Summary
İmplante ozmotik pompa ile izoproterenol kronik uygulama farelerde ileri kalp yetmezliği taklit etmek için yaygın olarak kullanılmıştır. Burada, 3 hafta boyunca sürekli izoproterenol uygulaması için cerrahi mini pompa implantasyonunda ayrıntılı yöntemlerin yanı sıra başarılı model oluşturma için ekokardiyografik değerlendirme yi açıklıyoruz.
Abstract
Izoproterenol (ISO), seçici olmayan bir beta-adrenerjik agonisttir, farelerde kardiyak yaralanmaya neden olmak için yaygın olarak kullanılır. Akut model strese bağlı kardiyomiyopatiyi taklit ederken, ozmotik pompa ile yönetilen kronik model, insanlarda ileri kalp yetmezliğini taklit eder. Açıklanan protokolün amacı, implante edilmiş bir mini pompa kullanarak farelerde kronik ISO kaynaklı kalp yetmezliği modeli oluşturmaktır. Bu protokol, 100+ suşinda kalp yetmezliğine neden olmak için kullanılmıştır. Cerrahi pompa implantasyonu teknikleri ayrıntılı olarak açıklanmıştır ve farelerde bir kalp yetmezliği modeli oluşturmak isteyen herkes için ilgili olabilir. Buna ek olarak, her gerginlik için ekokardiyografik parametrelere dayalı haftalık kardiyak remodeling değişiklikleri ve model gelişimi için beklenen zaman sunulmaktadır. Özetle, yöntem basit ve tekrarlanabilir. İmplante edilen mini pompa ile 3-4 hafta boyunca uygulanan sürekli ISO, kardiyak remodeling yapmak için yeterlidir. Son olarak, ISO modeli oluşturma başarısı hipertrofi, ventrikül dilasyonu ve disfonksiyon gösteren seri ekokardiyografi ile in vivo olarak değerlendirilebilir.
Introduction
Azaltılmış ejeksiyon fraksiyonu ile kalp yetmezliği (HFrEF) kardiyovasküler homeostazı korumak için sempatik sinir sisteminin iyi tanınan telafi edici yanıt eşlik ediyor1. Kronik aktivasyon ile kalp ve dolaşım üzerine hemodinamik stres ve zararlı etkiler gözlendi. Bunlar kalp yetmezliği için çağdaş farmakoterapinin temel taşı haline gelmiştir ve nörohormonal sistemlerin kalp yetmezliği ve terapötik antagonizmasının ilerlemesinde önemli mekanizmalardır1.
Birkaç fare modelleri kalp yetmezliği temel araştırmalar için kullanılabilir. Genetik modeller moleküler tedavileri keşfetmek ve sinyal yollarını araştırmak için çekicidir. Ancak, bu modeller kalp yetmezliği ortak formları ile ilgili olmayabilir. Diğer yaygın modeller sol anterior inen (LAD) arter ligasyonu, transaortik daralma (TAC), ve izoproterenol (ISO), her biri farklı bir patolojiketiyoloji2 hedefleyen,3,4,5 ,6. LAD arter ligasyonu böylece iskemik kardiyomiyopati için özel bir model oluşturarak bir anterior duvar miyokard infarktüsü indükler. TAC kalp yetmezliği hipertansif bir model oluşturmak için akut basınç aşırı neden olur. Basınç gradyanı ölçülebilmesine rağmen, hipertrofi tabakalaşmasıiçin izin, hipertansiyon akut başlangıçlı doğrudan klinik alaka yoksun4. Hem LAD hem de TAC modelleri yürütmek için yüksek düzeyde cerrahi uzmanlık gerektirir. Kalp yetmezliği Akut ISO modeli strese bağlı kardiyomiyopati taklit, Ayrıca Takotsubo hastalığı olarak bilinen, akut miyokard infarktüsü taklit sol ventrikül katekolaminler ve aktivite belirgin bir artış ile karakterizedir7, 8 . Buna karşılık, kalp yetmezliği kronik ISO modelleri katekolaminler kronik yüksek düzeyde ile, ileri kalp yetmezliği belirtileri özellikleri mevcut1. Kronik ISO modelinin avantajları, ileri kalp yetmezliğini taklit eden kronik adrenerjik stimülasyon sağlaması ve oluşturmasının nispeten kolay olmasıdır. Araştırmacı, patolojilerini en iyi şekilde özetleyen bir model seçmeli.
