이 논문은 근막 상복부 자유 피판을 들어 올려 쥐의 목으로 옮기는 데 필요한 단계를 설명합니다.
이 논문에서
요약
초록
Free tissue transfer는 1970년대 이후 임상 실습에서 점점 더 많이 사용되어 종양 제거, 외상, 감염, 기형 또는 화상으로 인한 복잡하고 치료할 수 없는 결함을 재건할 수 있습니다. 자유 피판은 머리와 목, 손, 발 및 회음부와 같은 매우 복잡한 해부학적 영역을 재구성하는 데 특히 유용합니다. 또한, 자유 조직 이식 분야의 기초 및 중개 연구는 임상적 잠재력이 큽니다. 그럼에도 불구하고, 외과 수련의와 연구자들은 수술 절차와 관련된 기술적 측면에 대한 정보가 부족하기 때문에 조직 이식의 미세수술 모델을 사용하는 것을 종종 단념합니다. 이 논문의 목적은 쥐의 목에 근막 상복부 자유 피판을 이식하는 데 필요한 단계를 제시하는 것입니다.
이 피판은 각각 대퇴 동맥과 정맥에서 시작하여 배출되는 표재성 상복부 동맥과 정맥을 기반으로 합니다. 평균적으로 표재성 상복부 정맥의 구경은 0.6-0.8mm이며, 표재성 상복부 동맥의 0.3-0.5mm와 대조를 이룹니다. 조직학적으로 피판은 피부(표피 및 진피), 지방 조직층(panniculus adiposus), 줄무늬 근육층(panniculus carnosus) 및 느슨한 유륜 조직층을 포함하는 조직의 복합 블록입니다.
간단히 말해서, 상복부 피판은 척추경 혈관에서 올라간 다음 외부 경정맥과 쥐 목의 복부 표면에 있는 경동맥으로 문합됩니다. 우리의 경험에 따르면, 이 모델은 목 부위로 옮겨진 상복부 피판의 약 70-80%의 완전한 생존을 보장합니다. 플랩은 육안 검사로 필요할 때마다 평가할 수 있습니다. 따라서 저자는 이것이 미세수술 연구 및 훈련을 위한 좋은 실험 모델이라고 믿습니다.
서론
무료 조직 전송은 점점 1970 1-5 실종 조직을 재구성하기 위해 임상에 사용되고있다. 이는 종양 적출술, 외상, 감염, 기형이나 화상 1-7으로 인한 복잡하고, 그렇지 않으면 치료가 결함의 재건을 허용했다. 이런 종류의 무료 플랩은 머리와 목, 손, 다리들, 그리고 회음부 1,4처럼 매우 복잡한 해부학 적 영역을 재구성 특히 유용하다.
그러나, 오늘은 수술 연수생은 자주 제기 전송 및 미세 수술 기법과 악기 8,9를 사용하여 무료 플랩을 insetting에 관련된 여러 단계의 복잡성에 의해 daunted된다. 또한, 널리 실력 microsurgeon 될 것이 허용되며, 동물 모델에서의 광범위한 실험 방법은 4,8-13 필수적이다.
또한, 기본 및 중개 연구무료 조직 전송 분야에서 큰 임상 전위 8,14-16이다. 그럼에도 불구하고, 연구자들은 자주 인해 수술 절차 4,8-14 관련된 기술적 측면에 관한 정보 부족으로 조직의 미세 수술 전달 모델을 사용 저지된다. 그것은 자주 조작 8,11,13,14,17,18을 유지하기 쉽고, 의무, 상대적으로 저렴 같이 쥐, 미세 수술 연구와 교육을위한 좋은 동물 모델이다.
몇몇 무료 뼈, 근육 및 피부 플랩 래트 18-24에서 설명되었지만, 프리 상복부 fasciocutaneous 플랩 널리 교시 9,12,13,18,25 목적을 위해 사용된다. 이 무료 플랩 어 첫 번째 Strauch 머레이에 의해 1967 년에 기술되었다 인해 여러 가지 요인, 기증자의 영역, 즉 일정한 혈관 해부학, 해부의 상대적 용이성, 상당한 영양 혈관, 피부의 중복에, 그 이후로 인기를 증가 얻고있다무형 문화 유산은 플랩의 고도 4,9-11,13,17,18,25-28에서 발생하는 결함의 기본 폐쇄 할 수 있습니다.
