يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

نموذج اعتلال عضلة القلب الناجم عن ميتوتريكسات في الزرد الكبار

9.4K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/57567

⸱

يونيو 7, 2018

 ,  ,  , 
1Clinical and Translational Sciences Track, Mayo Clinic Graduate School of Biomedical Sciences, 2Department of Biochemistry and Molecular Biology, Mayo Clinic, 3Division of Cardiovascular Diseases, Mayo Clinic, 4Institute of Life Science, Beijing University of Chinese Medicine

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

يتم وصف أسلوب لإنشاء نموذج اعتلال عضلة القلب الناجم عن ميتوتريكسات في الزرد الكبار (دانيو rerio) هنا. طريقتين بديل للحقن داخل وتعرض وتناقش شروط لتقليل الاختلافات بين مختلف مجموعات تجريبية.

الملخص

قد استخدمت الزرد الكبار وراثيا موجوداً (دانيو rerio) متزايدة كنموذج فقاريات لفهم الأمراض البشرية مثل اعتلال عضلة القلب. بسبب الراحة وقابليتها للمعالجات الجينية عالية الإنتاجية، توليد نماذج المكتسبة باعتلال عضلة القلب، مثل نموذج ميتوتريكسات الناجمة عن اعتلال عضلة القلب (DIC) في الزرد الكبار، هو فتح أبواب مجالات بحثية جديدة، بما في ذلك اكتشاف معدلات اعتلال عضلة القلب عن طريق الفحص الجيني إلى الأمام. يختلف عن النموذج DIC الزرد الجنينية، الأولى الحاد والمزمن مراحل اعتلال عضلة القلب في وقت لاحق يمكن تحديدها في النموذج DIC الزرد الكبار، مما يتيح دراسة آليات تعتمد على مرحلة الإشارات والاستراتيجيات العلاجية. ومع ذلك، يمكن الحصول على نتائج متغير مع الطراز الحالي، حتى في أيدي محققين ذوي خبرة. لتيسير تنفيذ نموذج DIC في المستقبل، نقدم بروتوكول مفصلة حول كيفية إنشاء هذا النموذج DIC في الزرد الكبار ووصف طريقتين بديل للحقن (الملكية الفكرية) داخل. نحن مناقشة الخيارات بشأن كيفية الحد من التفاوتات في الحصول على نتائج يمكن الاعتماد عليها وتقدم اقتراحات بشأن كيفية تفسير النتائج على نحو مناسب.

المقدمة

وضعت ميتوتريكسات (دوكس)، كما يدعى Adriamycin، كالعقاقير المضادة الورم منذ الستينات1،2. الآن ما زال بنشاط كالمخدرات العلاج الكيميائي مهم لنطاق عريض من الأورام. ومع ذلك، التطبيق السريري دوكس أعاقها عن السمية تعتمد على الجرعة، وخاصة كارديوتوكسيسيتي تتميز بأعراض متغيرة تتراوح بين التغييرات electrocardiographic أعراض التهاب التامور والتليف اعتلال عضلة القلب 1 , 2-وحتى الآن، أثارت الفرضيات الرئيسية الثلاثة على الأقل لشرح مدينة دبي للإنترنت، بما في ذلك تنشيط الأكسجين التفاعلية الأنواع (روس)1،3،4،5، تثبيط topoisomerase (ثانيا-β 6،TOP2β)7، والتحوير للكالسيوم داخل الخلية الإصدار1،،من89. تتراكم الأدلة تشير أيضا إلى الاستعداد الوراثي كعامل خطر رئيسي لمدينة دبي للإنترنت10،11،،من1213. الهويات الجينات ذات الصلة بهذه الميول DIC، مع ذلك، لا تزال غير معروفة إلى حد كبير. ديكسرازوكساني هو عامل adjuvant فقط وافق "لنا الغذاء" والدواء (FDA) لعلاج DIC، لكن مع التنفيذ المحدود14،،من1516، مما يؤكد الحاجة إلى تحديد إضافية الاستراتيجيات العلاجية. ولذلك يتم استكشاف نماذج حيوانية لمدينة دبي للإنترنت لهذه الأغراض. نظراً لإمكانية الوصول والبساطة، الدراسات الميكانيكية في مدينة دبي للإنترنت نماذج يمكن أن يكون آثار أوسع نطاقا في أنواع أخرى من القلب: المرضية المشتركة قد تكون مشتركة بين القلب مسببات مختلفة، لا سيما في لاحقاً المراحل المرضية17،18،،من1920.

