Summary
मछलीघर में रखा मछली के प्रजनन पारिस्थितिकी के अध्ययन को सक्षम करने के लिए बुनियादी तरीकों की एक श्रृंखला वर्णित है। ये स्क्वॉब का उपयोग कर मछली इकट्ठा करने, जीवित मछली को ले जाने और मछलीघर में रखी जंगली पकड़ वाली मछली के प्रजनन व्यवहार को देखने के लिए उपयोगी प्रोटोकॉल हैं।
Abstract
कैप्टिव-पालन पालन टिप्पणियां मछली व्यवहार और पारिस्थितिकी के पहलुओं को प्रकट करने के लिए मूल्यवान हैं, जब निरंतर क्षेत्र की जांच असंभव हो जाती है। यहां, बुनियादी तकनीकों की एक श्रृंखला को वर्णित किया गया है कि एक मछली पकड़ने वाली गोभी मछली के प्रजनन व्यवहार की टिप्पणियों को सक्षम करने के लिए, एक मॉडल के रूप में, एक मछलीघर में रखा जाता है। यह विधि तीन चरणों पर केंद्रित है: संग्रह, परिवहन, और सब्सट्रेट स्पॉनर के प्रजनन पारिस्थितिकी के अवलोकन जीवित मछली संग्रह और परिवहन के आवश्यक पहलू (1) मछली को चोट पहुंचाने से रोकते हैं, और (2) मछलीघर के लिए सावधान परिचयन चोटियों के माध्यम से चोटों को रोकने जैसे कि खरोंच या पानी के दबाव में अचानक परिवर्तन करना जरूरी है, जब कोई भी शारीरिक क्षति मछली के अस्तित्व और उसके बाद के व्यवहार पर नकारात्मक प्रभाव डालती है। एक्वेरियम के लिए सावधानीपूर्वक आकलन, घटना की मृत्यु को कम करता है और परिवहन के सदमे को कम करता है। कैद बंदी के दौरान टिप्पणियां शामिल हैं (1) इंडिवी की पहचानदोहरी मछली और (2) निगरानी से मछली या अंडों पर नकारात्मक प्रभाव के बिना अंडे पैदा हो गए, जिससे अध्ययन प्रजातियों की प्रजननशील पारिस्थितिकी की विस्तृत जांच हो सके। एक दृश्य इम्प्लांट इलास्टोमेर (VIE) टैग का चमड़े के नीचे का इंजेक्शन अलग-अलग मछली की बाद की पहचान के लिए एक सटीक तरीका है, और इसका इस्तेमाल मछली के विस्तृत आकार के साथ किया जा सकता है, जिससे उनका अस्तित्व और व्यवहार पर न्यूनतम प्रभाव होता है। यदि अध्ययन प्रजाति एक सब्सट्रेट स्पॉनर है जो चिपकने वाला अंडे जमा करता है, तो एक हटाने योग्य पनरोक शीट के अलावा पॉलिविनील क्लोराइड (पीवीसी) पाइप का निर्माण करने वाला एक कृत्रिम घोंसला साइट अंडे की गिनती और निगरानी की सुविधा प्रदान करेगा, जो घोंसले के शिकार पर अन्वेषक के प्रभाव को कम करेगा और मछली की अंडे की रक्षा व्यवहार। यद्यपि यह मूल पद्धति तकनीक पर जोर देती है, जो अनुसंधान लेखों में विस्तार में उल्लेखनीय रूप से उल्लिखित हैं, वे उन प्रयोगों को लागू करने के लिए मौलिक हैं जिनके लिए जंगली मछली के कैप्टिव पालन की आवश्यकता होती है।
Introduction
मछलियां 1 के आकारिकी, पारिस्थितिकी और व्यवहार में शानदार अनुकूली विकास स्पष्ट है विशेष रूप से, प्रजनन से संबंधित पारिस्थितिक विशेषताओं विशेषकर विविधतापूर्ण हैं, और इनमें से अधिकांश व्यक्तिगत फिटनेस 2 से सीधे प्रभावित हो सकते हैं। विभिन्न मछली प्रजातियों में अनोखी विशेषताओं के विकास के लिए चयनात्मक दबावों में अंतर्दृष्टि प्राप्त करने के लिए, जीवित मछली का उपयोग करके प्रजनन और सामाजिक व्यवहारों का प्रत्यक्ष अवलोकन सैद्धांतिक अनुमानों को सिद्ध करने के लिए अक्सर फायदेमंद होता है।
हालांकि, मछली की निरंतर फ़ील्ड टिप्पणियों को विशेष पानी के नीचे के उपकरण और सुविधाओं की आवश्यकता हो सकती है जो बनाए रखने में मुश्किल हो सकती हैं। इन मामलों में, जंगली पकड़े गए मछलीघर से पाले गए मछली की टिप्पणियां 3 , 4 , 5 में सहायक हो सकती हैं। इसके अलावा, मछली व्यवहार के कुशल अवलोकन जो दुर्लभ या भिन्न हैंप्राकृतिक हालात के तहत निरीक्षण करने के लिए , अक्वीरिया 6 , 7 , 8 में प्रयोगों को छेड़छाड़ करके संभव हो सकता है। सही पारिस्थितिक जांच के लिए कृत्रिम तनाव और शारीरिक क्षति को कम करके अच्छी परिस्थितियों में मछलियां जड़ना महत्वपूर्ण है।
पिग्मी गोबी ट्रिमा मरिना 23-25 मिमी की कुल लंबाई तक पहुंचती है और इसे पश्चिमी प्रशांत महासागर में वितरित किया जाता है, जहां यह 9-26 मीटर 9 की गहराई पर चुप, आश्रय के खण्ड में पाया जाता है इस काम में, टी। मरीनी का प्रयोग मॉडल के रूप में किया जाता है ताकि मछली के संग्रह के लिए बुनियादी तकनीकों की एक श्रृंखला का वर्णन किया जा सकता है जो कि आत्म-निहित पानी के नीचे श्वास तंत्र (एससीयूबीए), मछली परिवहन और मछली का अंतिम आकलन सीधी अवलोकन के लिए मछली अध्ययन प्रजातियों में से 'प्रजनन व्यवहार और पारिस्थितिकी
