يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

قياس وتغيير التزاوج محرك في ذكر

11.1K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/55291

⸱

فبراير 15, 2017

 ,  ,  , 
1F.M. Kirby Neurobiology Center, Boston Children’s Hospital, 2Harvard NeuroDiscovery Center, Harvard Medical School, 3Department of Neurobiology, Harvard Medical School

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

توضح هذه المقالة الفحص السلوكي يستخدم محرك التزاوج من الذكور في ذبابة الفاكهة melanogaste ص لدراسة الدوافع. باستخدام هذه الطريقة، يمكن للباحثين الاستفادة الطيران المتقدمة تقنيات العصبية الوراثية للكشف عن الآليات الوراثية والجزيئية والخلوية التي تكمن وراء هذا الدافع.

الملخص

وعلى الرغم من عقود من التحقيق، تبقى القواعد العصبية والجزيئية للدول تحفيزية غامضة. لقد وضعت مؤخرا رواية، اختزالية، ونظام قابلة للتحقيق معمق لدوافع استخدام محرك الأقراص التزاوج من الذكور ذبابة الفاكهة (ذبابة الفاكهة)، الأساليب التي نحن هنا بالتفصيل. مراكز النموذج السلوكي على النتيجة التي مفادها أن يقلل محرك التزاوج من الذكور إلى جانب الخصوبة على مدى copulations المتكررة ويسترد أكثر من 3 ~ د. في هذا النظام، والأدوات العصبية الوراثية القوية المتاحة في ذبابة تلتقي مع إمكانية الوصول الوراثية والاسلاك الرسم البياني المفترض متاحة للسلوك الجنسي. هذا التقارب يسمح العزلة السريعة واستجواب السكان العصبية صغيرة مع وظائف تحفيزية محددة. نحن هنا بالتفصيل تصميم وتنفيذ فحص الشبع الذي يستخدم لقياس وتغيير الدافع الخطوبة في الطيران الذكور. استخدام هذافحص، علينا أن نظهر أيضا أن انخفاض محرك التزاوج الذكور يمكن التغلب عليها من خلال تحفيز الخلايا العصبية الدوبامين. فحص الشبع هو بسيط، وبأسعار معقولة، وقوية إلى تأثيرات الخلفية الوراثية. نتوقع أن فحص بالشبع لتوليد العديد من الأفكار الجديدة في البيولوجيا العصبية للدول تحفيزية.

المقدمة

وقد وفرت العمل في ذبابة الفاكهة نظرة عميقة ورائدة في العديد من الظواهر البيولوجية، بما في ذلك طبيعة الجينات 1، ومبادئ التطور الجنيني 2، ايقاعات كل يوم 3، وتطوير والأسلاك من الجهاز العصبي 4 و 5 و 6. ولا يزال الدافع حتى تفهم بشكل أقل من هذه الظواهر، وربما بسبب القيود المفروضة على الأنظمة التي تم دراستها حتى الآن. تدرس الدافع في الطيران في المقام الأول في سياق الجوع، والذي يقدم العديد من التحديات بسبب تناول المواد الغذائية الصغيرة بزوال بها في نوبة التغذية والهيكل الخارجي الذي يحول دون علامات الصريحة من ترسب الدهون. ونتيجة لذلك، هناك حاجة لتوسيع النظم المستخدمة لدراسة الدوافع في الطيران.

نحن تصف الإطار السلوكي لدراسة محرك التزاوج فيذبابة الفاكهة. هذا النظام يستفيد من أدوات العصبية الوراثية في الطيران، فضلا عن إمكانية الوصول 7، 8، 9، 10، 11، 12 وconnectome المفترضة للدوائر في ديمبرافيك جنسيا 8 و 13. وبالإضافة إلى ذلك، فإن الكثير من فطريه 14، 15، 16، 17، 18، 19، 20، 21 و المستفادة 22، 23، وقد تم عمل 24 الدوائر الحسية والحركية السيطرة الخطوبة في التفاصيل، وتوفير فرصة نادرةلتحديد موقع العقدة الدوائر الدقيقة التي على يفتئت الدافع. بلغنا مؤخرا أنه في الطيران، كما هو الحال في البشر، ومستويات الدوبامين هي محور التزاوج محرك 25 و 26 و 27. لقد تمكنت من الوصول الجيني للمفصل على مستوى الدائرة الجزيئي وواستقبال الخلايا العصبية في الطيران، وتسهيل المنتجة للدوبامين ذات الصلة يحلل هذه الظاهرة الحفظ باستخدام فحوصات وصفنا هنا 25.

