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Medicine

3 차원 초음파 영상: 골격 조직의 신속 하 고 비용 효율적인 Morphometry

Published: November 27, 2017 doi: 10.3791/55943
* These authors contributed equally

Summary

3D 초음파 (3DUS) 이미징 골격 조직의 신속 하 고 비용 효율적인 morphometry 수 있습니다. 우리는 3DUS를 사용 하 여 근육 볼륨 및 잘라냅니다 길이 측정 하는 프로토콜을 제시.

Abstract

3D 초음파 이미징 (3DUS)의 발달 목표를 인간의 근육의 3 차원 형태소 초음파 분석을 수행 하는 형식입니다. 3DUS 이미지 보정된 자유형 2D B 모드 초음파 이미지, 복 배열에 배치 되는에서 건설 한다. 초음파 (미국) 이미징 근육 크기, 잘라냅니다 길이, 및 pennation의 각도의 정량화를 허용 한다. 이러한 형태학 변수는 힘 분 발의 근육 힘 및 길이 범위의 중요 한 결정 요인입니다. 제시 프로토콜 m. vastus lateralis m. gastrocnemius medialis의 볼륨과 잘라냅니다 길이 결정 하는 방법을 설명 합니다. 3DUS 3D 해 부 참조를 사용 하 여 표준화를 촉진 한다. 이 방법은 골격 근육에서 3D 형태 측정을 위한 신속 하 고 비용 효율적인 접근을 제공 합니다. 건강 및 스포츠, 근육의는 morphometry에 정보는 치료 또는 훈련 후 진단 및 후속 평가에 매우 유용한.

Introduction

건강 관리, 스포츠, 근육의 형태에 대 한 정보에서는 진단 및 후속 평가에 매우 중요 한 치료 또는 훈련1후입니다. 초음파 (미국) 상상 하는 근육 질환2, 중요 한 질병3,4, 심혈 관 질환5, 신경 장애6, 부드러운 조직 구조의 시각화를 위한 일반적으로 사용 되는 도구 7,8및 신체 훈련6,,910의 효과. 미국 영상 정량화를 근육 크기, 잘라냅니다 길이, 및 pennation의 각도 수 있습니다. 이러한 형태학 변수는 중요 한 결정 요인의 근육 힘 및 길이 범위의 강제 노력11,12,13,,1415.

현재, 미국 이미징 측정 주로 2D 이미지, 그 선택에서 수행 되는 아마도, 적당 한 방향 및 위치는 초음파의 조사. 이러한 2D 방법 관심의 매개 변수는이 비행기 내에서 존재 하지 않을 수 있습니다 하는 동안 하나의 이미지 평면 형태 측정을 제한 합니다. 형태소 분석에는 비행기 밖으로 측정 3D 참조 포인트를 사용 하 여 3D 접근이 필요 합니다. 부드러운 조직의 이러한 3D 형태 표현 자기 공명 영상 (MRI)16,17,18,,1920에 의해 제공 알려져 있다. 그러나 MRI는 비싸고 항상 사용할 수 없습니다. 또한, 근육 섬유의 시각화 확산 텐서 영상 (DTI)21등 특수 MRI 시퀀스를 필요합니다. MRI에 대 한 비용 효율적인 대안 3D 초음파 (3DUS) 영상입니다. 3DUS 접근 MRI 기술, 예를 들어에 비해 몇 가지 장점이, 그것은 주제를 검사 하는 동안 위치 지정을 위해 적은 공간 한계를 부과. 3DUS 이미징 순차적으로 2D (B 모드 미국) 이미지를 캡처하고 볼륨 요소 (복) 배열22,,2324에 위치 하는 기술 이다. 3DUS 이미지 재건의 과정의 5 단계 구성: (1) 캡처 일련의 자유 2D 미국 이미지; (2) 모션 캡쳐 (MoCap) 시스템;를 사용 하 여 미국 탐사선의 위치를 추적 (3) 동기화 MoCap 위치와 미국 이미지; (4) 위치와 방향을 참조;의 보정된 시스템을 사용 하 여 복 배열 내에서 초음파 이미지의 계산 그리고 (5)이 복 배열에 이러한 이미지를 삽입.

3DUS 접근은 골격 근육15,25,26,27,,2829의 형태학의 평가 대 한 성공적으로 적용 되었다. 그러나, 이전 접근7,15,,2530 입증 했습니다, 많은 시간이 소요 복잡 하 고 기술적으로 제한 하 고, 큰 근육의 작은 세그먼트를 개축 될 수 있는 대로.

3DUS 접근을 개선 하기 위해 새로운 3DUS 프로토콜은 시간의 짧은 기간 내에 완벽 한 근육의 재건 수 있도록 개발 되었습니다. 이 프로토콜 문서 이미징 m. vastus lateralis (VL) 및 m. gastrocnemius medialis (GM)의 morphometry를 위한 3DUS의 사용을 설명 합니다.

Protocol

인체와 관련 된 모든 절차는 VU 의료 센터, 암스테르담, 네덜란드의 의료 윤리 위원회에 의해 승인 되었습니다가지고.

