우심실과 좌심실 사이에는 몇 가지 차이점이 있습니다. 그러나 우심실 경색 (RVI)의 병리 생리학은 명확하지 않습니다. 본 프로토콜에서, RVI 마우스 모델 생성을 위한 재현가능한 방법이 도입되고, 이는 RVI의 메카니즘을 설명하기 위한 수단을 제공할 수 있다.
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이 논문에서
요약
초록
우심실 경색 (RVI)은 임상 실습에서 일반적인 프리젠 테이션입니다. 심한 RVI는 치명적인 혈역학 기능 장애와 부정맥으로 이어질 수 있습니다. 좌측 관상동맥 라이게이션에 의해 생성된 광범위하게 사용되는 마우스 심근경색(MI) 모델과는 달리, RVI 마우스 모델은 모델 생성과 관련된 어려움으로 인해 거의 채택되지 않는다. RVI 유발 RV 리모델링 및 기능장애의 메카니즘 및 치료에 대한 연구는 환자에서 RVI의 병태생리학을 모방하는 동물 모델을 필요로 한다. 이 연구는 C57BL/6J 마우스에서 RVI 모델 생성을 위한 실현 가능한 절차를 소개한다. 또한, 이 모델은 MI 후 24시간에서의 경색 크기 평가, 심초음파를 이용한 심장 리모델링 및 기능 평가, RV 혈역학 평가, RVI 후 4주째에 경색 영역의 조직학 등을 기반으로 특성화되었다. 또한, RV에서 관상동맥 배열을 관찰하기 위해 관상동맥 혈관계 캐스트를 수행하였다. RVI의이 마우스 모델은 오른쪽 심부전의 메커니즘에 대한 연구를 촉진하고 RV 리모델링의 새로운 치료 목표를 추구 할 것입니다.
서론
오랫동안 폐동맥에 연결된 단순한 튜브로 생각되었던 우심실 (RV)은 수년 동안 부당하게 무시되었습니다1. 그러나, RV 기능에 대한 관심이 증가하고 있는데, 이는 혈역학적 장애(2,3)에서 필수적인 역할을 하고 심혈관 질환(4,5,6,7)의 독립적인 위험 예측인자로서 작용할 수 있기 때문이다. RV 질환은 RV 경색 (RVI), 폐동맥 고혈압, 및 판막 질환8을 포함한다. 폐동맥 고혈압에 대한 엄청난 관심과는 달리, RVI는 7,9 무시 된 채로 남아 있습니다.
RVI는 일반적으로 열등한 후부 심근 경색10,11을 동반....
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프로토콜
모든 절차는 미국 국립 보건원 (NIH 간행물 제 85-23 호, 1996 년 개정)에서 발표 한 실험실 동물의 관리 및 사용 가이드에 따라 수행되었으며 남부 의과 대학 난팡 병원 동물 윤리위원회 (광저우, 중국)의 승인을 받았다. 건강한 수컷 C57BL/6J 마우스 (8-10주령; 체중, 25-30 g)를 남부 의과 대학의 동물 센터로부터 수득하였다. 암컷 쥐도 사용할 수 있지만 성별 차이의 잠재적 인 영향으로 인해 두 성별을 혼합하는 것은 권장되지 않습니다. 도착 후, 마우스는 12-h / 12-h 어두움 / 빛 사이클 (케이지 당 3-4 마우스) 아래에 보관되었으며, Ad libitum 음식과 물을 가지고있었습니다.
1. 수술 준비
- 수술 전에 오토클레이빙을 통해 수술 도구를 살균하십시오. 가열 패드를 37°C로 조정한다.
- 수술 통증을 완화하기 위해 50 mg / kg의 펜토바르비탈 ( 자료 표 참조)을 복강 내 주사하여 마우스를 마취하십시오. 마우스를 마취 유도를 위해 별도의 상자에 넣으십시오. 발가락 금단 반응의 부재로 마취의 깊이를 보장하십시오.
참고 : 또한 진통제에 더 좋기 때문에 흡입 마취를 위해 1.5 % 이소 플루란을 사용하....
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결과
이 연구에서, 마우스는 RVI (n = 11) 또는 가짜 조작 (n = 11) 그룹에 무작위로 할당되었다. 2개의 정상 마우스 심장에서 주조된 관상동맥은 도 1A에 도시되어 있다. RCA 라이게이션에 반응하여, ST-세그먼트 상승은 ECG의 리드 III에서 관찰되었다(도 1B). 더욱이, 2,3,5-트리페닐테트라졸륨 클로라이드 (TTC) 염색은 수술 후 24 h에서 경색 영역이 RV 유리벽의 45%를 차지한다는 것을 보여주었다 (도 1C, D). 상기 데이터는 RVI 마우스 모델의 성공적인 생성을 나타내었다.