أضفنا إلى المقايسات السلوكية في تشانغ وآخرون. 25 ساحة مسطحة جديدة السلوكية التي تتيح تسجيل الفيديو، الذي نسميه 2-الأبعاد (2-D) الشبع الفحص، تحسنا هاما مقارنة مع الطرق السابقة. وبالتالي، فإن الفحص الجديد هو أكثر قابلة للقياس، وبالتالي أكثر ملاءمة لشاشات الوراثية الجينات والخلايا العصبية التي تشارك في الدافع. نحن نستخدم هذا الاختبار الجديد، جنبا إلى جنب مع فحوصات الخطوبة وneurogeالتلاعب المغنطيسية، لشرح كيفية قياس وتغيير محرك التزاوج في الطيران.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

ملاحظة: يصف هذا البروتوكول إعداد (الأقسام 1-3) والتنفيذ (القسم 4)، والتحليل (القسم 4) لسنة 2-D المقايسات الشبع. ثم، وذلك باستخدام التحفيز الدوبامين كمثال، القسم 5 يبين كيفية الجمع بين التحفيز توليد الحرارة مع 2-D المقايسات بالشبع للحث على فرط الرغبة الجنسية. ويصف الجزء 6 3 طرق للتحقق من النتائج من 2-D المقايسات الشبع. وأخيرا، القسم 7 يوضح كيفية قياس استرداد محرك التزاوج في الذباب الذكور.

1. افتعال 8- و 32 غرفة اريناس السلوكية

ملاحظة: تتكون كل الساحة السلوكية من عدة طبقات من الأغطية البلاستيكية الليزر قطع عقدت معا بواسطة مسامير عرافة والمكسرات الإبهام في كل من الزوايا الأربع (الشكل 1A).

  1. افتعال طبقات من الساحة. افتعال كل طبقة باستخدام الليزر القاطع لقطع ورقة من البلاستيك الاكريليك على شكل المناسب (انظر الشكل 1B، 1C للمنتجات).
    ملاحظة: العديد من الأبحاث المؤسسة:NS لها قطع الليزر في المحلات التجارية آلة أو المساحات صانع. إذا كانت المؤسسة لديه حق الوصول إلى قطع الليزر، مع الاستمرار في الخطوات التالية. إذا لم يكن كذلك، ثم اتبع الإرشادات في الخطوة 1.2 بدلا من ذلك.
    1. لكل طبقة، فتح نمط تصميم في برنامج القاطع الليزر.
      ملاحظة: التصاميم يمكن العثور عليها في ملفات PDF اسم مناسب (على سبيل المثال، 8-غرفة أرينا - طبقة 2 - Doors.pdf) في خلفية مادة 1. يحتوي هذا الملف على شروح لنوع من البلاستيك لاستخدامها (على سبيل المثال، 1 / 8 بوصة (أي 3.175 مم) الاكريليك واضحة). سمك المحدد من كل طبقة ليست حرجة. الشرط الرئيسي هو السماح 0.12 بوصة (3 مم) أو أكثر من المساحة العمودية مجانا في الغرف.
    2. ضبط الإعدادات ليزر (السلطة، والتركيز، الخ) لنوع وسمك من البلاستيك لاستخدامها. وضع البلاستيك في السرير قطع الليزر وتشغيل القاطع ليزر.
      ملاحظة: سوف تختلف على نطاق واسع هذه الإعدادات على cutte الليزرنموذج r وقوة الليزر لها. البحث عن الإعدادات المناسبة استنادا إلى الخبرة السابقة أو عن طريق خفض اختبار على البلاستيك الخردة. يتم تضمين النقوش سداسية عميقة في التصميم لعطلته رؤساء عرافة المسمار. تسمح هذه الميزة لتشديد بيد واحدة من المكسرات الإبهام ويسمح الساحات للراحة شقة على مقاعد البدلاء (بدون جاحظ رؤساء المسمار). ومع ذلك، مما يجعل النقوش العميقة غالبا ما يكون من الصعب تحقيقه، و، وذلك باستخدام الليزر القاطع تستغرق وقتا طويلا. هذه الخطوة اختيارية ويمكن تخطي دون التأثير على النتائج السلوكية.
    3. عندما قطع إطار الباب (طبقة 2، الشكل 1A)، أيضا استخدام إعدادات الليزر المناسبة لنقش أرقام غرفة المدرجة في التصميم (كما في الشكل 1B، 1C).
  2. وضع النظام مع القطع بالليزر كاذب على الانترنت. تحميل جميع ملفات PDF تصميم لالساحة 8- و / أو 32 غرفة وتحديد نوع المادة (على سبيل المثال، 1/8 بوصة (أي 3.175 مم) جزءا لا يتجزأ منالاكريليك ص) على أساس الشروح في ملفات. سوف تظهر النتائج كما هو الحال في أرقام 1B (8 غرفة الساحة) و1C (32 غرفة الساحة).
  3. تجميع الساحات باستخدام أربعة مسامير عرافة وأربعة المكسرات الإبهام لمحاذاة، وتماسك طبقات البلاستيك (الشكل 1A). سوف تظهر على الساحتين كما في الشكل 1D، 1E (8-غرفة) والشكل 1F، 1G (32 غرفة).
    ملاحظة: جدار الغذائية (طبقة 4 في الشكل 1A) ويستخدم لمدة 2-D المقايسات الشبع فقط وحذفت في الساحات 32 غرفة، والتي تستخدم في فحوصات الخطوبة.

