Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Behavior

쥐에서 동물 불안을 테스트: 오픈 팔 레와 닫힌된 팔 벽 투명성 높은 플러스 미로 테스트

Published: June 29, 2018 doi: 10.3791/56428

Summary

쥐 불안 같은 동작 테스트는 높은 플러스 미로 테스트 환경에 따라 매우 다릅니다. 여기 우리가 장치 설정, 특히 팔 구조, 미로에 행동에 미치는 영향을 보여줍니다 그리고 우리 완화 약물의 효과 감지 하는 신뢰할 수 있는 프로토콜을 설명. 이 보고서는 불안 연구에 기여할 것입니다.

Abstract

높은 플러스 미로 테스트 설치류 동물 불안을 평가 하기 위한 행동입니다. 이 테스트는 행동 과학의 분야에서 널리 적용 됩니다, 하지만 충돌 결과 종종 다른 실험실에서 제공 됩니다. 다른 결과 대 한 이유를 확인 하려면 우리는 이전 실험실, 대부분 특히 존재/부재의 오픈 팔의 측면과 닫힌된 팔 벽의 투명/불투명 함에 ledges 다 팔 기능에 집중 했다. 이전 보고서에서 우리는 그렇지 않으면 동일 실험 조건에서 열리고 닫힌 팔 디자인의 다른 조합에 쥐 행동을 비교 하는 사용자 지정 설계 된 컨테이너를 사용 하 고 팔 기능에 차이 실험을 방해 했다 결과입니다. 간단히, 오픈 팔 레 크게 증가 쥐, 불안 같은 동작 동안 투명 팔이이 동작 감소도 있습니다. 또한, no ledged 오픈 팔 + ledged 오픈 팔 + 투명 한 벽으로 폐쇄 팔의 조합에 비해 불투명 한 벽으로 폐쇄 팔의 조합에는 완화 약물의 효과의 높은 검출 감도 확인 합니다. 이 보고서에서 우리는 상승에 대 한 프로토콜 플러스 미로 테스트, 이전 보고서와 우리의 실험 경험에서 주요 결과의 논의 함께 소개합니다. 우리는이 보고서는 연구자를 고용 또는 누구는 고가 사용 하 여 그들의 연구에서 미로를 계획에 대 한 유용한 정보를 제공할 것입니다 믿습니다.

Introduction

기분 장애, 불안 장애, 우울증, 등에서 고통 받는 환자의 수는 증가 하 고 있다. 이러한 장애의 개발 관련 유전과 환경 요인, 비록 자세한 병원 성 기계 장치는 아직 완전히 이해1. 따라서, 연구는 적은 부작용을가지고 효과적인 약물의 개발으로 서 기분 장애의 근본적인 메커니즘을 잠복 근무에 초점을 해야 합니다.

실험실 동물에 대 한 행동 테스트는 뇌 더 높은 기능, 감정 등을 조사 하는 데 유용 합니다. 동물의 행동은 매우 다양, 실험 결과 자주 다릅니다 실험실, 경우에 동일한 타고 난된 긴장 사용된2. 따라서, 연구원은 또한 그들은 실험실에서 안정적이 고 정확한 결과 제공 하기 위해 채택 하는 실험 장치의 기본 기능을 이해 해야 합니다.

높은 플러스 미로 테스트 설치류3,4정서적 반응성 검사 원래 설립 되었다. 전체 기구는 바닥 위에 보통 있는 500 m m 이며 두 오픈 및 두 닫힌된 팔 더하기 모양 수 있도록 이루어져 있다. 팔 탐험 (를 포함 하 여 기간 및 각 팔에 항목의 주파수)의 측정 거리 여행, 및 지정 된 동작 같은 복종된 동물의 뻗어 참석 자세 관측 기간 동안 기록 됩니다. 이러한 조치에 의해 동물 불안 실험 결과로 추정 된다.