بالإضافة إلى نماذج القوارض من مدينة دبي للإنترنت، تم تطوير نماذج DIC الزرد بإنتاجية أعلى لتسهيل اكتشاف العوامل الوراثية الجديدة والمداواة. أنشئ نموذج DIC جنينية في الأجنة الزرد شفافة لفحص المركبات العلاجية21. نظراً لأن القلب أمراض ظهور الكبار مع المرضية تدريجيا، اعتلال عضلة القلب الزرد الكبار نماذج تم وضع22،،من2324،،من2526. ونحن إنشاء أول نموذج المكتسبة لاعتلال عضلة القلب الناجمة عن فقر الدم المزمن24، تليها مدينة دبي للإنترنت كنموذج المكتسبة باعتلال عضلة القلب الثاني في الزرد الكبار23. ووجدنا أن حقن بولس واحد من دوكس في الزرد الكبار يدفع كارديوتوكسيسيتي يتكون من مرحلة حادة تقريبا خلال أسبوع واحد بعد انتهاء الحقن (wpi)، تليها مرحلة مزمنة من اعتلال عضلة القلب إلى 6 أشهر بعد الحقن. بينما هابلوينسوفيسينسي الهدف آليا من ربمسن(mtor) يساعد اعتلال عضلة القلب الذي يبالغ في المرحلة المزمنة، وفيات الأسماك في المرحلة الحادة، مما يؤكد قيمة النموذج DIC الكبار نستشف تعتمد على المرحلة 23من الآليات. كذلك أثبتنا أنه يمكن استخدام نموذج DIC الكبار التأكيد على مجموعة من الزرد insertional القلب (ZIC) طفرات التي تتولد عن طريق نهج القائم على ينقول الطفرات insertional27. شاشة تجريبية حددت 3 الجينات المعروفة اعتلال عضلة القلب، فضلا عن 6b دناج (Hsp40) هومولوج، الفصيلية ب والأعضاء (dnajb6b) كالجديدة DIC قابلية الجينات28. ولذلك، أدت توليد نموذج DIC الكبار في الزرد إلى منهجية جديدة تمكن بصورة منهجية تحديد المعدلات الوراثية لمدينة دبي للإنترنت، التي تكمل القائمة على نطاق الجينوم جمعية دراسة (جواس) ومحور الصفات الكمية (QTL ) التحليل.

وخلال جيل وتنفيذ نموذج DIC الزرد الكبار، لاحظنا وجود تباينات كبيرة فيما بين الباحثين مختلفة و/أو حتى بين الحقن المختلفة التي يقوم بها المحقق نفسه. طبيعة طولية من الطراز يفرض تحديات لتسجيل النتائج من المحققين مختلفة وفي عملية استكشاف الأخطاء وإصلاحها متسلسلة. لتسهيل استخدام هذا الذي يحفز اعتلال عضلة القلب الإجهاد طريقة بسيطة من مجتمع البحث، يمكننا وصف لنا البروتوكول بالتفصيل، هذا نوعين من الحقن بالملكية الفكرية، ومناقشة اعتبارات الحد من التباينات بين مختلف الباحثين.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

وأجريت جميع الإجراءات الموصوفة هنا وفقا للدليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية (الأكاديميات الوطنية الصحافة-2011)، والتي وافق عليها برعاية الحيوان المؤسسية عيادة مايو كلينيك واستخدام اللجنة.