Bu yöntemin genel amacı, kalp yetmezliği hastalarında bulunan kronik sempatik aktivasyonu taklit etmek için sürekli ISO bültenleri implante mini pompa kullanarak farelerde kalp yetmezliği indüklemek için1. Yöntem basit ve tekrarlanabilir. Fare suşları arasında belirgin bir varyasyon olmasına rağmen, 30 mg/kg/gün'de 3 ila 4 hafta arasında uygulanan ISO, çoğu farede kardiyak remodeling yapmak için yeterlidir. Özellikle, ISO hafta boyunca pro-hipertrofik kompansatör faz yol açar 1 duvar inceltme, ventrikül dilatasyonu ve hafta sistolik fonksiyon azalma takip 2 ve 32. ISO modelinin oluşturulmasında başarı hipertrofi, dilatasyon ve ventriküler disfonksiyonu gösteren seri ekokardiyografi ile in vivo olarak değerlendirilebilir, ayrıca miyokardiyal için hasat edilen kardiyak dokunun histolojik ve moleküler değerlendirilmesi yoluyla eksinyolen lipid birikimi, fibrozis, ER stres, apoptoz, ve gen ekspresyonu9,10,11,12.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Bu protokol Kaliforniya Üniversitesi, Los Angeles hayvan bakım kurallarına bağlıdır (ARC protokolü #2010-075). Peri-prosedür fare bakımı ve analjezi yönetimi kuruma özgü olabileceğiiçin okuyucuların kendi IACUC onaylı protokollerine uymaları tavsiye edilir.
1. Isoproterenol ozmotik pompa hazırlanması
NOT: Bu işlem, 100'den fazla inbred fare suşlarından 18+ g ağırlığındaki 9+ haftalık dişi farelerde ve suşların bir alt kümesindeki erkek farelerde başarıyla uygulanmıştır. Bu işlem için maksimum vücut ağırlığı sınırı yoktur. Tedavi yaşının kalp yetmezliği gelişimine karşı isoproterenol kaynaklı duyarlılığı etkileyip etkilemediği bilinmediği için her zaman yaşla uyumlu kontrolleri ekleyin.
- Her fare için vücut ağırlığını tartın ve kaydedin.
- Her fare için uygun miktarda ve izoproterenol konsantrasyonunu hesaplayın (Bkz. Tablo 1 ; Ek Dosya).
NOT: Bu deneyde kullanılan ozmotik pompalar(Malzeme Tablosu)100 μL'lik bir rezervuar hacmine sahiptir ve 28 güne kadar sürekli akış hızlarında ilaç teslim etmek üzere tasarlanmıştır. Pompa yüklemesi sırasında dolum tüpündeki hacim kaybını hesaba katmak için pompa başına fazladan 20 μL'lik bir isoproterenol çözeltisi hazırlayın. - Analitik bir denge kullanarak uygun miktarda isoproterenol(Tablo 1)tartın ve 120 μL steril %0,9 NaCl çözeltisi içinde eritin. Pipet şiddetle veya girdap için 1 dakika tamamen izoproterenol solubilize etmek.
NOT: Ozmotik pompaları bir laboratuvar biyogüvenlik kabininde hazırlayın. Pompalar cerrahi eldivenlerle kullanılmalıdır. Steril teknik ozmotik pompaların hazırlanması sırasında ve cerrahi implantasyon işlemi sırasında tavsiye edilir. - Tartmak ve akış moderatör ile birlikte boş ozmotik pompa kaydetmek ve daha sonra akış moderatör kaldırın.
- 1.0 mL şırınga içine 120 μL isoproterenol çözeltisi aspire ve ozmotik pompalar ile sağlanan 27-gauge künt uçlu dolum tüpü takın.
NOT: Şırınga ve dolum tüpünün hava kabarcıklarından arındırılmış olduğundan emin olun. - Pompayı dik konumda tutarken, dolum tüpünün ucu pompa haznesinin altına yakın olana kadar dolgu tüpünü üstteki açılan pompadan takın.
- Izoproterenol çözeltisi pompa nın açılmasına kadar dolana kadar şırınga pistonlarını yavaşça iterek ozmotik pompayı yükleyin.
- Dolgu tüpünü dikkatlice çıkarın ve fazla çözeltiyi silin.
- Pompayı kapatmak için akış moderatörüne geri takın ve fazla çözümü silin.
