Summary
Målet med denne artikkelen er å gi en primer for utvikling og bruk av VX2 karsinom kanin modellen for leverkreft.
Abstract
Kanin VX2 svulsten er en dyremodell ofte brukt til translasjonsforskning om leverkreft (HCC) innen intervensjonsradiologi radiologi. Denne modellen benytter en anaplastisk squamous celle carcinoma som er enkel og pålitelig måte overført i skjelettmuskulatur donor kaniner for eventuell harvest og allograft implantasjon i leveren godtroende mottakere. Dette svulst pode vokser raskt i leveren mottaker kaniner i en angiographically identifiserbar svulst preget av en nekrotisk kjerne omgitt av en levedyktig hypervascular kapsel. Den fysiske størrelsen på kaninen anatomi er tilstrekkelig til å forenkle vaskulær instrumentering tillater for programmet og testing av ulike intervensjonsradiologi teknikker. Til tross for disse fordelene finnes det en paucity tekniske ressurser til å handle som en konkret referanse for forskerne arbeider med modellen. Her presenterer vi en omfattende visuell disposisjon for de tekniske aspektene ved utvikling, vekst, overføring og angiographic utnyttelse av kanin VX2 svulst modell for nybegynnere og erfarne forskere både.
Introduction
Kanin VX2 svulst modellen har spilt en rolle i eksperimentell onkologi siden utviklingen i 19351,2. Dette svulst er en virus-indusert anaplastisk squamous celle carcinoma preget av hypervascularity, hurtig vekst og enkel overføring i skjelettmuskulatur3,4. Mens kanin VX2 svulst modellen er brukt til å undersøke et mangfold av kreft5,6,7,8; fokus for dette papiret er leverkreft9.
Formålet med metoden beskrevet er å presentere en modell for primær leverkreft eller leverkreft (HCC), som kan brukes av intervensjonsradiologi Røntgenleger for translasjonsforskning. Den kan brukes for farmakokinetiske studier, terapeutiske undersøkelser og ablative metoden testing10,,11,,12,,13,,14,,15.
Metoden beskrevet heri gir flere fordeler sammenlignet med andre modeller innenfor samme som gnager modeller som rotter, mus, og woodchucks eller større modeller som primater16. En av de viktigste fordelene er rask og pålitelig tumor vekst som tillater forskere å etablere en aktiv svulst linje innen en måned første hind lem forplantning17. I tillegg har denne svulst grei sonographic synlighet og en hypervascular periferi som gjør at både transarterial locoregional behandlinger og ablative terapier. Til slutt, og viktigst, tillater størrelsen på kaninen blodkar gjennomførbart og teknisk enkel utnyttelse av vaskulær instrumentering18.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Følgende protokollen følger alle krav og retningslinjer mandat ved University of Illinois - Chicago. Det ble vurdert og godkjent av lokale institusjonelle Animal Care og bruk komiteen før kjøringen.
1. VX2 Hind lem Tumor utvikling
- Skaffe VX2 svulst celle linjen fra National Cancer Institute divisjon av behandling kreftdiagnostikk og behandling svulst/celle linje oppbevaringssted.
Merk: På dette tidspunktet-ordren katalogen kan bli funnet på følgende link: https://dtp.cancer.gov/repositories/. - For å forberede celle suspensjon injeksjon, plasser den frosne VX2 prøve og methylcellulose mediet i lunkent vann til de har tint.
- Sug opp 0.5\u20121 mL tinte celle suspensjon og en like volum av tinte methylcellulose medium i en 5-mL sprøyte.
Merk: Det kan hjelpe for å bruke en 21 eller 22 G nål inneholder cellen suspensjon og en større gauge nål inneholder methylcellulose medium. Plass sprøyter på isen.
- Sug opp 0.5\u20121 mL tinte celle suspensjon og en like volum av tinte methylcellulose medium i en 5-mL sprøyte.
- Forberede hind lem svulst donor kanin vaksinasjon av cellen suspensjon, starter med sedasjon 1 mg/kg acepromazine og 0.02 mg/kg buprenorfin gitt intramuskulært. Barbere inoculation området (baklem) med avklipt og ren den barbert er med en alkohol - eller jod-baserte agent.