1입니다. 계측

  1. 측정 컴퓨터초음파 장치 를 연결 합니다. 필요한 경우, 순차적 초음파 이미지를 저장 하 프레임-잡아 하드웨어 또는 소프트웨어를 사용 합니다.
    참고: 5 cm 선형 배열 조사 (12.5 m h z)는 B 모드 이미지 (25 Hz)를 생성 하는 데 사용 됩니다. 각 측정 전에 이미징 깊이, 음향 주파수와 전력의 추가-근육의 결합 조직 인터페이스를 시각화 하기 위해 최적화 되어 있다. 측정, 동안 이러한 설정은 변경 되지 않습니다.
  2. MoCap 시스템 측정 컴퓨터에 연결 합니다.
  3. 엄격 MoCap 클러스터 표식 위치 및 미국 탐사선의 방향을 추적 하 초음파 프로브 연결 합니다.
  4. 동기화 장치 (피에 조 크리스탈) MoCap 시스템의 트리거 입력에 연결 합니다.
    참고: 동기화 장치의 활성화 순간적으로 활성화 피에 조 크리스탈 변환기도 음파를 전송 합니다. 받은 soundwaves 시스템 개시 (그림 1A, 화살표)에서 미국 이미지에 독특한 유물을 만듭니다.
  5. 물으로 맞춤 교정 프레임 (팬텀)를 채우십시오.

2. 보정

참고: 프로브 좌표계에 관하여 미국 이미지에서 공간 보정 (T로에서) 변환 매트릭스를 계산을 수행 합니다. 이 교정 과정 되었습니다22위에서 설명한. 에 대 한 간략 한 설명은 아래를 참조 하십시오.

  1. 장소는 팬텀 팬텀 좌표에서 (Phxyz그림 1B, 화살표), 안정 된 표면에 알려진된 위치에와 (즉, 두 개의 해저 횡단 전선)를 들고 물으로 가득 합니다. 
  2. 온도계와 물 온도 측정 합니다.
  3. MoCap 포인터 도구를 사용 하 여 글로벌 좌표계 (Gl)에 위치와 방향을 팬텀의 기록.
  4. 미국 이미지 샘플링을 시작 하 고 활성화 MoCap 데이터 수집 (3.3.3 단계에서 설명).
  5. 머리를 물에 미국 프로브 (Pr)의 잠수함 번역 및 40의 미국 조사를 회전 s (25 Hz에서 샘플링) 모든 방향으로, 미국 이미지 (Im)와의 가시성을 유지.
  6. 데이터 수집을 중지 합니다.
  7. 피에 조 크리스탈 만든 유물을 포함 하는 첫 번째 미국 프레임을 식별 하 여 MoCap 데이터 및 미국 이미지를 동기화 하 고 그에 따라 미국 이미지 시퀀스를 자르기 (3.4.1.1 단계에서 설명).
  8. 관련 미국 이미지는와 명확 하 게 표시 되 고 이러한 미국 이미지 (메신저xyz)에와의 위치 추적을 식별 하 고 정확한 수 온에 대 한 위치.
  9. 시간 인스턴스에 홍보 (공식 1) Ph 에서 변환의 일련에 의해 움직이는 홍보 에 관하여와의 위치를 확인 (나 1: n =) 해당 단계 2.8에서에서와 식별 하.
    Equation 1
  10. 식 2를 해결 하 여 홍보 변환 매트릭스 (홍보T) 계산, 시간에 메신저 (단계 2.8에서에서 측정 되는)와의 모든 신원 관련 된 일치 (i = 1 : n)와 홍보 (단계 2.9에서에서 계산)에서 좌표.
    Equation 2

Figure 1
그림 1: 3DUS 알고리즘의 도식. (A) 모션 캡쳐 (MoCap) 시스템 마커 엄격 (Gl) 글로벌 좌표계 내에서 초음파 프로브에 연결 된 클러스터를 추적 하기 위해 사용 됩니다. MoCap 및 초음파 데이터의 동기화 만들기 수행 됩니다 Optotrak에 의해 도입 된 유물 (화살표)를 사용 하 여 트리거 피에 조 크리스탈. (B) 위치와 방향을 초음파 이미지 좌표 시스템 (Im)의 홍보메신저내에서 알려진된 지점을 식별 하 여 프로브 좌표계 (홍보)를 기준으로 계산 됩니다. 이 위해 맞춤형 팬텀 팬텀 좌표에서 (Ph) 알려진된 위치에와 (즉, 두 개의 잠수 횡단 전선)를 들고 물을 가득 사용 됩니다. (C) 변환의 일련이 알려진된 포인트는 홍보에 계산 됩니다. (D) 알려진된 변환의 전체 시리즈, 메신저 에서 이미지는 어떤 복 배열 좌표 시스템 (Va)으로 변형 될 수 있다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

3. 실험 프로토콜

참고: 실험 프로토콜을 3DUS 이미징, 즉 GM과 VL (그림 2A)의 morphometry를 포함 하는 두 개의 일반적으로 수행된 프로토콜을 설명 합니다.