2. إعداد الطعام لمدة 2-D التخمة الفحص

ملاحظة: لأن الشبع فحص 2-D يمتد 4.5 ساعة، ويطير يستخدم الطعام في الساحة لتوفير التغذية والمياه. يستخدم هذا البروتوكول، ولكن لا يقتصر على، التقليدي دقيق الذرة أجار يطير الغذاء.

  1. تجميع جزئيا الشبع الساحة 2-D (8 الغرفة) مع طبقات 3-6(انظر الشكل 1A للقيام بمهام طبقة) وتشديد عليه مع المكسرات الإبهام والبراغي عرافة.
  2. وضع الطعام ذبابة جديدة في زجاجة نظيفة، الميكروويف آمنة. إضافة قليل من الماء لتغطية السطح السفلي من القمقم (الشكل 2A).
  3. الميكروويف الطعام على ارتفاع لمدة 30 - 45 ثانية. تحقق من التقدم ويقلب كل 15 ثانية حتى ذاب (الشكل 2B). الحذر! يطير الغذاء الدمامل بسهولة على.
  4. استخدام اضعافها 1000 ميكرولتر ماصة (الشكل 2C) لنقل ببطء ~ 1 ذاب مل الغذاء في كل غرفة (الشكل 2D).
  5. السماح الغذائية لresolidify في 4 درجة مئوية لمدة 10 دقيقة ~ (الشكل 2E) قبل تجميع تماما الساحة (الشكل 2F).
  6. استخدام الساحة الانتهاء للتجارب (انظر القسم 4) أو تخزينها في 4 درجات مئوية.
  7. تخزين بقايا الطعام في 4 درجات مئوية وإعادة استخدامها.

3. إعداد العذراء الإناث السلوكية فحوصات

ملاحظة: 2-D المقايسات الشبع استخدام أعداد كبيرة من الذباب الإناث البكر (~ 120-160 لالساحة السلوكية كاملة) التي يصعب جمع باستخدام الطرق القياسية. يصف هذا القسم نهج بديل باستخدام التحوير-HS اختبأ على كروموسوم Y 28، والتي استخدمت بنجاح في المقايسات الخطوبة 25 و 29. في الأوراق المالية المستخدمة لتوليد الإناث البكر البيضاء العينين لديه w1118 الوراثي (X) / HS-اختبأ (Y)؛ + / +، + / + (بلومينغتون عدد الاسهم 24638).