Merk: Har meloksikam kan gis en dose 0,2 mg/kg subcutaneously for analgesi. Kanin pels er vanskelig å barbere. Det anbefales at forskeren utfører flere skanneoperasjoner, først fokus på fjerne hoveddelen av pelsen og deretter trykke clippers mot huden og går mot korn. - Legge ved en 16 G nål 5-mL sprøyte som inneholder cellen suspensjon og injisere 1 mL av suspensjon i magen av hind lem muskler av donor kaninen, omtrent 1 cm dyp. Husk å vokte sciatic nerve kjører innenfor en håndgripelig groove langs femur.
Merk: Frisk VX2 vellykket inoculates 88% av fagene mens frosne og tinte VX2 er bare vellykket 33% av tiden19.
FORSIKTIG: VX2 svulsten vokser raskt. Bivirkninger som kan nevnes som svulst utvikler: økt pustefrekvens, apati, redusert årvåkenhet og atferdsendringer (f.eks, uvanlig aggressivitet). Følgelig er anbefalinger å nøye kontrollere dyrene og planlegge for svulst innhøsting innen to uker etter vaksinering.
2. VX2 Hind lem Tumor vekst og høsting
Merk: Hvis vellykket vaksinasjon, bør det være en håndgripelig (3\u20124 cm) svulst nodule på injeksjonsstedet innen 2 uker. Vanligvis blir denne nodule håndgripelig rundt 1 uke; men er det bedre å la svulsten vokser å tillate tilstrekkelig vev samling. Denne nodule vil vanligvis være fast, indurated og opphøyet over nivået av muskelen. Hvis
- Palpate området inokulerte to uker fra vaksinering. Hvis ingen tumorveksten oppdages to uker, utføre trinn 1 på nytt. Se figur 1.
Merk: Tilstedeværelsen av svulsten kan også vurderes via ultralyd. Mens det har vært noen studier å vurdere forskjellen i tumor vekst beregninger når overføres fra frosne lager sammenlignet med friske lager, det er vår erfaring at frosne lager svulsten vokser litt tregere og blir synlig etter sine friske aksjer Counter delen. Uansett, skal disse metodene gi en harvestable svulst 2 uker. - Forberede hind lem svulst donor svulst harvest. Bedøve kaninen med 45 mg/kg ketamin og 5 mg/kg xylazine. Euthanize med en intravenøs (IV) dose av natrium pentobarbital overstiger 390 mg/kg.
- Når kaninen har blitt forgiftet, kan du begynne å høste svulsten ved å fjerne kutan og underhud vev overliggende svulst nodule skalpell med uansett størrelse blad forskeren ser passe. Se figur 2.
- Når svulst nodule er blitt identifisert i hind lem muskler, fjerne den svulst en bloc bruker bredt kurvelineæritet marger. For dette, kuttet tendinous festepunktene på proksimale og distale endene av den av muskel- og deretter spore skalpell bladet langs det underliggende ben. Halvere explanted prøven utsette svulst capsule og necrotic kjernen. Se Figur 3.
Merk: VX2 svulsten har en svært nekrotisk kjernen. Pass på å bruke riktig vernebriller og andre personlig verneutstyr når høsting svulsten, siden skade svulst kapselen kan føre til høyt trykk utstøting av nekrotisk rusk. - Forsiktig skrape nekrotisk kjernen med en stump gjenstand (f.eks tang, hemostats) for å rengjøre svulsten. Dette bør tillate bedre visualisering av svulst kapsel og overgangspunkt mellom capsule og omkringliggende muskler. Se Figur 4.
- Fra dette eksemplet høste flere biter av svulst ca 1\u20122 mm3 og umiddelbart lagre dem i en kopp med romtemperatur sterilt saltvann.
