ERRATUM NOTICE
Important: There has been an erratum issued for this article. Read more …
Summary
Necrotizing enterokolit (NEC) är den allvarligaste gastrointestinala (GI) sjukdomen som ofta förekommer i för tidigt födda barn, särskilt mycket låg födelsevikt spädbarn, med hög dödlighet och oklar patogenes. Orsaken till NEC kan vara relaterad till inflammatoriska immunsystemet avvikelser. En NEC djurmodell är ett oumbärligt verktyg för NEC sjukdom immun forskning. NEC djurmodeller använder vanligtvis C57BL/6J neonatal möss; BALB/c neonatal möss används sällan. Relaterade studier har visat att när möss är infekterade är Th2-cellsdifferentiering dominerande hos BALB/c-möss jämfört med C57BL/6J-möss. Studier har föreslagit att förekomsten och utvecklingen av NEC är associerade med en ökning av T helper typ 2 (Th2) celler och i allmänhet åtföljs av infektion. Därför använde denna studie neonatal BALB/c möss för att inducera en NEC-modell med liknande kliniska egenskaper och intestinala patologiska förändringar som de som observerats hos barn med NEC. Ytterligare studier är motiverade för att avgöra om denna djurmodell kan användas för att studera Th2-cellssvar i NEC.
Abstract
Necrotizing enterokolit (NEC) är den allvarligaste gastrointestinala (GI) sjukdomen som ofta förekommer i för tidigt födda barn, särskilt mycket låg födelsevikt spädbarn, med hög dödlighet och oklar patogenes. Orsaken till NEC kan vara relaterad till inflammatoriska immunsystemet avvikelser. En NEC djurmodell är ett oumbärligt verktyg för NEC sjukdom immun forskning. NEC djurmodeller använder vanligtvis C57BL/6J neonatal möss; BALB/c neonatal möss används sällan. Relaterade studier har visat att när möss är infekterade är Th2-cellsdifferentiering dominerande hos BALB/c-möss jämfört med C57BL/6J-möss. Studier har föreslagit att förekomsten och utvecklingen av NEC är associerade med en ökning av T helper typ 2 (Th2) celler och i allmänhet åtföljs av infektion. Därför använde denna studie neonatal BALB/c möss för att inducera en NEC-modell med liknande kliniska egenskaper och intestinala patologiska förändringar som de som observerats hos barn med NEC. Ytterligare studier är motiverade för att avgöra om denna djurmodell kan användas för att studera Th2-cellssvar i NEC.
Introduction
Necrotizing enterokolit (NEC), den allvarligaste gastrointestinala (GI) sjukdomen, förekommer hos de flesta för tidigt födda barn (>90%), särskilt de med mycket låg födelsevikt (VLBW)1. Hos VLBW spädbarn varierar förekomsten av sjukdomen från 10% till 12%, och dödligheten hos barn som diagnostiserats med NEC är mellan 20% och 30%2,3. Orsaken till NEC kan vara relaterad till slemhinnan skador, invasion av patogena bakterier och intestinala utfodring, vilket kan leda till inflammatoriska svar och induktion av intestinala skador i mottagliga värdar3. Patogenesen vid NEC är oklart. Relevant forskning visar att det drabbade barnets immunsvar är onormalt, och genetisk mottaglighet, mikrovaskulära spänningar och intestinala bakteriella förändringar kan spela viktiga roller i sjukdomen3.