높은 플러스 미로 테스트는 세계 전체에서 사용 됩니다 하지만 모든 실험실 사용 같은 장치 디자인5,6, 그리고 이러한 차이 실험 결과 영향을 미칠 수 있습니다. 예를 들어 차이 존재 또는 부재를 들고 따라 ledges의 또는 닫힌된 팔5,6에 대 한 투명 또는 불투명 벽의 사용을 포함 됩니다. 따라 ledges 팔 열고 닫힌된 무기에 대 한 투명 한 벽의 사용은 동물 기구7떨어지를 방지 하 고 닫힌된 팔 각각8,9내부 행동 관찰을 용이 하 게 개발 되었다. 개별 팔 구조 차이 검사 하는 일부 연구 동물 불안1,2,5,10,11 감지 하는 능력에 영향을 미칠 수 있다 지만 , 동물 행동에 (/ 짧은 난 간 없이) 열기 및 폐쇄 (투명/불투명 벽) 팔 기능의 결합된 효과 아직 조사 되지 않는다.

최근 보고서에서 우리는 쥐12불안 같은 행동에 팔 디자인의 이러한 조합의 효과를 논의 했다. 간단히, 오픈 팔 레 크게 증가 쥐, 불안 같은 동작 동안 투명 팔이이 동작 감소도 있습니다. 또한, 높은 검출 감도 없음 ledged 오픈 팔 + ledged 오픈 팔 + 투명 한 벽으로 폐쇄 팔의 조합에 비해 불투명 한 벽으로 폐쇄 팔의 조합에는 완화 약물의 효과의 확인 합니다. 이 보고서에서 우리는 상승에 대 한 우리의 프로토콜을 소개 합니다 플러스 이전 보고서에서 주요 결과의 논의와 함께 테스트, 미로. 우리는이 보고서는 그 누가 고용 또는 누구는 고가 사용 하 여 그들의 연구에서 미로를 계획에 대 한 유용한 정보를 제공할 것입니다 믿습니다.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

여기에 설명 된 모든 실험 절차 승인 기관 동물 관리 및 사용 위원회 메이지 대학의 (IACUC 14-0002(1)). 동물 대표 결과에 사용 하는 다음과 같이 준비 되었다: 남성 Sprague-Dawley 쥐 실험 동물 회사에서 구입 하 고 시작 하기 전에 적어도 1 주일에 대 한 표준 쥐 감 금 소 (W200 × D410 × H250 m m) 당 4 동물의 그룹에서 지 내게 했다는 행동 실험입니다. 동물 주택 방 (12: 12와 명암 일정 조명에 10:00 h), 실내 온도 (25.0 ± 0.5 ° C), 습도 (55 ± 10%), 조명과 환기에 대 한 표준 대기 조건에서 유지 되었다 (10 회 / h), 그리고 동물 식품 (ad libitum 접근 했다 오리엔탈 효 모 주식 회사, 도쿄, 일본) 및 물. 동물 종이 침구 (알파-dri, LSG Corporatin, 도쿄, 일본)와 함께 표준 쥐 (W410 x D250 x H200 m m, Toyoriko 주식 회사, 아이치 현, 일본)에 유지 했다.