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Protocol
1. लाइव मछली का संग्रह और परिवहन
नोट: इस प्रोटोकॉल का वर्णन है कि 15 मीटर से सतह की सतह तक एक गैस मूत्राशय के पास मछली इकट्ठा कैसे करें। सतह पर तेजी से संचरण दबाव में परिवर्तन करके गैस मूत्राशय के विस्तार को प्रेरित करेगा, जो मछली को गंभीर रूप से नुकसान पहुंचा सकता है या मार सकता है। सावधानी बरती जाती है, क्योंकि इस पहले चरण के दौरान मछली के कारण होने वाले नुकसान से उनके अस्तित्व और बाद के व्यवहार पर नकारात्मक प्रभाव पड़ता है।
- स्कूबा के साथ गोताखोरी से पहले, निम्नलिखित सामग्रियों को इकट्ठा करें: लक्षित प्रजातियों के पानी के नीचे कैप्चर करने के लिए एक हाथ शुद्ध; डबल पॉलिथिलीन बैग जो मछली के लिए काफी बड़ी होती हैं; रबरबैंड (ø 80 मिमी x 6 मिमी); सतह पर संग्रह बैग बढ़ाने के लिए एक ऑक्सीजन सिलेंडर; एल्बीगिन, जो एक रोगाणुरोधक है, में 10% सोडियम नैफ़र्स्ट्रिनेट होता है; एक पोलीस्टीयरिन फोम बॉक्स जिसमें संग्रह बैग लगाए जाने के लिए; pipettes; और, यदि आवश्यक हो (चरण 1.4 देखें), एक लंबाई के साथ एक रस्सीअधिकतम गोताखोरी गहराई के बराबर है, साथ ही साथ कम से कम 2 किलो वजन।
- डाइविंग करते समय हाथ की जाल का इस्तेमाल करते हुए लक्षित मछली प्रजातियों को एकत्रित करें; जबकि अभी भी पानी के नीचे, एक पॉलीथीन बैग में कब्जा मछली रखें और एक रबरबैंड के साथ बैग के मुंह को टाई। अगर मछली को मछलीघर में परिवहन के लिए 1 दिन का समय लगेगा, तो मछली के पानी को नवीनीकृत करने के लिए अन्य थैलों में प्राकृतिक आवास से पानी का संरक्षण भी किया जाएगा।
नोट: सुरक्षा के लिए, पानी के नीचे का काम कम से कम दो लोगों द्वारा किया जाना चाहिए। - 1 मी / मिनट से अधिक की गति पर मछली के बैग के साथ इकट्ठा करने की स्थिति से सतह: जबकि 10 मीटर या अधिक की गहराई पर, 1 से 5 मिनट प्रत्येक 2 मीटर के लिए चढ़ते रहें; और सतह से 10 मीटर की गहराई से 1 से 5 मिनट प्रत्येक 1 मीटर के लिए बंद हो जाता है जब कब्जा कर लिया मछली बैग में अपनी उछाल बनाए रखने में असमर्थ हैं ( यानी , यदि वे नीचे की ओर तैरने की कोशिश करते हुए एक विस्तारित गैस मूत्राशय के साथ तैरते हैं), तो 1-5 मिनट या डी के लिए समान गहराई बनाए रखें1 से 2 मीटर गहराई तक एक बार जब मछली अपनी उछाल को ठीक करने लगती है, तो सतह पर चढ़ाई शुरू होती है।
नोट: यदि एक संभावना है कि स्क्वॉ टैंक में हवा चढ़ते समय खत्म हो जाएगी, पॉलीथिलीन बैग के लिए रस्सी को बांधाएं और एक ≥2 किलोग्राम वजन संलग्न करे; पानी के नीचे के ऑपरेटर को सुरक्षित रूप से चढ़ाया जाने के बाद, सतह को ऊपर ऊपर निर्धारित उसी गति पर खींचें। - समुद्र तट या नाव पर, सतह के बाद प्रत्येक पॉलीथीन बैग के पानी में 10 पीपीएम एल्बीगिन को भंग कर देते हैं।
नोट: हालांकि कुछ मछली सतह पर लाए जाने के बाद ही उनकी उछाल को बनाए रखने में सक्षम नहीं हो सकती है, लेकिन अधिकांश लोगों को एक दिन में ठीक होने की उम्मीद की जा सकती है। - यदि एक संग्रह बैग में मछली का घनत्व अधिक होता है, तो अधिक से अधिक बैगों में मछली को विभाजित करके उनसे परिवहन के दौरान एक दूसरे के खिलाफ रगड़ कर एक-दूसरे को हानि पहुंचाने से रोकना। यदि मछली एक आक्रामक प्रजाति है, तो उन्हें बैग के बीच अलग-अलग विभाजित करें।
- ऑक्सीजन के साथ संग्रह बैग को बढ़ाइए और फिर आर का उपयोग करके बैग के मुंह को मुहरेंubberbands। बैग में ऑक्सीजन पेश करते समय, भंग ऑक्सीजन सामग्री को बढ़ाने के लिए बैग के पानी में नोजल को कम करें; पूरी तरह विस्तारित बैग 1/4 पानी से भरा होना चाहिए।
- एक स्थिर पानी के तापमान को बनाए रखने और अंधेरे स्थितियों के तहत मछली के तनाव को कम करने के लिए, एक पॉलिस्टीन फोम बॉक्स में मछली के साथ संग्रह बैग रखें।
