Riportiamo un'efficiente tecnica di radioetichettatura del carbonio-11 per produrre traccianti clinicamente rilevanti per la tomografia a emissione di Positron (PET) utilizzando cartucce di estrazione in fase solida. 11 Del sistema di L'agente c-metilante viene passato attraverso una cartuccia precaricata con precursore e l'eluizione successiva con etanolo acquoso fornisce traccianti PET chimicamente e radiochimicamente puri in alti rese radiochimiche.
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Articolo metodologico
Fase solida 11C-Metilazione, purificazione e formulazione per la produzione di traccianti PET
* These authors contributed equally
In questo articolo
Sommario
Abstract
La produzione di routine di radiotracciatori utilizzati nella tomografia a emissione di positroni (PET) si basa principalmente sulla chimica umida in cui il synthon radioattivo reagisce con un precursore non radioattivo nella soluzione. Questo approccio richiede la purificazione del tracciante dalla cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC) seguita dalla riformulazione in un solvente biocompatibile per l'amministrazione umana. Recentemente abbiamo sviluppato un nuovo approccio a metilazione a 11C per la sintesi altamente efficiente di prodotti radiofarmaceutici PET con etichettato carbonio 11, sfruttando le cartucce di fase solide come unità monouso "3-in-1" per la sintesi, la purificazione e riformulazione dei traccianti. Questo approccio evita l'uso di HPLC preparativo e riduce le perdite del tracciante nelle linee di trasferimento e a causa del decadimento radioattivo. Inoltre, la tecnica basata sulla cartuccia migliora l'affidabilità della sintesi, semplifica il processo di automazione e facilita la conformità ai requisiti GMP (Good Manufacturing Practice). Qui, dimostriamo questa tecnica sull'esempio di produzione di un composto B di Pittsburgh, tracciante PET ([11C]PiB), un agente di imaging in vivo gold standard per placche amiloidi nel cervello umano.
Introduzione
La tomografia a emissione di positroni (PET) è una modalità di imaging molecolare che si basa sulla rilevazione del decadimento radioattivo di un isotopo attaccato a una molecola biologicamente attiva per consentire la visualizzazione in vivo di processi, segnali e trasformazioni biochimiche . Il carbonio-11 (t1/2 x 20,3 min) è uno dei radioisotopi più comunemente utilizzati nel PET a causa della sua abbondanza in molecole organiche e della breve emivita che consente più amministrazioni tracciari nello stesso giorno allo stesso soggetto umano o animale e riduce il carico di radiazioni sui pazienti. Molti tracciari etichettati con questo isotopo sono utilizz....
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Protocollo
1. Preparazione di tamponi ed eluenti
- Sciogliere 2,72 g di triidrato di acetato di sodio in 100 mL di acqua per preparare la soluzione di acetato di sodio da 0,2 M (soluzione A).
- Sciogliere 11,4 mL di acido acetico glaciale in 1 L di acqua per preparare la soluzione di acido acetico 0,2 M (soluzione B).
- Unire 50 mL della soluzione A con 450 mL della soluzione B per preparare il buffer di acetato a pH 3.7 (buffer 1) in base al buffer reference center15. Verificare il pH del buffer con strisce pH o un misuratore di pH.
- Unire 12,5 mL di etanolo assoluto con 87,5 mL di tampone 1 per rendere 12,5% soluzione Et....
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Risultati
Per riassumere una tipica radiosintesi di [11C]PiB, il gassoso [11C]CH3OTf viene prima passato attraverso una cartuccia tC18 precaricata con una soluzione di precursore (Figura 1). La separazione della miscela di reazione viene quindi ottenuta mediante eluizione successiva con soluzioni etanolo acquose come segue. In primo luogo, il 12,5% di EtOH eluisce la maggior parte dei non reagiti [11C]CH3OTf e 6-OH.......
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Discussione
Nonostante la recente comparsa e l'approvazione FDA di diversi traccianti PET etichettati da 18F, come florbetapir, florbetaben e flutemetamolo, [11C]PiB rimane un tracciante standard d'oro per l'imaging amiloide a causa della rapida assunzione del cervello e rilegatura. Attualmente questo tracciante è sintetizzato tramite chimica bagnata16 o utilizzando un approccio "ciclo secco"4,17. Entrambi i metodi richi.......
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Dichiarazioni
Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti.
Ringraziamenti
Questo studio è stato parzialmente sostenuto da una sovvenzione 18-05 della Alzheimer's Society of Canada (per A. K.) e Brain Canada Foundation con il sostegno di Health Canada. Gli autori desiderano riconoscere la Facoltà di Medicina dell'Università McGill, l'Istituto Neurologico di Montreal e il McConnell Brain Imaging Centre per il supporto di questo lavoro. Ringraziamo anche la signora Monica Lacatus-Samoila per l'aiuto con le procedure di controllo della qualità e i dottori Jean-Paul Soucy e Gassan Massarweh per l'accesso ai radioisotopi e alla struttura di radiochimica.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| 6-OH-BTA-0 | Composti biochimici avanzati ABX | 5101 | Precursore non radioattivo di [11C]PiB |
| 6-OH-BTA-1 | ABX composti biochimici avanzati | 5140 | Standard non radioattivo di [11C]PiB |
| Sistema HPLC Agilent 1200 | Agilent | Agilent 1200 | Sistema HPLC analitico |
| Etanolo assoluto | Alcoli commerciali | 432526 | |
| siringa Hamilton (luer-tip, 250 &; L) | Hamilton | HAM80701 | |
| MZ Analytical PerfectSil 120 | MZ-Analysentechik GmbH | MZ1440-100040 | Colonna HPLC analitica |
| Perkin Elmer Clarus 480 GC system | Perkin Elmer | Clarus 480 | Collettore in policarbonato per cromotografo a gas |
| Scintomics | ACC-101 | Collettore | |
| di sintesi Restek MTX-Colonna in cera (30 m, 0,53 mm) | Restek | 70625-273 | Colonna GC analitica |
| Modulo Scintomics GRP | Scintomics | Scintomics GRP | Unità di sintesi automatizzata |
| Sep-Pak tC18 Plus | Waters | WAT020515 | Cartuccia di estrazione in fase solida |
| Collettore resistente ai | solventi Scintomics | ACC-201 | Collettore di sintesi |
| Ago spinale | BD | 405181 | |
| Sterile linea di prolunga | B. Braun | 8255059 | |
| Filtro sterile | Millipore | SLLG013SL | |
| Fiala sterile (20mL) | Huayi | SVV-20A | |
| Acqua sterile | Baxter | JF7623 | |
| Synthra MeIplus Research | Synthra | MeIplus Research | [11C]CH3I/[11C]CHModulo 3OTf |
| Siringa (10 mL) | BD | Siringa 309604 | |
| (1mL) | BD | Siringa 309659 | |
| (20 mL) | B. Braun | 4617207V | Siringa dispenser |
| Filtro di sfiato | Millipore | TEFG02525 |
Riferimenti
- Langstrom, B., Lundqvist, H. The preparation of 11C-methyl iodide and its use in the synthesis of 11C-methyl-L-methionine. The International journal of applied radiation and isotopes. 27 (7), 357-363 (1976).
- Larsen, P., Ulin, J., Dahlstrøm, K., Jensen, M.
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Ristampe e permessi
