간 전이 절제 후 종양 재발률이 높은 것은 해결되지 않은 문제로 남아 있습니다. 예시된 마우스 모델은 이러한 재발의 이유를 조사하는 데 유용할 수 있습니다. 간 절제 모델과 간내 종양 세포 주입을 최초로 결합합니다.
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이 논문에서
요약
초록
전이성 간 병변의 절제 후 종양 재발의 높은 발생률은 미해결 문제로 남아있다. 일상적인 임상 영상에 의해 검출하지 않은 작은 종양 세포 예금은, 간 절제술 후 간 재생 인자에 의해 자극 될 수있다. 이 요인은 종양 재발에 중요한있는, 그러나 완전히 명확하지 않다.
제시된 마우스 모델 간 절제술 후 재발 성 악성 병변의 발달에서 중요한 역할을하는 메커니즘을 탐구하는 데 유용 할 수있다. 이 모델은 생쥐의 간 조직 제거 및 (주사) 종양 유도의 정의 양의-수행하기 쉬운 재현 기술을 결합합니다. 동물은 단일 개복술, 30 %의 간 절제술, 또는 70 %의 간 절제술 중 처리 하였다. 모든 동물은이어서 나머지 간 조직으로 종양 세포 주입을 받았다. 관찰 2 주 후, 간 종양 크기와 중량을 평가 하였다면역 조직 화학에 의해 조사 하였다.
70 %의 간 절제술 후 종양 부피 및 중량을 크게 단독 개복술 (p <0.05)과 비교하여 증가 하였다. 또한, 면역 조직 화학 (사료된다)를 절제 군에서 증가 된 종양 증식률 (p <0.05).
이러한 결과는 간내 종양 성장 간 재생 메커니즘의 영향을 보여준다. 조직 학적 정밀 검사 또는 RNA 분석 등의 방법으로 결합 된 설명 마우스 모델은 간에서 종양 성장 및 전이 재발에 관여하는 다른 요인 규명을위한 기반이 될 수 있습니다. 포스트 간절 전이의 환경에서 특정 문제를 탐색 할 때 술 관찰의 길이와 같은 변수들의 상당수는 주사 또는 주입 및 간 절제술의 타이밍에 사용되는 세포주는 멀티 앵글을 제공한다. 이 절차의 제한은 프입니다thorization 적절한 동물 실험 시설 및 특정 장비의 취득에 동물 절차, 액세스를 수행 할 수 있습니다.
서론
대장 암 (CRC)은 모든 악성 종양의 약 9 %를 차지한다. 그것은 미국과 전 세계 두, 세 번째 가장 흔한 암이다. 30 만에서 CRC 범위에서 글로벌 사망률은 1 년 당 50 만 이상합니다. 환자의 20 %는 대장 종양의 발견에 간 전이 고통. 절제 전이는 일반적으로 부분 간 절제술의 2,3에 의해 처리된다. 개선 된 수술 기법, 새로운 복합 전략과 절제 전이의 새로운 정의는 환자 4의 증가에 대한 가능한 부분 간 절제술의 치료를 렌더링합니다.
보조 간 악성 종양의 재발은, 그러나, 현대 위장 수술에 도전 임상 적 후유증이다. 간 전이 절제술을 시행 CRC 환자는 자신의 남은 간 5에서 새로운 종양을 개발의 30 ~ 50 %의 확률. 따라서,에 대한 추가 연구가 요구된다간 전이의 재발에 관여하는 메커니즘.
약 70 %의 간 절제술은 일반적으로 나머지 간 조직에서 몇 주 내에 보상된다. 이 재생이 성장 인자 베타 (TGF-β), 혈관 내피 성장 인자 바뀌는 인터루킨 6 (IL-6), 종양 괴사 인자 알파 (TNF-α), 간세포 성장 인자 (HGF) 등의 사이토 카인을 포함한 여러 메커니즘을 수반 (VEGF ....
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프로토콜
바바리아, 독일의 미텔 프랑켄 현 정부는, 설명 된 절차에 대한 권한을 부여. 유사한 실험은 적절한 당국의 사전 승인이 필요합니다.