1-إعداد الزرد الكبار

  1. إعداد أزواج تربية كافية في عبور الدبابات للحصول على الأقل مرتين كالعديد من الأسماك الإجمالية اللازمة لحقن دوكس. إذا مقارنة الأسماك مع مختلف الخلفيات الوراثية، تولد جميع الأسماك خلال نفس الأسبوع لضمان مطابقة سن ضوابط.
  2. جمع أجنة الأسماك في صباح اليوم التالي، ونقلها إلى أطباق بتري 100 مم، والاحتفاظ بها في حاضنة 28.5 درجة مئوية. الاحتفاظ بالأجنة في كثافة منخفضة (< طبق بيتري الأجنة/100).
  3. تحديث الماء الجنين يوميا لتجنب اختلال الجنس، وإزالة البيض الميت يدوياً في الوقت مناسب باستخدام ماصة نقل.
  4. وضع نفس عدد الأجنة في كل دبابة (على سبيل المثال، المتوسطة الأجنة/3 ل 60 دبابة في البداية) لضمان مطابقة كثافة عناصر التحكم.
  5. بدء باراميسيا التغذية في التسميد بعد 4 أيام (إدارة الشرطة الاتحادية).
  6. فحص الأسماك يوميا خلال مرحلة الأحداث. ضبط عدد الأسماك حسب الحاجة لضمان الأسماك مشابهة الكثافة.
  7. عندما تصل الأسماك إلى 4 أسابيع عمر، نقل الأسماك تصل إلى 20 في كل دبابة متوسطة ل 3 جديدة لتحقيق مزيد من النمو. ابدأ لتغذية السمك مع الجمبري أجاج مظلل حية.

2-إعداد وتخزين حل الأسهم دوكس

ملاحظة: يمكن شراء دوكس من الشركات الحيوية المختلفة. ويكتسب المجمع عادة كمسحوق في حاويات البنى الداكن.

  1. دقة إذابة مسحوق دوكس في الماء المتأين الشطب لضمان لا كتل مرئية، مع تركيز 5 ملغ/مل نهائي كحل الأسهم. 1 مل الكوة دوكس المخزون في كل أنبوبة 1.5 مل قفل صندوق الأمانات. لف الأنابيب 1.5 مل مع ورقة رقائق الألومنيوم لحماية دوكس من التعرض للضوء.
    ملاحظة: إجراء هذه الخطوة في غطاء كيميائية.
  2. يبقى الحل دوكس الأسهم عند 4 درجة مئوية للتخزين. للتخزين على المدى الطويل (> 4 أسابيع) لحل دوكس الأسهم، وتنفيذ 3 المقطع الاختياري الوارد وصفها أدناه.

3-مراقبة نوعية دوكس باستخدام أجنة الزرد (اختياري)

ملاحظة: هو دوكس كلا الرطوبة-وحساسة للضوء، ولذلك فإنه يمكن أن يفقد فعاليته المخدرات للنمذجة DIC بعد التخزين الموسعة. دوكس تم شراؤها من شركات مختلفة، أو دفعات مختلفة حتى من نفس الشركة، أنها مفيدة لمعايرة فعاليته المخدرات باستخدام البرية من نوع (WT) الزرد الأجنة قبل إجراء التجارب على الأسماك الكبار. هذا الأسلوب مشتق من الزرد عنها جنينية DIC نموذجي21.