- यदि मछली एक मछलीघर में मछली पहुंचाने के लिए 1 दिन का समय ले लेता है, प्रत्येक मछली रखने वाले बैग में प्रति दिन एक बार 1/4 से 1/3 बार पानी का आदान-प्रदान कर लेता है, जिसमें निवास स्थान से बनाए गए पानी का उपयोग करके 10 पीपीएम एल्बीगिन , और प्रत्येक ऑक्सीजन के साथ दोबारा repack प्रत्येक दिन, हाथ की जाली या विंदुक से मरने वाली मछलियां और मस्तिष्क को नीचे से हटा दें।
नोट: यदि हवाई जहाज परिवहन शामिल है, तो परिवहन से पहले सतह पर हवा के दबाव में मछली को इकट्ठा करने के लिए कम से कम 1 दिन प्रतीक्षा करें, क्योंकि अल्पावधि में दो चरण के दबाव में बदलाव (पानी के नीचे से सतह तक, और सतह तक ऊपरी वायु) नकारात्मक रूप से प्रभावित हो सकता है मछली का अस्तित्व i>
2. एक मछलीघर में मछलियां बढ़ाना
- पानी का तापमान बराबर करने के लिए 30 मिनट के लिए एक मछलीघर में मछली वाले बैग को फ़्लोट करें।
- पानी की रसायन विज्ञान ( जैसे , पीएच, लवणता) में अचानक अंतर के कारण सदमे से बचने के लिए, 10 मिनट की अवधि में, पानी के पानी के साथ बैग के पानी के बढ़ते रूप से आदान-प्रदान करें।
नोट: एक मछली जो पानी के रसायन विज्ञान में बहुत बढ़िया अंतर से चकित हो जाती है, शरीर के रंग और / या व्यवहार में असामान्य परिवर्तन दिखा सकता है। अभिकलन के दौरान सावधानीपूर्वक मॉनिटर करें - मछलीघर में 10 पीपीएम एलबीगिन भंग करें।
- इसके बाद, एक दिन में 3 दिन के लिए, एक्वायरियम पानी के 1/3 नवीकरण, प्रतिस्थापन पानी में 10 पीपीएम एल्बीगिन जोड़ा।
- अंत में, एल्बैगन को एक दिन में एक बार एक दिन में आधे मछलीघर पानी का आदान-प्रदान करके शुरू करना शुरू हो जाता है, जब तक कि रंग फ्रेड नहीं पड़ता।
3. व्यक्तिगत मछली पहचानने के लिए एक दृश्य इम्प्लांट इलस्टोमर (VIE) टैग इंजेक्शन
टी "> नोट: इस कार्य में, फिशर फिशरिक 10 , ऑलसेन और वोलेस्टेड 11 , और लेब्लाक और नॉक 12 का संदर्भ लें, उदाहरण के लिए, VIE टैग्स का उपयोग करके व्यक्तिगत मछली की पहचान की जाती है। इसके अलावा, यदि अध्ययन प्रजातियों को हाथ में रखने के लिए पर्याप्त है , चरण 3.2 में प्रयुक्त शल्य तालिका आवश्यक नहीं होगी।- प्रत्येक व्यक्ति के लिए इंजेक्शन स्थिति और टैग का रंग निर्धारित करें। सबसे सुरक्षित विकल्प, इंजेक्शन बिंदु को शरीर के मोटी मांसल पृष्ठीय या भाग के रूप में चुनना है, और उस पेट में इंजेक्शन लगाने से बचने के लिए है जहां आंतरिक अंग छेने जा सकते हैं।
नोट: चित्रा 1 में नंबरिंग सिस्टम का वर्णन किया गया है: यदि 8 प्रजातियों में इंजेक्शन के लिए अध्ययन प्रजातियों में काफी बड़ी है, तो यह प्रणाली 154 व्यक्तियों की एक रंग के उपयोग की पहचान करने की अनुमति देगा। VIE टैग के दस रंग व्यावसायिक रूप से उपलब्ध हैं मछली के शरीर के रंग के आधार पर अलग-अलग रंग चुनें। - <मजबूत> हाथियों में से छोटी मछली के लिए, एक शल्य तालिका तैयार कर सकते हैं (इस प्रकार केंल एट अल 13 को भी देखें) ( चित्रा 2 )।
- पेटी डिश की ऊंचाई की तुलना में कम से कम 5 - 10 मिमी कम से कम 5 सेंटीमीटर एल एक्स 5 सेंटीमीटर डब्ल्यू को मापने वाले एक नरम स्पंज काट लें।
- लगभग 5 - 10 मिमी की गहराई के स्पंज में एक नाली काटें, और मछली की लगभग शरीर की चौड़ाई से उसकी चौड़ाई समायोजित करें पॉलीविनाइल क्लोराइड (पीवीसी) बोर्ड (0.3 मिमी मोटाई) को 5 सेमी एल एक्स 5 सेंटीमीटर डब्ल्यू में कट कर इसे घाटी के गुना (या एम-आकार) में घुमा दें।
- दाढ़ी वाले स्पंज के ऊपर ग्रोव्ड पीवीसी बोर्ड सेट करें और फिर पेट्री डिश (ø 160 मिमी, 30 मिमी की गहराई) में स्पंज सेट करें। पीवीसी बोर्ड पर्याप्त रूप से डूबे होने तक पेट्री डिश भरने के लिए रिकवरी टैंक से पानी का उपयोग करें।
- VIE टैगिंग मैनुअल के अनुसार VIE टैग तैयार करें। इलास्टोमेर सामग्री को मिलाएं और मिश्रण को 3-एमएल सिरी तक जोड़ेंकिट में निहित 29-गेज सुई के साथ एनजी।
- टैग इंजेक्शन प्रदर्शन करते समय उपयोग करने के लिए दो पानी के टैंक तैयार करें: संज्ञाहरण के लिए एक और वसूली के लिए एक; पालनपोषक मछलीघर में पानी से मेल खाने के लिए इनमें से तापमान और लवणता एकाग्रता को समायोजित करें। वायु पंप के साथ वायु पंप का प्रयोग करें ताकि वसूली के टैंक में पानी को हल्का रूप से प्रसारित किया जा सके।