- Rezervuar hacminin %90'Dan fazlasının ozmotik pompanın yeniden tartılarak doldurulduğundan onaylayın.
NOT: Kontrol pompaları, pompa haznesini steril %0,9 NaCl çözeltisi ile doldurarak aynı şekilde hazırlanır.
2. Cerrahi aletlerin hazırlanması
- Fiber optik O-ring ışık mikroskobu aydınlatıcı, 2 adet forceps, iğne tutucu, sıcak boncuk sterilizatörler, cam boncuklar ve makas(Malzeme Tablosu)dahil olmak üzere tüm cerrahi aletleri temizleyin.
- Otoklav cerrahi aletleri 121 ° C 30 dakika için ameliyat öncesi aletleri sterilize etmek.
3. Isoproterenol ozmotik pompa cerrahi implantasyon
- Fareyi %95 O2 ve %5 CO2'de %3 izofluran ile indüksiyon odasına yerleştirerek anesteziyi teşvik edin. Anesteziyi nosekon ile %2 isofluran ile koruyun.
- Analjezi için kürek kemikleri arasında boynun ensesine 5 mg/kg karprofen s.c. uygulayın.
- Kornea dehidratasyon önlemek için gözlere oftalmik merhem yerleştirin.
- Solunum hızı, ayak ucutu refleksve mukoza rengi izleyerek anestezi derinliğini kontrol edin.
- Fareyi ısıtılmış bir ped üzerinde supine pozisyonunda yerleştirin. Alt karın saç çıkarın ve betadin veya klorheksidin ile cilt dezenfekte.
NOT: Ameliyat sonrası enfeksiyonu en aza indirmek için, cerrahi alanın olay kıllarından arındırılmış olduğundan emin olun. - 1 cm uzunluğunda orta hat deri kesi kesmek için cerrahi makas bir çift kullanın. Altta yatan periton duvarlarından deriyi dikkatlice incelemek için bir çift künt uçlu makas kullanın.
NOT: Pompanın büyüklüğünü karşılamak için intraperitoneal teslimat tercih edilir. - Periton duvarlarını forceps ile altta yatan bağırsaktan uzaklaştırın ve ince cerrahi makas kullanarak periton duvarlarında 0,8 cm'lik bir delik kesin.
- Önce akış moderatörü ile periton boşluğuna ozmotik pompa yerleştirin.
- Periton duvarlarındaki tutunucuyu 5.0 emilebilir dikişleri kesintiye uğramış bir şekilde kullanarak kapatın. Cilt kesisini kesintiye uğramış bir şekilde kapatmak için 6.0 emilemez dikişler kullanın.
- Kurtarma sırasında fareyi sıcak ve kuru tutmak için özel bir kuluçka makinesine yerleştirin. Normal solunum ve hareket dönüşü için ilk iki saat içinde her 30 dakikada bir fareyi izleyerek anesteziden iyileşmeyi değerlendirin.
- Fare anesteziden tamamen iyileştikten sonra, rutin gövdeye geri döndürün. Deney sonuna kadar her gün 3 güne kadar ve daha sonra her 2-3 gün sonra komplikasyonlar için hayvan izlemeye devam edin.
NOT: Hayvanlar ameliyat sonrası ağrı veya enfeksiyon, kilo kaybı belirtileri, hareket kabiliyeti eksikliği, anormal duruş, damat yetersizliği ve kesi bölgesinin aşırı yalama veya ısırma belirtileri için izlenmelidir. - Carprofen 5mg/kg s.c. her 24 saat kadar 48 saat ve daha sonra gerektiği gibi uygulayın.
- Cerrahi alan enfeksiyonlarını önlemek için içme suyunda 5 gün boyunca 0.25 mg/mL amoksisilin uygulayın.
- 7 ila 10 gün sonra emilmeyen dikişleri çıkarın.
4. Anestezi altında ekokardiyografik değerlendirme
NOT: Birkaç hafta boyunca seri kardiyak remodelasyonu izlemek için ekokardiyografik değerlendirme tekrar tekrar yapılabilir. 3 hafta boyunca haftalık aralıklarla ekokardiyografik ölçümler yaptık.
- Isofluran%1.25 ila %1.5 oranında indüksiyon odasında anestezi edin. Uygun şekilde sakinleştirildikten sonra, farenin bir burun konisi aracılığıyla anestezi almaya devam etmesini sağlayan bantla ekokardiyografi platformuna sabitleyin.