1. 높은 플러스 미로 테스트

  1. 설정 높은 플러스 미로 (W1, 500 × 500 × H2, 000 mm D1) 사용자 지정된 컨테이너에 장치 (그림 1A) 더하기 모양의 금속 프레임 워크 실행을 지원 하기 위해 바닥 위에 500 m m 방법 무기 (그림 1B)에 컨테이너 천정에 조명 밝게 필요한 빛의 강도 (그림 1C), 및 동작 테스트 (그림 1C)의 라이브 비디오 모니터링을 사용 하도록 중앙 천장에 디지털 비디오 카메라에는 미로의 표면.
  2. 더하기 모양의 프레임 워크에 무기 (L500 x W100 m m)를 수정 하 고 다음 4 개의 팔의 중앙에 광장 중앙 플랫폼 (W100 x D100 m m) 수정 (그림 1D -F).
    참고: 우리의 실험실에서 우리는 두 팔을 벌려 (L500 x W100 m m)의 두 종류와 닫힌된 팔의 두 가지 유형 (W100 x H450 mm x L500) (그림 1D). 닫힌된 팔 투명 하거나 불투명 한 벽 (그림 1D), 그리고 열려있는 팔 짧은 난 간 (H5 m m, 그림 1E) 없이 설계 되었습니다. 광장 중앙 플랫폼 (W100 × D100 mm)는 4 개의 팔의 가운데에 배치 됩니다 (그림 1D -F). 따라서, 팔의 다음 네 가지 조합 실험 목적에 따라 준비 될 수 있다: 오픈 선반과 무기 + 투명 한 벽 (선반/투명), 팔 레와 + 불투명 벽 (선반/불투명), 닫힌된 팔 닫힌된 팔 열 팔 ledges + 투명 한 벽 (No-선반/투명), 닫힌된 무기와 선반 없이 두 팔을 벌려 + 닫힌된 팔 불투명 하지 않고 (No-선반/불투명) 벽. 팔 활주로의 표면 행동 분석 제 2에서 설명한 대로 자동된 동작 분석 소프트웨어에 의해 추적 하는 더 나은 동물 있도록 검은색 이다.
  3. 각 팔과 중앙 플랫폼의 원심 끝 부분의 약 100 럭 스 표면에 조명 강도 조정 합니다.
  4. 각 테스트 전에 70% 에탄올 솔루션 전체 기구를 청소 하 고 증류수로 닦아.
  5. 이미징 분석 섹션 2, 행동 분석에서에서 설명 하는 비디오에 대 한 쥐의 행동을 기록 하는 디지털 비디오 카메라를 시작 하는 하드 디스크 레코더에 "녹화 버튼"을 클릭 합니다.
  6. 오픈 팔을 직면 하 고 중앙 플랫폼에서 동물을 놓고 5 분에 대 한 기구에 무료 탐사를 허용 합니다.
  7. 녹음 완료 하드 디스크 레코더에서 "stop 버튼"을 클릭 합니다.
  8. 시험된 동물 동물 주택 룸에 돌아온 배설물 및 urinations의 수를 계산 합니다.
  9. 1.4 단계에서 실험의 끝까지 반복 합니다.
    참고: 건조 테스트 실행은 항상 실행 체크는 모든 실험 설정을 올바르게 설정 되어 전에 어떤 실험 동물 실험 조건에 노출 되는 각 실험을 시작 하기 전에. 그렇지 않으면, 일부 동물, 특히 첫 번째 동물 다른 환경 조건 (예를 들어, 아마도 조작 및 동물 단서 가능성이 이전 시험된 동물에 의해 왼쪽 동안는 실험에 의해 유도 된 소음) 발생할 수 있습니다.
    참고:는 경험 컨테이너 근처 동물 테스트 되 고 있습니다. 따라서, 비록는 경험 보이지 않습니다 쥐 여전히 수 있습니다 냄새 / 소리를 통해 그들을.

2. 행동 분석

참고: 행동 분석 수동 관측에 의해 수행 되 고 자동 분석 소프트웨어.

  1. 수동 관측
    1. 동물 선반에 배치 후 다음 관찰: 번호 항목 (팔에 항목 정의 모든 인스턴스로 모든 4 발 팔에 있을 때)의 각 팔에 소요 되는 시간 및 오픈 팔을 직면 수 뻗어 참석의 자세 닫힌된 팔을 향해 중앙 플랫폼에서 백업 하는 동안.
    2. 기간 및 스톱 워치 및 컨테이너의 문을 폐쇄 때부터 시작 하는 5 분에 대 한 수에 의해 위에 정의 된 행동의 주파수를 측정 합니다.
  2. 자동된 분석
    1. 사용 가능한 소프트웨어 프로그램을 사용 하 여 다음 기록: 팔 (중앙 플랫폼에서 근 위, 중간, 그리고 원심 세그먼트)에 여행, 시간에 보낸된 다른 위치 거리 및 시간 별로 분 분석 오픈에 폐쇄 무기입니다.
    2. 수동 관측 시작으로 동시에 자동된 분석 소프트웨어의 "시작 버튼"을 클릭 (녹음 중지 됩니다 자동으로 설정 된 기간을 기록 하는 경우).
      참고:이 연구에서 사용 되는 행동 분석 소프트웨어 배경 필드;와 대조를 통해 동물을 추적 고정된 크기 할당, 동물, 밝은 개체로 식별 하 고 그것의 중심점의 운동 따라서 동물 추적에 사용할 수 있습니다.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

