يمكن التحقيق بالتفاعل والترسب من الطين والخلايا البكتيرية في نطاق البحرية، لوحظ في البيئات الطبيعية، أفضل في بيئة معملية خاضعة لمراقبة. هنا، يمكننا وصف بروتوكول مفصلة، التي تحدد طريقة جديدة لقياس معدل ترسيب الطين وفلوككوليس سيانوباكتيريال.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تحديد معدل تسوية الطين/سيانوباكتيريال فلوككوليس
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
الآليات التي تدعم ترسب موضوعة بدقة، تجري مناقشات الرواسب العضوية الغنية لا تزال إلى حد كبير. على وجه التحديد، تحت هو دراسة أثر التفاعل بين جزيئات الطين مع الخلايا سيانوباكتيريال رد الفعل، والعوالق إلى السجل الرسوبي. وهذا التفاعل مساهما رئيسيا محتملاً نماذج ترسبية الزيتي. ضمن إعداد مختبر، يمكن دراسة معدلات هذه المواد معقمات والترسيب ويقاس في بيئة تسيطر عليها. هنا، نحن تفاصيل بروتوكول لقياس معدل الترسيب خلائط سيانوباكتيريال/الطين. وتتضح هذه المنهجية من خلال وصف العينة تجربتين: الأولى يستخدم الكاولين (المجففة شكل من أشكال كاولين) و سينيتشوكوككوس sp. المجلس المركزي الفلسطيني 7002 (البكتيريا البحرية كوككويد)، والثاني يستخدم الكاولين و سينيتشوسيستيس sp. 6803 PCC (البكتيريا كوككويد المياه العذبة). سيانوباكتيريال ثقافات مختلطة بمقادير متفاوتة من الطين داخل جهاز مصمم خصيصا لدبابات الأمثل للسماح بتسجيل الصور الفوتوغرافية والفيديو المستمر، في الوقت الحقيقي. وترد تفاصيل إجراءات أخذ العينات فضلا عن بروتوكول بعد جمع للقياس الدقيق للكلوروفيل من الذي يمكن تحديد تركيز سيانوباكتيريال الخلايا المتبقية في تعليق. من خلال النسخ المتماثل التجريبية، شيد الشخصية الذي يعرض معدل الترسيب.
المقدمة
استخدام الظروف البيئية الحالية وعمليات الاستدلال في الماضي آليات ترسبية منذ فترة طويلة دعامة الترسبات. بينما استخدمت نظائر ترسبية الحديثة، مثل البحر الأسود، فهم ترسب الرواسب الغنية بالعضوية، وموضوعه بدقة، إمكانيات التجارب المختبرية لتسليط المزيد من الضوء على أصل الودائع الزيتي. منطقة واحدة للتحقيق في نشأة تتعلق الأسود هو معدل الترسيب، وآلية تشكيل الأصلي. تقليديا، قد تم الافتراض أن تتعلق الأسود شكلت في بيئات حيث معدل الترسيب، والإنتاجية الأولية ومعدلات التنفس مسألة العضوية تعزيز المحافظة على المواد العضوية في الرواسب1،2 ،3. ومع ذلك، دور سيانوباكتيريال ومعقمات الطين ظلت إلى حد....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1. إعداد الثقافات سيانوباكتيريال
-
إعداد الثقافات التطعيم باستخدام الوسائط الصلبة
- الحصول على خلايا سيانوباكتيريال أكسينيك من النوع الأميركي ثقافة جمع أو تحصيل الثقافة باستور. على سبيل المثال، حصل أحادي الخلية، والبحرية سينيتشوكوككوس sp. 7002 المجلس المركزي الفلسطيني من "جمع الثقافة باستور"، فإنه سيشار إلى الآخرة سينيتشوكوككوس.
- الحفاظ على خلايا سينيتشوكوككوس على لوحات تتضمن الوسائط الصلبة (+ وسائط سائلة14 و 1.5% أجار15). سوف تحال هذه إلى الآخرة كثقافات التطعيم.