  1. الوجه الذباب في زجاجة جديدة مرة واحدة 20 - 50٪ من الشرانق وeclosed (انظر الشكل 3A على سبيل المثال) وهناك ما يكفي من الذكور (5-10) لنشر الأسهم.
  2. الحرارة صدمة زجاجة الأصلي في حمام الماء الساخن 37 درجة مئوية لمدة 1 ساعة لتنشيط بما فيه الكفاية HS-اختبأ لقتل الذكور (الشكل 3B). بعد الصدمة الحرارية، إلا الإناث سوف eclose من هذه الزجاجات وهكذا سوف تظل عذراء حتىالمقاييس.
    ملاحظة: تأكد يتم تسخينها جميع الاطراف من القمقم بالتساوي (انظر الشكل 3A لخط الماء). تمديد هذه المرة لتصل إلى 2 ساعة إذا 1 ساعة ليست كافية لقتل الرحيم عن جميع الذكور.
  3. عزل الإناث التي تم جمعها لا يقل عن 3 د قبل التجارب لضمان أن تكون من العمر ما يكفي لتكون تقبلا جنسيا 25 و 29.
    ملاحظة: Y كروموسوم-أقل من الذكور تنشأ من حين لآخر من هذه الأسهم. هذه الذكور لها عيون بيضاء ولا تتأثر الصدمة الحرارية لأنها لا تحتوي على التحوير HS-اختبأ. أنهم لا يستطيعون إنتاج الحيوانات المنوية، وبالتالي لا يمكن أن تقلل التقبل لدى الإناث 30، 31.

4. أداء وتسجيل النقاط 2-D التخمة فحوصات

ملاحظة: من المهم للسيطرة على عمر ذكر الذباب عن التغيرات محرك التزاوج مع التقدم في السن. يستخدم هذا البروتوكول الذكور التي هي 3-4 د من العمر 25 .

  1. تعيين الحاضنة إلى درجة الحرارة المطلوبة (على سبيل المثال، 23 درجة مئوية لمدة قياسية، التجارب RT) والرطوبة (> 30٪). لحاضنات دون مراقبة الرطوبة، وترك كوب من الماء في الحاضنة غير كافية.
  2. ضع 2-D الشبع فحص الساحة في الحاضنة لمدة 30 دقيقة ~ لكي تتوازن درجة الحرارة ومنع التكثيف في غرف أثناء التجربة. يجب أن تكون الأبواب الدوارة في موقف فتح.
  3. استخدام الشافطة ذبابة 32 إلى نضح 15-20 الإناث البكر في كل غرفة من الساحة (الشكل 4).
    ملاحظة: من المهم أن الإناث والذكور لا تخدير على نفس يوم الاختبار. في تجربتنا، والقيام بذلك قد يؤثر على تقبل الإناث وسلوك التزاوج من الذكور.
  4. نضح 1 الذكور في كل غرفة.
  5. وضع الساحة المحملة في الحاضنة تحت كاميرا الفيديو المستهلك القياسية (الشكل 5) وفيلم عن 4.5 ساعة.
  6. تسجيل أشرطة الفيديو عن طريق الانتباه عند كل من الذكور تطير يبدأ وينتهي كل التزاوج (أي الجماع). قد تكون هذه الخطوة في البداية تستغرق وقتا طويلا. مع الممارسة، يمكن للمرء أن يسجل الفيديو بسرعة 5X أو أعلى.
    ملاحظة: منذ الذباب تتزاوج ل~ 20 دقيقة في ~ 23 درجة مئوية (مدة أقصر عند ارتفاع درجات الحرارة) 29، يمكن للمرء أن المقشود من خلال دقيقة 15 الأول من كل التزاوج.
  7. بعد تسجيل جميع الأوقات التزاوج، تلخيص عدد من التزاوج لكل ذبابة (انظر نتائج تمثيلية).
  8. استخدام التعليمات البرمجية المقدمة لتوليد ethogram. رؤية خلفية المادة 2 لرمز والتعليمات والبيانات سبيل المثال.
  9. استخدام CO 2 أو درجات الحرارة الباردة لتخدير الذباب قبل إزالتها.

