Summary
在这里，我们提出了一种放大合成乌帕替尼中间体叔丁基（5-甲苯磺酰基-5h-吡咯[2，3-b]吡嗪-2-基）氨基甲酸酯（ACT051-3）的方案。
Abstract
Upatinib是一种Janus激酶抑制剂药物，由一家生物技术公司开发，用于治疗免疫疾病。化合物叔丁基（5-甲苯磺酰基-5h-吡咯[2，3-b]吡嗪-2-基）氨基甲酸酯（ACT051-3）是乌帕替尼的重要中间体。迄今为止，尚未报道这种中间化合物（ACT051-3）的稳定工业生产。本研究从实验室合成、中试放大、工业化生产等方面描述了化合物ACT051-3的具体合成方法和工艺。在探索ACT051-3的工艺路线过程中，对反应条件进行了许多适当的调整和改进，最终成功开发了ACT051-3的最佳工业生产工艺。通过改变参与反应的碳酸钾的状态，反应时间几乎翻了一番，大大提高了反应效率。此外，通过在反应中引入N，N-二异丙基乙胺（DIPEA），昂贵的催化剂Pd（OAc）2的用量减少了2.5 倍，大大降低了生产成本，证实了该工艺路线和ACT051-3工业化生产的可行性，满足了市场对这一重要中间体的需求。
Introduction
近年来，乌帕替尼已成为全球流行的用于治疗免疫紊乱的Janus激酶1（JAK1）抑制剂1，2。该药物已显示出对银屑病关节炎（PsA）3，4，类风湿性关节炎（RA）5，6，7和特应性皮炎（AD）8，9的显着治疗效果。此外，由于其高选择性10，乌帕替尼具有广泛的临床应用。叔丁基（5-甲苯磺酰基-5h-吡喃[2，3-b]吡嗪-2-基）氨基甲酸酯（ACT051-3）是乌帕替尼的重要中间体。其主要结构组分为吡咯环和吡嗪环，可用于制备新型含氮三环激酶抑制剂，用于治疗免疫和肿瘤疾病11。
中试放大是实验室中试研究确定的工艺路线和条件的中型放大（50x-100x），然后进行工艺测试、工业调查和优化，以确定最佳的工业生产和操作条件12.
目前，该中间体化合物（ACT051-3）的实验室合成路线已有报道，但由于收率低、反应复杂、设备要求高等问题，仅小规模进行，仍有很大的优化空间11，13，14，15。然而，目前还没有关于中间化合物ACT051-3的中试放大和工业化生产的工艺路线的报道。
因此，本研究参考实验室合成路线较好的实验室合成路线，研究了化合物ACT051-3的中试放大和生产路线。与原实验室合成路线相比，对反应条件进行了许多适当的调整和改进，并研究了可能影响反应结果的其他因素。最后，确定了最优路线最合适的工艺参数，得到了操作简单、成本低、环保的工艺路线，适用于ACT051-3的中试放大生产。
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Protocol
1. 化合物ACT051-2和ACT051-3的中试规模合成
- 2-溴-5-甲苯磺酰基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪的合成（ACT051-2）
- 在圆底烧瓶中，将50.0g化合物2-溴-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪（ACT051-1;0.25M）溶解在15mL N，N-二甲基甲酰胺（DMF;3 V）中。
- 在氮气保护下向反应溶液中加入65.3g二异丙基乙胺（DIPEA;0.51M）（提供气体和水分屏障），并通过冷水浴将温度冷却至0-5°C。为了保护氮气，将反应器的压力泵至-0.75--0.8MPa，然后通过N2 以平衡0.1MPa的压力。
- 加入 60.20 g 溶解在 12 mL DMF （0.32 M） 中的 TsCl。通过温水浴将温度升高至20-30°C并搅拌约1小时。向混合物中加入冷水（600.0mL，0-10°C），再搅拌1小时。
- 使用玻璃漏斗在真空下过滤产品，并用砂光板填充滤纸。用水（200.0mL）洗涤数次，并使用电动恒温干燥炉干燥，得到收率为78%的淡黄色固体（ACT051-2）。
- （5-甲苯磺酰基-5H-吡咯[2，3-b]吡嗪-2-基）氨基甲酸叔丁酯的合成（ACT051-3）
- 将176.11gACT051-2溶解在366.31g1，4-二恶烷中，置于三端口圆底烧瓶中。