Merk: Disse svulst prøvene skal brukes for påfølgende intrahepatic implantasjon. - Plasser de resterende svulsten i et sterilt Petriskål og bad den med Dulbeccos endret Eagle's Medium (DMEM). Hvis denne prøven holdes kaldt på is, kan det bli bevart for håndtering til 2\u20123 h senere.
3. lever svulsten implantasjon via Laparotomy
- Forberede mottaker kaninen laparotomy. Bedøve mottaker kaninen 45 mg/kg ketamin og 5 mg/kg xylazine for induksjon etterfulgt av intubasjon og vedlikehold med 1% - 3% isoflurane som nødvendig. Når kaninen er anesthetized, barbere kirurgiske området bruker hårklippere. Rense såret området med tre eksemplarer vask med betadine scrub og 70% etanol løsning betadine løsning og drapere magen i et sterilt kirurgisk mote.
- Med et #15-blad, starte på laparotomy ved å gjøre en liten nedover loddrette midtlinjen snitt gjennom kaninhud fra xiphoid prosessen. Dette bør være lett palpated tendens til å være omtrent på størrelse med en amerikansk penny. Se figur 5.
- Reflektere huden og identifisere de linea alba. Dette bør være en reflekterende hvite bånd av vev reiser inferiorly utviklet. Bruke sløv disseksjon for å krysse den linea alba og utsette peritoneum. Se figur 6.
Merk: Peritoneum er lett identifiseres siden det vil være direkte overliggende tarm, som kan sees flytte med åndedrett.
FORSIKTIG: Peritoneum tendens til å være tilhenger i underliggende tarmen på grunn av overflatespenningen. Bruke stumpe traumer for å dissekere den linea alba bidrar til å spre risikoen for perforating underliggende tarm. - Når peritoneum er utsatt, nøye analysere gjennom det å angi bukhulen. Leveren kan nå identifiseres. For å bedre navigere abdominal plass, utvide midtlinjen snitt 1\u20122 cm inferiorly gjennom hud, muskler og peritoneum.
Merk: Utvide midtlinjen innsnitt kan enkelt og sikkert gjøres ved forsiktig å sette en buet hemostat i peritoneal plass med buet spissen vender overfladisk mot peritoneum. Deretter åpner hemostat litt og bruke et blad til søt vevet mellom to armer av hemostat. - Identifisere den venstre flik av leveren for å velge et område for svulst implantasjon. Den venstre lobe er infero-lateral til den mediale flik i midtlinjen.
- Før du forsøker å tegne leveren av peritoneal plass, plass en tørr stykke gasbind på dårligere aspekt av innsnitt.
Merk: Gasbind vil gi en tilhenger overflate å legge leveren å hindre den i å trekke tilbake i magen. - Bruke atraumatiske tang eller et stykke våt gasbind over fingrene, nøye trekke den venstre flik av leveren av magen gjennom snittet og legge det ned på tørr gasbind tidligere. Se figur 7.
FORSIKTIG: Lever kapselen er følsom og kan enkelt brudd. Det er viktig å være forsiktig når du håndterer denne organ for å hindre capsular blø, lever blåmerker eller eventuell hemoperitoneum.
Merk: Vanligvis leveren vil erklære seg visuelt ved å skrive inn peritoneal plass; men hvis kaninens magen er oppblåst, kan leveren skyves cranially ut av syne. Hvis dette er tilfelle, løft abdominal veggen med en stump sonde. I dette scenariet leveren tendens til å følge det ventrale aspektet av mellomgulvet på grunn av overflatespenningen så nøye separat leveren bruker en stump sonde og det bør ta. Deretter bruke atraumatiske tang til å trekke leveren ut. - På dette punktet, forberede tumor vev implantasjon og Plasser et stykke våt gasbind over leveren til å beskytte den.
- Velg et 1\u20122 mm3 stykke tumor vev som ble generert under trinn 2.6 for implantasjon i leveren. Se Figur 8.
- Bruker et #11-blad, punktering av leveren vev i 45° vinkel gjør en 0,5 cm dyp lomme, ta vare ikke for å trenge det dorsal aspektet av leveren kapselen. La bladet på plass etter at punktering. Se figur 9.
