Животные модели атеросклероза важны, чтобы понять механизм и исследовать новые подходы к предотвращению развития зубного налета или разрыв, ведущей причиной смерти в промышленно развитых странах. Этот протокол использует сочетание шар травмы и богатым содержанием холестерина чтобы побудить атеросклеротических бляшек в кролика подвздошных артерии.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Кролик модель ускоренной атеросклероза: методологические перспективы травмы шар подвздошных артерии
* These authors contributed equally
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Острый коронарный синдром, обусловленных коронарной окклюзии после развитие атеросклеротических бляшек и разрыв является ведущей причиной смерти в промышленно развитых странах. Новая Зеландия Белый (NZW) кроликов широко используются как животной модели для исследования атеросклероза. Они разрабатывают спонтанное поражений, когда кормили с атерогенные диеты; Однако это требует длительного времени 4-8 месяцев. Для дальнейшего укрепления и ускорения атерогенеза, часто используется сочетание атерогенные диеты и механических повреждений эндотелия. Представлена процедура заставить атеросклеротических бляшек в кроликов использует баллонного катетера сорвать эндотелия в левой подвздошной артерии NZW кроликов кормят атерогенные диеты. Такие механические повреждения, вызванные баллонного катетера вызывает цепь воспалительных реакций, инициирование neointimal накопление липидов в времени зависит от моды. Атеросклеротических бляшек после шар травмы шоу neointimal утолщение с обширной липидной инфильтрации, содержимое ячейки высокой гладких мышц и присутствие макрофагов производные ячейки пены. Этот метод прост, воспроизводимые и производит налета контролируемой длины в пределах подвздошных артерии. Вся процедура завершается в течение 20-30 мин. Процедура является безопасной с низкой смертности и также предлагает высокий успех в получении существенной интимы поражений. Процедура баллонного катетера индуцированной артериальной травмы результаты в атеросклероза в течение двух недель. Эта модель может использоваться для изучения болезни патологии, диагностической визуализации и оценить новые терапевтические стратегии.
Введение
Разрыву уязвимых атеросклеротических бляшек является одной из ведущих причин смерти в промышленно развитых странах1. Хотя исследования в течение последних десятилетий развернул несколько молекулярных и клеточных механизмов, участвующих в прогресс зубного налета, продолжали усилия по-прежнему необходимы не только для того, чтобы распутать сложный механизм прогрессирования заболевания, но и для тестирования новых терапевтических подходы. Было предложено несколько животных моделей для изучения атеросклероз. Генетические манипуляции, холестерин кормления или механической травмы эндотелия являются стандартной стратегии разделяют большинства животных....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Этот экспериментальный протокол был одобрен кантональная служба ветеринарии, Фрибур и Швейцарского федерального ветеринарного бюро, Швейцария (FR 2015/58).
Примечание: мужской NZW кроликов, весом от 2.8 до 3,2 кг были использованы. Животные были размещены в обычных условиях (12 h свет и темные цикла, предоставляемых ad libitum воды и продовольствия). До шар денудации животные были акклиматизировались на 1 неделю, во время которого они кормили с нормальной Чоу диеты. После 1 недели акклиматизации кролики были перешли на атерогенные рацион, состоящий из высоких жиров (8,6%) и насыщенных жирных кислот с 205 мг/кг (1%) холестерина в течение в....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Шар травмы подвздошных артерии была успешно выполнена без осложнений (рис. 1). Общее время варьировал от 20 до 30 минут для травм выполнена только одна подвздошная артерия и 35 до 45 минут для травм на обеих артерий. Кролик восстанавливается в течение 1 ч после травмы шар. Все животные появились здоровым без значительной потери веса. Обнаружен не инфекции, отеки или артериального тромбоза. Рана был нормальный помимо некоторых мягкий фиброз в месте шва. После .......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Кролик подвздошных артерии атеросклероза модель широко используется в исследования атеросклероза. С этот протокол кроликов стремительно развивался более тяжелой и Дополнительные таблички по сравнению с спонтанное поражений разработаны с только холестерин диета. Важно отметить, что животные быстро оправиться от операции.
Главным стимулом для атерогенеза является механических повреждений, вызванных баллонного катетера, который повреждает эндотелия и раздувает судна стены26
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы заявляют не конкурирующих финансовых интересов.