- 向溶液中加入65.75克叔丁基氨基甲酸酯、138.21克颗粒状碳酸钾（2.0当量）、11.57克黄磷（0.04当量）和2.25克Pd（OAc）2 （1.28%重量）。
- 将混合物加热至105°C，并在氮气气氛下搅拌7小时。让混合物冷却至室温，并用布赫纳漏斗过滤产品（滤纸孔径为80-120μm）。
- 用乙酸乙酯（200 mL）洗涤过滤器残留物。使用循环水真空泵在50-60°C的减压下浓缩产品，压力值为-0.095MPa。保持泵工作以保持压力并获得深棕色油。
- 粗品用柱层析纯化，用石油醚和乙酸乙酯（V/V，10/1）洗脱，得目标化合物为白色固体，收率为93.5%。
2. 化合物ACT051-2和ACT051-3的中试放大合成
- 2-溴-5-甲苯磺酰基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪（ACT051-2）的中试放大合成
- 将1.0千克ACT051-1（5.05 M）和1.305千克DIPEA（10.1 M）加入三端口圆底烧瓶中。向烧瓶中加入3LDMF（3V）并溶解固体。将反应混合物加热至35°C。
- 向反应溶液中加入1.203kgTsCl（6.31M）并搅拌1小时。搅拌混合物，直到通过薄层色谱（TLC）和高效液相色谱（HPLC）确认反应完成。简而言之，取少量反应产物并进行TLC监测。当TLC显示几乎没有原料剩余时，将样品送至HPLC中央控制，检测与原料的反应或产物比为0.1/99.9。
- 倒入8.4升冷水，再搅拌0.5小时。用布赫纳漏斗过滤所有液体（滤纸孔径为80-120μm），并用600mL水冲洗粗产品。
- 使用电恒温干燥炉将所得产物在70°C下干燥过夜，得到收率为94.9%的产品。
- 中试放大合成叔丁基（5-甲苯磺酰基-5H-吡咯[2，3-b]吡嗪-2-基）氨基甲酸酯（ACT051-3）
- 向反应釜中加入 3.31 L 叔戊醇和 4.97 L 甲苯 （V/V， 2/3）。
- 向溶液中加入1.66千克ACT051-2，0.83千克叔丁基氨基甲酸酯，1.301千克碳酸钾粉，0.11千克黄磷和0.31千克DIPEA。
- 抽真空氮气三次，如步骤1.1.2所示，重复3x，在氮气保护下向反应溶液中加入10gPd（OAc）2 （0.60%wt）。
- 将反应混合物加热至90°C并搅拌4小时。将混合物冷却至40°C或更低。
- 使用硅藻土作为助滤剂，用Buchner漏斗（滤纸孔径为80-120μm）过滤反应溶液，并用甲苯洗涤滤饼。
- 收集并浓缩滤液。使用循环水真空泵在50-60°C减压下浓缩滤液，压力值为-0.095MPa。保持泵工作以保持压力。
- 加入 300 mL 庚烷并搅拌 20 分钟。再次用Buchner漏斗过滤反应溶液（滤纸孔径为80-120μm），并用庚烷（50mL，三次）冲洗粗产物。干燥，得产品收率96.3%。
3.化合物ACT051-2和ACT051-3的工业生产
- 2-溴-5-甲苯磺酰基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪（ACT051-2）的工业化生产
- 确认反应器清洁无水，并确保混合装置在打开时没有噪音，并且反应器的底部排放阀已关闭。
- 将 355.50 kg DMF （3 V） 加入 2，000 L 搪瓷反应器中并开始搅拌。向溶液中加入125.04千克ACT051-1（1.0当量）和164.8千克DIPEA（2.0当量）。
- 在氮气保护下将温度降至20-25°C。在25-35°C下加入150.22kgTsCl（1.25当量），在3小时内分10批。
- 让混合物保持在25-35°C并搅拌2小时。 在另一个2，000L反应器中准备750.20kg冷水（3-4°C）。
- 通过HPLC监测反应，当剩余原料为0.5%时确认反应完成。
- 向反应混合物中加入冷水（3-4°C），并在15-30°C下搅拌1.5小时。收集滤液并用水（250-500公斤，2-4 V）冲洗，直到它变成中性（使用pH纸测试）。
- 将产物在60-65°C干燥30.5小时，得到收率为95.5%的浅棕色固体。