Nec djurmodell är ett oumbärligt verktyg för forskning om patogenesen vid NEC. De djurarter som används för NEC-modeller är grisar, råttor och möss. På grund av den långa graviditetsperioden, tillväxtcykler och höga kostnader har grisar under de senaste åren dock inte varit förstahandsvalet för NEC-modeller och har ersatts med råttor eller möss4. Eftersom det finns skillnader i immunbakgrunden hos olika musstammar5, måste olika studier använda olika stammar av möss för att upprätta NEC djurmodeller. BALB/c möss har en viktig egenskap; när de är infekterade eller hanterar yttre skador är polariseringen av TH2-celler under infektion hos möss betydligt starkare än hos andra stammar av möss6,7,8. T helper celler spelar en avgörande roll i förekomsten och progressionen av NEC, särskilt utvecklingen av TH2 celler3,9,10,11. Därför använde denna studie BALB/ c möss för att fastställa NEC-modellen, vilket kan vara till hjälp för NEC-sjukdomsforskning på T-celler.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Denna forskning godkändes av Medical Ethics Committee of Guangzhou Women and Children's Medical Center (NR. 174A01) och Animal Ethical Committee vid Guangzhou Forevergen Biosciences Laboratory Animal Center (IACUC-G160100). Alla djur uppföddes i samma rum i en specifik patogenfri (SPF) miljö, och experiment utfördes i en konventionell miljö. Mössen som användes för avel var 7-8 veckor gamla; mössen för att inducera NEC (n = 72) separerades från dammen på dag 4, och dammarna(n=14) hölls i den ursprungliga buren och vårdade kontrollmöss (Cont.) gruppmöss(n=24).
1. Beredning av reagenser och anordningar
- Förbered mjölkersättningen för BALB/c-mössen i motsvarande förhållande (för tidigt barnmjölkspulver: getmjölkpulver = 2:1).
OBS: De slutliga näringssammansättningarna av modersmjölk12 visas i tabell 1. - LPS-lösning (2,5 mg/ml)
- Lös upp totalt 10 mg LPS-pulver i 4 ml steriliserat dubbeldestillerat vatten, blanda väl och förvara i kylskåp vid -20 °C efter alikvotering.
OBS: LPS-lösningen förvaras i mörker vid 2-8 °C för omedelbar användning eller vid -20 °C för långtidsförvaring.
- Lös upp totalt 10 mg LPS-pulver i 4 ml steriliserat dubbeldestillerat vatten, blanda väl och förvara i kylskåp vid -20 °C efter alikvotering.
2. Inducera nekrotiserande enterokolit hos neonatala BALB/c möss
- Mata neonatalmössen.
- Håll neonatalmössen i samma bur med dammen, vårdad av dammen på dag 0-4.
- På natten dag 4 (när neonatalmössen väger 2,5-3 g), separera neonatalmössen i NEC-gruppen från dammen för att inducera NEC, hålla dem i en djurinkubator och mata dem med formel. Cont.-gruppen får dock stanna hos och matas av dammen.
OBS: Neonatalmöss som är separerade från dammen måste höjas i en inkubator på grund av deras svaga kroppstemperaturreglering.
- Förbered sondmatningsröret genom att blötlägga det i 75% alkoholbehållare i 1-2 min och tvätta dem två gånger i rent, dubbeldestillerat vatten.
OBS: För att undvika korskontaminering bland mössen måste ovanstående process utföras efter att ha matat varje mus. - Inducera NEC-modellen.
- Ta neonatalmössen från dammen på dag 4 och fasta dem för en natt.
- Ge näring åt mössen med LPS (20-30 μL åt gången) och mata dem med formel på dag 5 (40-50 μL åt gången).
- Från dag 5 och framåt, utsätta mössen för en hypoxi-reoxygenation-kall-chock cykel två gånger om dagen i 5 dagar. Placera mössen i en hypoxianordning vid 5% O2 i 90 s och reoxygenera dem i 3 min; upprepa denna process fem gånger. Placera sedan mössen i en 4 °C-miljö i 15 minuter och överför dem sedan till en inkubator. Se figur 1A,B för induktionsprocessen.
OBS: En cykel av hypoxi-reoxygenation-kall stimulering utfördes en gång på morgonen och en gång på eftermiddagen. En blandning av 5% O2 med 95% N2 förbereddes i behållaren, och koncentrationen mättes med en syredetektor.
- Observera noga alla möss, väg dem varje dag, registrera mössens överlevnad under induktionsperioden och registrera avföringsegenskaperna (med eller utan klibbig avföring / blodig avföring).