LV 단축에서의 4-챔버 정점도(도 2A) 및 2-챔버 뷰의 기록 및 대응하는 M-모드 심초음파(
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토론
프랑스의 Sicard와 동료들은 2019 년에 RVI의 마우스 모델을보고했는데, 이는 수술 과정을 설명하고 RVI9 이후 LV와 RV 간의 상호 작용에 중점을 두었습니다. 그러나 현재까지 추가 연구를 위해이 모델을 사용했다고보고된 연구는 없습니다. 보다 자세한 절차는 연구자가 RVI의 마우스 모델을 사용하여 조사하는 데 도움이 될 것입니다. Sicard et al.9의 보고서와는 달리, 우리는 품질 관리를위한 모델 생성 및 전략에 대한 단계별 정보를 제공하고 RCA, RV 혈역학 및 경색 영역에서의 심근 세포의 해부학 적 분포를 추가로 평가했습니다. 최근 보고서에 따르면 경색 부위의 심근 세포가 심근 재생23에 필수적인 역할을한다는 것이 입증되었습니다. RVI 환자의 RV 기능은 재관류16,24 없.......
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공개 사항
저자는 공개 할 것이 없습니다.
감사의 글
이 연구는 중국 국립 자연 과학 재단 (82073851 ~ Sun)과 국립 중국 박사 후 과학 재단 (2021M690074 to Lin)의 보조금으로 지원되었습니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride | Sigma | T8877 | TTC 염색 |
| 용 동물 미니 인공 호흡기 | Havard | Type 845 | 인공 환기 |
| 용 동물 초음파 시스템 VEVO2100 | 도플러 유속 및 AS 플라크에 대한 | Visual Sonic | VEVO2100 |
| Batson ' s # 17 해부학 적 부식 키트 | Polyscience Inc | 7349 | 혈관 주조 |
| 용 부프레 노르핀 | Isoreag | 1134630-70-8 | 수술 후 마우스의 통증 감소 |
| C57BL / 6J 마우스 + D29A1A2 : D27 | Animal Center of South Medical University | - | 마우스 RVI 모델 |
| 생성 용 카메라 | Sangnond | 사진 촬영용 | |
| 차가운 빛 일루미네이터 | 올림푸스 | ILD-2 | 작동 |
| 용 조명 심전도 ADI | 기기 | ADAS1000 | 심 |
| 제모 크림 | 기록 용 Reckitt Benchiser | RQ / B 33 Type 2 | 마우스 털 제거 |
| 열 패드 - 온도 조절 수술 시스템 (ALC-HTP-S1) | SHANGHAI ALCOTT BIOTECH CO | ALC-HTP-S1 | 가열 |
| Hematoxylin-eosin 염료 | Leagene | DH0003 | Hematoxylin-eosin 염색 |
| Heparin 나트륨 염 | Macklin | H837056 | Heparization용 |
| Isoflurane | RWD 생명 과학 | R510-22 | 흡입제 마취 |
| 연구실에서 만든 주걱 | 두경으로 작업 | ||
| 실험실에서 만든 기관 캐뉼라 | 삽관용 | ||
| Matrx VIP 3000 Isofurane 기화기 | Midmark Corporation | VIP 3000 | 마취 |
| 의료 나일론 봉합사 (5-0) | Ningbo Medical Needle Co. | 5-0 | 가슴 닫기 |
| 미세 수술 팔꿈치 핀셋 | RWD 생명 과학 | F11021-11 | 수술 |
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| 바늘 집게 | Visual Sonic | F31006-12 | 수술 |
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| 조직 집게 | Visual Sonic | F-12007-10 | 수술 |
| 조직 가위 Visual | Sonic | S13052-12 | 혈역학적 측정을위한 오픈 가슴 |
| 트랜스미션 젤 | Guang Gong pai | 250ML | 준비 심장 초음파 측정 |
| 혈관 클램프 | Visual Sonic | R31005-06 | 대동맥에서 혈액 차단용 |
참고문헌
- Rallidis, L. S., Makavos, G., Nihoyannopoulos, P. Right ventricular involvement in coronary artery disease: role of echocardiography for diagnosis and prognosis. Journal of the American Society of Echocardiography: Official Publication of the American Society of Echocardiography. 27 (3), 223-229 (2014).
- Frangogiann....
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