5. عن طريق التلاعب توليد الحرارة إلى عكس التخمة في 2-D التخمة فحوصات

ملاحظة: هذا البروتوكول الاختبارات سواء تحفيز توليد الحرارة من السكان العصبية محددة يمكن التغلب على الشبع. وFLI التجريبيوفاق التعبير عن قناة الموجبة الحساسة للحرارة TrpA1 في السكان محددة من الخلايا العصبية (UAS-TrpA1). تطبيق الخطوات التالية لتحفيز الخلايا العصبية الدوبامين (TH-GAL4)، والتي ثبت لتعزيز التزاوج محرك 25. هذه الخطوات التي يمكن استخدامها جنبا إلى جنب مع السائقين العصبية الأخرى لاكتشاف الشعوب الأخرى التي تعزز محرك التزاوج.

  1. للحث على thermogenetically سلوكيات التزاوج في الذباب الاشباع، وزيادة درجة الحرارة في الحاضنة (على سبيل المثال، من 23 درجة مئوية إلى 28.5 درجة مئوية) بعد الانتهاء من كامل 4.5 ح 2-D الشبع التجربة.
  2. بعد أن تصل حاضنة درجة الحرارة المطلوبة، ومواصلة التحفيز الحرارة لتصبح النتيجة التزاوج (أي. copulations) من الذكور لمدة 1 ساعة (انظر ممثل النتائج).
    ملاحظة: درجة الحرارة وطول التحفيز قد تختلف تبعا لنمط وراثي لذلك من الضروري استكشاف الظروف المثلى التي تحول دون فرط الخلايا العصبية في حين لا تزال تنتج روبوالحادي والنمط الظاهري.

6. استخدام تودد وتنقل إلى التحقق من التخمة

ملاحظة: يصف هذا القسم 3 طرق الاختيارية التي يمكن استخدامها للتحقق من النتائج من 2-D المقايسات الشبع. لا حاجة إليها لكل فحص.

  1. استخدام فحوصات التودد للتحقق الشبع.
    1. نضح ذكر واحد وأنثى واحدة البكر في كل دائرة من الدوائر 32 في ساحة الخطوبة.
    2. تصوير الذباب ل~ 20 دقيقة باستخدام كاميرا الفيديو المستهلك القياسية.
    3. يسجل مؤشر المغازلة (CI) لتحديد الخطوبة 25. هذا هو جزء من الوقت الذي يقضيه أداء المغازلة (الغناء بعد، الخ) والتزاوج (أي الجماع) خلال نافذة 5 دقائق. يبدأ هذا الإطار من الدرجة الأولى من المغازلة. إذا لم يبدأ ذبابة الذكور الخطوبة في دقيقة 15 الأولى، CI منه هو أن 0. الذباب السذاجة WT تظهر CI أكبر من 0.9، في حين يجب أن يكون ذبابة الاشباع بالكامل CI بelow 0.2. ويمكن أيضا النظر في اتخاذ تدابير الخطوبة أخرى 23، 33.
  2. سجل الخطوبة في 2-D المقايسات الشبع
    1. يسجل مقدار الوقت الذي يطير الذكور تنفق بمغازلة، على مدى فترة زمنية من الشبع فحص 2-D (على سبيل المثال، في ساعة الأولى). ويعرف الخطوبة كما ذكر القيام بأي خطوة من طقوس (الغناء بعد، وما إلى ذلك). خلافا لما حدث في القسم 6.1.3، هذه الخطوة لا يشمل الوقت الذكر تنفق التزاوج.
    2. تقسيم وقت الخطوبة أعلاه الوقت الإجمالي كان الذكر لا التزاوج (أي لا جماع) في نفس الفترة الزمنية. على سبيل المثال، إذا كان الذكور تطير المحاكم لمدة 15 دقيقة وزملائه لمدة 20 دقيقة على مدى ساعة الأولى، والنسبة هي 15 دقيقة / (60 دقيقة - 20 دقيقة) = 0.375. وأظهرت نسبة بأنها "جزء من nonmating الوقت في التودد" في ممثل النتائج.
  3. استخدام تنقل فحص لتقييم استنفاد
    1. تجميع جزئيا 32-الساحة غرفة مع جميع أجزاء ولكن ورقة التباين.
    2. نضح واحد يطير الذكور (لا الذباب الإناث) في كل غرفة 32 في ساحة الخطوبة.
    3. تصوير الذباب ل~ 10 دقيقة باستخدام كاميرا الفيديو المستهلك القياسية.
    4. تتبع الذباب مع البرنامج المساعد MTrack2 في ImageJ (http://valelab.ucsf.edu/~nstuurman/ijplugins/MTrack2.html).