이전 연구에서 우리는 오픈 팔 레의 결합된 효과 및 미로12에 예비 동작에 닫힌된 팔 벽의 투명도 비교. 쥐가 크게 ledges과 팔에 보다 선반 없이 팔에 훨씬 적은 시간을 보냈다 ([1, 60] F = 13.49, P = 0.0005) (그림 2A). 비슷한 결과 팔에 항목 수에 대 한 또한 찾아냈다 (F [1, 60] 11.17, P = 0.0014 <)12, ledges 존재 팔에 쥐 탐험 행동을 증가 하는 것을 건의. 쥐 크게 팔 팔 불투명 한 벽으로 폐쇄 했다 기구에 보다 투명 한 벽으로 폐쇄 했다 기구에 더 적은 뻗어 참석 자세를 보였다 (F [1,60] 4.03, P = 0.0492 =) (그림 2B), 제안 하는 투명 한 닫힌된 팔 벽 감소 쥐에 불안 같은 동작. 쥐 보다 투명 한 닫힌된 팔 벽 불투명 닫힌된 팔 벽과 기구에 했다 기구에 팔의 원심 세그먼트에 더 많은 시간을 보냈다 (F [1,60] = 8.00, P = 0.0983) (그림 2C), 5 월 또한 벽을 투명 한 제안 쥐 오픈 팔 예비 동작을 감소. 또한, 원심 세그먼트에 오픈 팔 탐험 없음-선반/불투명 장치 선반/투명 장치 (그림 2C)에 비해 크게 낮은 했다. 함께 찍은, 이러한 결과 나타냅니다 불안 같은 동작에 대 한 검출 감도 팔 디자인 기능 사용, 및 아니오-선반/불투명 장치 유형에 따라 다를 수 및 선반/투명 장치는 비교적 큰 있을 수 있습니다. 검출 감도 차이입니다.

팔 디자인의 다른 유형 검출 감도 차이 확인 하려면 추가 실험 완화 약물 다이아 제 팜 (그림 3A-D)를 사용 하 여 수행 되었다. 간단 하 게, 아니오-선반/불투명 장치 감지 (그림 3A-B) 선반/투명 장치 하지 않은 반면 두 팔을 벌려에서 소요 된 시간에 높은 복용량 다이아 제 팜 치료의 효과. 비슷한 결과 또한 두 팔을 벌려12 (데이터 표시 되지 않음)으로 항목의 수에 대 한 발견 했다. 이 기구에 기저 활동 (차량 치료) 없음-선반/불투명 장치에 보다 높은 하지만 그 오픈 팔 탐험의 33%를 초과 하지는 사실 때문 선반/투명 장치에 중요 한 영향의 부족 되었을 수도 있습니다. 어느 장치에 어떤 단계에서 시간입니다. 따라서,이 좁은 오픈 팔 탐험 시간 범위 Ledged/투명 장치 (그림 3C-D)에 다이아 제 팜의 완화 효과 구별 하는 것 더 어려워 했다.