  1. 제목 위치
    1. GM 실험:
      1. 거짓말을 경향이 시험 테이블에는 테이블의 가장자리 두 받침이 주제 요청.
      2. 경골 아래 지원 배치 하 여 더 낮은 다리를 수평으로 맞춥니다. 실험 프로토콜 동안 무릎 확장을 방지 하기 위해 덧 대 진된 분 이죠 스트랩과 시험 테이블에 허벅지를 수정 합니다.
      3. 주문 품 footplate31에 검사할 다리의 발에 맞게.
      4. Footplate31연결 된 각도와 주문 품 토크 렌치를 연결 합니다. 찾을 footplate 각도 해당 하는 외부에서 인가 되 토크, . 0, Nm (그림 2A).
      5. (그림 2A, 화살표) 테이블에 연결 되어 있는 확장 가능한 막대를 사용 하 여 0 Nm net dorsiflexion 순간 해당 방향에 footplate 수정.
    2. VL 실험:
      1. 부정사는 검사 테이블에 거짓말을 과목을 요구 하십시오.
      2. 60 °, 무릎 굴곡 각도 ( epicondylus lateralis주요 trochanter와 후자 발목 lateralis 의 센터를 연결 하는 선 사이의 각도로 세분화)으로 설정 지원에 더 낮은 다리를 위치.
      3. 엉덩이 움직임을 방지 하기 위해 엉덩이 아래 삼각형 모양의 빔을 배치 합니다.
      4. 실험 프로토콜 중 다리 움직임을 방지 하기 위해 두 개의 패딩된 분 이죠 스트랩과 지원에 더 낮은 다리를 수정 합니다.
      5. 엉덩이 각도 ( trochanter 주요와 뼈 lateralis femoralis와 후자 os coracoides 를 연결 하는 선 사이의 각도로 세분화) 95 °의 각도 변경 하 여 설정 된 다시 시험 테이블의 지원.
        참고:이 설명된 포즈 선정 되었습니다, 그것은 최적의 아이소메트릭 무릎 확장 측정32,33동안 관절 각도 유사로.
  2. 뼈 다 귀와 관심 (ROI)의 지역의 지역화
    참고: 이렇게 3 차원 초음파 검사의 지도 피사체의 위쪽 다리, 더 낮은 다리 및 발 자세의 후 실험 정량화 합니다. 식별 하 고 MoCap 포인터 도구를 사용 하 여 글로벌 좌표계에서 해 부 뼈 랜드마크의 위치를 기록 합니다.
    1. GM 실험:
      1. 촉진에 의해 다음과 같은 랜드마크를 식별 하 고 피부 마커를 사용 하 여 표시: 중간과 측면 대 퇴 골 epicondyles 그리고 경골 및 비 골의 malleoli의 센터의 가장 눈에 띄는 등 측면.
      2. 미국 장치를 사용 하 여 식별 하 고 중간과 측면 대 퇴 골 condyles (다리의 등 쪽)에 가장 피상적인 지점과 가장 인접 위치는 calcaneus에 GM의 삽입의 피부 마커를 사용 하 여 표시 합니다.
    2. VL 측정:
      1. 촉진에 의해 다음과 같은 랜드마크를 식별 하 고 피부 마커를 사용 하 여 표시: 중간과 측면 malleoli (위와); tuberositas 경골;의 슬 개 골 힘 줄의 가장 근 삽입 중간과 측면 epicondyles (위와); 슬 개 골 및 슬 개 골;에 가장 중간, 인접과 측면 삽입 경계의 꼭대기 그리고 어깨에 os coracoides .
      2. 미국 장치 식별 하 고 주요 trochanter 의 가장 피상적인 측면 및 주요 trochanter에 VL의 가장 근 삽입 표시.
    3. 모든 근육에 대 한 글로벌 좌표계에 MoCap 포인터 도구 기록 표시 랜드마크 (섹션 3.2.1, 3.2.2에서에서 설명)를 사용. 확인 된 해부학 적 랜드마크를 MoCap 포인터 도구를 이동 하 고 MoCap 소프트웨어를 사용 하 여 "기록" 버튼을 누르면 위치를 기록 하.
    4. 초음파를 사용 하 여 식별 중간과 측면 근육 국경; 피부 마커를 사용 하 여 피부에 중간과 측면 테두리를 표시 합니다.
  3. 3 차원 초음파 검사
    1. 3D 초음파 검사 하는 동안 이동 하지 주제를 지시 합니다.
    2. 피부와 미국 프로브 사이 적절 한 접촉 되도록 ROI에 충분 한 초음파 젤을 적용 합니다.
      참고: 젤 같은 응용 프로그램 제한 프로브 압력 그리고 이렇게 조직 변형 분명 미국 이미지를 얻을 하는 데 필요한 수 있습니다.
    3. 측정 컴퓨터에 프레임 그래버 소프트웨어 (예를 들어, WinDV34) 열고 "기록" 버튼을 클릭 하 여 미국 이미지 수집을 시작 합니다.
      1. 그 후, 시작 하 고 동기화 장치;에 "시작" 버튼을 누르면 MoCap 데이터 수집을 활성화 이 자동으로 동기화 장치 (즉, 피에 조 크리스탈) 위치한 MoCap 개시 (그림 1A, 화살표) 인스턴스에 미국 이미지에 독특한 유물을 만드는 미국 프로브를 활성화 합니다.
    4. 최소한의 프로브 압력 발휘 아직 이미지 품질을 보장 하면서 이동 조사 일정 한 속도로 투자 수익; 이것을 "청소" 라고 합니다. 분명 해 부 단면 미국 이미지는 대상 근육의 기록 다는 것을 확인 하십시오.
    5. 시각적으로 검사; 하는 동안 피사체의 움직임에 대 한 확인 주제 이동 하는 경우는 청소를 중단 하 고 단계 3.3.1에서에서 반복 합니다.
    6. GM 실험에 대 한 프로토콜을 청소
      1. 허벅지의 중간 양상에 대 퇴 골 condyles에 proximally 미국 조사를 놓습니다. 수행 청소 (섹션-3.3.1 3.3.5에서에서 설명)에 아래로 모든 방법을 GM과 아 킬 레 스 힘 줄의 중간 국경의 해 부 단면 이미지 내에서 가시성을 확보 하는 GM의 중간 국경 프록시 원심 방향에서의 calcaneus에의 삽입
      2. 추가 추가 스윕 (섹션에서에서 설명한 대로 3.3.3-3.3.5)까지 전체 ROI 스캔 되 고 근육의 내측 테두리 완전히 몇 군데 (그림 2B). 이전 스윕의 젤에서 추적을 사용 하 여 약간 (0.5 cm) 이전 스윕된 지역 중복 다음 청소 안내.
    7. VL 실험에 대 한 프로토콜을 청소
      1. 미국 조사를 경골 고원의 측면 측면에 놓습니다. VL, 주요 trochanter에 출처까지 VL의 측면 테두리의 가시성 확보 측면 테두리 위로 원심 근 방향으로 청소를 시작 합니다.
      2. 추가 추가 스윕 (섹션에서에서 설명한 대로 3.3.3-3.3.5)까지 전체 ROI 스캔 되 고는 VL의 중간 테두리 완전히 몇 군데 (그림 2B). 이전 스윕의 젤에서 추적을 사용 하 여 약간 (0.5 cm) 이전 스윕된 지역 중복 다음 청소 안내.
        참고: 스윕 프로토콜 동안 피사체의 움직임 방지 되어야 한다로 움직임 저하 복 배열에서 2D 미국 이미지의 위치. 스윕 수 조사의 폭과 대상 근육의 너비에 의해 결정 됩니다. 일반적으로, 4 cm의 프로브 폭 및 12 또는 18 cm의 근육 폭, 5 또는 7 스윕, 각각 필요 테두리를 포함 하 여 투자 수익을 커버 합니다.