- 工业生产叔丁基（5-甲苯磺酰基-5H-吡咯[2，3-b]吡嗪-2-基）氨基甲酸酯（ACT051-3）
- 确认反应器清洁无水，并确保混合装置正常且反应器底部排放阀已关闭。
- 将340.10千克叔戊醇（2 V）和552.50千克甲苯（3 V）加入2，000 L搪瓷反应器中并开始搅拌。
- 向溶液中加入212.40千克ACT051-2（1.0当量），106.00千克叔丁基氨基甲酸酯（1.5当量），166.70千克碳酸钾粉（2.0当量），14.10千克黄磷（0.04当量），39.40千克DIPEA（0.5当量）和1.06千克Pd（OAc）2 （0.5%重量）。
- 置换氮气四次，让混合物在氮气保护下加热至85-95°C，搅拌3小时。通过HPLC监测反应，当剩余原料为0.44%时确认反应完成。
- 将反应温度冷却至20-30°C。 分批收集溶液并将其放入125L塑料桶中30分钟。
- 用化学吸滤筒（滤袋孔径为10-15μm）过滤反应溶液，使用硅藻土作为助滤剂，并用甲苯（185.20-370.40kg，1-2V）洗涤滤饼。
- 将滤液收集在搪瓷容器中，并使用循环水真空泵在55-65°C下减压10小时，压力值为-0.095MPa。保持泵工作以保持压力并获得粘稠液体形式的产品化合物。
- 通过泵送甲苯并继续反应使产物蒸发两次。将最终产品浓缩4小时。用柱色谱纯化所得产物，用庚烷和乙酸乙酯（V/V，10/1-3/1）洗脱，得收率98.5%的固体。
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Representative Results
本研究为乌帕替尼的重要中间体ACT051-3提供了放大合成过程（图1和图2）。协议部分（步骤1-3）具体显示了化合物ACT051-2和中间体ACT051-3的革兰氏级合成，中试级千克级合成和放大生产步骤。
在探索化合物ACT051-2的最佳路线的过程中，如 表1所示，发现固体TsCl比液体TsCl（溶解在DMF中，方案步骤3.1）更多地参与反应，并且DMF的量显着减少了近三倍。此外，通过将加入TsCl时混合溶液的温度从0-5°C提高到23-35°C，产物收率从97.49%提高到98.44%（如 表2所示）。此外，还进行了关于处理后水消耗的实验。如 表3所示，用水量减少2.5倍（从15 mL/g ACT051-2降低到6 mL/g ACT051-2）后，反应收率降低了2.5%，但废液生成减少，反应效率显著提高。
通过一系列实验条件得到中间体ACT051-3的优化工艺路线。如 表4所示，通过在反应中引入DIPEA，用叔戊醇/甲苯（V/V，2/3）代替反应溶剂，Pd（OAc）2的用量降低了2.5 倍（从1.28%wt减少到0.5%wt），大大降低了生产成本，进一步提高了扩大生产的可行性。此外，通过改变参与反应的K2CO 3的状态，反应时间从7 h减少到3.5 h，大大提高了反应效率（如 表5所示）。此外，通过从叔戊醇/1，4-二恶烷（V/V，1/4）切换到叔戊醇/甲苯（V/V，2/3），反应时间缩短至3 h，产物峰面积从84.22%增加到88.52%，产物浓缩所需时间显著缩短，提高了反应效率（见 表6）。
两种化合物ACT051-2和ACT051-3均通过质子核磁共振（1H NMR），HPLC和高分辨率质谱进行了化学表征。ACT051-2和ACT051-3的分析方法（HPLC，1 H NMR和电喷雾电离[ESI]光谱）可以在支持工作中找到（补充表1，补充图 1，补充图2，补充图3，补充图4，补充图5和 补充图6）。ACT051-2和ACT051-3的表征数据报告如下：
2-溴-5-甲苯磺酰基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪（ACT051-2）：
1核磁共振（500兆赫，DMSO-d 6）δ8.59（秒，1小时），8.37（d，J = 4.1赫兹，1小时），8.00（d，J = 8.2赫兹，2小时），7.46（d，J = 8.2赫兹，2小时），7.02（d，J = 4.0赫兹，1小时），3.29（d， J = 11.9赫兹，3小时 ）。ESI：计算得出的 C13 H 10BrN3O2S [M] + 352.21，结果为 352.00。