플랩 해부학과 조직학
상복부의 플랩은 표면 상복부 동맥 및 정맥 (그림 1)에 의해 제공됩니다. 이 선박에서 발생한 각각 대퇴 동맥과 정맥에 드레인. 평균적으로 피상적 상복부 혈관의 구경 (그림 2) 17, 18 피상적 인 상복부 동맥의 0.3 ~ 0.5 mm 대조, 0.6 ~ 0.8 mm이다. 측면과 차례로 상복부 지역의 외피의 대부분을 공급하는 모세 혈관 네트워크를 발신, 여러 번 나누어 내측 지점 : 피상적 상복부 동맥 두 가지 주요 지점을 제공합니다. 이러한 모세 혈관은 (그림 2) 13,17,18 동맥 트리 병렬 과정을 피상적 상복부 정맥의 지류로 배출. 그림 3 재에도상복부의 플랩에 동원 할 수있는 피상적 인 상복부의 선박에 의해 공급되는 ventrolateral 복부 벽의 영역을 제공합니다. 이 플랩의 길이는 최대 5cm, 폭 13,17,18에서 3cm 될 수 있습니다.
조직 학적으로, 플랩은 ventrolateral 복벽 근육 (그림 4) 13,17,18를 덮고있는 외피로 구성되어있다. 그것은 진피와 표피에 의해 형성된 피부의 표면 층을 포함하고 있습니다. 피부 아래에 adiposus panniculus라는 지방 조직의 층이있다. 이 층 아래 panniculus의 카르노 서스 18,28,29로 알려진 횡문근의 또 다른 층이있다. panniculus의 카르노 서스 아래 큰 복부 근육을 덮고있는 깊은 근막에 피상적이고 느슨한 유륜 조직이있다. 따라서, 플랩이 깊은 근육 근막을 제외한 모든 층을 포함하는 복합 조직의 블록이다 (도 5) (1)3,17,18,27-31.
프로토콜
동물 주제와 관련된 모든 절차는 기관 동물 관리 및 사용위원회와 윤리위원회 노바 대학 의과 대학, 리스본, 포르투갈 (08 / 2012 / CEFCM)에 의해 승인되었다.
1. 수술 셋업 노트
- 250g (350)에 무게 성인의 Wistar 쥐를 사용합니다.
- 수술 7 일 전에 12 시간 명암주기 음식과 물 광고 무제한으로 쥐를 유지합니다.
- 필요한 마취 량을 측정하기 위해서 래트를 체중.
- 수술 전에 수술 도구를 압력솥.
- 레이아웃 모든 수술 용품 및 악기 절차 (재료의 표 참조)이 필요했다.
- 종래의 미세 수술기구를 사용하여 동작 현미경 수술을 수행한다.
- homeothermic 담요, 직장 프로브 및 열 램프를 배치합니다.
- 수욕은 가온 0.9 % 식염수를 함유 한 20 ㎖의 멸균 된 유리 병을 놓고37 ºC.
- 알콜 용액으로 운영 설정의 모든 표면을 소독 멸균 장갑을 착용 할 것. 장갑을 제거합니다.
- 스크럽 모자와 마스크를 놓습니다.
- 물과 비누로 손을 소독 및 멸균 장갑의 또 다른 한 쌍을 착용하십시오.
- 무균 수술 가운을 착용 할 것.
2. 마취 및 피부 준비
참고 : 무균 가운으로, 다음의 네 단계와 조수의 도움을 가지고와 장갑을 착용한다.
- 복강 주어진 케타민 및 디아제팜의 혼합물로 생쥐를 마취. 투여 량은 5 ㎎ / ㎏의 케타민 및 0.25 ㎎ / ㎏ 디아제팜이다. 발가락 핀치에 의해 전체 절차 8,14,15,32을 통해 호흡 속도의 준수에 의해 마취의 깊이를 판단.
- 각막 마모를 방지하기 위해 눈의 앞쪽 표면 안과 겔을 적용합니다.
- 제모 크림과 함께 복부의 복부 표면에 머리를 제거합니다. 머리 remov 후알은 따뜻한 식염수로 제모 크림을 제거합니다.
- 수술 부위를 통해 알콜 용액을 상당량 살포. 수술 부위에 제품을두고 닦아하지 않습니다. 적어도 15 초를 기다립니다. 응용 프로그램을 3 회 반복합니다. 수술을 진행하기 전에 최소 2 분의 접촉 시간을 떠난다. 다른 연구 단위는 수술 부위에 감염을 방지하기 위해 다른 프로토콜을 사용한다.