- احتضان اللوحات في 32 ± 2 درجة مئوية مع استمرار الضوء المقدمة في 30 – 50 µmol ا....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
عندما تتعرض للطين، تعرض الخلايا سيانوباكتيريال من تعليق22. ويتضح ذلك في نتائج ممثلة هنا. لتحديد أثر الطين على السكان سيانوباكتيريال ومراقبة الترسيب معدلات، تجربتين أجريت خلالها تعرضت سينيتشوكوككوس و سينيتشوسيستيس بطين الكاولين 50 غرام/لتر (الجدول 5-6، الشكل 2–3). وقد نمت الثقافات سيانوباكتيريال كما هو موضح في الخطوة 1. في وقت لاحق، تدفقت الدبابات بعد إقامة الخزان (الخطوة 2)، ثقافة
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
معقمات تحفزها التفاعل سيانوباكتيريال من الفخار الخلية قد جذبت الكثير من الاهتمام في مجالات البيئة والهندسة2،،من34،،من56،7 ،8،9،10،11،12، إلا أن التحقيق.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
شكر وتقدير
الكتاب الاعتراف بامتنان التمويل من العلوم الطبيعية والهندسة مجلس البحوث الكندي (05448 و 165831 و 213411).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| البكتيريا الزرقاء (في هذه الدراسة: Synechococcus< / em> sp. PCC 7002 و Synechocystis< em> sp. PCC 6803) | ثقافة باستور | PCC 7002 أو PCC 6803 | المستخدمة لتلقيح الألواح |
| أجار | Thermo Scientific | CM0003 | المستخدمة لملء طبقين من أطباق بتري |
| لوحات بتري (علم الجراثيم القياسي ، 100 × 15 مم) | Sarstedt | 82.1473.001 | 2 مطلوب |
| 1 لتر قارورة Erlenmeyer المقاومة للحرارة | Pyrex | 4980-125 | 1 مطلوب |
| 250 مل قارورة Erlenmeyer المقاومة للحرارة | Pyrex | 4980-250 | 1 مطلوب |
| حلقة تلقيح Nichrome بمقبض | فيشر Scientific | 14-956-103 | 1 المطلوب |
| من ورق القصدير | Reynolds Wrap رقائق الألومنيوم | 89079-067 | 50 سم مطلوب ؛ تستخدم لتغطية سدادة الرغوة وعنق قوارير erlenmeyer |
| وسائط النمو (على سبيل المثال A +) | 1050 مل مطلوبة ؛ أنتجت باستخدام التركيبة الموضحة في الجداول 1-4 | ||
| Bunsen Burner | Fisher Scientific | S95941 | 1 الأنابيب |
| البلاستيكية | المطلوبة فيشر Scientific | S504591 | 1 متر مطلوب ؛ تستخدم لإنشاء جهاز الفقاعات |
| سدادة الإسفنج | Jaece Industries Inc | 14-127-40E | 1 مطلوب ؛ ثقب مصنوع في وسط الماصة. تستخدم لبناء لوح الأكريليك لجهاز الفقاعات |
| ؛ | هوم ديبوت | أوبتكس لوح أكريليك شفاف نموذج # MC-102S | 1 مطلوب ؛ يستخدم لبناء خزان أكريليك (20 × 30 × 5.1 سم) |
| لاصق سيليكون مقاوم للماء | شفاف هوم ديبوت | لوكتايت نموذج سيليكون شفاف # 908570 | 1 مطلوب ؛ تستخدم لبناء خزان أكريليك (20 × 30 × 5.1 سم) |
| كاميرا أو مسجل فيديو | باناسونيك | HC-V770 HD | 1 مطلوب |
| حامل ثلاثي القوائم | Magnus | VT-300 | 1 المطلوب |
| قماش أسود | Primomart | ؛ 0726670162199 EAN ؛ رقم الجزء 680254blacknappedfr | 1 مطلوب ؛ قماش حجب خفيف duvetyne ؛ تقريبا 152 × 213 سم لتغطية تجربة الخزان |
| الماصة المصلية المقاومة للحرارة | مدمجة C708510 | 13-671-101G | 1 مطلوب ؛ تستخدم لإنشاء |
| قوارير عينة جهاز الفقاعات ؛ | Dynalon | S30467 | 12 على الأقل (سيختلف باختلاف الفاصل الزمني المختار) |
| ماصة زجاجية مقاومة للحرارة | فيشر Scientific | Corning Incorporated C708510 ، 13-671-101G | 1 مطلوبة ؛ تستخدم لإنشاء جهاز الفقاعات ؛ ستعمل الماصة المصلية من البوليسترين أيضا ، ولكن يجب توصيلها بالأنبوب والسدادة بعد تعقيم بقية الجهاز. |
| أجهزة الطرد المركزي الدقيقة | Eppendorf | 22 62 120-3 | 1 مطلوب ؛ يمكن استخدام المنتجات المماثلة إذا كانت قادرة على الطرد المركزي 1.5-2 مل من أنابيب الطرد الدقيق في 13,000 × |
| جم آلة دوامة (Vortex-Genie 2) | Industries، Inc | SI-0236 | 1 المطلوبة |
| 100٪ ميثانول | فيشر Scientific | A412-500 SDS | على الأقل 12 مل (1 مل لكل عينة) مطلوبة ؛ تحذير: قابل للاشتعال ، سام. ارتد القفازات ونظارات السلامة. لا تستخدم أو تخزن بالقرب من مصدر الاشتعال. يمكن استخدام مصادر بديلة. |
| كوفيت (1.6 & nbsp ؛ مل ، بوليسترين) | Sarstedt | 67.742 | لا يقل عن 12 مقياس |
| الطيف | المطلوب فيشر Scientific | 222-271600 | 1 مطلوب ؛ يمكن أيضا استخدام Pharmacia Biotech Novaspec ll. |
| المصابيح الكهربائية | هوم ديبوت | موديل # 451807; الانترنت #205477895; متجر SKU #1001061538 | 6-8 لمبات مطلوبة لتوفير الضوء لماصة تجارب الخزان |
| (Pipetman Classic P1000 | Gilson | F123602 | تستخدم لجمع العينات |
| 37٪ حمض الهيدروكلوريك | سيجما ألدريتش | 258148 | تحذير: تآكل وسام. ارتد معطف المختبر ونظارات السلامة والقفازات المقاومة للأحماض أثناء الاستخدام. أعدت إلى 4 نيوتن قبل استخدامها عن طريق التخفيف في الماء منزوع الأيونات في دخان كيميائي. |
| سدادة رغوة (صغيرة) | سدادة رغوة Canlab | T 1385 | |
| (كبيرة) | Canlab | T 1387 | تتطلب بعض السدادات السليمة وبعضها به ثقب واحد من خلال المركز |
| 30 درجة ؛ C حاضنة / غرفة نمو مع إضاءة | 1 مطلوبة | ||
| 70٪ الإيثانول | فيشر العلمي | BP8201500 | 30 مل & nbsp ؛ مطلوب ؛ تحذير: سام وقابل للاشتعال. ارتداء معطف المختبر ونظارات السلامة |
| فلتر الهواء الكارهة للماء (Midisart 2000 ، 0.2 & micro ؛ م) | سارتوريوس | 17805 | 1 الطين المطلوب |
| (مثل الكاولين) | فيشر ساينتفيك | MFCD00062311 | لا يقل عن 50 جم مطلوبة |
| من أنابيب الطرد الدقيق (2 مل ، بولي بروبيلين) يمكن | استخدام Sarstedt | 72.695.500 | منتجات مماثلة. 12 على الأقل (ستختلف مع الفاصل الزمني المختار) |
| 1000 & micro; L نصائح ماصة | Sarstedt | 70.762 | 1 مطلوبة |
المراجع
- Macquaker, H. S., Keller, M. A., Davies, S. J. Algal blooms and "marine snow": mechanisms that enhance preservation of organic carbon in ancient fine-grained sediments. J. Sediment. Res. 80, 934-942 (2010).
- Tyson, R. V. Sedimentation rate, dilution, preservation and total organic carbon: some results of a modeling study. Org. Geochem. 32, 333-339 (2001).
- Piper, D. Z., Calvert, S. E.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
