मियों के जोखिम को सीमित करने के रूप में यह एक संदिग्ध कैसरजन 28 है ख्याल रखना। Isoflurane और sevoflurane वर्तमान में उपलब्ध inhalant संवेदनाहारी के एजेंट हैं। इन एजेंटों के दोनों शल्य चिकित्सा हेरफेर के लिए पर्याप्त मात्रा में कार्डियो-अवसादग्रस्तता प्रभाव है। महत्वपूर्ण बात है, साँस संवेदनाहारी एजेंट प्रभाव के लिए titrated जा सकता है। यह शल्य चिकित्सा की तैयारी और फिर एक कम Sedat दौरान एक उच्च एनाल्जेसिक खुराक की अनुमति देता हैहृदय समारोह को मापने के लिए Ive खुराक, इस प्रकार इन यौगिकों के कार्डियो-अवसादग्रस्तता प्रभाव को कम।

रक्तसंचारप्रकरण मापदंडों के सामान्य स्तर से नीचे हैं, वहाँ कई आम कारण होते हैं। पहले कम रक्त की मात्रा, खून की कमी या वाष्पीकरण के लिए माध्यमिक है। इस जटिलता आम तौर पर तरल पदार्थ प्रशासन अनुभाग 2.7 में उल्लिखित के साथ संबोधित किया है। की धारा 1.5 में वर्णित है, मुख्य शरीर के तापमान के रखरखाव के लिए भी रक्तसंचारप्रकरण समारोह के आकलन के लिए बहुत महत्वपूर्ण है। इस प्रकार सावधान निगरानी आवश्यक है, एक डिजिटल राय प्रणाली रिकॉर्डिंग के दौरान मुख्य शरीर के तापमान को बनाए रखने के लिए उपयोगी हो सकता है। यह सुनिश्चित करना कि संवेदनाहारी ठीक से माप चरण के दौरान कम हो गया है भी हृदय प्रदर्शन में सुधार का एक महत्वपूर्ण पहलू है।

मापने सिकुड़ना का लोड स्वतंत्र मापदंडों के पीवी पाश विश्लेषण के प्राथमिक लाभ में से एक है। वास्तविक समय दबाव और वॉल्यूम के एक साथ संग्रहUme डेटा दिल पर लोड की स्थिति बदलती के जवाब में रक्तसंचारप्रकरण परिवर्तन को मापने के लिए अद्वितीय क्षमता प्रदान करता है। इस विश्लेषण दिल की सिकुड़ा समारोह जहाजों की कार्रवाई से अलग किया जा सकता है। शिरापरक वापसी का रोड़ा के माध्यम से प्रीलोड में कटौती कई पशु मॉडल और आदमी 4,7,12-16,18,29-32 में सिकुड़ना का लोड स्वतंत्र उपायों का आकलन करने के लिए इस्तेमाल किया गया है। छोटे कृन्तकों में, यह प्रक्रिया एक वक्रीय अंत सिस्टोलिक दबाव मात्रा संबंध 4,31,33 में परिणाम है। कोरोनरी छिड़काव में कमी है कि नाटकीय रूप से सिस्टोलिक समारोह 34 में गिरावट accelerates से इस संभावना का परिणाम है। माउस में, 2 - पीवी की एक दाहिनी ओर शिफ्ट में कोमल पेट संपीड़न परिणामों के 3 सेकंड छोरों। यह दोनों afterload में वृद्धि हुई है और प्रीलोड 12 से परिणाम है। सिकुड़ा समारोह में वृद्धि में लंबे समय तक afterload परिणाम में बढ़ जाती है, एक घटना Anrep प्रभाव 35 बुलाया। हालांकिइन अध्ययनों में प्रयुक्त पेट संपीड़न से कम की अवधि इंगित करता है कि Anrep प्रभाव इस प्रक्रिया के साथ हृदय समारोह को प्रभावित नहीं करता। अन्य अध्ययनों में, कुत्तों में तीव्र महाधमनी कसना सिकुड़ा समारोह में वृद्धि करने के लिए प्रदर्शन किया गया है, लेकिन यह कम प्रणालीगत छिड़काव 36 के प्रभाव से परिणाम की धारणा थी। फिर अवधि और महाधमनी प्रवाह, यहाँ के रूप में वर्णित पेट संपीड़न से उत्पन्न व्यवधान की गंभीरता, काफी सिकुड़ा समारोह प्रणालीगत ऊतकों की हाइपो-छिड़काव करने के लिए माध्यमिक बढ़ाने के लिए पर्याप्त नहीं है। पीवी छोरों पेट संपीड़न द्वारा प्राप्त की विश्लेषण पीवी छोरों दुम रग कावा रोड़ा के बाद शीघ्र ही प्राप्त के साथ अच्छी तरह से संरेखित। साथ में, इन टिप्पणियों है कि क्षणिक पेट संपीड़न यहाँ वर्णित काफी दिल का सिकुड़ना में परिवर्तन नहीं करता प्रदर्शित करता है। इसके अलावा, इस प्रक्रिया के लिए एक व्यापक भाग गया पर दिल के निष्क्रिय गुणों का आकलन करने के लिए एक महत्वपूर्ण तरीका प्रदान करता हैअंत डायस्टोलिक संस्करणों के जीई।