OBS: Den etablerade NEC-modellen varar i 5 dagar. - På dag 10 eller tidigare, när mössen visar NEC-symtom (tarmvred, hematochezia, diarré)13, avliva mössen genom inhalationsanestesi med isofluran och samla sedan omedelbart tarmvävnaden. Samla inte vävnader från mössen som dog spontant.
OBS: I denna studie anpassades slutpunkten för mus euthenasia när musen visade hematochezia och cyanos i hela kroppen.
3. Gav upp musen
- Fixera mushuvudet och håll magröret i höger hand. Sätt i magröret från det vänstra hörnet av musens mun.
OBS: Huvudet fixerades med pekfingret på musens huvud och trycktes försiktigt bakåt och nedåt för att förhindra att musen böjer sig framåt under operationen och påverkar införandet av magröret. - Flytta långsamt röret till mitten av munnen. Efter att röret har förts in ca 2-3 cm, tryck in 40-50 μL formel eller 20-30 μL LPS i mag-tarmkanalen. Se figur 2A,B för sondmatningen.
OBS: Under normala omständigheter sätts magröret in i mag-tarmkanalen smidigt. Om musen har en stark kräkreflex har magröret satts in i luftstrupen av misstag. Magröret måste dras ut försiktigt och musen får vila en stund innan du försöker ge upp den igen. Dessutom används sondmatningsförfarandet för att inducera modellen av NEC före dödshjälp av möss.
4. Samla färska tarmvävnadsprover för hematoxilin och eosin (H&E) färgning
- Sänk ner den färska ileumvävnaden från musen i 10% formalin i 24 timmar.
- Bädda in vävnaderna i paraffin och skär dem i 4 μm sektioner.
- Deparaffinisera sektionerna i xylen och rehydrera dem successivt i absolut etanol, 95% etanol, 80% etanol, 70% etanol och destillerat vatten, blötläggning i 5 min i varje steg. Färga sektionerna med hematoxylinlösning i 5 min och differentiera dem i 1% saltsyra i 75% alkohol i 5 s. Slutligen färga dem med eosinlösning i 1 min.
OBS: Efter färgning med hematoxylinlösning måste den differentieras med 1% saltsyra i etanol för att avlägsna alltför bundet hematoxilinlösning och cytoplasmiskt hematoxilinfärgämne. Koncentrationen av 1% saltsyra är lämplig för tarmvävnad. - Undersök histopatologin i tarmvävnaden vid 40x förstoring.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
BALB/c mus NEC modell inducerades av formel utfodring, LPS utfodring, hypoxi och kall stimulering. Under induktionsperioden observerades mössen för intestinal patologi, avföringsegenskaper, kroppsviktsförändringar och daglig överlevnad. Representativa bilder av tunntarmen under NEC induktion; siffrorna på bilden representerar intestinala patologi poäng från 0 (normalt epitel) till 4 (den allvarligaste) (figur 3A). Intestinala patologi poängen var betydligt högre i NEC gruppen än i Cont. gruppen (figur 3B). Siffrorna på bilden representerar avföringspoäng från 0 (välformade pellets) till 3 (flytande avföring) (figur 3C). På dag 10 var avföringspoängen för NEC-grupperna betydligt högre i NEC-gruppen, vilket indikerar att intestinal dysfunktion i NEC-gruppen var allvarligare (figur 3D). På dag 5, den första dagen för induktion av NEC-modellen, fanns det ingen signifikant skillnad i kroppsstorlek mellan de två grupperna. Dag 10 var mössen i NEC-gruppen dock betydligt tunnare och mindre från huvud till svans än mössen i Cont.