叔丁基（5-甲苯磺酰基-5H-吡咯[2，3-b]吡嗪-2-基）氨基甲酸酯（ACT051-3）：
1核磁共振 （500 MHz，CDCl 3） δ8.98 （s， 1H）， 7.95 （d， J = 8.4 Hz， 2H）， 7.84 （d， J = 4.1 Hz ， 1H）， 7.21 （s， 1H）， 7.19-7.17 （m， 1H）， 6.53 （d， J = 4.1 Hz， 1H）， 2.30 （s， 3H）， 1.45 （s， 9H）. ESI：计算得出的 C 18 H20N 4 O4S [M+H] + 389.12，结果为 389.15。
图1：中间体ACT051-3的合成路线。 （A）优化前ACT051-3的反应路线和条件：i）DMF，DIPEA，TsCl;ii） 黄磷，Pd（OAc）2，K2CO3，叔戊醇/1，4-二恶烷（V/V，1/4）;（B）优化后的ACT051-3反应路线和条件：i）DMF，DIPEA，TsCl;ii） 黄磷，Pd（OAc）2，K 2 CO3，二豌豆，叔戊醇/甲苯（V/V，2/3）。请点击此处查看此图的大图。
图2：化合物ACT051-2和ACT051-3在放大生产中的工艺流程图。 （A）ACT051-2在放大生产中的工艺流程图。（B）ACT051-3在放大生产中的工艺流程图。请点击此处查看此图的大图。
| 数 | 氯化锆的状态 | V（DMF） （实验室测试） | V（DMF） （试点扩大规模） |
| 1 | 溶于二甲基苯甲醚 | 8.5 V | 54 V |
| 2 | 固体 | 3.0 V | 18 V |
表1：不同形式的TsCl对合成化合物ACT051-2的影响。 TsCl的不同状态包括液态TsCl（溶于DMF）和固体TsCl.实验结果表明，固体TsCl更有利于工业化生产。
| 数 | 温度（°C） | 混合条件 | 是否有澄清程序 | 屈服 | 纯度 |
| 1 | 0-5 | 粘性 | 不 | 97.49% | 96.85% |
| 2 | 25-35 | 良好的混合 | 是的 | 98.44% | 96.99% |
表2：在不同温度下添加TsCl对ACT051-2合成的影响。 在0-5°C或23-35°C下向反应中加入TsCl。
| 数 | 耗水量 | 屈服 | 纯度 |
| 1 | 15毫升/克ACT051-1 | 97.49% | 96.85% |
| 2 | 6毫升/克ACT051-1 | 94.90% | 97.69% |
| 3 | 9毫升/克ACT051-1 | 95.07% | 96.71% |
表3：不同处理后耗水量对ACT051-2合成的影响。 尝试不同的处理后耗水量，包括15毫升/克ACT051-1，9毫升/克ACT051-1和6毫升/克ACT051-1。在6 mL/g ACT051-2的后处理水量下达到最佳条件。
| 数 | 相当于迪埃帕 | 相当于 K2CO3 | 相当于 Pd（OAc）2 |
| 1 | 0.0 等量 | 3.0 等值 | 1.28% 重量 |
| 2 | 2.0 等值 | 2.0 等值 | 0.60% 重量 |
| 3 | 1.0 等值 | 2.0 等值 | 0.60% 重量 |
| 4 | 0.5 等值 | 2.0 等值 | 0.60% 重量 |
表4：将DIPEA添加到合成ACT051-3的反应中的影响。 探索DIPEA添加与否对反应的影响。结果表明，引入DIPEA使Pd（OAc）2的含量降低了2.5 倍（从1.28%重量降至0.5%wt）。
| 数 | K2CO3 的状态 | 等效 | 反应时间（h） |
| 1 | 固体 | 2.0 等值 | 7 |
| 2 | 粉末 | 2.0 等值 | 3.5 |
表5：K2CO 3不同状态对合成化合物ACT051-3反应的影响。 选择颗粒状或粉末状的碳酸钾参与反应。
| 数 | 钯（OAc）用量2 | 反应溶剂 | V/V | 反应时间/小时 | 产品峰面积/ % |
| 1 | 0.60% 重量 | 叔戊醇/1，4-二氧六环 | 1-4 | 3.5 | 84.22 |