- 99.5% इथेनॉल के बराबर मात्रा के साथ 2-मेथाइलक्विनॉलिन मिश्रण करके एक संज्ञाहरण तरल तैयार करें; 18 पीपीएम की एकाग्रता प्राप्त करने के लिए इसे संज्ञाहरण टैंक में जोड़ें।
नोट: एनेस्थेसिया तरल का इष्टतम एकाग्रता व्यक्तियों की प्रजातियों और शरीर के आकार पर निर्भर करेगा। इसलिए, अग्रिम में अध्ययन प्रजातियों के लिए इष्टतम एकाग्रता की जांच करें। - संज्ञाहरण टैंक में व्यक्तिगत मछली को स्थानांतरित करें और उन्हें संवेदनाहट करने की इजाजत दें: ये है कि जब तक टैंक के बाहर टैप किया जाता है तब तक मछली को छूने या पानी के स्पंदन पर प्रतिक्रिया न करें। जैसा कि शरीर रंग बदल जाता है जब यह संज्ञाहरण होता हैकई मछलियों में ज़ेड, यह भी ध्यान से शरीर के रंग की निगरानी करता है और यह निर्णय करता है कि क्या मछली अपने परिवर्तनों से संवेदनाहृत है। चूंकि कुछ संभावना है कि मछली संज्ञाहरण टैंक से बाहर निकल सकती है, इसे पारदर्शी ऐक्रेलिक बोर्ड का उपयोग करके कवर किया जा सकता है, कम से कम तब तक मछली धीरे-धीरे आगे बढ़ने लगती है।
नोट: अध्ययन प्रजातियों और उसके शरीर के आकार के आधार पर, एनेस्थेसिया तरल की एकाग्रता को समायोजित करने और / या समायोजित करने के लिए आवश्यक समय को ठीक-ठाठ दें। यदि ऑपरैक्ल्यू आंदोलन कभी भी संज्ञाहरण द्वारा बंद कर दिया गया है, तो मछली मृत्यु के उच्च जोखिम पर होगी। - जैसा कि मछली कमजोर हो जाएंगे यदि उनका शरीर गरम हो जाए, तो मछली की संवेदनाहट करते समय अपेक्षाकृत ठंडे पानी में उंगलियां रखें।
- संज्ञाहरण टैंक से एक मछली लिफ्ट करें और इसे तुरंत मापें या आवश्यक डेटा (कुल लंबाई, लिंग, आदि ) को रिकॉर्ड करें। यदि मापन के दौरान एक मछली ठीक हो जाए, तो इसे तुरंत संज्ञाहरण टैंक में स्थानांतरित करें।
- शल्य तालिका में मछली को स्थानांतरित करें मछली उदर भाग को टी में सेट करेंवह पीवीसी नाली यदि शरीर का आकार बहुत छोटा है, इंजेक्शन बनाने के दौरान एक द्विनेत्री माइक्रोस्कोप का उपयोग करें। यदि अध्ययन प्रजातियों को हाथ में रखने के लिए काफी बड़ा है, तो इसे आयोजित किया जा रहा है, जबकि VIE टैग इंजेक्षन।
- बाहर की तरफ सुई की बीवेल की ओर की तरफ और मछली के सिर की ओर इशारा किया। सुई के नीचे की तरफ, शरीर के अधिक या कम समानांतर सम्मिलित करें, और जितना संभव हो उतना त्वचा के नीचे। मछली के आकार के आधार पर सम्मिलन की गहराई को समायोजित करें और आखिरकार टैग को आसानी से देखें।
- सुई वापस लेने के दौरान वीईई टैग को इंजेक्ट करते हैं, और सुई बेवेल सुई प्रविष्टि बिंदु तक पहुंचने से पहले इंजेक्शन को बंद कर देते हैं (यह अपेक्षाकृत आसान होगा कि टैग को अपेक्षाकृत विस्तृत क्षेत्र में इंजेक्शन लगाने पर)।
- टैग इंजेक्शन को पूरा करने पर, तुरंत मछली को वसूली टैंक में स्थानांतरित करें। यदि वसूली बहुत धीमी गति से दिखाई देती है, तो धीरे से हाथ से पानी प्रसारित करें।
- वसूली के बाद, मछली को मछलीघर में वापस लौटना और 10 पीपीएम एल जोड़ना जारी रखेंबैगन तीन दिनों के लिए पानी में
नोट: VIE टैग के लिए कम-दृश्यता की स्थिति के तहत, यूवीए फ़िल्टर किए गए प्रकाश टैग को पहचानने में सुविधा प्रदान करेगा
4. Demersal चिपकने वाला अंडे की गिनती
- एक कृत्रिम स्पॉलिंग घोंसला बनाने के लिए, जो मछली चिपकने वाला अंडे जमा कर सकती है, एक अपारदर्शी पीवीसी पाइप (ø 5 सेमी, 6 सेमी लंबा) का आधा भाग में, व्यास के लिए सीधा।
नोट: उपर्युक्त पाइप आकार अपेक्षाकृत छोटा गोबी टी। मरीना के लिए उपयुक्त है। इस प्रकार, अध्ययन प्रजातियों के लिए उपयुक्त पीवीसी पाइप का आकार और रूप समायोजित करें। - पनरोक शीट पर 5 मिमी x 5 मिमी ग्रिड प्रिंट करें और इसे पीवीसी पाइप के अंदर के क्षेत्र में फिट करने के लिए काट लें।
- रबरबैंड का उपयोग करके पीवीसी पाइप के अंदर पानी के निचले चादर को ठीक करें।
नोट: यदि महिलाओं के लिए जलरोधक शीट पर अंडे संलग्न करना मुश्किल है और अंडे चादर से गिरते हैं, तो शीटपैड के साथ शीट बनाओ। - रेत की एक परत के साथ मछलीघर नीचे कवर, 1- 2 सेमी मोटी लगभग एक तिहाई पीवीसी पाइप को आंशिक रूप से रेत में डालें, शीट-निश्चित पक्ष नीचे।