- 멸균 장갑을 착용, 쥐의 양쪽에 2 외과 드레이프를 놓습니다.
3. 기증자 사이트 수술
- 길이 약 5 cm이고, 3cm 폭을 범위의 상복부 플랩의 경계를 설정합니다.
- 외과 피부 마커를 사용하여 쥐의 복부의 복부 표면에 중간 선을 표시하기 위해, 치골에 흉골의 칼 모양의 과정에서 선을 그립니다.
- 외과 피부 마커를 사용하여 쥐의 왼쪽에, 첫 번째 줄에 두 개의 수직 선을 그릴 :에전자 흉부 케이지에 바로 꼬리 건너, 후자와 사타구니 배에 불과 두개골에 평행 한 또 하나, (그림 3, 6).
- 정중선과 떨어져에서 3cm의 주위에 평행 한 선을 가진 외과 피부 마커 횡 절개를 표시합니다.
- 플랩 수확
- panniculus의 카르노 서스 층에 도달 할 때까지 다수의 15 메스 블레이드 피부를 절개.
- panniculus의 카르노 서스면에 더 깊은, 근육 근막에 도달 할 때까지 전기 소작으로 절개를합니다.
- 플랩의 척추 경을 노출 횡 방향하는 내측에서 플랩을 올리고 뇌에서 꼬리에.
- 조심스럽게 결찰 및 천공 혈관이 깊은 근육 층에서 올라오고 플랩의 깊은 표면에가는 나눕니다.
- 플랩의 꼬리 측면에서 트랙터를 놓고 조심스럽게 괴롭 히고에 의해 조심스럽게 플랩의 척추 경을 해부멀리 느슨한 주위 조직 (그림 7).
- 결찰 및 외측 대퇴 곡절 동맥을 분할하고 합자에 대한 9/0 나일론을 사용하여 정맥.
- 대퇴 동맥과 정맥을 분리합니다. 존재하는 경우, (9/0 나일론을 사용하여) 결찰 및 인접 근육이 혈관의 가지를 나눕니다.
- 첫째, 대퇴 정맥의 근위 측면을 고정하는 이중 혈관 클램프를 사용합니다. 다음의 말단 부분을 클램프. 그런 다음, 대퇴 동맥의 말단 측면과 마침내 근위 측면을 클램프.
- 상기 대퇴 동맥의 말단 측면과 마침내 근위 측면을 클램프.
- 피상적 인 상복부 정맥의 단일 혈관 클램프 및 표면 상복부 동맥에 다른 하나를 놓습니다. 각각 자신의 기원과 종료에 표면 상복부 동맥과 정맥을 잘라 바로 미세의 가위를 사용합니다.
- 풍부하게 헤파린 생리 식염수 10 IU / ml의 이러한 혈관의 내강을 관개아무 혈액이나 파편은 선박 '루멘 (33) 안에 표시되지 않을 때까지.
- 당겨 혈관 섹션 사이트에 가까운 외막의 커프 트림.
- 애디슨의 집게 (그림 8)를 사용하여 목에 상복부 플랩을 전송합니다.
- 표피 하과 기증자 사이트를 닫기 5/0 흡수 바늘을 중단.
- 중단 5/0 나일론 바늘로 피부를 닫습니다.
4.받는 사이트 수술
- 받는 사이트 선박의 노출
- 외과 피부 마커를 사용하여 왼쪽 흉쇄 (SCM) 근육의 내측 경계 위에 선을 그립니다.
- 외과 피부 마커를 사용하여 즉시 두개골 다른 선을 그리고 왼쪽 쇄골에 평행. 이 두 라인은 왼쪽 흉쇄 관절에 수렴해야합니다.
- 번호 15 메스 블레이드를 사용하여 피부를 절개.
- subcutaneou을 극복하기 위해 전기 소작을 사용하여의 조직.
- 는 SCM 근육에 측면 외부 경정맥을 해골로 가위를 해부 한 쌍을 사용합니다.
- 격리이 (그림 9)에서 외부 경정맥의 지류를 결찰.
- 단지 9/0 나일론 봉합사와 하악 아래 외부 경정맥을 결찰.
- 후자 내고 아래에 하나의 정맥 클램프를 놓고 직선 미세의 가위를 사용하여 정 맥 외부 경정맥을 절단.
- 10 IU / ml의 농도에서 헤파린 생리 식염수로 정맥의 루멘을 씻으십시오.