- Aşırı sedasyonun negatif kronotropik ve inotropik etkilerini en aza indirmek için %1'lik bir bakım dozajına indirgen. Çalışma boyunca solunum ve kalp hızlarını dikkate alın ve gerektiğinde isofluran dozunu ayarlayın.
- Bir depilatif losyon ile göğüs saç çıkarın ve saç ücretsiz göğüs silin.
- Ultrason jelini göğüse yerleştirin ve ultrason sondasını kalbi görüntülemek için konumlandırın.
- B modunda, parasternal uzun eksenli görünümde sol ventrikül (LV) görüntü. Ultrason ışınının düzlemindeki aort kapağını ve LV apeksini hizalamak için ekokardiyografi platformını ayarlayın.
- Lv uzun eksenini ultrason ışınına ve LV maksimum çapını görüntünün merkezine yerleştirmek için ekokardiyografi platformını yatırın.
- Ultrason sondasını 90 derece çevirerek LV kısa eksenini görüntüleyin.
- M modunda LV duvar kalınlığı ve iç boyutları ölçün.
- Fareyi kafese geri yerleştirin. Normal solunum ve spontan vücut hareketlerinin geri dönüşü için monitör.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Daha önce yayınlanan çalışmamızda, 105 Hibrid Fare Çeşitliliği Paneli (HMDP) suşları 2,13arasında ozmotik pompa ile 21 gün boyunca 30 mg /kg/d iso dozu uygulandı. ISO tedavisinin 1, 2 ve3. Yazarlar arasında izoproterenol etkisini okudu önceki bir çalışmada benzer 23 fare suşları14, biz ekokardiyografik parametreler arasında çarpıcı inter-zorlanma varyasyon gözlendi. Ekokardiyografik parametrelere dayalı haftalık değişikliklerin özeti ve model gelişimi için beklenen süre sunulmuştur (Şekil 2 ve Şekil 3)2,15. Fare suşları arasında farklılıklar gözlenmiş olsa da, ortalama olarak, diyastole (IVSd) ve kesirli kısalma (FS) sonunda interventriküler septal duvar kalınlığı ilk hafta artış ama daha sonraki zaman noktaları na göre azalmak; sonunda sol ventrikül iç çapı diyastole (LVIDd) ve sol ventrikül kitlesi (LVM) 3 haftalık bir süre içinde artış(Şekil 3). Bu bulgular, izoproterenol'ün 1. Daha önce yayınlanmış çalışmamız da sol ventrikül hipertrofisi ile ilişkili çeşitli gen alt kümelerinin upregülasyon gösterdi, fibrotik marker Lgals3 ve kalp yetmezliği belirteci Nppb hafta 32dahil . Diferansiyel olarak düzenlenmiş diğer genler arasında anjiyogenez, salgılanan sinyal glikoproteini, polisakkarit bağlanması, aktin sitoiskeleti, kemokin sinyal yolu, proteinaceous ekstrasellüler matriks ve kollajen2sayılabilir. Bu sonuçlar ekokardiyografik ve histolojik bulgularla doğrulanır: fare kalpleri ISO altında gözle görülür şekilde daha büyük sol ventrikül oda boyutları ve tuzlu kontrole göre ISO tedavisi altında daha fazla miktarda fibrozis gösterilmiştir (Şekil 4 ) Olarak tanımlanır.
Şekil 1: Mini Pompa ile Kronik İzoproterenol (ISO)-Kaynaklı Kalp Yetmezliği Modeli.
Bu rakam Wang ve ark.2 ve Chang ve ark.15izni ile uyarlanmıştırBu rakamın daha büyük bir sürümünü görmek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 2: Hibrit Fare Çeşitliliği Paneli (HMDP) fare suşları arasında kardiyak yapı ve fonksiyonun ekokardiyografik ölçümlerinde değişiklik.
Siyah çubuklar, sıralı sırada temel koşul altında ölçümleri temsil eder. Beyaz çubuklar 3 haftalık sürekli ISO infüzyonundan sonra ölçümleri temsil eder. IVSd = interventriküler septal duvar kalınlığı; LVIDd = sonunda diyastole sol ventrikül iç çapı; LVM = sol ventrikül kitlesi; FS = kesirli kısaltma. Hata çubukları, ortalamaların (SEM) standart hatalarını temsil eder. Bu rakam Wang ve ark.2 ve Chang ve ark.15izni ile uyarlanmıştır.