- मछलियों की सफलता से बढ़ने के बाद, पीवीसी पाइप से अंडा द्रव्यमान के साथ शीट को हटा दें और उसे मछलीघर के पानी के साथ एक पेट्री डिश में रखें। पीवीसी पाइप के भीतर एक नई शीट को ठीक करें और मछलीघर के निचले हिस्से में यह वापस रखें। अंत में, अंडा जन चित्रण करके अंडे की गणना करें
- वैकल्पिक रूप से, अगर अंडे को अंडे को पानी से बाहर निकालने न दें तो सावधान रहें, तो पैतृक अंडे की देखभाल के निरीक्षण के बाद किया जाना चाहिए। इसके बजाय, एक पेट्री डिश का उपयोग अंडे और चादर को मछलीघर के पानी के साथ निकालने के लिए, अंडे के द्रव्यमान को जल्दी से पकाएं, और फिर शीट को ध्यान से एक पीवीसी पाइप में वापस अंडा की परत के साथ पुनः प्राप्त करें, इससे सभी को इसकी मूल स्थिति में लौटने से पहले मछलीघर के नीचे अंत में, तस्वीर का उपयोग करके अंडे की गणना करें
- ImageJ का उपयोग करते हुए अंडों की गणना करें ( चित्रा 3
- अन्यथा, अगर अंडे घनी में जमा हो जाते हैं, तो क्षेत्र घनत्व के अनुपात की गणना करके अंडे की संख्या का अनुमान लगाते हैं: अंडा घनत्व की गणना करने के लिए मुद्रित 5 x 5 मिमी 2 ग्रिड में अंडों की गणना करें, सतह के क्षेत्र को मापें जो अंडे के साथ ImageJ, और अनुमानित प्रति इकाई घनत्व प्रति यूनिट और सतह क्षेत्र से कुल अंडों की संख्या। ImageJ द्वारा उपरोक्त सतह क्षेत्र माप पद्धति को निम्नलिखित में समझाया गया है: सेट स्केल ... (रिसर्च सर्विसेज शाखा, https://imagej.nih.gov/ij/docs/menus/analyze.html); यह बताता है कि छवि के स्थानिक पैमाने को कैसे परिभाषित किया जाए; सतह क्षेत्र को मापने के लिए ImageJ का उपयोग करना (किने स्टेट कॉलेज, शैक्षणिकप्रौद्योगिकी, https://dept.keene.edu/at/2011/04/15/by-matthew-ragan/)।
नोट: यदि अंडे पारदर्शी होते हैं, तो ब्लैक पनरोक शीट स्वचालित गणना पद्धति के लिए अधिक उपयुक्त है क्योंकि ImageJ अंडे की रूपरेखा को अलग-अलग पहचान सकती है।
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Representative Results
उपरोक्त विधियों के बाद, टी। मरीना के 41, 15 और 96 व्यक्तियों को क्रमशः अप्रैल 2014, 2015 और 2016 में एकत्रित किया गया था, जापान में अमामी ओशिमा, कागोशिमा प्रीफेक्चर, ( तालिका 1 ) के अपतटीय। प्रत्येक मामले में, 25 (61%), 14 (93%) और 91 (9 5%) व्यक्ति एक मछलीघर में अंडे जमा करते रहने तक रहते थे। जैसा फुकुडा एट अल में रिपोर्ट किया गया 3 , 2014 में अवलोकन अवधि के अंत से पहले ही एक मछली की मृत्यु हो गई थी, और मछुआरे को पकड़ने के 7 दिन बाद शुरू हुआ, यह दिखाते हुए कि व्यक्तियों को अच्छी परिस्थितियों में पालन किया जा रहा है।
VIE टैग्स दिखाई दे रहे थे और व्यक्तियों की पहचान की अनुमति दे रहे थे, यहां तक कि इस छोटे आकार की मछली ( चित्रा 4 ए , 4 बी ) में भी। एक निविड़ अंधकार वाली चादर पर जमा अंडे की एक तस्वीर चित्रा 4 सी में दिखायी गयी है, यह साबित करती है किवे गिने जाने के लिए पर्याप्त दृश्यमान थे इसे हटाने और फोटो खिंचवाने के बाद, शीट मछलीघर में अपने पूर्व स्थान पर लौटा दी गई थी, और घोंसले के शिकार पुरुष तुरंत पैतृक देखभाल ( चित्रा 4 डी ) जारी रखा।
साथ में, इन तकनीकों को प्रयोग में लगाया जा सकता है जिसका लक्ष्य सामाजिक संपर्कों को दर्ज करना है और सभी व्यक्तिगत मछली की प्रजनन क्षमता को बनाए रखा है। विशेष रूप से, फुकुडा एट अल 3 ने उपरोक्त विधियों का उपयोग करके एक्वेरिया में टी। मरिना के प्रजनन संबंधी पारिस्थितिकी की जांच की। नतीजतन महिला फीकावृत्ति और महिला शरीर के आकार ( चित्रा 5 ) के बीच एक सकारात्मक सहसंबंध का प्रदर्शन किया गया था, जबकि प्रजनन की सफलता में कोई अंतर भिन्न आकार के पुरुषों ( चित्रा 6 ) के बीच नहीं देखा गया था। इसके अलावा, टी। मारीना ने एक सतत प्रजनन जोड़ी स्थापित करने का प्रयास किया और इन सभी के भीतर सबसे अधिक पैदा हुईजोड़े ( तालिका 2 ) केवल पुरुष टी। मारीना को पितृ की देखभाल करने के लिए मनाया गया था। व्यक्तियों के बीच आक्रामक बातचीत ने सुझाव दिया कि मोनोग्रामस संभोग प्रणाली मुख्य रूप से महिला साथी की रक्षा करने का परिणाम हो सकती है।
| संग्रह का दिन | संग्रह की गहराई | संग्रह विधि | एकत्रित व्यक्तियों की संख्या | रहने की अवधि | परिवहन दिवस | मृत व्यक्तियों की संख्या | जीवन दर | ||