Figure 2
그림 2: 회로도의 실험 설치 및 대상 근육 (gastrocnemius m. medialis (GM) 설치 및 m. vastus lateralis (VL) 설치) 이상의 초음파 프로브의 스윕. (A) 두 실험 조건에 대 한 주제의 특정 공동 구성. 녹색으로 표시 되는 객체 위치와 팔 다리의 방향을 설정 하는 조정 가능 하다. 화살표는 footplate 각도 수정 하는 데 사용 되는 확장 가능한 막대를 나타냅니다. (B) 초음파 프로브 관심 영역을 통해 여러 스위프의 경로입니다. 파란색 화살표는 관심사의 지역에 단일 스위프를 나타냅니다. 왼쪽: 스윕 통해 GM; 오른쪽:는 VL 통해 스윕입니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

  1. 3D 초음파 복 배열 재구성
    1. 개축 단일 3DUS 복 배열 (3DUS 이미지) 단일 스위프에서 특정 해 부 ROI (예를들면, 근육, 힘 줄)의 피부를 통해 빈 작성 및 inpainting 사용자 지정 스크립트를 사용 하 여 3DUS 복 배열. 3DUS 복 배열 재구성 하려면 다음 후 실험 단계를 수행 합니다.
      1. 동기화 MoCap 데이터 및 미국 이미지 첫 번째 미국 프레임을 식별 하 여 피에 조 크리스탈 만든 유물을 포함 하 고 미국 자르기 이미지 시퀀스 따라 VirtualDub 소프트웨어35와 함께. 먼저, 프레임 선택 슬라이더는 식별 된 시작 프레임에 놓고 키보드에 "홈" 버튼을 누르면. 다음, 측정 (마지막 피부 접촉)의 끝에 슬라이더를 이동 하 고 "종료" 버튼을 누릅니다. 자른된 이미지 시퀀스 내보내기 "F7" 버튼을 누릅니다.
      2. 미국 이미지, 사용자 지정 스크립트를 사용 하 여 채워질 수 있는 복 배열 (Va) 좌표 시스템을 정의 합니다. Va 검색 방향에 따라 중심 이며 단일 청소의 모든 미국 이미지에 맞게 크기를 확인 합니다.
        참고: 처음, 버지니아 이루어져 직사각형 모양의 복 스윕;의 방향에 더 긴 축 이 모양 충전 효율을 향상 시킵니다.
      3. 사용자 지정 스크립트를 사용 하 여 미국 이미지에서 픽셀 회색 값으로 버지니아 에서 복을 할당 합니다. 이 과정은 앞으로 매핑 또는 빈 채우기 (식 3; 으로 설명 그림 1 C) 23 , 24.
        Equation 3
        참고:이 앞으로 버지니아 버지니아 좌표계에서 이미지의 위치와 방향에에서 2D 미국 이미지의 매핑을 보여 줍니다. 즉, 하나의 이미지의 모든 픽셀의 위치 (Imxyz(1:n)) (i) 시간 인스턴스에서 동시에 매핑된 앞으로 복 배열에. 빈 작성 절차만은 해결 되지 않은 복 비어 ( 블랙)을 떠나 해결된 복을 채웁니다.
        참고: Equation 7 (즉, Gl 변환 매트릭스를 홍보 ) 앞에서 설명한 변환 매트릭스의 역 매트릭스를 나타냅니다.
      4. 복 배열 (즉, 검은 복) 내부 차이 식별 하는 사용자 지정 스크립트를 사용 하 여. 이진 이미지 처리를 사용 하 여 다음 단계를 수행:
        1. 모든 채워진된 복 개는 이진 복 빈 채워진 배열을 만듭니다. 스캔된 영역 내 바이너리 이미지 팽창 및 침식, 동일한 크기 구조-요소, 모든 관련 복 (복 회색 값)를 사용 합니다. 빈 채워진 이진 복 배열 (간격) 관련 복 (간격)에서 빼서 간격을 감지 합니다.
          참고: 이후 팽창 및 침식 작업은 이미지 처리 단계를 이진 이미지 완료. 이러한 단계를 차례로 수행 하 여 외부 경계 내부 제거 간격 동안 계속 합니다.
      5. "Inpaint 절차"를 사용 하 여 확인 된 격차와 회색 값 복36서라운드.
        참고:이 inpaint 기법을 사용할 수 있습니다: "각 레이블이 복 유한 차이에 의해 측정에서 두 번째 파생의 제곱의 합을 최소화 하는 바탕으로 부드럽게 보간 간격 채우십시오"36.
      6. '쌍입방 보간에 의해 버지니아 의 복 치수를 맞춰야 하 고 누적된.tiff 이미지 (3DUS image)로 복 배열을 저장 합니다.
  2. 여러 스윕 재건
    1. 모든 개별 스윕 (3.4 섹션에서 설명) 재구성 병합 여러 스윕 같은 Va 좌표계에 따라 하나의 큰 투자 수익을 취재.
    2. 새로운 버지니아 좌표 시스템, 모든 개별 재건축된 스윕에 맞게 크기를 만듭니다.
    3. 단계별 개별 버지니아의 큰 버지니아에 놓습니다. 한 복은 이미 다른 버지니아에 의해 할당 된, 경우이 복만 덮어씁니다 경우 새로운 복 회색 값 ≥10 8 비트 가늠 자에, 그렇지 않으면 새 복 회색 값은 삭제 됩니다.