Şekil 3: Her klasik inbred zorlanma için her ISO zaman noktasında taban çizgisi ile karşılaştırıldığında ekokardiyografik ölçümlerde ortalama değişiklikler.
Bu rakam Wang ve ark.2 ve Chang ve ark.15izni ile uyarlanmıştır. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 4: Kronik izoproterenol infüzyonu sonrası ekokardiyografik ve histolojik değişiklikler.
(A) Anasatırda ve 3. Her iki farede sol ventrikül iç boyutlarının genişlemesine ve fare #2 endokardiyal fibrozisin (kırmızı ok) gelişimine dikkat edin. (B) Masson'un kısa eksende sol ventriküldeki trikrom lekesi izoproterenol tedavisi ile geniş fibrozis ilerler (ölçek çubuğu: 2 mm). Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
| Vücut Ağırlığı (g) | Günlük doz (g/gün) | Akış Hızı (3L/gün) | Konsantrasyon (3L/gün) | İzoproterenol (mg/120 μl) |
| 20 | 600 | 2.64 | 227 | 27.3 |
| 21 | 630 | 2.64 | 239 | 28.6 |
| 22 | 660 | 2.64 | 250 | 30 |
| 23 | 690 | 2.64 | 261 | 31.4 |
| 24 | 720 | 2.64 | 273 | 32.7 |
| 25 | 750 | 2.64 | 284 | 34.1 |
| 26 | 780 | 2.64 | 295 | 35.4 |
| 27 | 810 | 2.64 | 307 | 36.8 |
| 28 | 840 | 2.64 | 318 | 38.2 |
| 29 | 870 | 2.64 | 330 | 39.5 |
| 30 | 900 | 2.64 | 341 | 40.9 |
Tablo 1: İzoproterenol konsantrasyonu ve 30 mg/kg/d ozmotik pompa hızında temsili vücut ağırlıklarına hazırlık. Bu tablo Wang ve ark.2 ve Chang ve ark.15izni ile uyarlanmıştır.
Ek Dosya. Bu dosyayı indirmek için lütfen buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu yöntemi kronik beta-adrenerjik stimülasyona2,13nedeniyle kardiyak sonuçları değerlendirmek için 100' den fazla inbred fare suşlarına uyguladık. Izoproterenol duyarlılık önemli farklılıklar fare suşları arasında var olduğu bilinmektedir ve gerektiğinde ilgi zorlanma özelleştirilebilir16. Bu fare suşları arasında beta-adrenerjik reseptör fonksiyonu varyasyon u olabilir17, otonom sinir sistemi aktivitesinde zorlanma bağımlı farklılıklar16, beta-adrenerjik reseptör (beta-AR) yoğunluğu ve / veya kaplin17 ve suşlar arasındaki diğer genetik farklılıklar. In vivo seri ekokardiyografi nin yanı sıra ISO'lu ve ISO'suz ex vivo kardiyak doku histolojisi ve gen ekspresyonuna dayanarak, hücresel süreçlerden hücre dışı matrikse ve inflamatuara kadar uzanan çarpıcı farklılıklara neden olan kronik izoproterenol tedavisi yanıtlar2,13. Aşağıdaki hususlar bu kalp yetmezliği modelinin uygulanması ile ilgili olabilir.
İmplante edilen farelerin %30'a yakını ozoproterenol ozmotik pompa ile implante edilmiş deneysel protokol2,13. Bunların %90'Dan fazlası pompa implantasyonundan sonraki ilk 48 saat içinde öldü. BXA-12/PgnJ, BXD-34/TyJ, BTBRT<+>tf/J, NZW/LacJ, BXD40/TyJ ve BALB/cJ en hassas suşları ile ölümler belirgin olarak ortaya çıktı. Ayrıca,,[20 g ağırlığındaki farelerin erken ameliyat sonrası mortalite (48 saat içinde ölüm) daha yüksek olduğunu gözlemledik. Farelerin en az 9-10 haftalık veya > 20 g yaşına kadar olgunlaşmasına izin vermek erken postoperatif mortaliteyi en aza indirebilir. Bu nedenle, bir deney planlarken gerginliğe özgü farklılıkları ve erken postoperatif mortaliteyi hesaba katmak önemli olabilir. Ölüm nedenini belirlemek için otopsi yapmadık. Bu nedenle, ozmotik pompaların arıza oranını belirlemek mümkün değildir. Kurban edilen farelerde görsel bir kusur tespit edilemedi.