- Løft bladet i en ventrale retninger for å lage en liten lomme i leveren seng. Svulst brikken ved hjelp av pinsett, plassere svulst stykket i denne lomme og fjern bladet.
Merk: Bladet kan fjernes før innsetting svulst stykket, men leveren vil blø og dette kan skjule punktering området gjør det vanskelig å identifisere.
FORSIKTIG: Pass på å minimere kontakt av svulsten med noen andre strukturer å hindre utilsiktet svulst seeding. Dette kan også unngås ved å sette til side noen verktøy for å hjelpe med implantasjon etterpå. - På dette punktet, plass et stykke hemostatic agent, for eksempel gel skum, over svulst lommen å fremme hemostasen og å hindre utstøting av svulst stykket.
- Returnere leveren til buk, når hemostasen er bekreftet.
- Lukk bukveggen med 3-0 polydioxanone Sutur på en konisk nål bruker en enkel kontinuerlig sting og lukke huden med 4-0 polyglactin 910 suturer på en klippe nål bruker kontinuerlig subcuticular maske.
Advarsel: Når du lukker bukveggen, ta vare ikke for å skade omentum eller andre tarm strukturer i Sutur kaste.
Merk: Mens denne svulst tar minst 2 uker kunne definitivt radiographically identifiseres, den når en størrelse på 1.5\u20122 cm diameter på 3 uker med vekst. Være forsiktig ikke for å tillate lever svulsten å vokse forbi 3.5\u20124 uker siden svulsten vil danne en exophytic masse og aggressivt spre lokalt.
4. VX2 Svulst suspensjon forberedelse
- Plass en 40 µm sil i munnen på en 50-mL konisk propylen rør. Bruker svulst fra steg 2,7, bruk en #15-blad for å skrape svulst overflaten for å samle levedyktig svulst og plassere disse avskraping i silen.
- Vask levedyktig svulst avskraping gjennom en sil med DMEM og deretter virvel propylen røret på 1600 rpm i 8 min.
- Når sentrifugen er fullført, Fjern nedbryting og kaste den. Deretter legge methylcellulose til gjenværende cellen blokk i 1:1 volumetriske forholdet.
- Injisere denne suspensjon i hind lem donor kanin følgende trinn 1.3\u20121.4. Legg resterende suspensjon i 1 mL dele i Kryogenisk rør og fryse dem i flytende nitrogen for senere bruk.
5. angiographic utnyttelse av VX2 leveren svulst
- Forberede kaninen som beskrevet i trinn 3.1.
- Palpate femur sporet i lysken. Når sporet er identifisert, gjøre en 2\u20123 cm lineær snitt langs sporet. Se Figur 10.
- Bruke sløv disseksjon, finne og isolere femur bunt som inneholder femur blodåre, arterien, og nerven. Se Figur 11.
- Igjen, bruke sløv disseksjon å skille arteria femoral fra resten av strukturer i bunten og isolere arteria oppå en skalpell håndtere. Se Figur 12.
- Med en 3-fransk introducer kit, kan du bruke Seldinger teknikken tilgang med en nål. Sett inn en guidewire og fjerne nålen for å fremme 3-fransk skjede i fartøyet. Se figur 13.
FORSIKTIG: Unngå bruk av overdreven force fremme 3-fransk skjede, da dette kan føre til transection av arteria femoral. - Velg for cøliaki bagasjerommet under fluoroscopic veiledning og et kateter, guidewire og iohexol kontrast agent-vanligvis plassert på T12 nivå- og avansere til kateter inn venstre hepatic subclavia via vanlige hepatic og riktig hepatic.
- På dette punktet, administrere agent gjennom kateter valg. Når agenten administreres, fjerne kateter.
- Bruker 3-0 silke Sutur, ligate arteria femoral proximally og distally til innsettingspunktet på skjede. Husk å stramme knuten proksimale til skjede som det trekkes for å hindre blødning.
- Lukk den lyske snittet med 4-0 polyglactin 910 suturer på en klippe nål bruker en subcuticular maske.