  1. جمع WT الزرد الأجنة من أزواج 2 على الأقل من الأسماك. ديتشوريوناتي الأجنة في التسميد بعد 24 ساعة (hpf) يدوياً باستخدام حقنه بإبرة صغيرة. وبدلاً من ذلك، علاج الجنين مع بروتيناز ك بتركيز نهائي 10 ميكروغرام/مل لمدة 10-15 دقيقة في حاضنة 30 درجة مئوية. تحديث الماء الأجنة بعد ديتشوريوناتيون. إزالة أجنة ميتة والحفاظ على الأجنة 36 على الأقل لكل دفعة.
  2. تمييع الحل دوكس الأسهم في الماء الأجنة الطازجة إلى تركيز نهائي من 100 ميكرومتر. حجم الحل هو 100 ميليلتر لكل الأجنة 3. مزيج الحل دوكس المخفف بدوامة. ينبغي أن يكون الحل النهائي المخفف ضوء، اللون الأحمر.
  3. إضافة 100 ميليلتر/بئر الحل دوكس المخفف لصفيحة شفافة نظيفة 96-جيدا.
  4. تأخذ 3 أجنة ديتشوريوناتيد مع ماصة نقل بلاستيك، والحفاظ على الأجنة قرب نهاية طرف ماصة. وضع طرف الماصة في كل بئر مع الحل دوكس. واسمحوا نهاية الطرف تلمس الحل والسماح للأجنة للسباحة في البئر.
    ملاحظة: تجنب دفع الأجنة، الذي سيتم إضافة المزيد من المياه في البئر وتمييع الحل دوكس يدوياً.
  5. تحديث الحل دوكس في 48 هبف. وبحلول ذلك الوقت، مراقبة الآبار تحت مجهر مع 10 X التكبير لتحديد الأجنة أو أجنة ميتة (وقف نبضات القلب) مع وذمة. عد وإزالة أي أجنة ميتة في الوقت مناسب، إلا يمكن أن تموت الأجنة الباقية معرضة للحل مع أجنة ميتة بسرعة كذلك.
  6. فحص الأجنة في 72 هبف والتعويل عليها. يعتبر علاج دوكس "فعالية المخدرات جيدة" إذا > وفاة 25% (وقف نبضات القلب) يمكن ملاحظتها في دفعات كلا من الأجنة.

4-حقن قبل إعداد

ملاحظة: تستخدم حقن دوكس الأسماك من 8 أسابيع إلى 6 أشهر من العمر. أوزان الجسم (BWs) من الأسماك البرية الهندي تناذر (ويك) نضجت بالحقن يمكن أن تتراوح بين 0.2-0.5 ز.

  1. سريع الأسماك عن 24 ساعة قبل الحقن.
  2. تخدير السمك مع الماء الجنين الذي يحتوي على تريكايني 0.16 mg/mL. استخدام ورقة تصفية نظيفة لتجفيف المياه من كلا الجانبين من الجسم. قياس وزن الجسم لكل الأسماك على نطاق. تجميع الأسماك داخل الفرق 10% في الحرب البيولوجية لحقن لاحق.
    ملاحظة: للتقليل من حجم العمل في هذه الخطوة، تعتبر الأسماك داخل الفرق 10% في الأسلحة البيولوجية بنفس الحجم؛ ولذلك، تعد دوكس العامل حل واحد وفقا لما يعني الأسلحة البيولوجية.
  3. تخطط لضخ كل الأسماك الكبار مع 5 ميليلتر للحل. حساب تركيز العامل دوكس وفقا لإعداد الأسماك و BWs.
    ملاحظة: لدراسة كارديوتوكسيسيتي المزمنة تصل إلى 6 أشهر، استخدم دوكس عند جرعة قدرها 20 مغ/كغ. لدراسة كارديوتوكسيسيتي الحادة من دوكس، يمكن زيادة الجرعة دوكس ما يصل إلى 50 مغ/كغ من وزن الجسم.
  4. تمييع دوكس المخزون في 1 × الحل هانك الملح المتوازن (حبس) للمقابلة العامل تركيزات. دوامة لخلط الحل. باختصار تدور إلى أسفل لجمع الحل.