Under de 5 dagar under vilka modellen fastställdes ökade vikten av mössen i NEC-gruppen långsamt eller till och med visade negativ tillväxt, och överlevnadsgraden för mössen i NEC-gruppen minskade gradvis jämfört med Cont. gruppen (figur 4B, C). Dessutom användes en annan sats möss för att inducera NEC-modellen men utan att samla vävnaderna; Dag 13 hade alla möss i denna NEC-grupp dött, och överlevnadskurvan minskade avsevärt (kompletterande figur S1). Figur 5A visar morfologi och patologiska resultat (nekros av intestinala slemhinnan vävnad) av den resected ileocecal området i tarmvävnaden från NEC patienter i detta sjukhus. I denna studie utvecklade mössen i NEC-gruppen (1/13) ileocecal blödning och nekros (figur 5B).
Figur 1: Induktion av BALB/c NEC-modellprocessen. (A) Mössen i NEC-gruppen separerades från dammen vid födseln tills de var 4 dagar gamla (på dag 4) och fastade den natten. NEC-modellen inducerades från dag 5 och framåt efter födseln och varade i 5 dagar. Intestinala vävnad exemplar samlades på dag 10 eller tidigare. Mössen i Cont.-gruppen var inhyst med och vårdades av dammen. B) Sekvensen av verksamheten för varje dag efter det att den nya kreditinstitutsmodellen har förts in. Förkortningar: Cont. = kontroll; NEC = necrotizing enterocolitis; LPS = lipopolysackarid. Klicka här för att se en större version av den här figuren.
Bild 2: Gastric sondmatning. (A) En specialiserad sondmatningsanordning användes i denna studie, som kombinerades med ett plaströr och en spruta. B) Sondmatningsröret som kommer in från munhörnet i 45° vinkel mot den vertikala linjen. (C) Röret flyttades långsamt till mitten av musens mun för att säkerställa att magsäcksröret och matstrupen var på samma vertikala nivå. Förkortningar: D= diameter. Klicka här för att se en större version av den här figuren.
Figur 3: BALB/c-mus NEC-modell. A) Fotomikrografer av intestinala patologipoäng från de två grupperna, t.ex. som visar intakt och normal slemhinnan i Cont. intestinala villi försvinnande med intestinala nekros i NEC gruppen (poäng 4). (B) Intestinala patologipoäng hos mössen efter NEC-induktion var högre än för cont. gruppen (n = 9 i Cont. gruppen, n = 35 i NEC-gruppen, *** P < 0,001 med Students t-test). C) Fotomikrografer av avföringspoäng från två grupper, t.ex. visar välformade pellets i Cont. gruppen (poäng 0), bildade avföring i två grupper (poäng 1), halvformade pallar i NEC-gruppen (poäng 2) och flytande avföring i NEC-gruppen (poäng 3). (D) Avföringspoängen i NEC-gruppen var betydligt högre än i gruppen Cont.-gruppen (n = 6 i cont.-gruppen, n = 13 i NEC-gruppen, *** P < 0,001 med Studentens t-test). Den röda triangeln representerar separationen av slemhinnan och laminapropria, och den svarta pilen pekar på musavföring. Skalningsstaplar = 50 μm. Förkortningar: Kont. = kontroll; NEC = necrotizing enterocolitis; HE = hematoxylin och eosin. Klicka här för att se en större version av den här figuren.
Figur 4: Jämförelse av kroppsform och mössens överlevnad mellan Cont.-gruppen och NEC-gruppen. (A) Utseendet på de två grupperna av möss på dag 5 och dag 10. B) Detta avsnitt visar mössens viktförändringar i två grupper över tiden. x-axeln representerar antalet dagar efter att mössen föddes, och y-axeln representerar mössens viktförändringar. **P < 0,01, ***P < 0,001 med Students t-test för att jämföra Cont.-gruppen (n = 10) och NEC-gruppen (n = 27) (C) Det här avsnittet visar överlevnadskurvorna hos möss i kontrollgruppen (n = 10) och NEC-gruppen (n = 25). Förkortningar: Cont. = kontroll; NEC = nekrotiserande enterokolit. Klicka här för att se en större version av den här figuren.