| सरफेसिंग | ट्रांसपोर्ट | दशानुकूलन | |||||||
| 15 ए2014 बजे | - 21 मीटर | सतह तक मछली के साथ सतह। | 41 | रात भर | 16 अप्रैल 2014 | 16 | 0 | 0 | 61% |
| 23 अप्रैल 2015 | - 1 9 मीटर | 12 मीटर गहराई तक मछली के साथ सतह, सतह तक रस्सी तक खींचो। | 15 | एक दिन | 25 अप्रैल 2015 | 1 | 0 | 0 | 93% |
| 26 अप्रैल 2016 | - 21 मीटर | 15 मीटर गहराई तक मछली के साथ सतह, सतह तक रस्सी तक खींचो। | 96 | एक दिन | 28 अप्रैल 2016 | 4 | 1 | 0 | 95% |
तालिका 1: संग्रह की स्थिति और मछली जीवन रक्षा दर। मृत व्यक्तियों की संख्या बताती है कि कब और कितनी व्यक्तिगत मछलियों की मृत्यु हो गई।
सारणी 2: पालन प्रयोग के दौरान पैरों के चलते। एम , पुरुषों की व्यक्तिगत पहचान (आईडी); एफ , महिलाओं की आईडी; रेखांकित आईडी , एक जन्मजात महिला; उल्लिखित आईडी , एक महिला जो पुरुष के साथ मेल खाती है हालांकि उन्होंने एक सतत जोड़ी स्थापित नहीं की थी इन परिणामों से संकेत मिलता है कि टी। मारीना एक मोनोगमसैट मैट सिस्टम के भाग के रूप में एक सतत प्रजनन जोड़ी स्थापित करने की होती है। इस तालिका को फुकुडा एट अल से संशोधित किया गया है 3 इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए कृपया यहां क्लिक करें।
चित्रा 1: VIE टैगिंग स्थितियों की व्यवस्था। ( ए ) प्रत्येक अंक न्यू से पता चलता हैएमएबी इंजेक्शन की स्थिति के लिए इसी। एक व्यक्तिगत मछली की पहचान संख्या टैग की स्थिति (ओं) को मिलान करके निर्धारित की जाती है। ( बी ) व्यक्तिगत मछली नंबर 93 का एक उदाहरण
चित्रा 2: एक दृश्य सर्जिकल टेबल illustrating। इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें
चित्रा 3: मैनुअल और स्वचालित एग्ज की गणना करना ImageJ का उपयोग करना ( ए ) सेल काउंटर प्लगइन का उपयोग करके मैनुअल गिनती यह प्लगइन कुछ सब डिविजन द्वारा समूहीकृत अंडे की गणना करने में सक्षम है। यह एक उदाहरण है जो अंडेएस चार समूहों में विभाजित किया गया और गिना गया। ( बी ) स्वचालित अंडा गणना ( सी ) छवि जो स्वचालित अंडा की गिनती छवि और मूल तस्वीर को मिला दिया गया था। इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें
चित्रा 4: VIE टैग के साथ टी। मारीनाइज इंजेक्शन द्वारा प्रतिनिधि व्यक्तिगत पहचान , और आर्टिफिशियल स्पॉलिंग साइट पर जमा अंडों की गणना करने के लिए पनरोक शीट का उपयोग करना। ( ए ) व्यक्तिगत नंबर 1, गुलाबी VIE टैग द्वारा पहचाना; एक सफेद तीर इंजेक्शन VIE टैग इंगित करता है ( बी ) व्यक्तिगत संख्या 11, दो हरे रंग की VIE टैग द्वारा पहचाने गए; सफेद तीरों से संकेत मिलता हैइंजेक्शन VIE टैग ( सी ) एक निविड़ अंधकार शीट पर पैदा अंडे। ( डी ) पैतृक देखभाल एक नर द्वारा फिर से शुरू हुई, जिसमें अंडे के साथ चादरें हटाई गईं और फोटो खिंच गईं, और फिर वापस मछलीघर में रख दिया गया। इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें
चित्रा 5. टी। मरीना में क्लच आकार और महिला शरीर का आकार (कुल लंबाई) के बीच संबंध । ठोस वक्र , महिलाओं के प्रत्येक आकार समूह में अनुमानित रूप से पैदावार, जिसे सामान्यीकृत रेखीय मिश्रित-प्रभाव मॉडल से प्राप्त किया गया था। इन परिणामों से संकेत मिलता है कि महिला प्रजनन सफलता शरीर के आकार (पियर्सन का सहसंबंध, आर = 0.56, पी <0.05, एन = 1 6)। यह आंकड़ा फुकुडा एट अल से संशोधित किया गया है 3 इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें
चित्रा 6. टी मरीना में अनुमानित संभोग सफलता और नर शारीरिक आकार (कुल लंबाई) के बीच संबंध । प्रत्येक डेटा वस्तु का अनुमान पुरुषों की प्रजनन आवृत्ति और महिलाओं की अनुमानित फीकावृत्ति से अनुमानित था। इन परिणामों से संकेत मिलता है कि पुरुष अपने शरीर के आकार (पीयरसन के सहसंबंध, आर = ˗0.51, पी > 0.05, एन = 8) के बावजूद प्रजननशील रूप से सफल रहे। यह आंकड़ा फुकुडा एट अल से संशोधित किया गया है 3_upload / 55964 / 55964fig6large.jpg "target =" _ blank "> कृपया इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए यहां क्लिक करें।