- 는 SCM 근육의 중간 마진을 분리함으로써 경동맥과 미주 신경 (그림 10) 노출 측면이 근육을 수축.
- 전기 소작을 사용하여 SCM 근육의 중간 세 번째에 가로 절개를합니다.
- 는 SCM 근육의 깊은 표면과 스트랩 근육 사이의 트랙터를 놓습니다.
- 경동맥에서 미주 신경을 멀리 애타게동맥, 돌보는는 이러한 구조를 손상하지.
- 혈관 문합
- 경동맥에 두 번 동맥 클램프를 놓습니다.
- 경동맥의 측면 측면에서 9/0 나일론 스티치를 배치하고, 혈관 벽의이 부분을 당겨이 스티치를 사용합니다.
- 용기 벽의이 영역에 개구를 생성하기 위하여 미세 직선 위의 쌍을 사용한다.
- 10/0 나일론 봉합사는 플랩의 표면 상복부 동맥과 최근에 만든 경동맥 개방의 수준에서 경동맥 사이에 termino - 측 문합 수행 중단 사용.
- 외부 경정맥의 근위 그루터기와 표면 상복부 정맥 접근이 두 혈관의 구경을 검사합니다.
- 크기의 차이가 중간에 약간의 경우, 팽창 집게를 사용하여 표면 상복부 정맥의 절단 끝의 루멘을 팽창.
- 구경 차가 매우 포르노 인 경우ounced는 포셉 팽창 이외에 30 ~ 45 °의 각도에서 표면 상복부 정맥 끝 베벨.
- 사용하여 정맥 문합을 수행는 11/0 나일론 봉합사를 중단.
- 플랩의 혈관에 배치 된 하나의 클램프를 제거합니다.
- 대퇴 정맥에 위치 더블 클램프를 제거합니다.
- 대퇴 동맥에 위치 더블 클램프를 제거합니다.
- 문합의 개통과 역량을 평가
- 플랩의 동맥과 정맥이 완전히 팽창하고 유의 한 출혈이 혈관 클램프 (그림 11)를 제거의 3 분 후에 관찰되지 않은 경우 확인합니다.
- 이 기간 동안 출혈되면 문합을 통해 촉촉한 식염수 거즈를 배치하고 부드러운 압력을 적용합니다.
- 문합에서 출혈 3 분 후 중지하지 않는 경우, 필요에 따라 나일론, 혈관 클램프 배치 후 봉합을 중단 11/0 추가 추가 할 수 있습니다.
- 따뜻한 식염수에 적신 거즈로 목 혈관에 연결하고 포장 플랩으로 10 분을 기다립니다.
- 플랩의 관류과 목에 상처 지혈을 평가합니다. 출혈, 혈전증 또는 과도한 견인의 징후에 대한 문합을 검사합니다.
- 5/0 표피 하 중단 된 봉합사로 시작하는받는 사이트의 플랩을 고정합니다.
- 나일론 봉합사를 중단 5/0로 피부 (그림 12)를 닫습니다.
- 플랩의 동맥과 정맥이 완전히 팽창하고 유의 한 출혈이 혈관 클램프 (그림 11)를 제거의 3 분 후에 관찰되지 않은 경우 확인합니다.
5. 수술 후 케어
- 오른쪽 측면 욕창 위치에 개별 케이지 안에 복구 할 수있는 쥐를 남겨주세요. 아래 낮은 설정 전기 열 패드를 배치하여 새장을 따뜻하게 유지. 케이지와 고열을 방지하기 위해 전기 열 패드 사이의 빛 천을 놓습니다.
- 시계는 흉골 드러 누움을 재개 할 때까지 동물 지속적으로 반대 측와위로 매 5 분을 돌려 ambulate 할 수있다.
- 하우스 개별적으로 쥐 제거 t까지그는 2 주 수술 후 수술 바늘.
- 수술 후 통증에 대한 항 염증 약물 1 밀리그램 / 수술 후 3 일 동안 kg 피하 하루에 한 번을 부여합니다.
6. 플랩 평가
- 쥐의 머리 위에 음식 대접을 제시하고 육안 검사에 의해 플랩의 생존 능력을 평가합니다.
- 노출 이전 단계를 사용하여 부족한 경우, 플랩을 검사하는 동안 조수가, 쥐의 견갑골 영역을 통해 부드러운 터치를 적용해야합니다.