Figur 5: Ileocecal blödning hos barn med NEC och möss med NEC. (A) Blödning och nekros i det ileocecal området hos barn med NEC. B) Blödning och nekros i det ileocecal området hos möss med NEC (1/13). tarmarna hos mössen i Cont. gruppen var dock normala, utan blödning och nekros. Den svarta triangeln hänvisar till intestinal blödning och nekros, och den röda pilen visar blödning och nekros i det ileocecal området. Skalningsstaplar = 50 μm. Förkortningar: Kont. = kontroll; NEC = nekrotiserande enterokolit. Klicka här för att se en större version av den här figuren.
| Sammansättning | Mus (g/L) | Mjölkersättning (g/L) |
| protein | 69-118 | 100 |
| fett | 93-175 | 100 |
| kolhydrat | 28-37 | 50 |
| kalcium | 0.97-6.2 | 2.84 |
| fosfor | 1.6-2.72 | 1.62 |
| natrium | 0.66-1.4 | 1 |
| kalium | 1.08-1.7 | 1.2 |
| klorid | 1.17-1.76 | 1.76 |
| magnesium | 0.0001-0.3 | >0.12 |
| zink | 0.009-0.055 | 0.018 |
| järn | 0.004-0.007 | 0.017 |
| koppar | 0.0017-0.007 | 0.0018 |
Tabell 1: Mjölkingredienser för mejeriformel.
Kompletterande figur S1: Överlevnadskurvan minskade signifikant i NEC-gruppen så att alla möss dog spontant (n = 5 i cont. gruppen, n = 10 i NEC-gruppen). Förkortningar: Cont. = kontroll; NEC = nekrotiserande enterokolit. Klicka här för att ladda ner den här filen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
NEC är den vanligaste gastrointestinala systemet nödsituation för nyfödda, med en hög incidens och dödlighet, särskilt i för tidigt födda barn1,2,3. Dess patogenes är dock fortfarande oklart. Man tror för närvarande att slemhinnan skador, patogen invasion och enteral utfodring är högriskfaktorer för NEC3. Hittills är de djur som används för NEC-modellen främst grisar, råttor och möss. De flesta studier har använt neonatal C57BL/6 möss för att inducera NEC13,14,15,16, och mycket få studier har använt BALB/c neonatal möss för att inducera NEC. Balb/c möss har dock fördelen av Th cell polarisering6,7,8, vilket motiverar ytterligare studier för att avgöra om de kan vara en bra NEC-modell för Th cellforskning av sjukdomen.
Vi hänvisade till Nadler patologiska poängstandarden för NEC model17 och fann att poängen för NEC-gruppen var betydligt högre än kontrollgruppens. En poäng ≥ 2 anger NEC, och framgångsgraden för att inducera NEC är 38-50%, vilket är lägre än 77% framgångsgrad för NEC-modellering i studien av Caplan et al. (DOI:10.3109/15513819409037698). Vi utvärderade också avföringspoängen18 av de två grupperna av möss och fann att poängen för NEC-gruppen var högre än i kontrollgruppen. Ju högre poäng, desto allvarligare tarmdysfunktion. Alla dessa uppgifter visar att inrättandet av nec-modellen var framgångsrikt. Dessutom är det uppmuntrande att den neonatala BALB/c-musmodellen för NEC i viss utsträckning kan simulera mänskligt nec. Blödning och nekros förekommer i tarmarna hos barn med NEC3,19; liknande patologiska villkor observerades i denna modell.
Sondmatning är det viktigaste steget i att inducera NEC i musmodellen. Om sondmatningen inte var skickligt behärskad var det lätt att felaktigt placera magröret i luftstrupen och få musen att dö. Under magsond användes vänster tumme, långfinger och ringfinger för att klämma båda sidor av musens torso, och pekfingret placerades på huvudet för att fixera musen på plats. Detta var för att förhindra att musen rörde sig och orsakar magsäcksröret att skada matstrupen. Mag röret sattes in från det vänstra hörnet av musens mun. Det är först när magröret kommer in i matstrupen smidigt utan motstånd som vi kan fortsätta att sätta in det. LPS eller mjölkersättning ska injiceras först efter att ha fört in magröret 2-3 cm från musens underläpp.