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Discussion
कई मछलियों की प्रजनन संबंधी पारिस्थितिकी अक्सर प्रायोगिक पालन के माध्यम से प्रकट की जाती है। विशेष रूप से, लिंग परिवर्तन 6 , 8 , 14 , दोस्त की पसंद 15 , 16 और आत्मनिर्भर प्रतिस्पर्धा 7 , 17 मछलीघर से पकड़ी मछलियों की विस्तृत जांच के अक्सर विषय हैं। इसके अलावा, एक्वैरियम में पाए गए कुछ परिणाम बाद में क्षेत्र 8 , 18 में पुष्टि किए गए हैं। ये परिणाम एक्सीरिया में जंगली पकड़े जाने वाली मछलियों के उपयोग के उपयोग और उपयोग की विश्वसनीयता की विश्वसनीयता का समर्थन करते हैं। इसके अलावा, ऐसे प्रयोगों के पालन के माध्यम से हेरफेर जो परिस्थितियों का अनुकरण करते हैं जो स्वाभाविक रूप से हो सकते हैं लेकिन जंगली परिस्थितियों में केवल शायद ही कभी बड़े पैमाने पर क्षेत्र जांच के लिए एक प्रारंभिक चरण के रूप में उपयुक्त है।
पेशेवरटॉक एक छोटे-आकार के सब्सट्रेट स्पॉनर के लिए उपयुक्त तरीके का वर्णन करता है जो चिपकने वाला अंडे जमा करता है। प्रजातियों के बीच एक्वैरियम-रखा मछली की इष्टतम परिस्थितियों में बड़े बदलाव की उम्मीद की जा सकती है, इस प्रकार प्रोटोकॉल के कुछ बिंदुओं में समायोजन वारंट किया जा रहा है। विशेष रूप से, विशेष अध्ययन प्रजातियों के प्रारंभिक मूल्यांकन के बाद प्रोटोकॉल के पांच बिंदुओं को समायोजन के लिए माना जाना चाहिए: (1) मछली प्रोटोकॉल 1.4 में समय बिताने का समय; (2) संज्ञाहरण तरल की एकाग्रता और क्रमशः प्रोटोकॉल 3.1.3 और 3.1.5 में, VIE टैग इंजेक्शन लगाने से पहले संज्ञाहरण में बिताए गए समय; (3) प्रोटोकॉल 3.1.8 में मछली में VIE टैग को इंजेक्शन लगाने पर सुई की प्रविष्टि की गहराई; (4) प्रोटोकॉल 3.2.1 में पीवीसी पाइप का आकार और रूप, कृत्रिम घोंसले साइट के रूप में इस्तेमाल किया जाता है; और (5) प्रोटोकॉल 4.6 में मैन्युअल गणना (सटीक लेकिन समय और प्रयास लेता है), स्वत: गिनती और क्षेत्र-घनत्व अनुपात आकलन (कुशल, लेकिन किसी न किसी) में ठीक से तीन अंडा गणना विधि का उपयोग कर। कबपहले कुछ अंडे होते हैं, या जब कुछ उपखंड द्वारा गठित गिनती की आवश्यकता होती है (जैसे कि मृत या जीवित, विकासात्मक चरण-आधारित वर्गीकरण और इसी तरह), मैन्युअल गणना पद्धति की सिफारिश की जाती है। जब बड़ी संख्या में अंडे होते हैं, और ImageJ प्रत्येक अंडे को व्यक्तिगत रूप से अलग कर सकता है, स्वचालित गणना पद्धति उपयुक्त हो सकती है। क्षेत्र-घनत्व अनुपात अनुमान प्रभावी होता है जब बहुत से, और घनी अंडे और ImageJ व्यक्तिगत रूप से प्रत्येक अंडे को अलग नहीं कर सकते।
मछली की कई प्रजातियों सतह पर लाया जाने के बाद पूरी तरह से अपनी उछाल बनाए रख सकते हैं। हालांकि, इस प्रोटोकॉल के अनुसार सावधानीपूर्वक सतह की सतह को सबसे ज्यादा मछली एक दिन में ठीक होने की अनुमति दे सकती है। यदि मछली की सतह को बरामद किए जाने के बाद ही संग्रह बैग में उल्टा चलना पड़ता है, तो यह निर्धारित करने के लिए इंतजार करें कि मछली को हटाने से पहले कम से कम एक दिन मर गया है या नहीं। यदि सतह पर लाया जाने के तुरंत बाद मछली मर जाती है या अगर उन्हें ठीक करने के लिए एक दिन से अधिक समय की आवश्यकता होती है, तो अधिक धीमी गति से या ईए का विस्तार करेंबाद के एकत्रित प्रयासों के दौरान सर्फिंग के दौरान समय का अंतराल।
VIE टैग के अतिरिक्त, अलग-अलग मछली की पहचान करने के लिए अन्य तरीकों से मौजूद हैं: रंगीन बाहरी प्लास्टिक स्ट्रीमर्स, नायलॉन एंकर टैग, फ़िन क्लिपिंग, और निष्क्रिय एकीकृत ट्रांसपोंडर (पीआईटी) टैग आदि । हालांकि, विशेष रूप से छोटी मछली इकट्ठा करते समय, इनमें से कुछ तकनीकों में मृत्यु दर बढ़ सकती है, विकास में बाधा उत्पन्न होती है, या स्वस्थानी स्थिति में दिखाई नहीं दे सकती । 10 इसके अलावा, जैसा कि अधिकांश बाहरी टैग मछली के शरीर से निकलते हैं, एक टैग प्रजातियों के कुछ व्यवहारों को प्रतिबंधित कर सकता है जो बिरों, संकीर्ण दरारों या घने समुद्री शैवाल बेड में स्थित हैं। इसके विपरीत, छोटी मछलियों के कई अध्ययनों में पाया गया कि VIE टैगिंग का मृत्यु दर और विकास 10 , 11 पर कोई बड़ा नकारात्मक प्रभाव नहीं पड़ा। VIE टैग लापरवाही से मछली के व्यवहार को प्रभावित कर सकता है क्योंकि चमड़े के नीचे का टैग आगे बढ़ना नहीं करता है, हालांकि मछली छोटी है, यह विशेष रूप से उपयुक्त हैछोटे-आकार वाले 10 प्रजातियों के व्यवहार संबंधी टिप्पणियों के लिए पहचान विधि कुछ पिछले अध्ययनों के अनुसार, ऐक्रेलिक पेंट भी उसी तरह इस्तेमाल किया जा सकता है जैसे VIE टैग 19 , 20
