Мы опишем метод шаг за шагом выполнения прямых пульпы на мышах зубов для оценки пульпарного заживления раны и формирования репаративного дентина в естественных условиях.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Развитие прямого Pulp-укупорки модель для оценки пульпозного ранозаживляющим и Репаративная дентина Формирование у мышей
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Зубная пульпа - это жизненно важный орган зуба, полностью защищенный эмалью и дентином. Когда пульпа подвергается воздействию из-за кариесогенных или ятрогенных повреждений, ее часто закрывают биосовместимыми материалами, чтобы ускорить заживление пульпозной раны. Конечная цель состоит в том, чтобы регенерировать репаративный дентин, физический барьер, который функционирует как «биологическое уплотнение» и защищает подлежащую ткань пульпы. Несмотря на то, что эта процедура прямого удаления пульпы уже давно используется в стоматологии, молекулярный механизм заживления пульпозной раны и образования репаративного дентина до сих пор плохо изучен. Чтобы индуцировать репаративный дентин, укупорка пульпы была проведена экспериментально у крупных животных, но в меньшей степени у мышей, предположительно из-за их небольших размеров и вытекающих из этого технических трудностей. Здесь мы представляем подробный, пошаговый метод выполнения процедуры укупорки пульпы у мышей, включая подготовку полости, подобной полости класса I, размещение материалов для укупорки пульпы и процедуру реставрации с использованием стоматологического композита. Наша модель мышей с крышкой пульпы будет играть важную роль в исследовании фундаментальных молекулярных механизмов заживления пульпозной раны в контексте репаративного дентина in vivo, позволяя использовать трансгенных или нокаутных мышей, которые широко доступны в исследовательском сообществе.
Введение
Кариес зубов является одним из наиболее распространенных заболеваний полости рта и основной причиной хирургических вмешательств в зубные ряды почти у всех людей1,2. Прогноз хирургических вмешательств и реставраций зуба во многом зависит от правильной реакции пульпы и успешного заживления раны. Действительно, кариес, который проникает глубоко через эмаль и дентин, часто приводит к обнажению подлежащей пульпы, которая часто «закрыта» стоматологическими материалами, такими как гидроксид кальция (Ca(OH)2) или гидравлические кальциево-силикатные цементы (HCSC), включая минеральные триоксидные агрегаты (MTA). Конечной целью такой процедуры укупорки пу....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Мыши были приобретены у Jackson Laboratory и хранятся в патогена вивария в UCLA Отдел лабораторных животных медицины (DLAM). Эксперименты проводились в соответствии с утвержденными институциональными руководствами Исследовательского комитета канцлера животных (ARC # 2016-037).
1. Мышь обезболиванием
- Используйте восемь-недельных самок мышей C57 / НД6 (п = 3).
- Обезболить мышей с использованием растворов (5 мг / кг веса мыши) кетамином (80-120 мг / кг веса мыши) / ксилазина и управлять внутрибрюшинно (IP) в дозе 10 мл / кг.
- Приготовьте кетамином (80 - 120 мг / кг) / ксилазином (5 мг / кг) растворы и вводить их внутрибрюшинно (IP) в....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Здесь мы показали процедуры шаг за шагом выполнить покрытие пульпы на мышах зубов. Одним из ключевых аспектов пульпы у мышей должна иметь соответствующее устройство. В связи с этим, имея микроскопа с 10 - кратным увеличением мощности является существенным (Фиг.1А). Чтобы создать класс-I-подобный препарат в зуб, мы использовали ¼ круглый заусенцев в электрической высокой скорости наконечник при 200000 оборотов в минуту (рис 1В). В качестве альтернативы, л.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
В настоящее время существует несколько различных экспериментальных моделей , доступных для проверки эффектов в естественных условиях стоматологических материалов, строительных лесов, или факторов роста на одонтогенного дифференциации зубных стволовых клеток пульпы (DPSCs) 13. Эти модели включают в себя внематочной аутологичной трансплантации DPSCs в орган, такой как капсулу почки или подкожное трансплантацию DPSCs в иммунодефицитом мышей с подмостей 14,15. Тем не менее, эти методы ограниче.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторам нечего раскрывать.
Благодарности
Это исследование было поддержано R01DE023348 (RHK) из NIDCR / NIH и Научно-исследовательского гранта факультета (RHK) из Совета по научным исследованиям ученого Сената Лос-Анджелеса отделения Калифорнийского университета.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Стереомикроскоп BM-LED | MEIJI Techno | Microscope | |
| Optima MCX-LED | Bien Air Dental | 1700588-001 | Электромоторный двигатель |
| изофлуран | Henry schein | health NDC 11695-0500-2 | |
| 1/4 круглый бор | Brasseler | 001092T0 | |
| Эндодонтический K-файл | Roydent | 98947 | |
| ProRoot MTA | Dentsply | PROROOT5W | MTA |
| Paper point | Henry schein | 100-3941 | |
| Ultra-Etch | Ultradent product Inc. | Кислотный травитель | |
| OptiBond SoloPlus | Kerr | 29669 | Клеи |
| Coltolux LED | Coltene/whaledent Inc. | C7970100115 | Отверждаемый световой блок |
| Характеризация тонировки | Bisco | T-14012 | Текучий композитный |
| Skyscan | Breuker | 1275 | uCT сканер |
| Microm | Thermo | HM355S | Microtome |
| Hematoxyline-1 | Thermo Scientific | 7221 | |
| Eosin-Y | Thermo Scientific | 7111 | |
| Cytoseal 60 | Thermo Scientific | 8310-16 | Монтажное решение |
Ссылки
- Dye, B., Thornton-Evans, G., Li, X., Iafolla, T. Dental caries and tooth loss in adults in the United States, 2011-2012. NCHS Data Brief. (197), 197(2015).
- Bagramian, R. A., Garcia-Godoy, F., Volpe, A. R. The global increase in dental caries. A pending public health crisis. Am J Dent<....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