- 트루 히요 등에 의해 상세히 설명 된 바와 같이 정량적으로, 상처 열개, 플랩 표피, 충혈, 혼잡 및 / 또는 괴사의 영역을 평가하기 위해 디지털 사진 및 ImageJ에 소프트웨어를 사용합니다. 15.
결과
미세 과정의 맥락에서 연구 목적을 위해 모두 무료로 조직 전송의 모델로 상복부 무료 플랩을 사용하여 10 년 이상의 저자의 경험에 따르면, 플랩 생존의 속도는 외과 의사의 민첩성과 경험에 다소 의존 . 전술 한 기술적 인 측면을 고려하는 경우 일반적으로, 거의 전체 생존율 (<플랩 괴사 10 %) 플랩의 약 70 %는 예상 할 수있다. 플랩의 약 10 %는 부분적인 괴사 (10 내지 50 %)을 제시한다. 플랩의 약 20 %가 완전 괴사를 겪는다. 약 80 %의 전체 생존율은 저작 제 (DC) (도 13)에 의해 수행되는 절차를 지난 20을 얻었다.
수술 후 처음 두 일 동안 무료 상복부 플랩은 종종 부종과 정맥 울혈의 어느 정도를 제공합니다. 이러한 일반적으로 봇시간 가라 수술 후 점차 세 사이의 오일. 일반적으로 첫 주 동안 쥐들은 약간의 상처 열개의 분산 영역 (그림 14)의 결과로, 대부분의 외장 바늘과 표피 하 봉합의 일부를 제거합니다. 10 일 후, 머리를 천천히 플랩의 표면에 성장하기 시작합니다. 수술 후 첫 달의 끝에서, 플랩은 일반적으로 인접한 피부보다 약간 짧은 모발에 덮여있다. 두 달 수술, 플랩의 존재는 약간의 덩어리에 의해 예고하고 플랩의 가장자리 주위에 상대적으로 눈에 띄지 않는 상처 (그림 14)입니다. 플랩의 자동 식인 풍습은 저자의 경험에서, 총 플랩 괴사의 경우에 거의 독점적으로 발생 드문 발견이다.
그림 1 : 상복부 무료 FLA의 혈관 해부학피.
이 사진은 이전에 동맥 시스템에 빨간색 라텍스 솔루션과 정맥 시스템의 블루 라텍스 용액을 주입 한 쥐의 왼쪽 상복부 영역을 보여줍니다. 상복부 영역이 표면 상복부 동맥 및 정맥 축 혈액 공급을받는 것을 관찰 할 수있다. 이 선박에서 발생한 각각 대퇴 동맥과 정맥에 드레인. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 2 : 상복부 무료 플랩에 미세 혈관의 혈액 공급을 나타내는 표면 상복부 선박의 부식 캐스트의 스캐닝 전자 현미경 이미지.
superfi의 부식 캐스팅이 주사 전자 현미경 이미지쥐의 인공 상복부 혈관은 정맥은 동맥이 더 큰 구경을 가지고 있음을 보여준다. 평균적으로 피상적 상복부 혈관의 구경은 피상적 인 상복부 동맥의 0.3 ~ 0.5 mm에 비해 0.6 ~ 0.8 mm이다. 측면과 차례로 상복부 지역의 대부분을 공급하는 모세 혈관 네트워크를 발신, 여러 번 나누어 내측 지점 :이 이미지는 또한 표면 상복부 동맥이 두 가지 주요 지점을 기원 것을 알 수있다. 이러한 모세 혈관은 동맥 트리 병렬 과정을 피상적 상복부 정맥의 지류로 배출. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 3 : 쥐의 왼쪽 상복부 무료 플랩의 잠재적 인 영역입니다.
이 그림의 파트 :피상적 인 상복부의 선박에 의해 공급되는 복부 벽의 영역을 변위량하고는 상복부 플랩에 동원 될 수있다. 이 플랩은 최대 길이 5cm, 폭 3cm로 할 수있다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 4 : 상복부 플랩의 hematoxilin - 에오신 염색 부분의 사진입니다.
상복부의 지역이 hematoxilin - 에오신 염색 섹션은 상복부 플랩이 복벽 근육을 커버이 지역의 외피로 구성되어 있음을 보여줍니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 5 : 상복부 플랩의 조직 학적 조성물.