주 : 다음 매뉴얼 따라서 표시된 그룹 A와 그룹 B에서 남아있을 필요 C. 단계 이전에 논의 된 그룹 A를 위해 사용될 수있다.
1. 준비
- 장갑 착용 현미경 아래에있는 폴리스티렌 패드를 배치하고 약간 패드 위의 영역에 렌즈를 초점을 맞 춥니 다.
- 멸균 시트 및 장소의 절반 폴리스티렌 패드이고 그것을 바로 옆에 나머지 절반을 분할합니다.
- 수술기구를 소독하고, 폴리스티렌 패드 옆에 멸균 시트에 배치합니다.
- 아치를 형성하는 많은 클립을 똑 바르게. 바로 옆에 동물의 머리가 거짓말을 어디에 - 거꾸로 그것을 켜고 상단에있는 폴리스티렌 패드로 키를 누릅니다.
- 두 사지 사이 기화기의 마우스 피스를 배치아치의. (그림 7)
- 동물의 머리가 거짓말을 할 장소에서 40cm에 대한 가열 램프를 설정합니다. 40 ° C를 초과하지 않는 폴리스티렌 패드의 수준에서 반드시 열을 만든다.
- 운영 동물에 대한 별도의 케이지를 준비합니다.
- 플렉스 튜브에 종양 세포의 정의 된 양의 부피 (5....
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결과
우리의 특정 실험에서, 우리는 30 무 흉선 누드-foxn1nu / 뉴 쥐를 포함. 이들은 중간 개복술 (식염수 50 μL에 용해) 500,000 MC38 종양 세포의 종양 세포 주입을 수신하고,이어서 70 %의 간 절제술, 30 %의 간 절제술 또는 추가적인 개입 하나로 처리 하였다.
십사일 후, 나머지 간 거의 완전한 재생이 30 % 또는 70 % 간 절제술을 다음 관찰되었다 (30 % 간 절제술 그룹의 간 비대 색인은 70 % 간 절제술 그룹에서 0.8 대 1.06이었다).
하나의 개복술 후 간내 종양의 평균 무게는 332 밀리그램 (: 10-608 mg의 범위)이었다. P & #와 70 % 간 절제술 후 : 30 % 간 절제술 대 961.......
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토론
설치류에서 수술을 수행 이전 실험 바이어스를위한 소스로 봉사 할 수 있었다 특정 변수를 식별 할 수 있었다. 안전하고 유효한 결과를 얻기 위해, 다음과 같은주의 사항을 고려하십시오.
일상적인 사전 연산 금식 간 재생 (13, 14)를 억제 할 수 간 지방증 (12), 발생할 수 있습니다. 그것은 따라서 사용하지 않는 것이 좋습니다. 간세포의 가장 높은 유사 분열 활동은 하루 15에 걸쳐 변화한다. 가능한 경우, 모든 그룹에 대해 하루 동안 특정 시간에서의 절차를 수행. 쥐의 간 재생 4-6 주 된 동물에 가장 효과적이다. 연령 10 개월 이상 동물은 크게 재생 용량 (16)을 감소 있습니다. 편견의 가능성을 최소화하기 위해 실험 동일 인종, 성별과 연령의 쥐를 사용한다. 무균 환경에서 작업이 같은 개방 과정에서 일반적으로 중요하다. 특히 athymi 같은 면역 생물에 조기 사망 또는 편향.......
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공개 사항
저자는 공개할 것이 없습니다.
감사의 글
특별 감사는 기술적 인 질문에 그의 도움 박사 벤자민 Motsch로 이동합니다. 저자는 또한 멀티미디어 지원을 위해 박사 마커스 Forschner 및 BIRK 뮐러을 인정하고 싶습니다, 그녀의 편집 전문 지식에 대한 에리카 Magelky 리사 호르 눙 박사 롤랜드 Jurgons 모든 프란츠 - Penzoldt-센터, 대학 교수 스테판 폰 Hörsten ( 동물의 취급 및 관리에 자신의 전문성에 대한 에를 랑겐). 우리는 MC38 종양 세포를 제공하기위한 임상 화학 연구소, 하이델베르크, 독일 대학의 의학 교수 만하임 교수 마이클 Neumaier 감사합니다.