लोड स्वतंत्र उपायों का विश्लेषण विशिष्ट पीवी के चयन के विश्लेषण में शामिल होने के लिए छोरों की आवश्यकता है। यह महत्वपूर्ण है कि यह एक प्रयोगात्मक डेटा सेट के पार लगातार किया जा सकता है। सकारात्मक दबाव वेंटिलेशन बाएं वेंट्रिकल 37 प्रीलोड की सांस निर्भर परिवर्तन के माध्यम से एक रक्तसंचारप्रकरण विरूपण साक्ष्य बनाता है। (- 4 सेकंड 3) इस विरूपण साक्ष्य से बचने के लिए, पीवी छोरों एपनिया का संक्षिप्त अवधि के दौरान एकत्र किया जाना चाहिए। वे दिल पर लदान में प्रयोगात्मक परिवर्तनों के बेहतर नियंत्रण प्रदान के रूप में श्वसन में रुक जाता है, विशेष रूप से उपयोगी होते हैं। यह एपनिया के इन अवधियों हाइपोवेंटिलेशन से बचने के लिए कम रखने के लिए महत्वपूर्ण है। प्रक्रियाओं इस पांडुलिपि में वर्णित दो अलग प्रक्रियाओं, दुम रग कावा रोड़ा और पेट संपीड़न, मोटे तौर पर एक ही समय में एकत्र से लोड स्वतंत्र डेटा इकट्ठा। इन दोनों प्रक्रियाओं से अलग छोरों संयुक्त और एक साथ विश्लेषण किया जाना चाहिएएर वे दोनों तहत एक ही दिल के समारोह उपाय के रूप में मोटे तौर पर, एक ही परिस्थितियों। वहाँ कई सिद्धांतों जब विश्लेषण के लिए छोरों के चयन पर विचार करने के लिए कर रहे हैं। arrhythmic धड़क रहा से बचें। एक गिरा हरा निम्नलिखित हरा हमेशा असामान्य रूप से बड़े है और समय से पहले की धड़कन असामान्य रूप से छोटे होते हैं; दोनों आंकड़ों के विश्लेषण को बाधित करेगा। धड़क रहा से बचें जहां दबाव घट रही है लेकिन मात्रा स्थिर है। ये दुम रग कावा का रोड़ा निम्नलिखित माउस में आम हैं और मायोकार्डियम के गरीब छिड़काव की संभावना माध्यमिक हैं। अंत में, धड़कता सीधे लदान में परिवर्तन के बाद से ही डेटा शामिल हैं; वसूली की अवधि के दौरान धड़कता संभावना दिल की लोडिंग की स्थिति के हेरफेर से उत्पन्न प्रणालीगत रक्तचाप में परिवर्तन करने के लिए माध्यमिक सहानुभूति तंत्रिका गतिविधि में परिवर्तन से प्रभावित हैं।