우측의 사진은,이 플랩의 메이슨 트리 크롬의 부로부터 얻은 반면, 왼쪽 사진은 상복부 플랩의 hematoxilin 실린 - 에오신 염색 섹션을 나타낸다. 이 두 사진은 쥐의 상복부 플랩는 조직의 복합 블록 있음을 보여줍니다. 그것은 진피와 표피에 의해 형성된 피부의 표면 층을 포함하고 있습니다. 피부 아래에 adiposus panniculus라는 지방 조직의 층이있다. 이 층 아래 panniculus의 카르노 서스로 알려진 가로 무늬 근육의 층이있다. panniculus의 카르노 서스 아래에는 크고 깊은 복부 근육을 커버하는 깊은 근막이있다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 수술 전에 쥐의 복부 표면에 6. 수술 전 피부 표시.
이 사진은 왼쪽 상복부 플랩을 인상하고 이후 왼쪽 자궁 지역의 복부 측면이 플랩을 인세하는 데 사용되는 절개의 스킨 표시를 보여줍니다.
그림 7. 운영 현미경 (10X 배율)에서 상복부 플랩의 영양 혈관 외과 해부학.
이 사진은 피상적 인 상복부 동맥과 정맥에서 발생하는 각각 대퇴 동맥에 배수 및 정맥 보여줍니다. 측면 대퇴 곡절 동맥은 일반적으로 피상적 인 에피의 꼬리 측면에서 발생위 동맥. 측면 대퇴 곡절 정맥 비슷한 경로를 가지고 있으며, 일반적으로 표면 상복부 정맥에 종료됩니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 8의 영양 혈관에 유경 상복부의 플랩 생체 외 (피상적 인 상복부 동맥과 정맥 - A, V, 각각). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
의 그림 9. 운영보기목부 (6 배 확대)의 왼쪽에있는 수신자 정맥, 즉 외부 경정맥의 해부.
흉쇄 근육 외부 경정맥 측의 피하 과정을 관찰 할 수있다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
목 (10 배 확대)의 왼쪽에있는 그림 10. 기증자 동맥, 즉, 경동맥의 해부의 운영보기.
그림과 같이 동맥과 첨부 미주 신경은 흉쇄과 infrahyoid 근육을 수축 한 후 노출됩니다. t의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오그의 그림.
그림 운영 현미경 (10 배 확대)에서와 같이 플랩의 선박과 목에받는 사람 혈관의 혈관 문합 11. 사진.
이 사진은 경동맥과 피상적 인 상복부 동맥 사이의 termino-측면 문합을 보여줍니다. 표면 상복부와 외부 경정맥 사이 termino 말단 문합을 관찰하는 것도 가능하다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
쥐 immedi의 복부 측면의 그림 12. 사진 ately 수술 후.
기증자 영역은 쉽게 주로 닫혀 있는지 확인합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
20 연속 쥐 그림 13. 상복부 무료 플랩 생존은 첫 번째 저자 (DC)에 의해 동작.
다섯 쥐 (20 %)은 전체 플랩 괴사 (적색 점으로 표시 한 경우, 4, 8, 13, 15 등)를 제시했다. 트루 히요 등에 의해 상세히 설명 된 바와 같이 플랩 괴사 분야는 자유 소프트웨어 ImageJ에를 사용하여 측정 하였다. 15. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
14 "SRC ="/ 파일 / ftp_upload / 55281 / 55281fig14.jpg "/>
4, 14 60 일 수술 후 목의 복부 측면에 배치 된 상복부 플랩 (14) 사진 그림.
쥐가 바늘을 제거로 나흘 수술 후, 일반적으로 약간의 상처 열개있다. 그러나, 플랩은 일반적으로 장소에 남아 있습니다. 간단한 육안 검사로 매일 플랩을 조사 할 수있다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
토론
일관된 플랩 생존을 얻기 위한 가장 중요한 측면은 미세 수술 기술의 다양한 단계에서 세부 사항에 주의를 기울이는 것입니다. 예를 들어, 혈관, 수술 기구 및 미세한 봉합선을 잘 시각화하려면 멸균된 컬러 플라스틱 배경을 혈관 아래에 배치하는 것이 매우 유용합니다. 많은 연구자들과 마찬가지로 우리는 멸균된 노란색 또는 녹색 풍선 조각을 사용하는 것을 선호합니다(그림 7 및 11). 이러한 배경은 인접한 구조에 대한 봉합선의 부착을 최소화하는 추가적인 이점을 제공하며, 이로 인해 때로는 너무 많은 장력으로 봉합선을 당겨야 하여 혈관 파열로 이어질 수 있습니다. 마지막으로, 배경을 사용하면 잠재적인 혈전 형성 조직 파편이 문합 부위로 실수로 끌릴 확률을 줄이는 추가적인 이점이 있습니다.