5-دوكس الحقن في الأسماك الكبار

  1. المكان نظيف 100 مم طبق بيتري مع اسفنجة داخله، تحت مجهر تشريح، ثم قم بضبط التركيز. قص الأسفنج جعل تجويف حوالي 4 سم في طول عقد من أسماك. جعل تجويف أطول لأسماك كبيرة.
  2. إعداد إبرة ز 34 مع 10 ميليلتر الصغرى-حقنه. شطف الإبرة مع المخزن المؤقت x HBSS 1 لإزالة أي فقاعات وكتل من المحاقن والأنابيب.
  3. تخدير السمك الكبار في الماء الجنين الذي يحتوي على تريكيني 0.16 ملغ/مل لمدة 2 دقيقة.
    ملاحظة: يمكن أن تؤدي إلى أنيسثيتيزاتيون فترة طويلة أكثر من 5 دقيقة تليها الحقن دوكس الأسماك الموت.
  4. نقع الأسفنج في الماء الجنين مع تريكايني، ونقل الأسماك إلى الأسفنج للحقن.
  5. إجراء حقن دوكس الملكية الفكرية بأي من الأساليب اثنين هو موضح أدناه.
    1. حقن الملكية الفكرية الكلاسيكية29
      1. ضع السمك مع البطن حتى في تجويف الأسفنج. بسرعة إدراج الإبرة، مع 45° زاوية لجسم الأسماك في خط الوسط بين الزعانف الحوضية، واختراق حوالي 1-2 مم-الإفراج عن جميع دوكس الحل ببطء. الانتظار 5 s قبل سحب الإبرة. تحقق من تسليم دوكس بلون أحمر تظهر في بطن السمك.
    2. حقن IP البديلة
      1. ضع الأسماك أفقياً على الأسفنج مع الأمامي إلى اليمين. بلطف استقرار الأسماك استخدام ملقط نهاية غير حادة مع اليد اليسرى وأمسك بالصغير-المحاقن مع اليد اليمنى.
      2. ضع الإبرة تحت الخط الجانبي أعلى الزعنفة الحوضية، مع المجسم مشطوف الحواف متقابلة لأعلى. لافتاً في موقف 07:00 ص بزاوية 45 درجة، إدراج الإبرة 3-4 مم تجويف الأسماك الواقعة بين الحوض وزعانف الشرج ومن ثم خفض المكبس ببطء. تحقق من تسليم دوكس بلون أحمر تظهر في بطن السمك.
  6. بسرعة نقل الأسماك حقن لخزان عبور نظيفة مليئة بالمياه العذبة نظام السماح للأسماك لاسترداد. شطف الإبرة مرة واحدة مع المخزن المؤقت x HBSS 1 بين الحقن.

6-بعد حقن الأسماك الإدارة

  1. بعد الحقن، إرجاع السمك للنظام مع تشغيل الدورة الدموية. إذا كان ذلك ممكناً، الاحتفاظ بالأسماك دوكس تعامل بشكل منفصل من النظام الرئيسي لتجنب التلوث المتبادل بين الدبابات المختلفة التي تشترك في الدورة الدموية.
  2. الأسماك حقن لآخر 24 ساعة للانتعاش بسرعة. مراقبة الأسماك يوميا خلال الأسبوع الأول. إزالة السمك الميت في الوقت مناسب لتجنب العدوى للأسماك الأخرى.
    ملاحظة: موت الأسماك خلال 24 ساعة الأولى من المحتمل بسبب الآفات البدنية الناجمة عن الحقن.
  3. كذلك المحافظة على الأسماك أكد دوكس للملاحظات الطولية. إزالة السمك الميت في الوقت المناسب لتجنب العدوى إلى غيرها من الأسماك في الخزان.
    ملاحظة: يتم توثيق إعداد الأسماك لإنشاء منحنى البقاء على قيد الحياة.
  4. استخدام فحوصات تجريبية مختلفة للنمط الظاهري الأسماك أكد دوكس، مثل تخطيط صدى القلب30وظيفة القلب مراسل الخط المعدلة وراثيا23، السباحة التحدي26، والتقدير الكمي لأخرى يعيد البناء المرضية علامات23.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