Längden på hypoxi bör övervakas noggrant. I denna studie varade hypoxi i 90 s varje gång. Om hypoxi är för lång kommer mössen inte att kunna tolerera det och kommer att dö. Denna modell kan användas för att undersöka NEC-relaterade immunceller, särskilt TH1- och TH2-celler3,9,10,11,20. I framtiden planerar vi att undersöka om denna modell är användbar för att studera Th2-cellssvar i NEC. Dessutom introducerade denna studie också en ny metod för avföringsbedömning för att utvärdera tarmdysfunktion hos möss med NEC18. Det finns dock vissa begränsningar i denna studie. Till exempel var modellens framgångsgrad inte särskilt hög. Ansträngningar pågår för att förbättra metoden för BALB/c NEC-modellering för att öka framgångsgraden genom att justera hypoxinivån från 5% O2 till 1% O2, som beskrivits tidigare15.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har inga intressekonflikter att avslöja.
Acknowledgments
Författarna tackar Clinical Biological Resource Bank of Guangzhou Women and Children's Medical Center för att tillhandahålla det kliniska provet och Guangzhou Forevergen Biosciences Laboratory Animal Center för att tillhandahålla möss. Denna forskning stöddes av National Natural Science Foundation of China grant 81770510 (R.Z.).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Absolute ethanol | Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD. | 100092683 | |
| Goat Milk powder | Petag | 71795558417 | |
| HE dye solution | Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD. | G1003 | |
| Isoflurane | RWD, Shenzhen Reward Life Technology Co., LTD. | R510 | |
| LPS | Sigma-Adrich | L2880 | |
| Medical oxygen | various | various | |
| Microscope | NIKON | NIKON imaging system (DS-Ri2) | |
| Neutral resin | Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD. | 10004160 | |
| Paraffin | various | various | |
| Premature baby milk powder | Abbott | 57430 | |
| Xylene | Sinopharm Chemical Reagent Co., LTD. | 10023418 | |
| 1% Hydrochloric acid | various | various | |
| 10% Formalin | LEAGENE | DF0110 |
References
- Horbar, J. D., et al. Mortality and neonatal morbidity among infants 501 to 1500 grams from 2000 to 2009. Pediatrics. 129 (6), 1019-1026 (2012).
- Stoll, B. J., et al. Neonatal outcomes of extremely preterm infants from the NICHD Neonatal Research Network. Pediatrics. 126 (3), 443-456 (2010).
- Neu, J., Walker, W. A.
- Sangild, P. T., et al. Invited Review: The preterm pig as a model in pediatric gastroenterology. Journal of Animal Science. 91 (10), 4713-4729 (2013).
- Cancro, M. P., Sigal, N. H., Klinman, N. R. Differential expression of an equivalent clonotype among BALB/c and C57BL/6 mice. Journal of Experimental Medicine. 147 (1), 1-12 (1978).
- Kuroda, E., Yamashita, U. Mechanisms of enhanced macrophage-mediated prostaglandin E2 production and its suppressive role in Th1 activation in Th2-dominant BALB/c mice. Journal of Immunology. 170 (2), 757-764 (2003).
- Fornefett, J., et al. Comparative analysis of clinics, pathologies and immune responses in BALB/c and C57BL/6 mice infected with Streptobacillus moniliformis. Microbes and Infection. 20 (2), 101-110 (2018).
- Rosas, L. E., et al. Genetic background influences immune responses and disease outcome of cutaneous L. mexicana infection in mice. International Immunology. 17 (10), 1347-1357 (2005).
- Sproat, T., Payne, R. P., Embleton, N. D., Berrington, J., Hambleton, S. T cells in preterm infants and the influence of milk diet. Frontiers in Immunology. 11, 1035 (2020).