본 작품은 학위 취득에 대한 요구 사항의 이행을 수행 하였다 박사는 "의대를." 프리드리히 - 알렉산더 - 대학 에를 랑겐 - 뉘른베르크 (FAU)에서.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Equipment | |||
| Operation Microscope | Zeiss | OPMI-1 FC S21 | |
| Induction Cage (Plexiglas Box) | UNO BV, 네덜란드 | 180000132 | |
| 유량계 + 연결 키트 | UNO BV, 네덜란드 | 180000008 | |
| UNO 기화기 Sigma Delta | UNO BV, 네덜란드 | 180000002 | |
| 마취 용 키 필러 | UNO BV, 네덜란드 | 180000010 | |
| 활성탄 필터 흡착기 | UNO BV, 네덜란드 | 180000140 | |
| 가스 배기 장치 | UNO BV, 네덜란드 | 180000118 | |
| 마우스 용 안면 마스크 | UNO BV, 네덜란드 | 180000065 | |
| 기화기 스탠드 | UNO BV, 네덜란드 | 180000006 | |
| 히트 램프 | Physitemp Instruments | HL-1 | |
| 스티로폼 패드 | RAYHER | 30074000 | |
| 세 번째 손 도구 | TOOLCRAFT | ZD-10F | |
| 정밀 저울 | Kern | EW 220-3NM | |
| 저울 | Kern | EMB 500-1 | |
| 슬라이딩 캘리퍼스 | MIB | MIB 82026100 | |
| 미세 해부 집게 | Braun/Aesculap | BD195R | |
| 미세 해부 가위 | Braun/Aesculap | FD100R | |
| 미세 해부 바늘 홀더 | Braun/Aesculap | BM563R | |
| 견인기 | 미세 과학 도구(FST) | 번호 17001-0 | 유형 : Bowmann |
| Clamp | Braun / Aesculap | BJ002R | |
| Name < / strong > | Company < / strong > | < strong>카탈로그 번호 < / strong > | Comments< / strong > |
| < strong >Expendable Items < / strong> (참고 : 수량은 동물 및 절차 당입니다) | |||
| 폴리오드레이프 멸균 커버(45cm x 75cm) | Hartmann | 2775001 | |
| 멸균 면봉(2x) | Hartmann | 4700151 Peha | |
| 멸균액(0.9% NaCl) | 브라운 | 3570310 | PZN=04454809 |
| 소독제(Softasept - 250ml) | 브라운 | 3887138 | PZN=0762008808505018 |
| 2 x 1ml 주사기(Injekt-F) | Braun | 9166017V | |
| 26 G 캐뉼라 (Sterican) - Carprofen 주사용 | Braun | 4665457 | |
| 30 G 캐뉼라 (Sterican) - 종양 주사용 | Braun | 4656300 | |
| Caprofen (=Rimadyl) | Pfizer | QM01AE91 | |
| Metamizole (= Novaminsulfon) | Ratiopharm | 16543.00.00 | |
| 4-0 Vicryl 봉합사 | Ethicon | J835G | |
| 5-0 프롤렌 봉합 | 사 Ethicon | 8618G | |
| SafeLock Flex-Tube 1.5 ml | Eppendorf | ||
| 4 x 4 거즈 스폰지 | Kendall/Covidien | UPC: 728795135355 | ASIN: B005BFQTWM |
| 대형 클립 | ACCO | A7072510G | |
| Name | Company | 카탈로그 번호 | Comments |
| Animals | |||
| Female athymic nude-foxn1nu/nu | Harlan Laboratories BV | 코드 069 |
참고문헌
- Haggar, F. A., Boushey, R. P. Colorectal cancer epidemiology: incidence, mortality, survival, and risk factors. Clin. Colon Rectal Surg. 22, 191-197 (2009).
- Fong, Y., et al. Liver resection for colorectal metastases. J. Clin. Oncol. 15,....
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재인쇄 및 허가