وترد هنا طريقتين لإجراء حقن الملكية الفكرية لنموذج DIC في الزرد الكبار. أثناء استخدام الكلاسيكية، وأنشئت الملكية الفكرية حقن الأسلوب29، لوحظ أن الحل دوكس حقن (اللون الأحمر) يمكن أن طين في بعض الأحيان الخروج من الموقع حيث اخترقت الإبرة. يستخدم الحقن IP البديلة في موقع آخر لاختراق الإبرة هو 3-4 ملم بعيداً عن الصفاق حيث يتم تحريرها في دوكس (الشكل 1A)، الذي يمنع فعلياً التسرب (الشكل 1B، ج 1). ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

نموذج DIC تدريجي، لتم تحديد جرعة 20 ملغ/كغ دوكس تجريبيا كأعلى جرعة التي لا تتسبب في موت الأسماك الكبيرة خلال 1 wpi لكن النتائج لا تزال في موت الأسماك والحد من وظيفة القلب بعد wpi 4 (الشكل 3 و 4 الشكل). هذه الجرعة مماثلة لتلك التي يكثر استخدامها في نماذج DIC القوارض (15-25 مغ/كغ) وإلى حدود الجرعة التراكمية في البشر (550 مغ/م2، وما يعادل 15 مغ/كغ)4،7،،من3...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

الكتاب يعلن لا تضارب المصالح.

شكر وتقدير

هذا العمل كان تدعمها جزئيا "منحة تنمية عالم" من "جمعية القلب الأمريكية" (14SDG18160021 إلى YD)، R01 المعاهد الوطنية للصحة في "الولايات المتحدة" يمنح HL 81753 و 107304 HL إلى XX، ومؤسسة مايو كلينيك إلى س س.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
خزان العبورAquaneeringZHCT100
حاضنةThermoFisherالحفاظ على الجنين
3 لتر خزان متوسطAquaneeringZT280صيانة الأسماك
باراميسياكارولينا131560طعام للأسماك الصغيرة
روبيان ملحي حيفقس في المنزلطعام للأسماك البالغة
دوكسوروبيسين هيدروكلوريدسيجماD1515-10MG
1.5 مل أنبوب قفل آمنEppendorfرقم 022363204لتخزين الأدوية
ورق رقائق الألومنيومفيشر1213104لمنع التعرض للضوء
Proteinase KRocheرقم 03115887001لإزالة الجنين
الملح المتوازن هانك (HBBS)ثيرموفيشر14025076مركبة لطبق بتري DOX
100 ممFalcon431741
10 & mu ؛ L NanoFil حقنة صغيرةWPINANOFILللحقن
34 إبرة قياسWPINF34BV-2للحقن
TricaineArgentMS-222التخدير الأسماك
96 لوحةبئر Costar3539لعلاج الأجنة المخدرات
نقل ماصةBel-art المنتجF37898لنقل الجنين
تربية الأسماك محلول