4입니다. 근육 형태학의 변수의 측정

  1. 의료 상호 작용 툴키트37 (MITK)를 사용 하 여 3DUS 이미지를 로드 하 여 근원, 삽입, 및 근육 배꼽의 선단부의 좌표를 검색.
    1. 3D 이미지를 로드 한 후 '결합 십자 회전' 슬라이스 설정 합니다. 근육 이나 뼈 구조를 정확 하 게 좌표를 검색 하는 축에 맞춥니다.
      참고: MITK는 선호 해 부 포인트의 평가 대 한 다른 3D 이미징 분석 소프트웨어를 통해 신속 하 고 대화형 복 배열 식별 절차를 용이 하 게 어떤 방향으로 ("결합 십자 회전"), 부 러 뜨 리 수 있기 때문에.
  2. 근육 량을 측정 하기 위하여 MITK 사용 하 여 기원과 근육 배꼽의 원심 끝 사이의 근육 배꼽 경계를 식별. 근육 배 길이 (그림 3A)에 따라 분산 수동으로 여러 해부학 적 횡단면을 균등 하 게, 세그먼트를 내장 MITK 분할을 사용 합니다.
    1. '분할 도구'를 열고 '새로운 분할.'를 만들합니다 횡단면 근육 배 따라 중간에서 식별 된 근육 경계 세그먼트를 시작 합니다. 수동 세그먼트를 추가 하 고 마우스 왼쪽된 버튼을 누르면 근육 경계를 따라 커서를 이동 하 여 그리기를 키보드에서 누릅니다 'A'. 언론의 ' 시장 세분화의 일부를 제거 하.
    2. 키 해당 하는 마지막 선택된 모드를 누릅니다 (즉, 'A' 나의 ') 근육 배 따라 다른 횡단면을 십자선을 이동. 4.2.1 새로운 선택 된 횡단면을 세그먼트를 반복 합니다. 다음 단계를 계속 하기 전에 최소한 6 시간 동안이 단계를 반복 합니다.
    3. 근육 배 길이 따라 모든 횡단면에 '보간'를 '사용' 검토 근육 경계 (노란색 선)의 제안 된 세그먼트를 설정 합니다.
    4. 제안 된 보간된 세분화 (노란색 선) 이미지에서 근육 경계를 일치 하지 않는 횡단면에 추가 세그먼트를 추가 합니다. 4.2.2 단계를 반복 합니다.
    5. '모든 분할 영역에 대 한 확인' 버튼을 눌러 고는 세그먼트 만들어진 비행기를 선택 합니다.
    6. 거의 원시 래스터 데이터 (NRRD) 파일로 이진 볼륨을 저장 하 고 사용자 지정 스크립트를 사용 하 여 레이블이 지정 된 볼륨 크기를 계산 합니다.
  3. 성숙기 (그림 3A)38의 전체 길이 포함 하는 근육 배꼽의 중간 경도 잘라냅니다 비행기의 방향을 찾아.
    참고: 중간 경도 비행기는 3 개 점에 의해 정의 됩니다. 기원과 근육 배꼽의 원심 끝의 처음 두 점은 있습니다. 세 번째 포인트와 근육 배꼽의 선단부를 짝수가 해 부 단면 이미지에서 발견 된다. 이 해 부 단면 이미지 내에서 제 3 원심 aponeurosis 수확량의 탄젠트에 투영 처음 두 점 사이의 중간점을 원점 함께 가리키고 근육 배꼽의 선단부 중반 경도 평면을 정의 합니다.
  4. 중반-경도 비행기에서 기원과 근육 배 (예를 들어, 50%)의 원심 끝 사이 미리 정의 된 표준된 위치에서 잘라냅니다 길이 측정 합니다. 근육 경계 세그먼트. 라인 중간 놓고이 라인 기본 성숙기의 방향을 일치 될 때까지 회전 합니다. 근육 경계와이 라인의 교차로 잘라냅니다 길이 (그림 3B)의 추정을 나타냅니다.
    참고: 이전에 그것은 증명 계정, 때로는 곡선, 원심 aponeurosis38의 방향 고려 하는 데 필요한 원본 사이 및 원심 해 부 단면 이미지 (그림 3B)에서 보듯이 근육 배꼽의 끝입니다.

Figure 3
그림 3: 3DUS 분석의 도식. (A) 식별 및 대상 근육 경계 해 부 단면 이미지 근육 배 따라 중간에서 세분화 녹색 실선이 나타냅니다 ( 중심 원심 aponeurosis (파란색 점선)의 방향에 수직 중반 경도 비행기의 방향을. (B) 측정 잘라냅니다 길이의 중반 경도 잘라냅니다 비행기 내에서 수행 됩니다. 투명 한 영역 근육 경계 식별 통폐합은 레드. 점선된 노란색 라인은 중간 근육 배꼽에 놓이고 기본 성숙기의 방향을 일치 될 때까지 회전. 이 선 근 위 및 원심 aponeuroses (굵은 노란색 실선으로 연결)와 교차점 잘라냅니다 길이 예상을 나타냅니다. 녹색 실선 위치와 해 부 단면 평면의 방향을 나타냅니다. : 위아래 GM (m. gastrocnemius medialis): VL (m. vastus lateralis) 근육. 규모에 대 한 흰색 사각형 대표 1 cm × 1 cm. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Representative Results

설명된 3DUS 기술은 4 명의 남성 인간의 시신에서 GM과 VL의 형태학 상 데이터를 수집, 살에 죽음 76.8 ± 7.9 (평균 ± SD) 사용 되었다. 시신 부의 해부학 및 신경 과학 Vrije 대학교 의료 센터 (VUmc), 암스테르담, 네덜란드의 기부 프로그램을 통해 획득 했다. 시체 방부 방법 조직39의 형태학 적 특징을 유지 하기 위한 보존 되었다.