플랩의 혈관이 매우 가늘고 연약하다는 점을 고려하면 혈관 내 혈전증 및 플랩 실패로 이어지는 내막 병변을 피하기 위해 혈관의 전체 너비를 꼬집지 않는 것이 중요합니다. 플랩의 혈관과 수용 부위의 혈관 모두에 부주의한 손상을 방지하려면 인접한 지류를 자유롭게 결찰하고 분할하는 것이 더 안전하며, 이를 통해 이러한 혈관을 더 쉽게 조작할 수 있습니다.
문합을 시작하기 전에 혈관을 최종 위치에 배치하여 혈관 꼬임이나 플랩 척추경의 비틀림을 방지하기 위해 노력하는 것이 중요합니다. 혈관의 작은 구경과 섬세한 일관성을 감안할 때 이를 명확하게 배제하기 어려운 경우가 많습니다. 한 가지 유용한 트릭은 문합 부위에서 멀리 떨어진 곳에 3바늘을 꿰매어 플랩을 최종 위치에 고정하는 것입니다. 다음으로, 의심스러운 경우 플랩의 척추경에 배치된 혈관 클램프를 일시적으로 열고 혈관이 충혈될 때까지 10 IU/mL 농도의 헤파린화 생리 식염수로 혈관의 내강을 채웁니다. 이로 인해 혈관은 문합 완료 후 클램프를 제거할 때와 같이 혈액으로 관류된 후 나타날 구성을 가정하게 됩니다.
또한, 전체 시술 동안, 특히 최종 바늘을 묶기 전에 혈관 내부의 기포가 작더라도 감지하는 것이 가장 중요합니다. 이러한 기포가 혈관 부분에서 멀리 떨어져 있으면 미세 겸자로 혈관을 부드럽게 착유할 수 있습니다. 문합 부위 가까이에 위치하는 경우 간단한 관개로 밀도가 낮은 기포가 혈관 내강에서 쉽게 배출됩니다. 기포의 존재를 인식하지 못하면 의심할 여지 없이 플랩 혈관의 미세한 구경으로 인해 돌이킬 수 없는 플랩 허혈 및 괴사가 발생할 수 있습니다.
또한, 다음을 위해 바늘을 통과하고 묶는 동안 세심한 관리의 필요성을 아무리 강조해도 지나치지 않습니다. 문합 밀봉 및 내피 재성장에 필수적인 적절한 내막 접촉을 보장하기 위해 양호한 혈관 외전을 얻습니다. 문합 부전, 즉 출혈을 초래하는 느슨한 혈관 접촉을 피하십시오. 그리고 문합 협착증과 혈전증 경향으로 이어지며, 정맥이나 동맥이 각각 침범하는 경우 정맥 울혈 또는 플랩 관류 불량을 초래하는 혈관 조직을 너무 많이 잡지 마십시오.
마지막으로, 전체 절차 동안, 특히 깊은 표면에서 플랩을 들어 올릴 때 완벽한 지혈을 보장하는 것이 중요합니다. 그렇지 않으면 혈종 형성과 쥐 사망이 뒤따를 가능성이 높습니다.
기술의 수정 및 문제 해결
저자는 전기 소작을 사용하여 SCM의 중간 부분에 가로 절개를 하면 경동맥이 더 잘 노출될 수 있을 뿐만 아니라 향후 동맥 문합에 대한 과도한 긴장의 위험을 최소화할 수 있음을 관찰했습니다.
또 다른 중요한 기술적 팁은 더 쉽게 노출되는 전벽에 스티치를 배치할 때 마지못해 이 벽을 잡을 위험을 최소화하기 위해 혈관의 뒷벽에서 문합을 시작하는 것입니다. 뒷벽이 문합의 앞쪽에 봉합되면 혈관 개통의 부족은 기계적 이유로 인해 즉시 또는 혈전증의 결과로 단 몇 시간 후에 거의 항상 발생합니다8.