المراجع

  1. Octavia, Y., et al. Doxorubicin-induced cardiomyopathy: from molecular mechanisms to therapeutic strategies. J Mol Cell Cardiol. 52 (6), 1213-1225 (2012).
  2. Singal, P. K., Iliskovic, N. Doxorubicin-induced cardiomyopathy. N Engl J Med. 339 (13), 900-905 (1998).
  3. Angsutararux, P., Luanpitpong, S., Issaragrisil, S. Chemotherapy-Induced Cardiotoxicity: Overview of the Roles of Oxidative Stress. Oxid Med Cell Longev. , 795602(2015).
  4. Ichikawa, Y., et al. Cardiotoxicity of doxorubicin is mediated through mitochondrial iron accumulation. J Clin Invest. 124 (2), 617-630 (2014).
  5. Zhang, Y. W., Shi, J., Li, Y. J., Wei, L. Cardiomyocyte death in doxorubicin-induced cardiotoxicity. Arch Immunol Ther Exp (Warsz). 57 (6), 435-445 (2009).
  6. Sawyer, D. B. Anthracyclines and heart failure. N Engl J Med. 368 (12), 1154-1156 (2013).
  7. Zhang, S., et al. Identification of the molecular basis of doxorubicin-induced cardiotoxicity. Nat Med. 18 (11), 1639-1642 (2012).
  8. Dodd, D. A., et al. Doxorubicin cardiomyopathy is associated with a decrease in calcium release channel of the sarcoplasmic reticulum in a chronic rabbit model. J Clin Invest. 91 (4), 1697-1705 (1993).
  9. Mitry, M. A., Edwards, J. G. Doxorubicin induced heart failure: Phenotype and molecular mechanisms. Int J Cardiol Heart Vasc. 10, 17-24 (2016).
  10. Aminkeng, F., et al. A coding variant in RARG confers susceptibility to anthracycline-induced cardiotoxicity in childhood cancer. Nat Genet. 47 (9), 1079-1084 (2015).
  11. Deng, S., et al. Dystrophin-deficiency increases the susceptibility to doxorubicin-induced cardiotoxicity. Eur J Heart Fail. 9 (10), 986-994 (2007).
  12. Leong, S. L., Chaiyakunapruk, N., Lee, S. W. Candidate Gene Association Studies of Anthracycline-induced Cardiotoxicity: A Systematic Review and Meta-analysis. Sci Rep. 7 (1), 39(2017).
  13. Wasielewski, M., et al. Potential genetic predisposition for anthracycline-associated cardiomyopathy in families with dilated cardiomyopathy. Open Heart. 1 (1), e000116(2014).
  14. Lebrecht, D., et al. Dexrazoxane prevents doxorubicin-induced long-term cardiotoxicity and protects myocardial mitochondria from genetic and functional lesions in rats. Br J Pharmacol. 151 (6), 771-778 (2007).
  15. QuanJun, Y., et al. Protective Effects of Dexrazoxane against Doxorubicin-Induced Cardiotoxicity: A Metabolomic Study. PLoS One. 12 (1), e0169567(2017).
  16. Seifert, C. F., Nesser, M. E., Thompson, D. F. Dexrazoxane in the prevention of doxorubicin-induced cardiotoxicity. Ann Pharmacother. 28 (9), 1063-1072 (1994).
  17. Adams, J. W., et al. Enhanced Galphaq signaling: a common pathway mediates cardiac hypertrophy and apoptotic heart failure. Proc Natl Acad Sci U S A. 95 (17), 10140-10145 (1998).
  18. Bowles, N. E., Bowles, K. R., Towbin, J. A. The "final common pathway" hypothesis and inherited cardiovascular disease. The role of cytoskeletal proteins in dilated cardiomyopathy. Herz. 25 (3), 168-175 (2000).
  19. Kroumpouzou, E., et al. Common pathways for primary hypertrophic and dilated cardiomyopathy. Hybrid Hybridomics. 22 (1), 41-45 (2003).
  20. Towbin, J. A., Bowles, K. R., Bowles, N. E. Etiologies of cardiomyopathy and heart failure. Nat Med. 5 (3), 266-267 (1999).
  21. Liu, Y., et al. Visnagin protects against doxorubicin-induced cardiomyopathy through modulation of mitochondrial malate dehydrogenase. Sci Transl Med. 6 (266), 266ra170(2014).
  22. Asimaki, A., et al. Identification of a new modulator of the intercalated disc in a zebrafish model of arrhythmogenic cardiomyopathy. Sci Transl Med. 6 (240), 240ra274(2014).