해 부, 이전 3DUS 이미지 GM과 VL의 설명 된 방법론에 따라 만들어졌습니다. 해 부, 동안 피부, 피하 조직, 그리고 GM과 VL overlaying fasciae 제거 되었습니다. 계정에 원심 aponeurosis의 방향을 복용 중간 경도 섹션 삭감 되었다. 캘리퍼스를 사용 하 여 잘라냅니다 길이 측정, 기원과 근육 배꼽의 원심 끝에 중간 이었다. 그 후, tenotomy, 후 근육 배 해 부 되었고 보정된 물 열에 빠져들. ImageJ를 사용 하 여 볼륨, 근육 배 없이 물 란의 사진에 측정 되었다 그리고 근육 볼륨 차이40에서 계산 했다. 잘라냅니다 길이 볼륨 세 번 측정 하 고 평균 및 표준 편차 값을 계산 했다. 3DUS 메서드 및 해 부 측정 사이 기준 유효 평균 잘라냅니다 길이 근육 볼륨 Pearson의 상관 관계를 사용 하 여 테스트를 했다. 파생된 잘라냅니다 길이 볼륨 측정을 사용 하 여 양방향 모델 내부 클래스 상관 계수 (ICC3, 3)41, 혼합 계량은 3DUS 메서드는 데이터의 로그 변환 후 내 평가자 신뢰도 편차 (CV)의 계수 계산 했다. 잘라냅니다 길이 근육 볼륨 측정의 타당성은 중요 하 고 높은 상관 관계에 의해 확인 되었다 (r = 0.998, p < 0.01와 r = 0.985, p < 0.01, 각각). 3DUS 메서드의 내부 평가자 신뢰성 파생 잘라냅니다 길이 측정 및 볼륨 높았다 (ICC3, 3 0.983, 이력서 7.3%, 및 ICC3, 3 0.998, 이력서 5.4%, 각각). 그것은 3DUS 접근 제시 VL 인간과 GM (표 1)의 볼륨과 잘라냅니다 길이 평가 대 한 유효 하 고 신뢰할 수 있는 도구는 결론을 내렸다.

Table 1
표 1: 시신 유효성 검사 데이터. C#은 시신 수, GM은 m. gastrocnemius medialis, VL는 m. vastus lateralis. "해 부" 표시 결과 시신 해 부를 하 고 "3DUS"는 시신을 3DUS 이미지 분석에서 결과 보여줍니다.

Discussion

유효 하 고 신뢰할 수 있는 3DUS 기술은 골격 근육의 형태학 변수 빠른 분석에 대 한 수 있도록 제공 됩니다. 그러나 3DUS 접근은 아직 사용 하지 일반적으로 부드러운 조직 이미징에 대 한 다른 3DUS 접근 약 10 년42,43, 사용할 수 있다. MRI는 vivo에서 근육 볼륨의 추정에 대 한 ' 금 표준 ' (.,16,17,18,,1920참조). MRI 유효성 테스트 되었고 유령 또는 MRI 기반 볼륨 견적44,45알려진된 볼륨의 시체 장기 비교 연구에서 확인. 그러나, 연구에 대 한 MRI 가용성 제한 되며 검사는 시간과 비용이 많이 드는. 또한, 자세는 보어에 의해 제한 된다 실험 주제 MRI 스캐너의 점유. 전형적인 미스터 이미지 생성 부족 대비 근육 형상 (잘라냅니다 길이 및 각도)의 변수 측정을 수행 합니다. 그러나, 3D 근육 형상 또한 MRI를 사용 하 여 추가 기술, 예를 들면, DTI 기술21을 사용 하 여 평가 될 수 있습니다. MRI, 미국 이미지와 마찬가지로 적절 한 구분 인터페이스에서 다른 유형의 조직 ( 우리 안에 보이는 이미지), 부드러운 조직 볼륨 평가1,30 는 유효한 형식을 제공 제공 44,,4647,,4849. MRI, 달리 3DUS 이미지는 동일한 측정에서 볼륨 및 근육 형상에 분석을 수행 하기 위해 충분 한 대비를 있다.

또한, 발표 기법 큰 근육의 연구에 대 한 하나의 배열로 여러 스윕의 이미지를 결합 수 있습니다. 이 새로운 3DUS 방법 근육 형태학의 임상 평가 대 한 잠재적인 도구를 제공합니다. 이 방법은 근육 (예를 들어, 힘 줄, 내부 장기, 동맥) 이외의 소프트-조직 구조 이미징에 대 한 또한 사용할 수 있습니다.