- Vedlikeholde standard postoperativ omsorg og overvåke dyr utvinning. Utfør euthanasia og obduksjon etter behov ved hjelp av.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Når du ser på figur 1, er det klart at quadricep av kaninen er forstørret. I tillegg vises flere små diskrete knuter, vanligvis samkjøre med tumor vekst gjennom konseptkjedene. Ved palpasjon vises injisert lem enn ikke-injisert lem. Hvis en forsker krever mer definitive kvalitetssikring av svulst tilstedeværelse, kan ultralyd imaging brukes til å identifisere svulsten innebygd i muskelen. Hvis en svulst ikke oppdages være hind lem re-injisert med en svulst celle suspensjon.
For å bekrefte vellykket vaskulær tilgang, er blodet tilbake i sliren observert på aspirasjon som vist i figur 13D. Hvis vaskulær tilgang var mislykket, vil forsøkte aspirasjon gi luften i skjede eller presentere med betydelig motstand når stempelet til sprøyten.
For leveren tumor vekst, finnes det to måter å bekrefte vellykkede overføring: angiographically og obduksjon. Angiography, kan identifikasjon av svulsten oppstå umiddelbart som er tilfelle i figur 14A hvor svulsten trekker blodtilførsel direkte fra vanlige hepatic arterien. Det kan også ta en tid i tilfeller der svulst laterale som er tilfelle i figur 14D. Hvis svulsten ikke synlig etter injeksjon av kontrast i vanlige hepatic arterien, skal forskeren forsøke å injisere kontrast i venstre og høyre hepatic arterier for å forbedre sjansene for utheving svulsten. Det kan også hjelpe for å se etter avvikende arterier reise lateralt mot distale kanten av leveren som vist i figur 14C. På obduksjon, bør svulst være synlig som vist i figur 15B (sammenlign å finne 15A).
Figur 1: kanin hind lem. Barbert kanin hind lem med masse indikativ av tumor vekst. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2: utsatt hind lem. Samme lem som vist figur1 med overliggende huden reflektert avslører et stort område av hypervascularity og misfarging forskjellig fra omkringliggende muskler som representerer plasseringen av svulsten (hvit stiplet linje). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 3: Svulst fjernet en bloc og delt i to. (A) svulst og omkringliggende muskler fjernet en bloc. (B) svulst har vært delt i to for å avsløre sin capsular veggen (pilspisser) og necrotic kjernen. Svulst prosessen kan sees i både halvdeler samt noen nekrotisk rusk. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 4: svulst kapsel. Pilspisser betegne et stykke svulst (T), som er avgrenset fra tilstøtende muskel (M) kapselen svulst (stiplet hvit linje). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 5: utsatt xiphoid prosessen. Hud og underliggende muskel har blitt reflektert for å tillate visualisering av xiphoid prosessen (svart pil) og gut (hvit pil). Den hvite stjernen angir skallen retning. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 6: Linea alba. Overliggende huden og konseptet blitt reflektert for å tillate visualisering av den linea alba (svart pil) kjører skallen til caudal retning. Dette området er avascular og gir blod-tap kostnadsfritt peritoneal plass. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 7: flik av leveren utenfor peritoneum. Dette bildet viser en flik av leveren som var forsiktig utdraget fra peritoneal plass og plassert på et stykke gasbind. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 8: etter behandlet svulst stykke for implantasjon. Et stykke svulst behandlet til riktig størrelse for implantasjon plassert ved av et #11 blad for skala. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 9: opprette en lomme i leveren for svulst implantasjon. En #11-blad settes til riktig dybden i utdraget flik av leveren. Dette vil opprette en passende størrelse pocked for implantering av svulst stykket fra Figur 8. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 10: femur groove og opprinnelige snitt. (A) palpasjon av hind lem tillater visualisering av femur sporet (hvit stiplet linje). (B) første snitt i hind lem gjort langs femur sporet. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 11: Identifikasjon av femur bunten. Sløv Disseksjon av den opprinnelige snittet avslører femur vene (svart pil). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 12: Disseksjon av femur bundle og isolering av femoral arterien. (A) Disseksjon av femur bunten gir oss individuelt skille (fra venstre til høyre) femur vene (sluttverdi), femoral arterien (FA), og femur nerve (FN). (B) femoral arterien isolert på en skalpell håndtere. Merk kolonnen blodet slik at forskjell fra femoral nerve. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 13: vaskulær tilgang. (A) en guidewire (G) er avansert i arteria femoral (FA) gjennom tilgang nålen (N) som tidligere ble satt inn i arteria femoral. (B) en skjede (S) og dilator (D) er avanserte over guidewire (G) i arteria femoral (FA). (C) skjede (S) og dilator er avanserte fullt i femoral arterien (FA) til skjede huben. (D) skjede er sikret med silke etter dilator og guidewire er fjernet. Aspirasjon gir blod (svart pil) i skjede. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 14: Angiographic tenkelig hepatisk svulst. (A) kateter tips (hvit pil) levere kontrast direkte til arterien fôring svulsten (hvit stjerne). (B) kateter tips (hvit pil) levere kontrast i distale venstre hepatic arterien og moderat kontrast opptak av svulst laterale (hvit stjerne). (C) ytterligere kontrast injeksjon i svulst fra B demonstrere en avvikende arterie (hvit linje) reiser fra kateter (hvit pil) til svulsten (hvit stjerne). (D) svulsten fra B etter ytterligere kontrast opptak. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 15: kanin leveren. (A) en sunn kanin lever viser den venstre mediale lobe (hvit stjerne) overliggende den venstre lateral lobe (svart stjerne). (B) en kanin lever med en fullt utviklet hepatic svulst (hvit pil). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Det første kritiske trinnet i VX2 svulst metodikk er vellykket overføring av en svulst i hind ben i donor kanin. Se første avsnitt i delen "Representant resultater" for mer informasjon om dette trinnet.
Neste viktige trinn er å sikre at levedyktig svulst kapselen er riktig identifisert. Ikke bare vil dette være nødvendig for svulst suspensjon forberedelse, men det er også viktig for valg av generere svulst stykker for hepatic implantasjon. Avgrensning mellom levedyktig svulst og omkringliggende muskelvev merkes i Figur 4. Hvis feil Vevsprøve skrapte under suspensjon forberedelse, mislykkes etterfølgende hind lem overføringen. Hvis dette skjer under hepatic implantasjon, skjer ikke tumor vekst i leveren. Dette vil ikke være synlig til angiography.
Under hepatic implantasjon prosessen, må utvises forsiktighet når du nærmer deg den venstre flik av leveren. Ofte, hvis leveren er åpenbart når du angir peritoneum, er det faktisk den mediale flik av leveren som operatører observerer. Implantering i den mediale flik av leveren presenterer en håndfull spørsmål for angiographic bruk. Først er den mediale lobe anatomiske forhold med ryggraden. En mediale lobe svulst kan ofte være uklar av ryggraden på fluoroscopy gjør bekreftelse og behandling av svulsten vanskelig. I tillegg er arteria gastroduodenale ofte forbundet med blodkar leverer den mediale lobe. Dette øker risikoen for ikke-mål embolisering av tarmen og kan føre til tarm iskemi/hjerteinfarkt og mulig død av dyret. Som nevnt tidligere, vil dette ikke kvalifisere som en feil; imidlertid garanterer det mer forsiktig under visualisering og behandling.
Det siste kritiske trinnet er vellykket og stabil femoral arterien tilgang. Som vist i Figur 12, skal arteria femoral isoleres oppå en skalpell blad håndtak. Mens dette gjøres hovedsakelig for å tillate forskeren til å utføre mer nøyaktig Seldinger teknikk20, bør det opprettholdes hele prosedyren. Dette er fordi fjerner skalpell håndtere når skjede har innført kan føre til utilsiktede bevegelse skjede innenfor blodkar fører til skjede okklusjon og mulig skade blodkar og omkringliggende strukturer. Hvis skjede blir forskyves under prosedyren gjelder trykket i femur sporet proksimale til webområdet tilgang for å stoppe blødningen og arteria kan deretter bli samskrevet. Ikke forsøk å sette skjede. Forskeren kan prøve å få tilgang fra arteria kontralateral femoral.
