Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Farelerde beyin sapı uyarılmış yanıt odyometrisi veri edinme ve Analizi

12.1K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/59200

⸱

10 Mayıs 2019

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

Bu makalede

Özet

Beyin sapı uyarılmış reaksiyon odyometrisi klinik nörofizyolojide önemli bir araçtır. Günümüzde hem farmakolojik hem de genetik hayvan modellerini içeren temel bilim ve preklinik çalışmalarda beyin sapı uyarılmış yanıt Odyometri de uygulanır. Burada işitme beyin tepkileri yanıtlarının farelerde nasıl başarıyla kaydedilip analiz edileceğini ayrıntılı bir şekilde tarif ediyoruz.

Özet

Beyin sapı uyarılmış reaksiyon odyometrisi (BERA) klinik nörofizyolojide merkezi alaka düzeyine sahiptir. Görsel olarak uyarılan potansiyeller (VEPs) veya somatoduyusal uyarılmış potansiyeller (SEPs) gibi diğer uyarılmış potansiyel (EP) teknikleri gibi, işitsel uyarılmış potansiyeller (AEPs) aynı stimüllerin tekrarlayan sunumu ile tetiklenir, daha sonra ortalama olarak farklı pozitif (p) ve negatif (n) sapmaları ile sonuçlanan Elektroensefalografi (EEG) tepkisi. İnsanlarda, altta yatan nöronal devrelere senkronizasyon ve iletim hızı değişiklikleri karakterize etmek için her iki genlik ve bireysel dorukların gecikme kullanılabilir. Daha da önemlisi, AEPs, farmakolojik ve genetik hayvan modellerinde işitsel fonksiyonun tanımlanması ve karakterize edilmesi için temel ve preklinik bilimlere de uygulanır. Daha da fazla, farmakolojik test ile birlikte hayvan modelleri sensorineval işitme kaybı tedavisinde potansiyel faydaları araştırmak için kullanılır (örneğin, Yaş veya gürültü kaynaklı işitme açıkları). Burada, tıklama ve ton patlaması uygulamasını kullanarak farelerde işitsel beyin-uyarılmış yanıtların (ABRs) Nasıl kaydetmelerine ilişkin ayrıntılı ve entegratif bir açıklama sağlıyoruz. Bu protokolün belirli bir odak öncesi deneysel hayvan konut, anestezi, ABR kayıt, ABR filtreleme süreçleri, otomatik dalgalı bazlı genlik büyüme fonksiyon Analizi ve gecikme algılama üzerinde.

Giriş

Beyin fizyolojisinin merkezi bir yönü, öğrenme, bellek, duygusal reaksiyonlar veya motorik tepkiler gibi farklı içsel veya ekstrensek çıktıda sonuçlanan çevresel bilgileri işleme yeteneğidir. Çeşitli deneysel ve tanı yaklaşımlar, bireysel nöronal hücre türlerinin veya bir uyarıcı ile ilgili nöronal devrelerde nöronların kümeleri/toplulukların elektrofizyolojik tepkisini karakterize etmek için kullanılabilir. Bu elektrofizyolojik teknikler mikro-, meso-ve macroscale1' de farklı uzamsal boyutları kapsar. Mikroölçek seviyesi, örneğin, kültürlü veya akut ayrılmış nöronlar1kullanarak farklı yama-kelepçe modlarında gerilim ve ....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm hayvan prosedürleri Alman hayvan bakımı Konseyi yönergelerine göre yapılmıştır ve tüm protokoller, yerel kurumsal ve ulusal hayvan bakımı Komitesi tarafından onaylanmıştır (Landesamt für Natur, Umwelt, und Verbraucherschutz, State Kuzey Ren-Vestfalya ofisi, Doğa, çevre ve tüketim bölümü [LANUV NRW], Almanya). Yazarlar daha da tüm hayvan deney bakım ve laboratuar hayvanları kullanımı (NıH yayınlar No 80-23) için sağlık Kılavuzu Ulusal Enstitüleri uyarınca yürütülmüştür teyit 1996 veya INGILTERE hayvanlar (bilimsel prosedürler) Yasası revize 1986 ve ilişkili yönergeler veya 24 Kasım 1986 (86/609/EEC) ve 22 Eylül 2010 (2010/63/EU) Avrupa Toplulukları Konseyi Direktif....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

İşitme eşiği farklılıklarını, genlik büyüme fonksiyonunu ve gecikme süresini karşılaştırmayı değerlendirmek için tıklama ve ton patlama-uyarılmış ABR kayıtları kullanılabilir. SPL artan modda tıklayın-uyarılmış ABRs kontrol için Şekil 1 ve cav3,2 T tipi voltaj-Gated CA2 + kanal (yani, CAv3,2+/- ve CA eksikliği iki örnek mutant fare hatları tasvir edilir v3,2 null mutantlar [Cav3,2-/-.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu protokol, farelerde işitsel uyarılmış beyin sapı yanıtlarının nasıl kaydetili olduğunu ayrıntılı ve bütünleştirici bir açıklama sağlar. Hayvan ön tedavisi, anestezi ve potansiyel metodolojik mantık faktörleri üzerine spesifik odaklanma verir. İkincisi dahil, diğerleri arasında, cinsiyet, fare çizgisi, yaş, ve konut koşulları. Tüm bu faktörlerin sensorineval işitme kaybı ve işitsel bilgi işleme temel yönleri üzerinde bir etkisi olabilir unutulmamalıdır. Böylece, işitsel profil oluşturma çalışmalarının uygun tabakalaşma.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların ifşa etmesi gereken hiçbir şey yok.