오프 라인 처리 시간에 대 한 수정:

3DUS 접근의 수정 처리 시간을 개선 하 고 더 큰 근육을 측정 목표로 주로 했다. 3DUS 이미지의 오프 라인 처리 시간 복 배열 설정, 샘플링 주파수, 투자 수익, 기간 및 스윕, 스윕의 수 및 사용된 워크스테이션의 속도의 크기에 따라 달라 집니다. 이전, 재구성 시간 ≈ 2 h의 750 미국 이미지를 생성 한 스윕 재구성을 위해 필요 했다 (30 25 Hz에서 s)15,,2530. 현재 3DUS 방법으로 동일한 청소 시간이 50 s 재건 (99% '오프 라인' 처리 시간을 향상). 이 개선 복 프레임-의해-프레임 채우기, 픽셀 픽셀 및 증가 랜덤 액세스 메모리 (RAM) 큰 복 어레이 구성 하는 워크스테이션의 대신에 큰 벡터 작업을 활용 하 여 향상 된 충전 알고리즘에 의해 설명 될 수 있다. 새로운 3DUS 방식으로 1 cm/s의 속도로 30 cm의 청소 길이 나타내는 일반적인 개조 대상 복 크기 0.2 x 0.2 x 0.2 m m의3 및 25 Hz의 샘플링 주파수 다음 시간이 걸립니다 재구성 하 :

a. 약 10의 동기화 펄스를 식별 하 고 관련 미국 이미지를 선택 하.
b. 약 120의 보정 변환 매트릭스 (홍보T)을 확인 하.
c. 약 10의 빈 작성 단계에 대 한.
4. 약 30의 갭 채우기 단계를 실행 하기 위한.

총 170 s. 참고, 단계 b 유일한 요구는 프로브에 MoCap 마커의 엄밀한 연결을 가정 하 고 한 번 수행할 수 복용 떠나는 50 단일 스위프의 재건에 대 한 s. 두 개의 단일 스위프 결합 복 배열 소요 약 10 s 재건.

제한 사항 및 중요 한 단계:

여러 3DUS 이미징 측면을 고려 수 있습니다.

i. 미국 이미지 품질: 복 배열 내에서 배치 될 더 많은 픽셀을 제공 하는 2D 미국 이미지의 높은 해상도. 이 더 높은 복 밀도로 이어지는 복 크기 감소를 허락할 것 이다. 몇몇 현재 사용할 수 있는 초음파 기계 조직 인터페이스의 더 나은 유물 없는 구별에 대 한 수 있도록 시끄러운 세부적인 질감을 줄이기 위해 공간 다중을 사용 합니다. 가장자리 향상 얼룩을 줄일 수 있다입니다. 그러나,는이 방법은 바람직하지 않다, 때문에 그것은 독특한 인터페이스, 인터페이스의 진정한 해 부 위치를 왜곡 함으로써 만들려는 시도에서 이미지를 변형 주목 한다.

ii. MoCap 정확도: 픽셀 수만 정확 하 게 배치를 복으로 위치 센서는 정확 하 게 조사의 좌표를 수량화 하는 경우. 이미지 해상도의 증가와 MoCap 정확도 더 중요 해 집니다. 제시 3DUS 0.2 x 0.2 x 0.2 m m3, 3DUS 복 어레이 재구성 하기 위해 충분 한 정확도 제공 하는 0.1 m m의 정확도로 MoCap 시스템을 사용 하 여의 복 치수와 함께 최고의 작품을 설치.

iii. 샘플링 주파수: 미국 이미지 또는 데이터 스트림 MoCap 최저 시간적 해상도 샘플 주파수를 결정 합니다. 이 청소 시간 또는 복 배열 설정을 영향을 줍니다. 예를 들어, 50 Hz로 25에서 샘플 주파수를 두 배로 청소를 시간을 반으로 수행할 수 있습니다. 또는, 스윕 속도 변경 하지 복 배열, 적은 간격 채워질 것을 떠나와 그로 인하여 잠재적으로 복 배열 해상도 증가 채우기 위해 더 많은 이미지를 제공 합니다. 그러나, 샘플링 주파수를 증가 없이 복 배열 해상도 증가 운동 유물의 잠재력을 증가할 것 이다 느린 검사 필요.

iv. 재건 시간 이미지: 빠른 복원 필요 충분 한 사용 가능한 RAM과 강력한 워크스테이션. 또한, 재구성 시간 크게 복 배열 볼륨 및 갭 채우기 프로세스의 복잡성에 따라 다릅니다.

v. 실험 프로토콜: 실험 프로토콜의 표준화 VL 및 GM, 현재 연구에서 exemplified 형태학 측정 (예:잘라냅니다 길이, 잘라냅니다 각도, 아랫 배 근육의 비교를 위해 필수적 이다 길이, 힘 줄 길이, aponeurosis 길이) 과목 및 경도 연구 과목 내 모니터링 사이. 그러나, note 근육을 활성화 하는 동안 나머지에서 평가 하는 형태를 변경할 수 있습니다. 예를 들어 VL 실험에 대 한 최대한 수축 하는 동안 무릎 신 근 형태 높은 pennation 각도 60 ° 무릎 굴곡, 나머지50형태에 비해 짧은 성숙기 보여줄 수 있습니다. 특정 조건에서 (., spasticity), 전도 (EMG) 검사 하는 동안 휴식 근육 활동 레벨을 확인 하는 데 사용할 수 있습니다.

6. 프로브 압력 및 조직 변형: ROI에 충분 한 초음파 젤을 적용 하는 경우 프로브와 피부 사이 전체 접촉 대 한 유지 하는 압력의 양을 제한 됩니다. 지침 서는 투자 수익을 스캔을 느끼게 한다 피부, 유혹과 압력 유지 젤 접촉 및 그로 인하여 피부에만 적용 해야 하는 것이 좋습니다. 그러나, 약간의 조직 변형 초음파 젤의 관대 한 금액으로도 피할 수 없을 수도 있습니다. 프로브 크기와 곡선된 ROI 압력 또는 사용 하는 젤의 필요한 금액을 영향을 줍니다. 큰 프로브 크기와 더 많은 곡선된 투자 수익 더 많은 압력을 필요로 하거나 비슷한 함께 작은 프로브 보다 더 많은 젤 투자 수익 곡선. 또 다른 가능한 해결책 미국 이미지의 반향 (즉, 비-피부-접촉) 영역을 삭제 하는 것입니다. 또한, 조직 변형 피부와 피하 지방 조직 층 첫 번째 조직 계층에서 발생할 가능성이 가장입니다. Note 아무 피하 지방 조직에 거의 주제는 따라서 압력의 부작용에 더 수 그리 다. 또한, 조직 개 악은 일반적으로 다른 청소와 오버랩의 지역 조사의 센터에서 대부분 발생 합니다.