Figure 1
그림 1 : 상승에 대 한 맞춤형 장비 플러스 미로 테스트 패널 (A): 높은 플러스 미로 테스트 컨테이너. 기구는 검은 컨테이너에 배치 되 고 컨테이너 프로젝트 영화 이미지 옆 모니터 실험 기간 동안 기록. 패널 (B): 장착된 무기를 지 원하는 컨테이너 프레임 워크 미로 플러스. 전체 기구는 바닥 위에 위치한 500 m m 이다. 패널 (C): 천장 조명 강도 대 한 조정할 수 있습니다. 디지털 비디오 카메라 레코드 동물 움직임을 조명으로 둘러싸인 (화살표 참조). 패널 (D): 프레임 워크;와 미로 팔 및 중앙 플랫폼은 상승 왼쪽에서 오른쪽에서 불투명 벽 팔, 아니-난 간에 오픈 팔, ledged 오픈 팔, 중앙 플랫폼, 폐쇄 하는 투명 한 벽 암 폐쇄. 패널 (E): 두 팔을 벌려;의 근접 촬영 보기 ledges 없이 왼쪽에서 오른쪽, 오픈 팔에서 팔 선반 (H5 m m)를 엽니다. 패널 (F): 생성 된 미로 (선반/투명 장치)의 예. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 2
그림 2 : 오픈 팔 레 불안 같은 동작을 줄이고 투명 한 벽은 부분적으로 불안 같은 행동 감소. 남자 쥐 겪었다는 고가 미로 플러스 팔 구조의 다른 조합으로 테스트 (선반/투명, 선반/불투명, 아니오-선반/투명, 및 아니오-선반/불투명). 테스트 순서는 실험 그룹 (각 장치 종류의 조합) 정규화 되었다. 이 절차는 각 테스트의 시간으로 인해 발생할 수 있는 예기치 않은 효과 정규화 합니다. 패널 (A):: 시간에 들고; 패널 (B):: 수가 뻗어 참석 자세; 패널 (C):: 시간 오픈 팔의 원심 세그먼트에서 보냈다. 견고 하 고 점선 라인 각각 열리고 닫힌 팔 구조의 중요 한 주요 효과 나타냅니다 (양방향 ANOVA, #P < 0.1 * P < 0.05, * *P < 0.01, * * *P < 0.001). 패널 (C)에 바 옆에 다른 문자는 상당한 차이 나타냅니다 (Bonferroni 여러 비교 테스트는 < b, P < 0.0125). 데이터와 sem의 의미로 표현 되었다 (n = 실험적인 그룹 당 16). 이러한 수치12우리의 이전 보고서 수정 되었습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 3
그림 3 : 아니-선반/불투명 기구 다이아 제 팜의 완화 효과의 높은 검출 감도 보여줍니다. 남성 쥐 받았다는 높은 플러스 미로 테스트, 아니오-선반/불투명 또는 선반/투명 장치, 차량 (0 mg/kg), 낮은 (0.25 mg/kg), 또는 높은 (0.5 mg/kg) 투여는 완화 약물 다이아 제 팜 (복의 치료를 받고 이후 30 분 주입)입니다. 다이아 제 팜 솔루션 표면 활성화 에이전트 0.9% 정상적인 염 분 해결책에서 녹 았다. 이 실험에서 3 약물 치료 그룹 및 기구 디자인의 두 가지 종류의 테스트 순서는 각 테스트의 시간으로 인해 발생할 수 있는 모든 효과 대 한 계정에 무작위로 했다. 패널 (A & B): 총 % 시간 (5 분) 선반/투명 및 아니오-선반/불투명 기구의 팔에 각각 보냈다. 패널 (C & D): 분에 의해 분 % 시간 선반/투명 및 아니오-선반/불투명 기구의 팔에 각각 보냈다. 패널 (B)에 바 옆에 다른 문자 나타냅니다 치료의 중요 한 차이 (Bonferroni 여러 비교 테스트는 < b, P < 0.0167). 패널 (C & D)에 견고 하 고 파선 줄 각각 시간 경과 및 다이아 제 팜 치료의 중요 한 주요 효과 나타냅니다 (반복 측정 ANOVA, *P < 0.05, * *P < 0.01, * * *P < 0.001). 데이터 열 SEM. 숫자 의미 동물 실험을 완료 하는 표시로 서 표현 되었다 (괄호에 숫자 표시 장치에서 떨어지는 동물). 이러한 수치12우리의 이전 보고서 수정 되었습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

정신 장애, 불안 장애를 포함 하 여에서 고통 받는 환자의 수는 증가, 그것은 불안의 기본 메커니즘의 이해를 개선 하기 위해 첨단 연구 개발 하는 것이 중요. 이를 위해, 그것은 또한 실험적인 절차를 최적화 하는 것이 중요입니다. 따라서, 하는 상승의 응용 프로그램 플러스 미로 테스트 개선, 우리는 쥐를 사용 하 여 실험적인 결과에 팔 기능의 효과 증명 하고있다.