Isofluran negatif kronotropik ve inotropik olduğu bilinmektedir. Sedasyon ve isoflurane'nin ekokardiyografik ölçümler üzerindeki etkisini en aza indirmek için dikkatli olunmalıdır. Göğüs kafesi kemikli bir gölge atar ve görüntü niteliklerini düşürürse, farklı bir interkostal boşluk ta kalbi görüntülemek için fareyi yeniden konumlandırın. Interventriküler duvar kalınlığı ölçümü sağ ventrikül duvarının varlığı ile karmaşık ise, kötü tasvir sınırları en aza indirmek için farklı bir interkostal alan üzerinden reimage. Doğru ölçümler, karşılaştırmalı analizleri aşağı yada kritik öneme taşıyor.
Sıçanlarda ozmotik minipompakullanımını belgeleyen literatür var18,19. Okuyucular bu protokolün sadece farelerle kullanıldığını ve diğer türler ile deneyler için diğer literatüre başvurulması gerektiğini belirtmelidir.
Geçmiş literatürde ozoproterenol günlük enjeksiyonları ve ozmotik pompalar ile sürekli uygulama vücutağırlığınagöre benzer ventriküler ağırlık neden olduğunu göstermektedir 20 . Ancak, hemodinamik farklılıklar vardır. Günlük enjeksiyonlar hemen hipotansiyon ve taşikardi birkaç saat içinde rebound hipertansiyon takip neden olur. Sürekli uygulama pompa implantasyonu gününde hemen hipotansiyon akabinde kan basıncının hafif hipertansiyona normalleşmesine neden olur220. Genel hemodinamik eğilimler kalp yetmezliği hastalarında kronik olarak aktive edilmiş sempatik hormonları daha yakından taklit etmektedir.
Hafta 1 isoproterenol, kontraktilite veya supernormal artmıştır. 2. ve 3. Devam eden izoproterenol arka planda, kesirli kısalma (FS) ve ejeksiyon fraksiyonu (EF) ile ölçülen normal kontraktilite, aslında, kas-ı lma rezervi bozulmuş temsil edebilir. Araştırmacı daha derin bir kardiyak bozukluk derecesine neden olmak isterse, iso dozajını artırabilir veya ISO tedavi süresini 4 haftaya uzatabilir, ameliyat sonrası mortalite riskini tartabilir. Son olarak, sunduğumuz veriler sadece dişi farelere dayanıyordu. Dişi fareler erkek fareler e göre daha yüksek iskemik kontraktil fonksiyon ve daha az ATP-tükenmesi erkek fareler ile karşılaştırıldığında bir iskemi reperfüzyon yaralanma modeli göstermiştir21. Ayrıca, kronik bir ISO modelinde, erkek fareler vücut ağırlığı oranı yüksek bir kalp göstermiştir ve parotis ve submaxillary bezlerinde toplam norepinefrin düzeyleri azaltılmış olarak kadınlara göre22. Bu yaklaşımı kadınlara ve erkeklere uygularken kullanıcının gözlenen sonuçlardaki cinsiyete dayalı farklılıkları göz önünde bulundurması gerekebilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.
Acknowledgments
Yazarlar nih K08 HL133491 finansman desteği için kabul.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Micro-Osmotic Pump System with Flow Moderator in Place | Alzet | Model 1004 | Includes filling tube, flow moderator and pump body |
| (-)-Isoproterenol hydrochloride | Sigma-Aldrich | 16504-1G | (-)-Isoproterenol hydrochloride is a powder that needs to be stored at -20°C. |
| 1 ml sterile syringe | VWR | BD309602 | |
| 30 W LED Fiber optic O-ring light microscope illuminator | AmScope | SKU: LED-30WR | |
| 5-0 COATED VICRYL (polyglactin 910) Suture | Ethicon | J303H | 5-0, absorbable |
| Fine Scissors - Sharp | FST | 14060-09 | |
| Glass beads | FST | 18000-46 | |
| Hot bead sterilizers | FST | 18000-50 | |
| Iris forceps | WPI | 15915 | |
| Look Sharpoint 6-0, 18" Black Nylon Monofilament Suture | LOOK | AA-2176 | 6-0, non-absorbable |
| Needle holder | WPI | 15926 | |
| Normal Saline, 0.9% NaCl | Fisher | 89167-772 |
References
- Hartupee, J., Mann, D. L. Neurohormonal activation in heart failure with reduced ejection fraction. Nature Review Cardiology. 14 (1), 30-38 (2017).