쥐의 상복부 혈관의 문합이 이러한 혈관의 구경이 작기 때문에 기술적으로 너무 어려운 것으로 간주되는 경우, 대퇴부 혈관은 상복부 혈관의 기원에 원위부에 결찰되어 상복부 피판의 혈관 척추경으로 사용할 수 있습니다. 이러한 방식으로 더 큰 혈관이 사용됩니다(대퇴 동맥의 구경은 1.0-1.2mm이고 대퇴 정맥의 구경은 1.2-1.5mm입니다). 또한, 대퇴 혈관의 다른 지류를 해부 및 결찰함으로써 2cm 이상의 혈관 척추경 길이를 얻을 수 있으며, 이는 플랩 삽입을 용이하게 합니다18,34,35.
재현성
교육 및 연구 목적으로 이 플랩을 사용한 10년 이상의 경험은 쥐 상복부 플랩이 자유 조직 이식의 재현 가능한 모델임을 강력하게 시사합니다11,13,17,18,26. 미세수술 연수생을 위한 좋은 교육 및 훈련 모델이기 때문에 미세수술 과정에 쉽게 통합될 수 있습니다11,13,17,18,26. 우리의 경험에 따르면, 초기에는 미세 수술 초보자에게 기술적으로 어려웠지만 약간의 훈련을 받은 후 자유 상복부 피판은 70-80%의 경우에서 후속 괴사를 최소화하거나 전혀 없이 쥐의 목으로 성공적으로 옮길 수 있습니다. 이러한 결과는 문헌13,18,36에 일반적으로 보고된 결과와 일치합니다.
기존 방법과 관련된 의의
쥐10,16,18,37-39에서 수많은 자유 플랩이 기술되었습니다. 교육 및 연구 목적으로 가장 일반적으로 사용되는 것은 복 직 근 근피판, 광배근 및 전거근 피판, 뒷다리 재이식 모델 및 상복부(사타구니) 피판18,35입니다. 이 플랩은 일관된 해부학적 구조와 상당한 혈관 척추경으로 인해 선호되었습니다. 상복부 피판은 근육 근막 위에서 해부되었기 때문에 틀림없이 기증자 부위 이환율이 낮은 피판과 관련이 있습니다18. 더욱이, 1967년에 기술된 상복부 피판은 쥐34,35에서 기술된 최초의 피판이었다. 이것은 Goldwyn이 동물의 실험적 플랩에 대한 첫 번째 설명 후 불과 4년 후에 발생했습니다. 흥미롭게도, 이 플랩은 개(34)의 사타구니 플랩이었다.
기술의 한계
이 모델의 두 가지 주요 한계는 수술을 수행하기 위해 미세 수술 기술이 필요하다는 점과 다른 저자13,18,36에 따르면 사례의 20-25%에서 상당한 괴사가 존재한다는 것입니다. 여기에 제시된 모델의 또 다른 잠재적 한계는 플랩의 자동 식인 풍습입니다. 그러나 위의 저자처럼 이것은 거의 전체 플랩 괴사의 경우에만 발생하는 드문 발견입니다.
기술의 향후 적용
쥐 상복부 자유 피판은 조직 관류, 조직 복구 및 외과적 상처 감염에 대한 실험적 연구에 사용될 수 있습니다40,41. 이의 영양 혈관은 관심 물질, 즉 약물, 바이러스 벡터 또는 리포좀을 함유하는 용액의 혈관 내 주사에 특히 적합하며, 이는 대부분 국소 또는 국소 효과를 생성합니다30,31. 또한 플랩 아래에는 병원체, 이물질, 방사성 종자 또는 화학 물질을 배치하여 여러 질병 과정 및 잠재적인 치료법을 모방할 수도 있습니다30,31.
공개 사항
저자는 공개할 것이 없습니다.
감사의 글
저자 (디오 카살) 중 하나는 Fundação Calouste 굴벤 키안, Fundação Champalimaud, Ministério 다 Saúde 전자 Fundação 파라 Ciência 전자 TECNOLOGIA, 포르투갈 후원 고급 의료 교육을위한 프로그램에서 보조금을 받았다.
저자는 촬영과 비디오를 편집 씨 알베르토 세 베리의 기술적 도움을 감사의 말씀을 전합니다. 저자는이 논문에서 제시 한 동물 표본을 준비하는 그들의 도움 씨 옥타비오 Chaveiro 씨 마르코 코스타 씨 카를로스 로페스에 감사하고 있습니다.
마지막으로, 저자는 동물의 획득 및 유지 보수에 관한 모든 물류 측면에서 그녀의 도움을 양 Gracinda 메네 제스에게 감사의 말씀을 전합니다.
재료
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