7. 이미징 및 해 부 지식: 어떤 이미징 양식 적임을 사용 하 여 또 다른 중요 한 고려 사항은 이다 해부학 및 이미징 모달의 지식 의미 있는 해석의 얻을 것이 필수적입니다. 주제와 이미지 유물 사이 해 부 변화 인식 하 고 해 부 구조의 식별 과정에서 고려 될 필요가 있다. 한 근육의 다른 구성 요소 또는 근육 그룹51차별화 해 부 지식을 요구 하기 때문에 건강 한 그리고/또한 잘 발달 된 근육으로도 명확한 id는 어려운 수 있습니다. 그러나, 위축된 근육 (즉, 노인, 병 리, 또는 한 시신), 명확한 식별은 더 작은 크기 때문에 훨씬 더 복잡 한 이미지 대비를 감소 및 따라서 덜 뚜렷한 조직 인터페이스 (그림 4 ). 우리가 믿을 이전 해 부 지식 없이 우리 3DUS 이렇게 설계 및 3DUS 측정에서 올바른 판단을 만들기에서 제한 되어. 예를 들어 GM 실험에 대 한 다른 footplate 각도 발생 하지 않습니다 반드시 예상된 변화 근육에 힘 줄 복잡 한 길이, 발7변형 때문. 또한 원심 aponeurosis의 곡률에 대 한 자세한 해부학 정보 모든 과목38중반 경도 비행기의 적절 한 선택이 필수적 이었다.

Figure 4
그림 4: 변화와 품질의 허벅지를 따라 중간 quadriceps 근육의 해 부 단면 3DUS 이미지 재건. (A) 남성 인간의 시체의 예제 위축 상태의 이미지 죽음 (죽음 나이: 81 년). 허벅지 근육 근육의 개별 머리의 경계 식별은 어렵습니다. 앉아 있는 남성 (세 30 년)의 (B) 예. 남자 선수 노 젓는 사람 (세 30 년)의 (C) 예. 규모에 대 한 흰색 사각형 대표 1 cm × 1 cm. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

미래의 응용 프로그램:

3DUS 방법은 다양 한 목적 및 스포츠 클리닉에서 설정을 사용할 수 있는 이미징 도구를 제공 합니다. 임상 내정간섭에서 효과 체력 레벨52관련이 있습니다. 3DUS를 사용 하 여 근육을 잃는의 위험에 환자를 모니터링 하기 위한 중요 한 (예를 들어, 참조53,54,55)은 질량과 잠재적으로 치료의 조정에 대 한 수 있습니다. 3DUS의 다른 잠재적인 응용 프로그램 모니터링 개입 (훈련) 및 부상에 대 한 응답에서 근육의 형태학 상 적응에 있다.

이 프로토콜 자유 3DUS 스윕 기반 인체의 부드러운 조직 구조를 측정 하는 비용 및 시간 효과적인 방법 설명. 또한, m. vastus lateralis m. gastrocnemius medialis 의 의미 있는 형태소 매개 변수 평가 유효 하 고 신뢰할 수 있는 것으로 판명.

Disclosures

저자는 공개 없다.

Acknowledgments

저자는 매우 아담 트랜드와 2004 년,이 연구에 사용 된 소프트웨어의 개발에 대 한 영감을 했다 3 차원 초음파에 대 한 그들의 알고리즘을 공유 니콜라 프라이에 감사.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Ultrasound device (Technos MPX) Esaote, Italy NA
Linear array probe (12.5 Mhz, 5 cm) Esaote, Italy NA
Workstation (HP Z440) HP, USA http://www8.hp.com/us/en/workstations/z440.html
Framegrabber (Canopus, ADVC 300) Canopus, Japan ADVC 300
Motion Capture System (Certus) NDI, Canada http://www.ndigital.com/msci/products/optotrak-certus/
Synchronisation device VU, NL Contact corresponding author
Calibration frame VU, NL Contact corresponding author
Thermometer Greisinger, Germarny GTH 175/PT
Examination table NA NA Any examination table
Inclinometer Lafayette instrument, USA ACU001
Adjustable Footplate VU, NL Contact corresponding author
Torque wrench VU, NL Contact corresponding author
Extendable rod VU, NL Contact corresponding author
Goniometer (Gollehon) Lafayette instrument, USA 1135
Triangular shaped beam NA NA Made out a piece of stiff foam
Lashing straps NA NA Any lashing strap
Surgical skin marker NA NA Any surgical skin marker
Ultrasound transmission gel Servoson NA A sticky gel type is recommended

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의학 문제 129 3D 초음파 골격 근육 근육 볼륨 건축 근육 기하학 형태학 잘라냅니다 길이 m. gastrocnemius medialis m. quadriceps femoris m. vastus lateralis
3 차원 초음파 영상: 골격 조직의 신속 하 고 비용 효율적인 Morphometry
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Weide, G., van der Zwaard, S.,More

Weide, G., van der Zwaard, S., Huijing, P. A., Jaspers, R. T., Harlaar, J. 3D Ultrasound Imaging: Fast and Cost-effective Morphometry of Musculoskeletal Tissue. J. Vis. Exp. (129), e55943, doi:10.3791/55943 (2017).

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