- Wang, J. J., et al. Genetic Dissection of Cardiac Remodeling in an Isoproterenol-Induced Heart Failure Mouse Model. PLoS Genetics. 12 (7), 1006038 (2016).
- Balakumar, P., Singh, A. P., Singh, M.
- Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present. Circulation: Heart Failure. 2 (2), 138-144 (2009).
- Huang, W. Y., Aramburu, J., Douglas, P. S., Izumo, S. Transgenic expression of green fluorescence protein can cause dilated cardiomyopathy. Nature Medicine. 6 (5), 482-483 (2000).
- Breckenridge, R. Heart failure and mouse models. Disease Model and Mechanism. 3 (3-4), 138-143 (2010).
- Wittstein, I. S., et al. Neurohumoral features of myocardial stunning due to sudden emotional stress. New England Journal of Medicine. 352 (6), 539-548 (2005).
- Templin, C., et al. Clinical Features and Outcomes of Takotsubo (Stress) Cardiomyopathy. New England Journal of Medicine. 373 (10), 929-938 (2015).
- Shao, Y., et al. A mouse model reveals an important role for catecholamine-induced lipotoxicity in the pathogenesis of stress-induced cardiomyopathy. European Journal of Heart Failure. 15 (1), 9-22 (2013).
- Kudej, R. K., et al. Effects of chronic beta-adrenergic receptor stimulation in mice. Journal of Molecular Cell Cardiology. 29 (10), 2735-2746 (1997).
- Zhuo, X. Z., et al. Isoproterenol instigates cardiomyocyte apoptosis and heart failure via AMPK inactivation-mediated endoplasmic reticulum stress. Apoptosis. 18 (7), 800-810 (2013).
- El-Demerdash, E., Awad, A. S., Taha, R. M., El-Hady, A. M., Sayed-Ahmed, M. M. Probucol attenuates oxidative stress and energy decline in isoproterenol-induced heart failure in rat. Pharmacology Research. 51 (4), 311-318 (2005).
- Rau, C. D., et al. Mapping genetic contributions to cardiac pathology induced by Beta-adrenergic stimulation in mice. Circulation Cardiovascular Genetics. 8 (1), 40-49 (2015).
- Berthonneche, C., et al. Cardiovascular response to beta-adrenergic blockade or activation in 23 inbred mouse strains. PLoS One. 4 (8), 6610 (2009).
- Chang, S. C., Ren, S., Rau, C. D., Wang, J. J. Isoproterenol-Induced Heart Failure Mouse Model Using Osmotic Pump Implantation. Methods Molecular Biology. 1816, 207-220 (2018).
- Shusterman, V., et al. Strain-specific patterns of autonomic nervous system activity and heart failure susceptibility in mice. American Journal of Physiology-Heart Circulation Physiology. 282 (6), 2076-2083 (2002).
- Faulx, M. D., et al. Strain-dependent beta-adrenergic receptor function influences myocardial responses to isoproterenol stimulation in mice. American Journal of Physiology-Heart Circulation Physiology. 289 (1), 30-36 (2005).
- Zhang, G. X., et al. Cardiac oxidative stress in acute and chronic isoproterenol-infused rats. Cardiovascular Research. 65 (1), 230-238 (2005).
- Boluyt, M. O., et al. Isoproterenol infusion induces alterations in expression of hypertrophy-associated genes in rat heart. American Journal of Physiology. 269 (2), Pt 2 638-647 (1995).
- Hohimer, A. R., Davis, L. E., Hatton, D. C. Repeated daily injections and osmotic pump infusion of isoproterenol cause similar increases in cardiac mass but have different effects on blood pressure. Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 83 (2), 191-197 (2005).
- Cross, H. R., Murphy, E., Koch, W. J., Steenbergen, C. Male and female mice overexpressing the beta(2)-adrenergic receptor exhibit differences in ischemia/reperfusion injury: role of nitric oxide. Cardiovascular Research. 53 (2), 662-671 (2002).
- Klingman, G. I., McKay, G., Ward, A., Morse, L. Chronic isoproterenol treatment of mice: effects on catecholamines and rectal temperature. Journal of Pharmaceutical Sciences. 62 (5), 798-801 (1973).