| 2 | 0.60% 重量 | 叔戊醇/1，4-二氧六环 | 2-3 | 3.5 | 83.34 |
| 3 | 0.60% 重量 | 叔戊醇/甲苯 | 2-3 | 3 | 88.52 |
| 4 | 0.50% 重量 | 叔戊醇/甲苯 | 2-3 | 2.25 | 87.11 |
表6：不同反应溶剂对合成化合物ACT051-3反应的影响。 选择叔戊醇/1，4-二恶烷（V/V，1/4）和叔戊醇/甲苯（V/V，2/3）作为反应溶剂。
补充表1：化合物ACT051-2和ACT051-3的分析方法。 分析化合物ACT051-2和ACT051-3的具体色谱条件，包括仪器、方法名称、液相柱、流动相、柱温、电流速度和波长。 请点击此处下载此文件。
补充图1：ACT051-2的高效液相色谱图。 通过HPLC检测数据结果。 请点击此处下载此文件。
补充图2：ACT051-3的高效液相色谱图。 通过HPLC检测数据结果。 请点击此处下载此文件。
补充图3：ACT051-2的MS谱图。 数据结果通过ESI光谱法检测。 请点击此处下载此文件。
补充图4：ACT051-3的MS谱图。 数据结果通过ESI光谱法检测。 请点击此处下载此文件。
补充图5：ACT051-2的 1H NMR谱图。 使用MestReNova分析数据结果。 请点击此处下载此文件。
补充图6：ACT051-3的 1H NMR谱图。 使用MestReNova分析数据结果。 请点击此处下载此文件。
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Discussion
合成的反应条件，包括反应温度、时间、反应试剂的选择和材料的比例，影响反应的可行性、收率、纯度和生产成本，特别是对于放大生产。
在实验室合成ACT051-2中，液体形式的TsCl（溶解在DMF中;步骤1.1.3）可用于反应;然而，它不适合中试放大合成或工业生产，因为使用液体TsCl进行该反应会增加反应系统中的溶剂量，导致更多的废液。因此，我们选择了固体TsCl进行中试放大和工业化生产的反应（分别为方案的步骤2.1.2和3.1.3），并获得了良好的实验结果，同时牢记环保和绿色化学的概念（表1）。
此外，在中试放大实验中发现，在低温下加入大量TsCl会使反应体系太粘而无法搅拌，导致原料包封的风险。为了解决这种风险，将温度从0-5°C提高到25-35°C（方案的步骤2.1.1或3.1.4），充分搅拌加入固体TsCl，反应溶液体系具有良好的流动性，反应进行顺利（表2）。
此外，ACT051-2的后处理实验需要大量的水（15 mL/g ACT051-1），不适合放大生产实验，产生更多的废液。因此，从环境保护的角度出发，在生产工艺条件的探索中，立即研究了后处理的最佳用水量。如 表3所示，当后处理水量减少到6 mL/g ACT051-1时，实验收率显示出很小的影响，但可以大大提高效率并减少废液的产生。
在探索中间体ACT051-3的工业化生产工艺路线时，我们进行了大量的工艺优化实验，解决了许多结垢问题。在ACT051-3的合成过程中，ACT051-2与Pd（OAc）2和黄磷催化的叔丁基氨基甲酸酯发生布赫瓦尔德-哈特维格偶联反应，得到化合物ACT051-3。Pd（0）是一种活性钯，常用于铃木和布赫瓦尔德16，17，18，19等耦合响应。然而，Pd（II）通常用于催化反应。结果，我们使用胺化合物（DIPEA）将Pd（II）还原为Pd（0），使整个反应的催化系统处于Pd（0）和Pd（II）催化循环中。随着DIPEA的加入，昂贵的催化剂Pd（OAc）2的用量从1.28%大幅降低到0.5%（表4），大大降低了放大生产的成本，进一步加强了该方法的合理性和可行性。
反应时间长会带来大量的副反应并产生杂质，不利于扩大生产规模。通过广泛的实验室研究，发现将碳酸钾的状态从颗粒变为粉末（方案的步骤1.2.2或2.2.2）导致反应时间的适当减少，这更有利于工业生产（表5）。此外，考虑到小规模中试实验中使用的1，4-二恶烷更难浓缩（协议的步骤1.2.1），我们考虑了甲苯和叔丁醇的组合（方案的步骤2.2.1或3.2.2;V/V，2/3），这是较好的浓缩溶剂，作为工业生产的反应溶剂。结果表明，该反应获得了较大的促进速率，缩短了反应时间，提高了反应效率（见 表6）。