7. استعادة التزاوج محرك بعد 2-D التخمة الفحص

  1. إجراء فحص بالشبع 2-D كما هو موضح في القسم 4، ولكن نضح ذكر الذباب في نهاية الفحص.
  2. عزل الذباب الذكور في 23 درجة مئوية لمدة العدد المطلوب من أيام.
  3. إجراء فحص بالشبع 2-D مع الذكور تعافى ويسجل التزاوج بهم (أي copulations) للساعة فقط 1 (انظر ممثل النتائج).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

لتوصيف حملة التزاوج ذبابة الفاكهة، البالغ من العمر 3 أيام، تم اختبار WT كانتون-S الذكور في الشبع فحص 2-D. على مدى مقايسة (4.5 ساعة)، الذكور تتزاوج في المتوسط ​​4.8 ± 0.3 (يعني ± الخطأ المعياري للمتوسط، SEM) مرات. التزاوج الشروع في الغالب في ساعة الأولى 2 (78٪) (الشكل 6A، 6B) وتصبح أقل تواترا كما الفحص تقدم (الشكل 6A، 6B). هذا الانخفاض لا يعود إلى عدم وجود شركاء التزاوج (لا تزال 74٪ من بين الإناث unmated في...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

دول تحفيزية يمكن مشبع، حافظ، وانتشال 34. نقدم الشبع فحص 2-D أن بسرعة وبقوة يقيس كل من هذه الجوانب من التزاوج محرك الأقراص في الطيران. هذا الاختبار يفتح إمكانية استخدام التلاعب الجيني الطيران المتقدمة لدراسة المكونات الجزيئية والدائرة من سلوك دوافع.

ويعتمد الفحص الشبع على قدرة الذكر إلى المحكمة بنجاح والتزاوج، وإنهاء copulations في الوقت المناسب. على الرغم من الذباب hyposexual محكمة أقل، ال...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

يشكر المؤلفون مايك كريكمور ودراجانا روغولجا وميشيل فرانك على التعليقات على المخطوطة. قدم بافيل جورليك الدعم الفني لتصنيع الساحات السلوكية. تم إجراء هذا العمل في مختبر مايك كريكمور وبدعم أيضا من مؤسسة وايتهول (الباحث الرئيسي: دراجانا روغولجا). S.X.Z. هو زميل ستيوارت إتش كيو وفيكتوريا كوان في كلية الطب بجامعة هارفارد.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
1/16 بوصة أكريليك شفافMcMaster-Carr8589K12يستخدم لصنع الساحات ؛ انظر المواد التكميلية 1 للتصاميم.
1/8 بوصة أكريليك شفافMcMaster-Carr8589K42يستخدم لصنع الساحات ؛ انظر المواد التكميلية 1 للتصاميم.
3/16 بوصة أكريليك شفافMcMaster-Carr8560K219يستخدم لصنع الساحات ؛ انظر المواد التكميلية 1 للتصاميم.
1/32 بوصة أسود delrinMcMaster-Carr8575K132تستخدم لصنع الساحات ؛ انظر المواد التكميلية 1 للتصاميم.
مسامير سداسية ، بطول 1 بوصة (50x)McMaster-Carr92314A115   ؛تستخدم لصنع الساحة. يمكن استبدالها بمسامير 3/4 بوصة (92314A113 ، McMaster-Carr) للساحات المكونة من 32 غرفة.
صواميل الإبهام (25x)McMaster-Carr92741A100تستخدم لصنع الساحات. يمكن استبدالها بالمكسرات السداسية العادية (90480A005 ، McMaster-Carr).
كاميرا الفيديوCanonVixia HF R700بأي كومكورد استهلاكي.
يمكن استبدال