Mens VX2 plattformen er en robust modell i bruk for translasjonsforskning om HCC, har det relevante mangler. Den primære svakheten med denne modellen er at tilstanden sykdommen ikke etterligner det av en menneskelig HCC. Svulsten indusert er ikke patologisk ligner menneskelige HCC eller er den ikke-cirrhotic lever parenchymal microenvironment. Videre viser VX2 svulsten betydelig interne nekrose, som utelukker denne modellen bruk for behandling effekt studier. Noen alternative modeller inkluderer gnager modeller som mus, rotter, og woodchucks eller større dyr modeller som griser og primater. 16 , 21 alternativene alle gir forskjellige fordeler og ulemper; i uttalelse fra forfatterne, på angiographic utnyttelse og kostnader effekt, imidlertid VX2 kaninen dominerende.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Verket avbildet i denne rapporten ble støttet av et forskningsstipend fra Guerbet LLC.
Acknowledgments
Vi ønsker å erkjenne den veterinary staben på University of Illinois - Chicago biologiske ressurser laboratorium.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| MethoCult (Methycellulose) | Stemcell Technologies | M3134 | |
| VX2 Cell Line | NCI | VX-2 | |
| 5 mL Syringe | BD | 309646 | |
| 16 G Needle | BD | 305197 | |
| 22 G Needle | BD | 305155 | |
| Hair Clippers | Wahl | 41870-0438 | |
| Foam Insulated Box | Mr. Box Online | 10 x 10 x 4 | |
| Acepromazine | Henry Schein | 003845 | |
| Buprenorphine | Par | 42023-179-05 | |
| Meloxicam | Henry Schein | 049755 | |
| Alcohol Pads | Covidien | 5033 | |
| Ketamine | Henry Schein | 056344 | |
| Xylazine | Akorn | 59399-110-20 | |
| Pentobarbital (Fatal-Plus) | Vortech | 9373 | |
| Sterile Petri Dish | Thermo Fisher | 172931 | |
| DMEM | Gibco | 11965092 | |
| Saline | Baxter | 2F7124 | |
| 15-Blade | Steris | 02-050-015 | |
| Scalpel Handle x 2 | Steris | 22-2381 | |
| Curved Hemostat | WPI | 501288 | |
| Atraumatic Forceps | Sklar | 52-5077 | |
| Gauze | Medline | NON21430LF | |
| 11-Blade | Steris | 02-050-011 | |
| Surgicel | Ethicon | 1951 | |
| 3-0 PDS / Taper | Ethicon | Z305H | |
| 4 - 0 Vicryl / Cutting | Ethicon | J392H | |
| 40 μm strainer | BD | 352340 | |
| 50 mL conical tube | Thermo Fisher | 339652 | |
| plastic pipette | Thomas Scientific | HS206371B | |
| Centrifuge | Sorvall | 75004240 | |
| 1.40 mL Tubes (Internal Thread) | Micronic | MP32131-Z20 | |
| 3-F VSI Micro-HV Introducer Kit | Vascular Solutions | Custom Order (P15180391) | |
| .018 45° angle glidewire | Terumo | RG*GA1818SA | |
| Direxion bern-shape microcatheter | Boston Scientific | M001195230 | |
| Omnipaque | GE | Y510 |
References
- Rous, P., Beard, J. W. The Progression To Carcinoma of Virus-Induced Rabbit Papillomas (Shope). The Journal of Experimental Medicine. 62 (4), 523-548 (1935).
- Kidd, J. G., Rous, P. A transplantable rabbit carcinoma originating in a virus-induced papilloma and containing the virus in masked or altered form. The Journal of Experimental Medicine. 71 (6), 813-838 (1940).
- Galasko, C. S. B., Muckle, D. S.