आर्टिफिशियल स्पॉइंग घोंसला आम तौर पर मछलियों के प्रजनन की जांच के लिए प्रयोग किया जाता है जो डिमर्सल चिपकने वाला अंडे पैदा करते हैं। पिछला अध्ययन कृत्रिम घोंसले का इस्तेमाल करता है, जो विभिन्न प्रकार की सामग्री से बना है, जैसे कि टेराकोटा छत टाइल 21 , सिरेमिक टाइल 22 , शेल 23 , पीवीसी बॉक्स 24 , आदि । कई सब्सट्रेट स्पॉवर्स के लिए ये कृत्रिम स्पॉन्ग घोंसले उपयोगी हो सकते हैं। इन अध्ययनों से पता चलता है कि मछली के लिए कृत्रिम घोंसले की उपलब्धता, जैसे कि आकृति और / या आकार, की तुलना में यह क्या है से अधिक महत्वपूर्ण है। जैसा कि पीवीसी पाइप सामग्री प्राप्त करना और प्रक्रिया करना आसान है,इस पेपर ने पीवीसी पाइप का इस्तेमाल स्पैनिंग घोंसला के रूप में किया था।
पारिस्थितिक जानकारी के माध्यम से प्राप्त कैप्टिव पालन पालन टिप्पणियों की सराहना की जानी चाहिए। अनकही रूप से, एक प्रजाति के प्राकृतिक पर्यावरण की तुलना में, जलीय आवास के विभिन्न पारिस्थितिक स्थितियों ( उदाहरण के लिए , पानी की भौतिक और रासायनिक विशेषताओं, खाद्य पारिस्थितिकी, अंतर के लिए अवसरों और अंतर-विशिष्ट बातचीत, निवास स्थान, और जनसंख्या घनत्व) यह व्यक्तियों को उन विशेष व्यवहारों को प्रदर्शित करने का नेतृत्व कर सकता है जो उनके प्राकृतिक लोगों से भिन्न हैं। इसलिए, क्षेत्र की जांच में पालनपोषण के अवलोकन के लिए पूरक होना चाहिए ताकि मछली प्रजनन व्यवहारों के अनुकूली विकास के लिए सर्वोत्तम पृष्ठभूमि प्रदान किया जा सके।
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Disclosures
लेखकों के पास खुलासे के लिए कुछ भी नहीं है।
Acknowledgments
मछली इकट्ठा करने में सहायता के लिए हम एस। योकोयामा का धन्यवाद करते हैं। हम W. Kawamura के लिए भी आभारी हैं कि वे तरीके पालन करने के बारे में उपयोगी सलाह दें। इस अध्ययन को जापान के सोसाइटी फॉर द प्रोमोशन ऑफ साइंस (कंकली) द्वारा अनुदान (सं। 24370006 और 16 के 0 7 7 7 7) के द्वारा टीएस को सम्मानित किया गया था
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Hand net | Nisso | AQ-17 | Select for the target species size. |
| Polyethylene bag | San-U Fish Farm | 8194 | |
| Rubber band | ESCO Co. LTD. | 78-0420-64 | ø 80 mm x 6 mm |
| Oxygen cylinder | N/A | N/A | Oxgen cylinder for diving equipment suits. |
| Elbagin | Japan Pet Design Co. Ltd. | 75950 | Pafurazine F (provided from same company) is equivalent drug to Elbagin. |
| Polystyrene foam box | N/A | N/A | |
| Pipette | AS ONE | 1-8625-04 | |
| Rope | Mizukami Kinzoku Co. LTD. | 95301601 | |
| Weight | N/A | N/A | Weight for diving equipment suits. |
| Water tank | N/A | N/A | |
| Air pump | KOTOBUKI | 4972814 062115 | |
| Air stone | KOTOBUKI | 4972814 232204 | |
| 2-Methylquinoline | Wako | 170-00376 | |
| Ethanol (99.5) | Wako | 057-00456 | |
| Visible implant elastomer tag kit | Northwest Marine Technology | N/A | http://www.nmt.us/products/vie/vie.shtml |
| Soft sponge | N/A | N/A | |
| PVC board | N/A | N/A | 0.3 mm thickness is easy to use. |
| Petri dish | N/A | N/A | A large one, such as ø 160 mm and 30 mm depth, is convenient for the injection of the VIE tag. |
| Transparent acrylic board | N/A | N/A | |
| UVA filtered light | N/A | N/A | |
| PVC pipe | N/A | N/A | ø 5 cm |
| Waterproof sheet | SOMAR Corp. | 3EKW03 | The film for the plain copier. |
| Sand | N/A | N/A | |
| Stereo microscope | N/A | N/A | |
| Camera | N/A | N/A |
References
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