높은 플러스 미로 설치류4, 동물 불안을 테스트 하려면 원래 설립 하지만 기본적인 구조는 일반적으로 일관 된 (예를 들어, 플러스 모양 바닥 위에 500 m m 상승), 다양 한 팔 디자인 자주 사용 하는. 원래, 기구 이루어져 ledges, 없이 두 팔을 벌려 고 팔 나무 불투명 한 벽으로 폐쇄. 그러나, 더 최근 팔 떨어지 기구, 동물을 방지 하기 위해 선반으로 개발 되었습니다 그리고 닫힌된 무기 또한 닫힌된 팔에 행동의 관찰을 용이 하 게 하는 투명 한 벽으로 개발 되었습니다. 그러나, 이러한 실험 결과 고가에 팔 기능 플러스 미로 테스트의 결합된 효과 보고 있다. 같이 우리의 결과, 오픈 팔 레의 존재와 쥐 (그림 2)에서 오픈 팔 탐험의 닫힌된 팔 벽 감소 회피의 투명도, 다이아 제 팜 ( 의 완화 효과의 검출 감도 줄일 수는 그림 3). 선반/투명 장치 차량에 두 팔을 벌려 큰 탐사를 장려 하 치료 쥐 (그림 3) 등장. 이 오픈 팔 탐험에서 행동 차별 감소 활동 차량 사이의 다이아 제 팜 치료 쥐, 따라서 더 어려운 불안 수준에 차이 감지 하 고. 따라서, 선반/투명 장치의 낮은 감도 의미 더 많은 동물 중요 한 치료를 입증 하는 테스트 해야 효과 없음-선반/불투명 기구를 사용 하 여 비교.

우리의 프로토콜에 기간 및 각 팔에 항목 수 수동으로 측정 했다 숙련된 경험에 의해. 이 절차는 팔에 모든 4 발 정의 팔 항목의 정확한 측정을 수 있습니다. 그것은 자동화 된 동물 추적 시스템 여행 거리, 그들은 항상 정확 하 게 팔에 비 항목 및 항목 사이 구별할 수 없습니다 우리의 경험 같은 일부 행동 매개 변수를 사용할 수 있지만 특히 동물 중앙 플랫폼와 팔 사이 국경 근처 뻗어 참석 자세를 수행 합니다. 따라서, 각 행동 매개 변수에 대 한 그들의 각각 힘에 따라 모두 수동 및 자동 관측 시스템의 조합을 사용 하는 것이 좋습니다.

몇 가지 다른 프로토콜의 차이점 실험실 있다. 예를 들어 일부 연구 자들은 다른 장소 오픈 팔15,16를 직면 하는 쥐 반면 닫힌된 팔13,14, 직면 하 고 중앙 플랫폼에서 동물 장소. 또한, 일부 연구 자들은 다른 쥐 방 테스트를 시작 하기 전에 테스트 하는 행동에 순응 하는 데 시간이 허용 하는 반면 그들의 가정-케이지에서 쥐 후 즉시 동작 테스트. 경우에 대해 예비 테스트에서 우리 경험 어떻게 결과 차이에 따라 처음 직면; 쥐 팔을 쥐 직면 배치 했다 팔에 입력의 발생률이 증가 했다. 또한, 쥐를 닫힌된 팔을 직면 하 고 배치 했다, 일부 동물 이동 하지 않았다 그 닫힌된 팔에서 첫 번째 항목. 이러한 경우에 열리고 닫힌 팔 사이 충돌을 경험 하는 쥐 또는 그들은 단지 이제까지 오픈 팔의 존재를 인식 하지 않고 닫힌된 장소에 있을 선호 여부를 구별 하기가 어렵습니다. 우리의 연구에서 우리는 충돌에서의 높은 발병 률을 보장 하기 위해 오픈 팔을 직면 하는 쥐를 배치 하기로 좋습니다 실험 결과에이 프로토콜 차이의 효과 제대로 되도록 추가 연구를 실시 조사.