- Maruyama, H., et al. Sonographic shift of hypervascular liver tumor on blood pool harmonic images with definity: Time-related changes of contrast-enhanced appearance in rabbit VX2 tumor under extra-low acoustic power. European Journal of Radiology. 56 (1), 60-65 (2005).
- Horkan, C., et al. Radiofrequency Ablation: Effect of Pharmacologic Modulation of Hepatic and Renal Blood Flow on Coagulation Diameter in a VX2 Tumor Model. Journal of Vascular and Interventional Radiology. 15 (3), 269-274 (2004).
- Bimonte, S., et al. Induction of VX2 para-renal carcinoma in rabbits: generation of animal model for loco-regional treatments of solid tumors. Infectious Agents and Cancer. 11 (1), 1-8 (2016).
- Goldberg, S. N., Gazelle, G. S., Compton, C. C., Mueller, P. R., McLoud, T. C. Radio-frequency tissue ablation of VX2 tumor nodules in the rabbit lung. Academic Radiology. 3 (11), 929-935 (1996).
- Rhee, T. K., et al. Rabbit VX2 Tumors as an Animal Model of Uterine Fibroids and for Uterine Artery Embolization. Journal of Vascular and Interventional Radiology. 18 (3), 411-418 (2007).
- Parvinian, A., Casadaban, L. C., Gaba, R. C. Development, growth, propagation, and angiographic utilization of the rabbit VX2 model of liver cancer: A pictorial primer and "how to" guide. Diagnostic and Interventional Radiology. 20 (4), 335-340 (2014).
- Xia, X., et al. Intra-arterial interleukin-12 gene delivery combined with chemoembolization: Anti-tumor effect in a rabbit hepatocellular carcinoma (HCC) model. Acta Radiologica. 54 (6), 684-689 (2013).
- Gaba, R. C., et al. Ethiodized oil uptake does not predict doxorubicin drug delivery after chemoembolization in VX2 liver tumors. Journal of Vascular and Interventional Radiology. 23 (2), 265-273 (2012).
- Choi, Y. H., et al. Novel Intraarterial Therapy for Liver Cancer Using Ethylbromopyruvate Dissolved in an Iodized Oil. Academic Radiology. 18 (4), 471-478 (2011).
- Ma, H. L., Xu, Y. F., Qi, X. R., Maitani, Y., Nagai, T. Superparamagnetic iron oxide nanoparticles stabilized by alginate: Pharmacokinetics, tissue distribution, and applications in detecting liver cancers. International Journal of Pharmaceutics. 354 (1-2), 217-226 (2008).
- Wang, D., et al. Liver tumors: Monitoring embolization in rabbits with VX2 tumors -Transcatheter intraarterial first-pass perfusion MR imaging. Radiology. 245 (1), 130-139 (2007).
- Bimonte, S., et al. Radio-frequency ablation-based studies on VX2rabbit models for HCC treatment. Infectious Agents and Cancer. 11 (1), (2016).
- Gaba, R., Obeid, M., Khabbaz, R., Garcia, K., Schachtschneider, K. Translational Animal Models for Liver Cancer. American Journal of Interventional Radiology. 2 (2), 1-8 (2018).
- Kuszyk, B. S., et al. Local tumor recurrence following hepatic cryoablation: radiologic-histopathologic correlation in a rabbit model. Radiology. 217 (2), 477-486 (2000).
- Geschwind, J., et al. Chemoembolization of Liver Tumor in a Rabbit Model Assessment of Tumor Cell Death with Diffusion-Weighted MR Imaging and Histologic Analysis. Journal of Vascular and Interventional Radiology. 11 (10), 1245-1255 (2000).
- Virmani, S., et al. Comparison of Two Different Methods for Inoculating VX2 Tumors in Rabbit Livers and Hind Limbs. Journal of Vascular and Interventional Radiology. 19 (6), 931-936 (2008).
- Seldinger, S. I. Catheter replacement of the needle in percutaneous arteriography: A new technique. Acta Radiologica. 49 (SUPPL 434), 47-52 (2008).
- Schook, L. B., et al. A genetic porcine model of cancer. PLoS One. 10 (7), e0128864 (2015).
