هنا ، نقدم بروتوكولا لإزالة التعصيب الودي الكلوي (RDN) في الفئران المصابة بارتفاع ضغط الدم الناجم عن تسريب الأنجيوتنسين الثاني. الإجراء قابل للتكرار ومريح ويسمح بدراسة الآليات التنظيمية ل RDN على ارتفاع ضغط الدم وتضخم القلب.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تحسين إزالة التعصيب الكلوي تخفيف ارتفاع ضغط الدم الناجم عن ضخ الأنجيوتنسين الثاني
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
تم إثبات فوائد إزالة التعصيب الودي الكلوي (RDN) على ضغط الدم في عدد كبير من التجارب السريرية في السنوات الأخيرة. ومع ذلك ، فإن الآلية التنظيمية ل RDN على ارتفاع ضغط الدم لا تزال بعيدة المنال. وبالتالي ، من الضروري إنشاء نموذج RDN أبسط في الفئران. في هذه الدراسة ، تم زرع مضخات صغيرة تناضحية مملوءة بالأنجيوتنسين II في فئران C57BL / 6 عمرها 14 أسبوعا. بعد أسبوع واحد من زرع المضخة التناضحية المصغرة ، تم إجراء RDN المعدل على الشرايين الكلوية الثنائية للفئران باستخدام الفينول. أعطيت الفئران المتطابقة مع العمر والجنس محلول ملحي وعملت كمجموعة صورية. تم قياس ضغط الدم عند خط الأساس وكل أسبوع بعد ذلك لمدة 21 يوما. بعد ذلك ، تم جمع الشريان الكلوي والشريان الأورطي البطني والقلب للفحص النسيجي باستخدام تلطيخ H&E و Masson. في هذه الدراسة ، نقدم نموذج RDN بسيطا وعمليا وقابلا للتكرار وموحدا ، والذي يمكنه التحكم في ارتفاع ضغط الدم وتخفيف تضخم القلب. يمكن لهذه التقنية أن تزيل الأعصاب الكلوية الطرفية دون تلف الشريان الكلوي. بالمقارنة مع النماذج السابقة ، يسهل RDN المعدل دراسة علم الأمراض والفيزيولوجيا المرضية لارتفاع ضغط الدم.
المقدمة
ارتفاع ضغط الدم هو أحد أمراض القلب والأوعية الدموية المزمنة الرئيسية في جميع أنحاء العالم. يمكن أن يؤدي ارتفاع ضغط الدم غير المنضبط إلى تلف الأعضاء المستهدفة والمساهمة في قصور القلب والسكتة الدماغية وأمراض الكلى المزمنة1،2،3. ارتفع معدل انتشار ارتفاع ضغط الدم من 20٪ إلى 31٪ بين عامي 1991 و 2007 في الصين. يمكن أن يتضاعف عدد البالغين المصابين بارتفاع ضغط الدم في الصين بعد مراجعة حديثة لمعايير تشخيص ارتفاع ضغط الدم (130/80 مم زئبق)4. يمكن السيطرة على ارتفاع ضغط الدم عن طريق الدواء ، ومع ذلك ، فإن ما يقرب من 20 ٪ من المرضى غير قادرين على السيطرة على ارتفاع....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
امتثلت جميع الإجراءات التجريبية على الحيوانات للدليل الأخلاقي ذي الصلة لرعاية واستخدام المختبر (منشور المعاهد الوطنية للصحة رقم 85-23 ، المنقح 2011) وتمت الموافقة عليها من قبل لجان البحوث الحيوانية في مستشفى هوادونغ التابع لجامعة فودان. تم تقسيم ذكور C57BL / 6 الفئران البالغة من العمر أربعة عشر أسبوعا (28-30 جم) عشوائيا إلى أربع مجموعات: مجموعة الشام ، مجموعة Sham + Ang II ، مجموعة RDN ، مجموعة RDN + Ang II ، n = 6 في كل مجموعة. تم الحفاظ على جميع الحيوانات في ظل ظروف مغلقة محددة خالية من مسببات الأمراض في غرفة يتم التحكم في درجة حرارتها عند 24 ± 1 درجة مئوية مع دورة ضوئية / مظلمة لمدة 12 ساعة وحرية الوصول إلى طعام القوارض القياسي والمياه حسب الطلب.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
الاحصاءات
يتم التعبير عن جميع البيانات كمتوسط ± الانحراف المعياري. تم استخدام ANOVA أحادي الاتجاه للتجارب مع ثلاثة أو أكثر من الحالات تليها اختبارات Bonferroni posthoc للمقارنات بين المجموعات الفردية. ضع في اعتبارك أن القيمة p تساوي أو تقل عن 0.05 على أنها مهمة. تم استخدام برنامج تجاري لإجراء جميع التحليلات الإحصائية.
تم تخفيف الزيادة في ضغط الدم الناجم عن Ang II بعد RDN
لوحظت زيادة كبيرة في ضغط الدم الانقباضي (SBP) في 1 أسبوع بعد ضخ Ang II. أظهرت مجموعة.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
أصبح ما إذا كان RDN يمكن أن يخفض ضغط الدم مثيرا للجدل منذ نشر النتيجة السلبية لتجربة HTN-3 التماثلية 7,25. ومع ذلك ، فقد أظهرت العديد من التجارب السريرية والتجارب على الحيوانات نتائج إيجابية وفعالة من RDN على البشر والحيوانات ارتفاع ضغط الدم9،10،11،12،13،14،15،16،<.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
لا يوجد تضارب في المصالح ، مالي أو غير ذلك ، كما أعلن المؤلفون.
شكر وتقدير
تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81770420) ، ولجنة العلوم والتكنولوجيا التابعة لبلدية شنغهاي (20140900600) ، ومختبر شنغهاي الرئيسي لطب الشيخوخة السريري (13dz2260700) ، والتخصص السريري الرئيسي لبلدية شنغهاي (shslczdzk02801) ومركز مرض الشريان التاجي للشيخوخة ، مستشفى هوادونغ التابع لجامعة فودان.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| Angiotensin II | Sangon Biotech | CAS: 4474-91-3 | لعمل نموذج أنيمول لارتفاع ضغط الدم |
| الجسم المضاد للتيروزين هيدروكسيلاز | Abcam | ab137869 | لتقييم التعبير عن TH للأعصاب الكلوية |
| تحليل ضغط الدم | أنظمة الزيارة | BP-2000 | قياس ضغط الدم |
| مضخة التناضح المصغرة | DURECT Corporation | CA 95014 | لملء الأنجيوتنسين الثاني |
| النورادرينالين ELISA Kit | Abcam | ab287789 | لقياس مستويات النورادرينالين الكلوي |
| الفينول | سانجون للتكنولوجيا الحيوية | CAS: 108-95-2 | تلف العصب الكلوي الودي |
| ورقة | الوزن Sangon Biotech | F512112 | لتدمير العصب الكلوي بورق وزن مغمور بالفينول. https://www.sangon.com/productDetail?productInfo.code=F512112. |
المراجع
- Messerli, F. H., Rimoldi, S. F., Bangalore, S. The transition from hypertension to heart failure: Contemporary update. JACC Heart Failure. 5 (8), 543-551 (2017).
- Lackland, D. T., et al. Implications of recent clinical trials....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