두 팔을 벌려 고 별로 분 분석의 원심 세그먼트의 탐험의 측정 쥐 불안 같은 행동에 대 한 더 자세한 정보를 제공합니다. 이 측량은 다른 팔 디자인 검출 감도 차이 표시 하는 데 도움이. 그럼에도 불구 하 고, 불안의 보고 결과 고가 사용 하 여 연구 플러스 미로 테스트 자주 이러한 유형의 상세한 측정13,,1718을 보고 하지 않습니다. 따라서,는 연구자도 보고 더 원심 탐사, 별로 분 분석, 그리고 또한 뻗어 참석 자세 등 쥐 탐구 활동에 대 한 내용은 것이 좋습니다.

결론적으로, 우리의 연구 결과 기구의 종류 그들의 자신의 특성을 가질 수 것이 좋습니다. 이러한 테스트에서 우리 노-선반/불투명 장치 더 나은 잠재적으로 완화 효과가지고 있는 약물의 효과 검색할 수 있습니다 설명 했다. 대조적으로, 그것은 생각할 수 있는 잠재적인 anxiogenic 마약 테스트 때 선반/투명 장치 비슷한 이용을 할 수 있습니다. 날짜 하려면, 행동 테스트는 약물 검사, 뿐만 아니라 돌연변이 동물 형질 분석 사용 되었습니다. 실제로, 고급 게놈 편집 기술을 돌연변이 동물의 급속 한 생산을 허용합니다. 따라서, 그것은 매우 더 나은 정밀도와 더 나은 행동에 변화를 감지 하는 감도 테스트 절차를 개발 하는 것이 중요입니다. 이 보고서는 상승의 향상 된 응용 프로그램 플러스 동물 불안 연구 약물 또는 대상 유전자의 예상된 기능에 따라에 대 한 테스트를 보여줍니다. 따라서, 우리는 높은 고용 연구 사전 플러스 미로 우리의 노력이 도움이 될 것입니다 믿습니다.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

저자는 공개 없다.

Acknowledgments

저자는 사용자 지정된 장치를 생산에 그의 원조에 대 한 씨 昭 히라노를 감사 하 고 싶습니다. 저자는 그들의 기술 지원에 대 한 다카하시 고스케 씨와 씨 신고 나카지마를 감사 하 고 싶습니다. 이 작품은 화학 물질의 위험, 건강 및 실험실 과학 연구 보조금, 보건, 노동 및 복지, 일본 (H25-과학-IPPANN-003) 및 연구소의 과학 및 기술 메이지 연구 프로젝트 교부 금 A에 대 한 연구에 의해 지원 되었다 대학, 일본입니다.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Customized container (W1500 × D1500 × H2000 mm) NA NA Handmade by Mr. Akihiro Hirano
Lighting NA NA Handmade by Mr. Akihiro Hirano
Elevated plus maze apparatus NA NA Handmade by Mr. Akihiro Hirano
Digital video camera Watec WAT-250D2 Any suitable video camera can be attached to a hard disk recorder for recording tracking profiles.
Hard disk recorder TOSHIBA RD-R200 Any suitable hard disk recorder can be attached to the digital video camera.
Sprague-Dawley rats Charles River Laboratories Japan, Inc. NA Any suitable rats can be used for your study
Standard rat cage Toyoriko TP-105 Any suitable rat cage be used for your study
Instrument to measure light intensity AS ONE 1-5818-02 Any suitable instrument to measure light intensity
EthoVision XT version 8.0 Noldus NA Any suitable software to measure animal behavior
Diazepam Taiyo Pharmaceutical Industry 1124402A2061 Any suitable drug can be used for your study
Tween 80 Wako Pure Chemical Industries 9005-65-6 Any suitable drug can be used for your study