المراجع

  1. Sturtevant, A. H., Bridges, C. B., Morgan, T. H. The spatial relations of genes. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 5 (5), 168-173 (1919).
  2. Campos-Ortega, J. A., Hartenstein, V. The Embryonic Development of Drosophila melanogaster. , Springer. Berlin Heidelberg: Berlin, Heidelberg. (1985).
  3. Hall, J. C. Systems Approaches to Biological Rhythms in Drosophila. Methods in Enzymology. 393, 61-185 (2005).
  4. Luo, L. Rho GTPases in neuronal morphogenesis. Nature reviews. Neuroscience. 1 (3), 173-180 (2000).
  5. Schmucker, D., Clemens, J. C., et al. Drosophila Dscam Is an Axon Guidance Receptor Exhibiting Extraordinary Molecular Diversity. Cell. 101 (6), 671-684 (2000).
  6. Jan, Y. N., Jan, L. Y. HLH proteins, fly neurogenesis, and vertebrate myogenesis. Cell. 75 (5), 827-830 (1993).
  7. Stockinger, P., Kvitsiani, D., et al. Neural circuitry that governs Drosophila male courtship behavior. Cell. 121 (5), 795-807 (2005).
  8. Yu, J. Y., Kanai, M. I., Demir, E., Jefferis, G. S. X. E., Dickson, B. J. Cellular Organization of the Neural Circuit that Drives Drosophila Courtship Behavior. Current biology. 20 (18), 1602-1614 (2010).
  9. Zhou, C., Pan, Y., Robinett, C. C., Meissner, G. W., Baker, B. S. Central Brain Neurons Expressing doublesex Regulate Female Receptivity in Drosophila. Neuron. 83 (1), 149-163 (2014).
  10. Rideout, E. J., Dornan, A. J., Neville, M. C., Eadie, S., Goodwin, S. F. Control of sexual differentiation and behavior by the doublesex gene in Drosophila melanogaster. Nature neuroscience. 13 (4), 458-466 (2010).
  11. Manoli, D. S., Foss, M., Villella, A., Taylor, B. J., Hall, J. C., Baker, B. S. Male-specific fruitless specifies the neural substrates of Drosophila courtship behaviour. Nature. 436 (7049), 395-400 (2005).
  12. Kimura, K. I., Ote, M., Tazawa, T., Yamamoto, D. Fruitless specifies sexually dimorphic neural circuitry in the Drosophila brain. Nature. 438 (7065), 229-233 (2005).
  13. Cachero, S., Ostrovsky, A. D., Yu, J. Y., Dickson, B. J., Jefferis, G. S. X. E. Sexual dimorphism in the fly brain. Current biology. 20 (18), 1589-1601 (2010).
  14. Clowney, E. J., Iguchi, S., Bussell, J. J., Scheer, E., Ruta, V. Multimodal Chemosensory Circuits Controlling Male Courtship in Drosophila. Neuron. 87 (5), 1036-1049 (2015).
  15. Kallman, B. R., Kim, H., Scott, K. Excitation and inhibition onto central courtship neurons biases Drosophila mate choice. eLife. 4, e11188(2015).
  16. von Philipsborn, A. C., Liu, T., Yu, J. Y., Masser, C., Bidaye, S. S., Dickson, B. J. Neuronal control of Drosophila courtship song. Neuron. 69 (3), 509-522 (2011).
  17. Zhou, C., Franconville, R., Vaughan, A. G., Robinett, C. C., Jayaraman, V., Baker, B. S. Central neural circuitry mediating courtship song perception in male Drosophila. eLife. 4, e08477(2015).
  18. Kohatsu, S., Koganezawa, M., Yamamoto, D. Female contact activates male-specific interneurons that trigger stereotypic courtship behavior in Drosophila. Neuron. 69 (3), 498-508 (2011).
  19. Kohatsu, S., Yamamoto, D. Visually induced initiation of Drosophila innate courtship-like following pursuit is mediated by central excitatory state. Nature Communications. 6, 6457(2015).
  20. Fan, P., Manoli, D. S., et al. Genetic and neural mechanisms that inhibit Drosophila from mating with other species. Cell. 154 (1), 89-102 (2013).
  21. Kurtovic, A., Widmer, A., Dickson, B. J. A single class of olfactory neurons mediates behavioural responses to a Drosophila sex pheromone. Nature. 446 (7135), 542-546 (2007).
  22. Ejima, A., Smith, B. P. C., et al. Generalization of Courtship Learning in Drosophila Is Mediated by cis-Vaccenyl Acetate. Current Biology. 17, 599-605 (2007).
  23. Keleman, K., Vrontou, E., Krüttner, S., Yu, J. Y., Kurtovic-Kozaric, A., Dickson, B. J. Dopamine neurons modulate pheromone responses in Drosophila courtship learning. Nature. 489 (7414), 145-149 (2012).
  24. Pan, Y., Baker, B. S. Genetic Identification and Separation of Innate and Experience-Dependent Courtship Behaviors in Drosophila. Cell. 156 (1-2), 236-248 (2014).
  25. Zhang, S. X., Rogulja, D., Crickmore, M. A. Dopaminergic Circuitry Underlying Mating Drive. Neuron. 91 (1), 168-181 (2016).
  26. Bowers, M. B., Van Woert, M., Davis, L. Sexual behavior during L-dopa treatment for Parkinsonism. The American journal of psychiatry. 127 (12), 1691-1693 (1971).
  27. Sacks, O. W. Awakenings. , Vintage Books. New York. (1999).
  28. Dietzl, G., Chen, D., et al. A genome-wide transgenic RNAi library for conditional gene inactivation in Drosophila. Nature. 448 (7150), 151-156 (2007).
  29. Crickmore, M. A., Vosshall, L. B. Opposing dopaminergic and GABAergic neurons control the duration and persistence of copulation in Drosophila. Cell. 155 (4), 881-893 (2013).
  30. Peng, J., Chen, S., Busser, S., Liu, H., Honegger, T., Kubli, E. Gradual Release of Sperm Bound Sex-Peptide Controls Female Postmating Behavior in Drosophila. Current biology. 15 (3), 207-213 (2005).
  31. Yapici, N., Kim, Y. J., Ribeiro, C., Dickson, B. J. A receptor that mediates the post-mating switch in Drosophila reproductive behaviour. Nature. 451 (7174), 33-37 (2008).
  32. Pellegrino, M., Nakagawa, T., Vosshall, L. B. Single Sensillum Recordings in the Insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae. Journal of Visualized Experiments. 36 (36), 1-5 (2010).
  33. Cook, R., Cook, A. The Attractiveness to males of female Drosophila melanogaster: effects of mating, age and diet. Animal behaviour. 23, 521-526 (1975).
  34. Toates, F. M. Motivational Systems (Problems in the Behavioural Sciences). , (1986).
  35. Hall, J. C. The mating of a fly. Science. 264 (5166), 1702-1714 (1994).
  36. Simpson, J. H. Mapping and manipulating neural circuits in the fly brain. Advances in genetics. 65 (9), 79-143 (2009).
  37. Venken, K. J. T., Simpson, J. H., Bellen, H. J. Genetic Manipulation of Genes and Cells in the Nervous System of the Fruit. Neuron. 72 (2), 202-230 (2011).
  38. Klapoetke, N. C., Murata, Y., et al. Independent optical excitation of distinct neural populations. Nature methods. 11 (3), 338-346 (2014).
  39. Bellen, H. J., Levis, R. W., et al. The BDGP gene disruption project: single transposon insertions associated with 40% of Drosophila genes. Genetics. 167 (2), 761-781 (2004).
  40. Spradling, A. C., Stern, D., et al. The Berkeley Drosophila Genome Project gene disruption project: Single P-element insertions mutating 25% of vital Drosophila genes. Genetics. 153 (1), 135-177 (1999).
  41. Parks, A. L., Cook, K. R., et al. Systematic generation of high-resolution deletion coverage of the Drosophila melanogaster genome. Nature genetics. 36 (3), 288-292 (2004).
  42. Matthews, K. A., Kaufman, T. C., Gelbart, W. M. Research resources for Drosophila: the expanding universe. Nature reviews. Genetics. 6 (3), 179-193 (2005).
  43. Ni, J. Q., Liu, L. P., et al. A Drosophila resource of transgenic RNAi lines for neurogenetics. Genetics. 182 (4), 1089-1100 (2009).
  44. Ni, J. Q., Zhou, R., et al. A genome-scale shRNA resource for transgenic RNAi in Drosophila. Nature. 8 (5), 405-407 (2011).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

دافع التزاوج في ذبابة الفاكهةاختبار الشبعدافعية التوددالتحفيز الدوبامينيالأدوات الجينية العصبيةالنموذج السلوكيمؤشر التوددتكرار التزاوجالخلفية الجينيةعلم البصريات الوراثي
قياس وتغيير التزاوج محرك في ذكر
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.