ويصف هذا البروتوكول استخدام محلل تكوين الهيئة والأيضية نظام الرصد الحيوانية لتحديد خصائص تكوين الجسم والمعلمات الأيضي في الفئران. يتم استخدام نموذج السمنة الناجمة عن التغذية بالدهون كمثال لتطبيق هذه التقنيات.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تكوين الجسم والتحليل الأيضي حبس في الفئران بنك الاحتياطي الفيدرالي الدهون عالية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
تعديلات على تكوين الجسم (كتلة الدهون أو الهزيل)، معلمات الأيضية مثل استهلاك الأوكسجين الجسم كله ونفقات الطاقة، واستخدام الركيزة، والسلوكيات مثل تناول الطعام والنشاط البدني يمكن أن توفر معلومات هامة بشأن الآليات الكامنة للمرض. ونظرا لأهمية تكوين الجسم والتمثيل الغذائي إلى تطور السمنة وعن عقابيل اللاحقة، من الضروري أن تجعل مقاييس دقيقة لهذه المعلمات في إعداد البحوث السريرية قبل. أوجه التقدم في التكنولوجيا على مدى العقود القليلة الماضية جعلت من الممكن اشتقاق هذه التدابير في نماذج القوارض بطريقة غير الغازية والطولية. ونتيجة لذلك، أثبتت هذه التدابير الأيضية مفيدة عند تقييم استجابة التلاعبات الجينية (الفئران على سبيل المثال الضربة القاضية أو المحورة وراثيا، والفيروسية ضربة إلى أسفل أو overexpression من الجينات)، وفحص المخدرات/مجمع التجريبية والغذائية، التدخلات السلوكية أو البدنية نشاط. وهنا، نحن تصف البروتوكولات المستخدمة لقياس مكونات الجسم والايض المعلمات باستخدام نظام الرصد في تشاو التي تغذيها وارتفاع الدهون الفئران حمية تغذية حيوان.
المقدمة
ويدعم الأيض جوانب كثيرة من الخلوي الطبيعي والجهاز وفسيولوجيا الجسم كله. ونتيجة لذلك، في الإعداد لمختلف الأمراض، تعديلات على التمثيل الغذائي قد تسهم مباشرة في الشرط الأساسي، أو قد يتأثر سلبا كأثر جانبي لعلم الأمراض. تقليديا، الأيضية للبحث والدراسات في ميزان الطاقة قد تركزت في مجال السمنة والشروط ذات الصلة مثل مقاومة الأنسولين، ما قبل السكري، التعصب السكر وأمراض القلب والأوعية الدموية، والسكري. هذه البحوث ما يبرره نظراً لتصاعد انتشار مثل هذه الشروط في جميع أنحاء العالم، والفرد، والمجتمعية، والتكاليف الاقتصادية تلحق هذه الشروط. على هذا النحو، وضع استراتيجيات وقائية وعلاجية جديدة للسمنة الهدف هدف مستمر في مختبرات البحوث في جميع أنحاء العالم، ونماذج الماوس الإكلينيكية بشدة....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
جميع التجارب التي وصفت أقرها "الفريد بحوث التعليم المخفر الحيوان الأخلاقيات اللجنة الطبية" (AEC أمريب) والفئران وقدمت الرعاية الإنسانية تمشيا مع "الوطنية للصحة" ومجلس البحوث الطبية (NHMRC) من "المبادئ التوجيهية لأستراليا" في التجارب الحيوانية. كانت الحيوانات التي تديرها تلك المنصوص عليها النظام الغذائي والمياه libitum الإعلانية ويسكنون في إيجاد بيئة التحكم في درجة الحرارة (~ 21-22 درجة مئوية) مع ضوء ح 12 ودورة الظلام-ح 12. الأسبوع سبعة غذيت القديمة الفئران الذكور (على خلفية C57Bl/6J) أما النظام الغذائي تشاو العادية العادية (محتوى الطاقة 14.3 MJ/كغ، تتألف من 76% كج من الكربوهيدرات والدهون 5% وبروتين 19%؛ انظر الجدول للمواد) أو لمجموعة التغذية بالدهون عالية، حم....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
عرض النتائج ينظر في الشكل 3 تغيير نموذجي في معلمات تكوين الجسم عند تغذية الدهون عالية، كما يقاس عن طريق اتشومري. في الأساس لم يكن هناك فرق في أي معلمة قياسها (الشكل 3 ألف-F). ومع ذلك، بعد أسبوع واحد فقط من الدهون عالية التغذية، كان هناك زيادة كبيرة في وزن الجسم وكتلة الدهون ونسبة كتلة الدهون في المجموعة HFD (الشكل 3 أ،ب،د). حجم الخلافات بين الفريقين .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
خطوات حاسمة
البروتوكولات المبينة في هذا التقرير تقديم مثال على طرق لقياس مكونات الجسم ومختلف المعايير الأيضية في الفئران باستخدام وهو محلل تكوين هيئة وحيوان ايضية نظام الرصد. لكل التقنيات، فمن الأهمية الحاسمة لضمان أن تعمل هذه الأجهزة على النحو الأمثل، للقيام بهذا، من الضروري أن الباحث تقوم باختبار نظام لمحلل تكوين الهيئة ومعايرة لتشكيل غاز معروفة الأيض الحيوان السابقة نظام الرصد استخدام المعدات. هذا سوف ضمان مزيد من الاتساق في النتائج وفرصة للكشف عن أية مشاكل محتملة تتعلق بال.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
شكر وتقدير
ونحن نشكر الموظفين من "البحوث الطبية الفريد" وفريق "خدمات التعليم المخفر الحيوان" (AS أمريب) لما قدمته من المساعدة ورعاية الفئران المستخدمة في هذه الدراسة والدعم لنظام "دعم البنية التحتية التشغيلية" من الدولة الفيكتوري الحكومة.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| نظام 4 في 1 | نظام EchoMRI | 4 في 1 محلل | تكوين الجسم بالكامل |
| عينة اختبار زيت الكانولا (التكاليف) | EchoMRI | الماوس الخاص (اتصل بالشركة للحصول على رقم القط) | |
| حامل عينة حيوانية ؛ | EchoMRI | 103-E56100R | |
| محدد | EchoMRI | 600-E56100D | |
| 12 غرفة نظام | Columbus Instruments | قفص التمثيل الغذائي المصمم خصيصا ؛ يتضمن برنامج التحكم | |
| Drierite | Fisher Scientific | 238988 | CLAMS القابل للاستهلاك |
| خزان الغاز | Air Liquide | المختلط لطلب | معايرة الغاز (0.5٪ CO2< / sub> ، 20.5٪ O2< / sub> ، توازن النيتروجين). نب سب. |
| النظام الغذائي العادي تشاو | الأعلاف المتخصصة النظام | الغذائي للفأر والجرذان المشع | |
المراجع
- Chen, W., Wilson, J. L., Khaksari, M., Cowley, M. A., Enriori, P. J. Abdominal fat analyzed by DEXA scan reflects visceral body fat and improves the phenotype description and the assessment of metabolic risk in mice. Am J Physiol Endocrinol Metab. 303 (5), E635-E643 (2012).
- Kovner, I., Taicher, G. Z., Mitchell, A. D.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