  23. Ding, Y., et al. Haploinsufficiency of target of rapamycin attenuates cardiomyopathies in adult zebrafish. Circ Res. 109 (6), 658-669 (2011).
  24. Sun, X., et al. Cardiac hypertrophy involves both myocyte hypertrophy and hyperplasia in anemic zebrafish. PLoS One. 4 (8), e6596(2009).
  25. Sun, Y., et al. Activation of the Nkx2.5-Calr-p53 signaling pathway by hyperglycemia induces cardiac remodeling and dysfunction in adult zebrafish. Dis Model Mech. 10 (10), 1217-1227 (2017).
  26. Yang, J., Shah, S., Olson, T. M., Xu, X. Modeling GATAD1-Associated Dilated Cardiomyopathy in Adult Zebrafish. J Cardiovasc Dev Dis. 3 (1), (2016).
  27. Ding, Y., et al. Trapping cardiac recessive mutants via expression-based insertional mutagenesis screening. Circ Res. 112 (4), 606-617 (2013).
  28. Ding, Y., et al. A modifier screen identifies DNAJB6 as a cardiomyopathy susceptibility gene. JCI Insight. 2 (8), (2017).
  29. Kinkel, M. D., Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E. Intraperitoneal injection into adult zebrafish. J Vis Exp. (42), (2010).
  30. Wang, L. W., et al. Standardized echocardiographic assessment of cardiac function in normal adult zebrafish and heart disease models. Dis Model Mech. 10 (1), 63-76 (2017).
  31. Desai, V. G., et al. Development of doxorubicin-induced chronic cardiotoxicity in the B6C3F1 mouse model. Toxicol Appl Pharmacol. 266 (1), 109-121 (2013).
  32. Zhu, W., Shou, W., Payne, R. M., Caldwell, R., Field, L. J. A mouse model for juvenile doxorubicin-induced cardiac dysfunction. Pediatr Res. 64 (5), 488-494 (2008).
  33. Chatterjee, K., Zhang, J., Honbo, N., Karliner, J. S. Doxorubicin cardiomyopathy. Cardiology. 115 (2), 155-162 (2010).
  34. Bang, C., et al. Cardiac fibroblast-derived microRNA passenger strand-enriched exosomes mediate cardiomyocyte hypertrophy. J Clin Invest. 124 (5), 2136-2146 (2014).
  35. Rassaf, T., Kelm, M. Protection from diabetic cardiomyopathy - putative role of the retinoid receptor-mediated signaling. J Mol Cell Cardiol. 59, 179-180 (2013).
  36. Wahbi, K., et al. Dilated cardiomyopathy in patients with mutations in anoctamin 5. Int J Cardiol. 168 (1), 76-79 (2013).
  37. Zhou, M. D., Sucov, H. M., Evans, R. M., Chien, K. R. Retinoid-dependent pathways suppress myocardial cell hypertrophy. Proc Natl Acad Sci U S A. 92 (16), 7391-7395 (1995).
  38. Hershman, D. L., et al. Doxorubicin, cardiac risk factors, and cardiac toxicity in elderly patients with diffuse B-cell non-Hodgkin's lymphoma. J Clin Oncol. 26 (19), 3159-3165 (2008).
  39. Silber, J. H., Barber, G. Doxorubicin-induced cardiotoxicity. N Engl J Med. 333 (20), 1359-1360 (1995).
  40. Von Hoff, D. D., et al. Risk factors for doxorubicin-induced congestive heart failure. Ann Intern Med. 91 (5), 710-717 (1979).
  41. Pugach, E. K., Li, P., White, R., Zon, L. Retro-orbital injection in adult zebrafish. J Vis Exp. (34), (2009).
  42. Zang, L., Morikane, D., Shimada, Y., Tanaka, T., Nishimura, N. A novel protocol for the oral administration of test chemicals to adult zebrafish. Zebrafish. 8 (4), 203-210 (2011).
  43. Collymore, C., Rasmussen, S., Tolwani, R. J. Gavaging adult zebrafish. J Vis Exp. (78), (2013).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

نموذج سمك الزيبرا البالغالحقن داخل الصفاقاختبار فعالية الدواءتقييم الاختلال الوظيفي القلبيالمجهر الفلوريالمسح الجيني الأماميالملاحظة المزمنةبدائل الحقنوظائف قلب سمك الزيبرا
نموذج اعتلال عضلة القلب الناجم عن ميتوتريكسات في الزرد الكبار
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.