पीवी पाश विश्लेषण हृदय समारोह की एक अत्यंत विस्तृत मूल्यांकन प्रदान करता है। जब आनुवंशिक फ्लेक्स के साथ संयोजन के रूप में लागू कियाibility और माउस की कम लागत के आवास यह आणविक स्तर पर हृदय शरीर क्रिया विज्ञान का आकलन करने के लिए एक व्यावहारिक अर्थ प्रदान कर सकते हैं। वहाँ कई महत्वपूर्ण सीमाओं कि जब इन assays प्रदर्शन करने के लिए निर्णय लेने पर विचार किया जाना चाहिए रहे हैं। सबसे पहले, यह एक इनवेसिव प्रक्रिया है जिसमें चूहों anesthetized हैं, जो हृदय समारोह के महत्वपूर्ण पहलुओं को प्रभावित कर सकता है। इसके अलावा, पीवी पाश डेटा की व्याख्या डेटा और संभावित confounding चर के भीतर पैटर्न की पहचान करने के लिए हृदय शरीर क्रिया विज्ञान दोनों की एक विस्तृत समझ की आवश्यकता है। इसके अतिरिक्त, क्योंकि इन assays टर्मिनल हैं वे बार बार एक ही माउस का आकलन करने के लिए इस्तेमाल नहीं किया जा सकता। वेंट्रिकुलर मात्रा में पीवी कैथेटर से निकाली गई एमआरआई द्वारा प्रदान की संरचनात्मक वेंट्रिकुलर संस्करणों की तुलना में कम सटीक हो जाते हैं। यह आश्चर्य की बात नहीं पीवी कैथेटर एक सिलेंडर, जो स्पष्ट रूप से वेंट्रिकल की कुल मात्रा का एक अनुमान है के रूप में वेंट्रिकल मॉडल के रूप में है। असली ताकत एक उच्च fre पर इस मात्रा के बारे में जानकारी इकट्ठा करने की क्षमता हैquency, इस प्रकार वेंट्रिकुलर मात्रा में परिवर्तन की थाप-टू-हरा विश्लेषण की इजाजत दी।

संग्रह और माउस से पीवी आंकड़ों के विश्लेषण चुनौतीपूर्ण हो सकता है, लेकिन विधि हृदय समारोह में कहा कि किसी अन्य पद्धति के माध्यम से उपलब्ध नहीं है के बारे में जानकारी प्रदान करता है। यह प्रक्रिया हृदय समारोह का सबसे पूरा चित्र उपलब्ध प्रदान करता है और murine मॉडल में इसका उपयोग इस तरह के दिल की विफलता और विरासत में मिला cardiomyopathies के रूप में जटिल हृदय रोग राज्यों के आणविक आधार के निर्धारण के लिए एक महत्वपूर्ण मंच प्रदान करेगा। यह पांडुलिपि इस प्रक्रिया का प्रदर्शन का सबसे महत्वपूर्ण पहलुओं पर विस्तृत जानकारी प्रदान करता है। हालांकि, सभी जटिल प्रक्रियाओं की तरह, इस अभ्यास की आवश्यकता है microsurgical कौशल है कि सफलतापूर्वक इन प्रयोगों प्रदर्शन करने के लिए आवश्यक हैं बनाने के लिए।

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Acknowledgments

लेखक NHLBI (K08 HL102066 और R01 HL114832) से धन स्वीकार करना चाहते हैं।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Dumont 5/45 (2) Fine Science Tools 11251-33
Vessel Dilating Forceps Fine Science Tools 18153-11
Castroviejo Micro Dissecting Spring Scissor Roboz Instruments RS-5668
Octogon Forceps - Serrated/Curved Fine Science Tools 11041-08
Octogon Forceps - Serrated/Straight Fine Science Tools 11040-08
Dissector Scissors- Heavy Blade Fine Science Tools 14082-09
Transpore Surgical Tape 3M 1527-1
3-0 Silk Suture Fine Science Tools 18020-30
TOPO Ventilator Kent Scientific TOPO
Martin ME 102 Electrosurgical Unit Harvard Apparatus PY2 72-2484
Syringe Pump Lucca Technologies GenieTouch
Stereomicroscope with boom stand Nikon SMZ-800N
Thermocouple Thermometer Cole Parmer EW-91100-40
T/Pump Warm Water Recirculator Kent Scientific TP-700
ADVantage Pressure-Volume System Transonic ADV500
Data Acquision and Analysis DSI Ponemah ACQ-16

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फिजियोलॉजी अंक 111 दबाव मात्रा लूप्स, माउस कार्डिएक फिजियोलॉजी सिकुड़ना वेंट्रिकुलर लोड हो रहा है
मापने माउस में दबाव माप लूप्स
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Townsend, D. Measuring Pressure… More

Townsend, D. Measuring Pressure Volume Loops in the Mouse. J. Vis. Exp. (111), e53810, doi:10.3791/53810 (2016).

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