Благодарности
Эта работа была поддержана Швейцарской национальной науки Фонд Грант 150271.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Новозеландские белые кролики | Чарльз Ривер лаборатории, Франция | Cre:KBL(NZW) | |
| Диета, богатая холестерином | Ssniff spezialdiä ten | Ssniff EF K High Fat and Cholesterol | |
| Glass bead sterilizer-Germinator 500 | VWR, Leicestershire, UK | 101326-488 | |
| Fogarty balloon embolectomy catheters, 2 French | Edwards Lifesciences, Швейцария | 120602F | Только для одноразового использования |
| Luer Lock Syringe | Becton, Dickinson and Company, США | 309628 | |
| Thermopad Type 226 | Solis, Switzerland AG | 397387 | |
| Бупренорфин-темгезик | Reckitt Benckiser AG, Швейцария | 7.68042E+12 | |
| Изофлуран | Piramal Critical Care, Inc, Вифлеем, Пенсильвания 18017 | 2667-46-7 | |
| Анестезиологический аппарат-комби-вет Базовая система анестезии | Rothacher Medical GmbH, Швейцария | CV 30-301-A | |
| Сенсорный монитор жизненных показателей Cardell | Мидмарк, Огайо, США | 8013-001 | |
| Офтальмологическая мазь-Хьюмигель | Вирбак, Франция | ||
| Машинки для стрижки шерсти животных | Aesculap AG, Германия | GT420 | |
| Дезинфицирующее средство-раствор бетадина | MundipharmaMedicalCompany, Швейцария | 14671-1203 | |
| Пинцет Dumont #7 FST | Германия | 11274-20 | |
| Средний и малый микроножницы | Medline International Switzerland Sà rl | UC4337 | |
| Микрососудистые зажимы | FST, Германия | 18051-28 | |
| Папаверин | ESCA химикаты, | Швейцария RE 356 803 | |
| Vein Pick | Harvard Apparatus, Кембридж, Великобритания | 72-4169 | Только для одноразового использования |
| Физиологический раствор | Dr. G. Bichsel AG, , Швейцария | 1330055 | |
| Полисорб 5-0 шов | Covidien AG, | Швейцария UL 202 | Монофиламент |
| сульфадоксин и триметоприм-триметазол | Werner Stricker AG, Швейцария | Swissmedic Nr. 50'361 | |
| Антисептик-октенисепт | Schü lke & Mayr AG, Швейцария | GTIN: 4032651214068 | |
| фосфат буферизованный физиологическим раствором | Roth | 1058.1 | |
| изобутанол-2-метилбутан | Sigma-Aldrich, Швейцария | M32631-1L | |
| Оптимальная температура резки compound-Tissue-Tek | VWR Chemicals, Бельгия | 25608-930 | |
| Cryostat | Leica, Glattbrugg, Швейцария | Leica CM1860 UV | |
| Предметное стекло- Superfrost Plus | Thermo Scientific | 4951PLUS4 | |
| Mayer's Haematoxylin | Sigma-Aldrich, Швейцария | MHS32-1L | |
| Eosin 0,5% aq. | Sigma-Aldrich, Швейцария | HT110232-1L | |
| Oil Red O | Sigma-Aldrich, Швейцария | O0625-25G | |
| α-антитела к гладкомышечному актину | Abcam, Великобритания. | ab7817 | |
| Антитело к клону макрофагов RAM11 | DAKO, Швейцария | M063301 | |
| Hoechst | Abcam, Великобритания. | ab145596 | |
| Поликлональное вторичное антитело к козьим антителам (Chromeo 546) | Abcam, Великобритания. | ab60316 | |
| Alexa Fluor 488/547 | Abcam, Великобритания. | ||
| Монтажная среда для глицереля, водная | вода DAKO, Швейцария | C056330 | |
| гематоксилин для окрашивания пентахрома Movat | Sigma-Aldrich, Швейцария | H3136-25G | |
| Хлорид железа для окрашивания пентахрома Movat | Sigma-Aldrich, Швейцария | 157740-100G | |
| Йод для окрашивания Movat | Sigma-Aldrich, Швейцария | 207772-100G | |
| Йодид калия для окрашивания пентахрома Movat | Sigma-Aldrich, Швейцария | 60400-100G-F | |
| Альцианский синий для окрашивания Movat | Sigma-Aldrich, Швейцария | A5268-10G | |
| Крепкий аммиак для окрашивания пентахрома | Movat Sigma-Aldrich, Швейцария | 320145-500ML | |
| Бриллиантовый кроцеин MOO для окрашивания пентахрома Movat | Sigma-Aldrich, | Швейцария 210757-50G | |
| Кислота Fuchsin для окрашивания пентахрома Movat | Sigma-Aldrich, Швейцария | F8129-50G | |
| Тиосульфат натрия для окрашивания пентахрома Movat | Sigma-Aldrich, Швейцария | 72049-250G | |
| Фосфовольфрамовая кислота для окрашивания пентахрома Movat | Sigma-Aldrich, Швейцария | 79690-100G | |
| Crocin для пентахрома Movat окрашивание | Sigma-Aldrich, Швейцария | 17304-5G | |
| EUKITT для пентахромового окрашивания Movat | Sigma-Aldrich, Швейцария | 03989-100ML |
Ссылки
- Mozaffarian, D., et al. Heart disease and stroke statistics--2015 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 131, e29-e322 (2015).
- Boone, L. R., Brooks, P. A., Niesen, M. I., Ness, G. C. Mechanism of resistance to dietary cholesterol. J Li....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
Больше статей