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Nestler, E. J. Role of the Brain's Reward Circuitry in Depression: Transcriptional Mechanisms. Int Rev Neurobiol. 124, 151-170 (2015).
  2. Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. Genetics of mouse behavior: interactions with laboratory environment. Science. 284 (5420), 1670-1672 (1999).
  3. Handley, S. L., Mithani, S. Effects of alpha-adrenoceptor agonists and antagonists in a maze-exploration model of 'fear'-motivated behaviour. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 327 (1), 1-5 (1984).
  4. Pellow, S., Chopin, P., File, S. E., Briley, M. Validation of open:closed arm entries in an elevated plus-maze as a measure of anxiety in the rat. J Neurosci Methods. 14 (3), 149-167 (1985).
  5. Violle, N., Balandras, F., Le Roux, Y., Desor, D., Schroeder, H. Variations in illumination, closed wall transparency and/or extramaze space influence both baseline anxiety and response to diazepam in the rat elevated plus-maze. Behav Brain Res. 203 (1), 35-42 (2009).
  6. Hogg, S. A review of the validity and variability of the elevated plus-maze as an animal model of anxiety. Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 21-30 (1996).
  7. Martinez, J. C., Cardenas, F., Lamprea, M., Morato, S. The role of vision and proprioception in the aversion of rats to the open arms of an elevated plus-maze. Behav Processes. 60 (1), 15-26 (2002).
  8. Anseloni, V. Z., Brandao, M. L. Ethopharmacological analysis of behaviour of rats using variations of the elevated plus-maze. Behav Pharmacol. 8 (6-7), 533-540 (1997).
  9. Anseloni, V. Z., Motta, V., Lima, G., Brandao, M. L. Behavioral and pharmacological validation of the elevated plus maze constructed with transparent walls. Braz J Med Biol Res. 28 (5), 597-601 (1995).
  10. Hagenbuch, N., Feldon, J., Yee, B. K. Use of the elevated plus-maze test with opaque or transparent walls in the detection of mouse strain differences and the anxiolytic effects of diazepam. Behav Pharmacol. 17 (1), 31-41 (2006).
  11. Fernandes, C., File, S. E. The influence of open arm ledges and maze experience in the elevated plus-maze. Pharmacol Biochem Behav. 54 (1), 31-40 (1996).
  12. Horii, Y., Kawaguchi, M. Higher detection sensitivity of anxiolytic effects of diazepam by ledge-free open arm with opaque walled closed arm elevated plus maze in male rats. Behav Brain Res. 294, 131-140 (2015).
  13. Santos, R. O., et al. Evaluation of the effect of acute sibutramine in female rats in the elevated T-maze and elevated plus-maze tests. Basic Clin Pharmacol Toxicol. 114 (2), 181-187 (2014).
  14. Lynn, D. A., Brown, G. R. The ontogeny of anxiety-like behavior in rats from adolescence to adulthood. Dev Psychobiol. 52 (8), 731-739 (2010).
  15. Horii, Y., et al. Male Hatano high-avoidance rats show high avoidance and high anxiety-like behaviors as compared with male low-avoidance rats. Exp Anim. 61 (5), 517-524 (2012).
  16. Walf, A. A., Frye, C. A. The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents. Nat Protoc. 2 (2), 322-328 (2007).
  17. Yang, Y., et al. Behavioral and pharmacological investigation of anxiety and maternal responsiveness of postpartum female rats in a pup elevated plus maze. Behav Brain Res. 292, 414-427 (2015).
  18. Albani, S. H., et al. Behavior in the elevated plus maze is differentially affected by testing conditions in rats under and over three weeks of age. Front Behav Neurosci. 9, 31 (2015).

Tags

동작 문제 136 불안 행동 다이아 제 팜 미로 불투명 또는 투명 한 벽으로 폐쇄 팔 오픈 팔 난 간에 플러스 상승
쥐에서 동물 불안을 테스트: 오픈 팔 레와 닫힌된 팔 벽 투명성 높은 플러스 미로 테스트
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Horii, Y., McTaggart, I., Kawaguchi, More

Horii, Y., McTaggart, I., Kawaguchi, M. Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test. J. Vis. Exp. (136), e56428, doi:10.3791/56428 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter