يصف هذا البروتوكول إجراء خطوة بخطوة لإنشاء نموذج صغير لفشل القلب مع جزء طرد محفوظ باستخدام انقباض الأبهر النازل. كما يتم عرض طرق تقييم مورفولوجيا القلب والأنسجة ووظيفة نموذج المرض هذا.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
نموذج جراحي لفشل القلب مع الكسر القذفي المحفوظ في الخنازير الصغيرة التبتية
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
يتم تصنيف أكثر من نصف حالات قصور القلب (HF) على أنها قصور القلب مع الكسر القذفي المحفوظ (HFpEF) في جميع أنحاء العالم. النماذج الحيوانية الكبيرة محدودة للتحقيق في الآليات الأساسية ل HFpEF وتحديد الأهداف العلاجية المحتملة. يقدم هذا العمل وصفا مفصلا للإجراء الجراحي لتضيق الأبهر الهابط (DAC) في الخنازير الصغيرة التبتية لإنشاء نموذج حيواني كبير ل HFpEF. استخدم هذا النموذج انقباضا يتم التحكم فيه بدقة للشريان الأورطي الهابط للحث على الضغط الزائد المزمن في البطين الأيسر. تم استخدام تخطيط صدى القلب لتقييم التغيرات المورفولوجية والوظيفية في القلب. بعد 12 أسبوعا من إجهاد DAC ، كان الحاجز البطيني ضخما ، ولكن تم تقليل سمك الجدار الخلفي بشكل كبير ، مصحوبا بتمدد البطين الأيسر. ومع ذلك ، تم الحفاظ على جزء طرد الجهد المنخفض للقلوب النموذجية عند >50٪ خلال فترة 12 أسبوعا. علاوة على ذلك ، أظهر نموذج DAC تلفا في القلب ، بما في ذلك التليف والالتهاب وتضخم خلايا عضلة القلب. كانت مستويات علامات قصور القلب مرتفعة بشكل ملحوظ في مجموعة DAC. هذا HFpEF الناجم عن DAC في الخنازير الصغيرة هو أداة قوية للتحقيق في الآليات الجزيئية لهذا المرض وللاختبارات قبل السريرية.
المقدمة
يمثل قصور القلب مع الكسر القذفي المحفوظ (HFpEF) أكثر من نصف حالات قصور القلب وأصبح مشكلة صحية عامة في جميع أنحاء العالم1. أشارت الملاحظات السريرية إلى العديد من السمات الحاسمة ل HFpEF: (1) الخلل الانبساطي البطيني ، مصحوبا بزيادة تصلب الانقباضي ، (2) جزء طرد طبيعي أثناء الراحة مع ضعف أداء التمرين ، و (3) إعادة تشكيل القلب2. تشمل الآليات المقترحة عدم التنظيم الهرموني ، والتهاب الأوعية الدموية الدقيقة الجهازية ، واضطرابات التمثيل الغذائي ، والتشوهات في بروتينات المصفوفة الساركوميةوخارج الخلية 3. ومع ذلك ، فقد أظهرت الدراسات التجريبية أن قصور القلب مع انخفاض الكسر القذفي (HFrEF) يسبب هذه التعديلات. اس....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تمت الموافقة على جميع الدراسات على من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام التابعة لمعهد مراقبة المختبر في قوانغدونغ (الموافقة رقم. IACUC2017009). تم إجراء جميع التجارب على وفقا لدليل رعاية واستخدام المختبر (الطبعة 8 ، 2011 ، الأكاديميات الوطنية ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم إيواء في منشأة معتمدة من AAALAC في معهد مراقبة مختبر قوانغدونغ (ترخيص رقم. SYXK (YUE) 2016-0122 ، الصين). تم استخدام ستة ذكور من الخنازير الصغيرة التبتية (ن = 3 لكل من المجموعة الوهمية ومجموعة DAC ، 25-30 كجم في الوزن) لتطوير نموذج HFpEF.
1. إعداد والأدوات
- تأقلم مع المنشأة لمدة 14 يوما قبل الجراحة.
- إجراء الفحوصات الصحية ، بما في ذ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
تخطيط صدى القلب
تم تقييم بنية القلب ووظيفته في الأسابيع 0 و 2 و 4 و 6 و 8 و 10 و 12. يتم عرض تسجيلات الوضع B والوضع M لمنظر المحور القصير parasternal في الشكل 4A. تضمن قياس تخطيط صدى القلب سمك الحاجز البطيني (VST) وسمك الجدار الخلفي (PWT) والبعد الداخلي للبطين الأيسر (LVID). زاد VST في نهاية الانبساط في قلوب DAC ، في حين زاد PWT في نهاية الانبساط ثم انخفض خلال فترة الملاحظة ، مما يشير إلى أن إعادة تشكيل الضخامي كانت موجودة في البطين الأيسر من الخنازير الصغيرة DAC .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
استخدمت هذه الدراسة تقنيات DAC لتطوير نموذج HFpEF للخنازير الصغيرة التبتية. يتم تقديم بروتوكول تحضير والأدوات خطوة بخطوة هنا ، بما في ذلك التخدير والتنبيب الرغامي وقنية الوريد والإجراءات الجراحية ورعاية ما بعد الجراحة. كما يتم تقديم تقنيات التسجيل لصور القلب ب و الوضع M للقلب. بعد DAC ، خضع القلب لتضخم البطين الأيسر خلال الأسبوعين 4 و 6 والتمدد بعد الأسبوع 8. تم الحفاظ على LVEF خلال فترة 12 أسبوعا. لوحظ التليف والالتهاب في قلوب DAC.
تم استخدام مزيج من عملية الصدر المفتوح وانقباض الأبهر لتطوير.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
يعلن أصحاب البلاغ أنه ليس لديهم مصالح متنافسة.
شكر وتقدير
تم دعم هذا العمل من قبل برنامج قوانغدونغ للعلوم والتكنولوجيا (2008A08003 ، 2016A020216019 ، 2019A030317014) ، وبرنامج قوانغتشو للعلوم والتكنولوجيا (201804010206) ، والمؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (31672376 ، 81941002) ، ومختبر مقاطعة قوانغدونغ الرئيسي لحيوانات المختبر (2017B030314171).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| خياطة جراحية قابلة للامتصاص | Putong Jinhua Medical Co. Ltd ، الصين | 4-0 | |
| محطة التنفس | الجمالية Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co.، Ltd ، الصين | WATO EX-35vet | |
| Aspirator | Shanghai Baojia Medical Devices Co.، Ltd ، الصين | YX930D | |
| Benzylpenicillin | Sichuan Pharmaceutical. INC ، الصين | H5021738 | |
| التخلص من أنبوب القصبة الهوائية مع الكفة | Shenzhen Verybio Co.، Ltd ، الصين | 20 سم ، معرف 0.9 | |
| محول التخلص | Guangdong Baihe Medical Technology Co.، Ltd ، الصين | ||
| شفرة تشريح | شنغهاي & nbsp ؛ طبية الأدوات (المجموعة) ؛ المحدودة ، الصين | ||
| الكي الكهربائي | شنغهاي ؛ Hutong Medical Instruments (Group) Co., Ltd ، الصين | GD350-B | |
| مقايسة الممتز المناعي المرتبطة بالإنزيم ELISA kit | Cusabio Biotech Co.، Ltd ، الصين | CSB-E08594r | |
| Eosin | Sigma-Aldrich Corp. | E4009 | |
| Flunixin meglumine | شنغهاي Tongren الصيدلانية المحدودة ، الصين | Shoyaozi (2012) -090242103 | |
| ملقط | شنغهاي & nbsp ؛ طبية الأدوات (المجموعة) ؛ المحدودة ، الصين | ||
| Hematoxylin | Sigma-Aldrich Corp. | H3136 | |
| Isoflurane | RWD Life Science Co.، Ltd ، الصين | Veteasy للحيوانات | |
| منظار الحنجرة | Taixing Simeite Medical Instruments and Instruments Co.، Ltd ، الصين | للبالغين | |
| أضواء جراحية LED | Mingtai Medical Group ، الصين | ZF700 | |
| قارئ Microplate | Thermo Fisher Scientific ، الولايات المتحدة الأمريكية | Multiskan FC | |
| مجهر | لايكا ، ألمانيا | DM2500 | |
| وحدة تقييد متنقلة | مخصصة | N / A | وحدة تقييد متنقلة ، مصنوعة من إطار معدني وعجلات ، مع غطاء قماشي |
| موردين محليين للأكسجين | ، قوانغتشو ، الصين | ||
| Paraformaldehyde | Sigma-Aldrich Corp. | V900894 | |
| مراقبة المريض | شنتشن Mindray الالكترونيات الطبية الحيوية ، الصين | Beneview T5 | |
| القسطرة المحيطية في الوريد (IV) | شنتشن Yima Pet Industry Development Co.، Ltd. ، الصين | 26G X 16 mm | |
| Propofol | Guangdong Jiabo Phamaceutical Co.، Ltd. | H20051842 | |
| ضام الضلع | شنغهاي & nbsp ؛ طبية الأدوات (المجموعة) ؛ المحدودة ، الصين | ||
| حاكم | أطعمة لذيذة ؛ التصنيع شركة ، الصين | ||
| مشرط يتعامل | مع شنغهاي ؛ طبية الأدوات (المجموعة) ؛ المحدودة ، الصين | ||
| مقص (ز) | شنغهاي ؛ طبية الأدوات (المجموعة) ؛ Co., Ltd. ، الصين | ||
| خياطة | Medtronic-Coviden Corp. | 3-0 ، 4-0 | |
| هلام بالموجات فوق الصوتية | تيانجين Xiyuansi معهد الإنتاج ، الصين | TM-100 | |
| مراقب بيطري | شنتشن ميندراي للإلكترونيات الطبية الحيوية ، الصين | ePM12M نظام | |
| Esatoe ، إيطاليا | MyLab30 | مجهزة بمحول صفيف مرحلي (3-8 هرتز) | |
| حقن زيلازين هيدروكلوريد | Shenda Animal شركة Phamarceutical Co.، Ltd. ، الصين | Shoyaozi (2016) -07003 | |
| حقن Zoletil | Virbac ، فرنسا | Zoletil 50 | Tiletamine و zolazepam للحقن |
المراجع
- Dunlay, S. M., Roger, V. L., Redfield, M. M. Epidemiology of heart failure with preserved ejection fraction. Nature Reviews Cardiology. 14 (10), 591-602 (2017).
- Redfield, M. M. Heart failure with preserved ejection fraction. New England Journal of Medicine.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
استكشف المزيد من المقالات