- Nanthakumar, N., et al. The mechanism of excessive intestinal inflammation in necrotizing enterocolitis: an immature innate immune response. PLoS One. 6 (3), 17776 (2011).
- Afrazi, A., et al. New insights into the pathogenesis and treatment of necrotizing enterocolitis: Toll-like receptors and beyond. Pediatric Research. 69 (3), 183-188 (2011).
- Auestad, N., Korsak, R. A., Bergstrom, J. D., Edmond, J. Milk-substitutes comparable to rat's milk; their preparation, composition and impact on development and metabolism in the artificially reared rat. British Journal of Nutrition. 61 (3), 495-518 (1989).
- Liu, Y., et al. Lactoferrin-induced myeloid-derived suppressor cell therapy attenuates pathologic inflammatory conditions in newborn mice. Journal of Clinical Investigation. 129 (10), 4261-4275 (2019).
- MohanKumar, K., et al. A murine neonatal model of necrotizing enterocolitis caused by anemia and red blood cell transfusions. Nature Communications. 10 (1), 3494 (2019).
- He, Y. M., et al. Transitory presence of myeloid-derived suppressor cells in neonates is critical for control of inflammation. Nature Medicine. 24 (2), 224-231 (2018).
- Cho, S. X., et al. Characterization of the pathoimmunology of necrotizing enterocolitis reveals novel therapeutic opportunities. Nature Communications. 11 (1), 5794 (2020).
- Halpern, M. D., et al. Decreased development of necrotizing enterocolitis in IL-18-deficient mice. American Journal of Physiology. Gastrointestinal and Liver Physiology. 294 (1), 20-26 (2007).
- Wu, N., et al. MAP3K2-regulated intestinal stromal cells define a distinct stem cell niche. Nature. 592 (7855), 606-610 (2021).
- Nino, D. F., Sodhi, C. P., Hackam, D. J. Necrotizing enterocolitis: new insights into pathogenesis and mechanisms. Nature Reviews. Gastroenterology & Hepatology. 13 (10), 590-600 (2016).
- Chuang, S. L., et al. Cow's milk protein-specific T-helper type I/II cytokine responses in infants with necrotizing enterocolitis. Pediatric Allergy & Immunology. 20 (1), 45-52 (2009).
Tags
Medicin Nummer 177 Necrotizing enterokolit BALB/c möss Immunologi T helper typ 2 cellerErratum
Formal Correction: Erratum: A Neonatal BALB/c Mouse Model of Necrotizing Enterocolitis
Posted by JoVE Editors on 03/07/2022.
Citeable Link.
An erratum was issued for: A Neonatal BALB/c Mouse Model of Necrotizing Enterocolitis. The Representative Results section was updated.
Figure 1 was updated from:
Figure 1: Induction of the BALB/c NEC model process. (A) The mice in the NEC group were separated from the dam at birth until they were 4 days old (on Day 4) and fasted that night. The NEC model was induced from Day 5 onwards after birth and lasted for 5 days. Intestinal tissue specimens were collected on Day 10 or earlier. The mice in the Cont. group were housed with and nursed by the dam. (B) The sequence of operations for each day after inducing the NEC model. Abbreviations: Cont. = control; NEC = necrotizing enterocolitis; LPS = lipopolysaccharide. Please click here to view a larger version of this figure.
to:
Figure 1: Induction of the BALB/c NEC model process. (A) The mice in the NEC group were separated from the dam at birth until they were 4 days old (on Day 4) and fasted that night. The NEC model was induced from Day 5 onwards after birth and lasted for 5 days. Intestinal tissue specimens were collected on Day 10 or earlier. The mice in the Cont. group were housed with and nursed by the dam. (B) The sequence of operations for each day after inducing the NEC model. Abbreviations: Cont. = control; NEC = necrotizing enterocolitis; LPS = lipopolysaccharide. Please click here to view a larger version of this figure.