Teşekkürler

Yazarlar Dr Christina Kolb (nörodejeneratif hastalıklar için Alman merkezi [DZNE]) ve Dr Robert Stark (DZNE) hayvan ıslahı ve hayvan sağlık bakım onların yardım için teşekkür etmek istiyorum. Bu çalışma, Federal Ilaçlar ve Tıbbi aygıtlar Enstitüsü (Bundesınstitut für Arzneimittel und Medizinprodukte, BfArM, Bonn, Almanya) tarafından mali olarak destekleniyordu.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
RZ6 için AEP/OAE Yazılımı (BioSigRZ yazılımı)Tucker-Davis Technologies (TDT)BioSigRZ
Binoküler cerrahi büyütme mikroskobuZeiss Stemi 20000000001003877, 4355400000000, 0000001063306, 4170530000000, 4170959255000, 4551820000000, 4170959040000, 4170959050000
Kafesler (Macrolon)Techniplast1264C, 1290D
Carprox veteriner, 50mg/ mlVirbac Tierarzneimittel GmbHPZN 11149509
Soğuk ışık kaynağıSchott KL2500 LCD9.705 202
Pamuk uçlu aplikatörler (steril)Carl RothEH12.1
Özel yapım örgülü metal Faraday kafesi (paslanmaz çelik, 2 mm kalınlık, 1 cm gözenek boyutu)ısmarlamaözel yapım
%5 Dekspantenol (Bepanthen göz ve burun kremi)Bayer Vital GmbHPZN: 01578681
Tek Kullanımlık Subdermal paslanmaz çelik İğne
elektrotları, 27GA, 12mm
Rochester Electro-Medical, Inc.S03366-18
Cerrahi örtü çarşafları (steril)HartmannPZN 0366787
Etanol, %70CarlRoth9065.5
1/4'' Serbest Alan Ölçümü Kalibrasyon Mikrofon KitiTucker-Davis Technologies (TDT)PCB-378C0
Eldiven (steril)Unigloves1570
Graefe Forseps kavisli, tırtıklıFST11052-10
GraphPad Prism 6 Yazılımı, V6.07GraphPad Prism Yazılımı, Inc.https://www.graphpad.com/
Isı bazlı cerrahi alet sterilizatörüFST18000-50
Homeothermic
ısıtma köreltilmiş
ThermoLux461265 / -67
Ketanest S (Ketamin), 25mg/mlPfizerPZN 08707288
Ringer' s çözeltisi (steril)B.BraunPZN 01471434
Matlab yazılımıMathWorks, Inc.
Medusa 4 kanallı düşük engelli. HeadstageTucker-Davis Technologies (TDT)RA4LI
Medusa 4 Kanallı Pre-Amp/SayısallaştırıcıTucker-Davis Technologies (TDT)RA4PA
MikrofonPCB'si Pieztronics378C01
Çok Alanlı Hoparlör- StereoTucker-Davis Technologies (TDT)MF1-S
OsiloskopTektronixDPO3012
Optibit Arayüzü için optik PC1 ekspres kartı)Tucker-Davis Systems (TDT)PO5e
Askina Braucel pedleri (selüloz emici pedler)B.BraunPZN 8473637
PreamplifierPCB Pieztronics480C02
RZ6 Çoklu G/Ç İşlemci sistemi (BioSigRZ)Tucker-Davis Technologies (TDT)RZ6-A-PI
%0,9 salin (NaCl, steril)B. BraunPZN:8609255
SigGenRZ yazılımıTucker-Davis Technologies (TDT)https://www.tdt.com/
Software R (sürüm 3.2.1) + Reshape 2 (Sürüm 1.4.1) + ggplot 2 (sürüm 1.0.1) + datatable (sürüm 1.9.4), + gdata (sürüm 2.13.3), + pastecs (sürüm 1.3.18), + waveslim (sürüm 1.7.5), + MassSpecWavelet (sürüm 1.30.0)The R Foundation, R Core Team 2015Açık Kaynak Yazılım (ücretsiz dağıtılabilir)
Ses azaltma kabiniMed Associates Inc.ENV-018V
Standart Model Forseps, 12 cm ve 14,5 cm uzunlukFST11000-12, 11000-14
Leukosilk bantBSN medical GmbH & Co. KGPZN 00397109
Doku Forsepsleri - 1x2 Diş 12 cmFST11021-12
Uniprotect havalandırmalı kabinBioscapeTHF3378
Havalandırmalı kabinTecniplast9AV125P
Ksilazin (Rompun),% 2Bayer Vital GmbHPZN 1320422
https://de.mathworks.com/products/matlab.html

Kaynaklar

  1. Sporns, O., Tononi, G., Kotter, R. The human connectome: A structural description of the human brain. PLOS Computational Biology. 1 (4), e42(2005).
  2. Bebarova, M. Advances in patch clamp technique: towards higher quality and quantity. Ge....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

İşitsel Beyinsapı CevabıKlik Ton Patlama StimülasyonuOtomatik Dalgalık AnaliziABR Eşik TespitiABR Latans AnaliziFare İşitsel ProfillemeSes Yalıtımlı KabinSubdermal Elektrot YerleşimiÖn Yükseltici Kalibrasyonu