综上所述，经过对实验条件的反复探索，最终得到了化合物ACT051-2和ACT051-3的最佳工艺放大条件，该放大生产的工艺流程图如图 2所示。放大生产结果表明，整个过程稳定，产品良率正常（方案步骤3.1.7或3.2.8）。
本研究得到的工业生产路线是一条新的可用路线，也证实了该工艺路线在未来工业生产中的可行性。此外，本研究获得的结果为今后化合物ACT051-2和ACT051-3的工业化生产路线研究提供了一定的技术研究依据。
但是，工艺路线仍有优化和改进的空间，例如TsCl（1.25当量）的量，在ACT051-2的合成中过量，可以进一步减少。此外，在ACT051-3的合成中，只有甲苯可以作为反应溶剂，便于后处理，催化剂Pd（OAc）2 的用量可能会继续减少。上述技术问题可以在今后的工作中进一步研究和探索，以更好地扩大合成化合物ACT051-3的生产。
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Disclosures
作者没有什么可透露的。
Acknowledgments
这里没有要提及的致谢。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 2-bromo-5H-pyrrolo[2,3-b]pyrazine | Nanjing Cook Biotechnology Co., Ltd. | 19120110 | |
| 1,4-dioxane | Liaoning cook Biotechnology Co., Ltd | General Reagent | |
| 1H NMR | Bruker AVIII 500 | ||
| 37% chloride acid molecular grade | NEON | 02618 NEON | |
| 4-toluenesulfonyl chloride (TsCl) | Nanjing Cook Biotechnology Co., Ltd. | AR A2010137 | |
| Anti-Chicken IgY (H+L), highly cross-adsorbed, CF 488A antibody produced in donkey | Sigma-Aldrich | SAB4600031 | |
| Anti-mouse IgG (H+L), F(ab′)2 | Sigma-Aldrich | SAB4600388 | |
| BD FACSCanto II | BD Biosciences | BF-FACSC2 | |
| BD FACSDiva CS&T research beads (CS&T research beads) | BD Biosciences | 655050 | |
| BD FACSDiva software 7.0 | BD Biosciences | 655677 | |
| Bovine serum albumin | Sigma-Aldrich | A4503 | |
| Centrifuge 5702 R | Eppendorf | Z606936 | |
| Circulating water vacuum pump | Guangzhou Zhiyan Instrument Co., Ltd | SHZ-D( ) |
|
| CML latex, 4% w/v | Invitrogen | C37253 | |
| Diatomite | Guangzhou Qishuo Chemical Co., Ltd. | / | |
| Double cone rotary vacuum dryer | Jiangsu Yang-Yang Chemical Equipment Plant Inc | SZE-500T | |
| enamel kettle | Jiangsu Yang-Yang Chemical Equipment Plant Inc | CS-03-002 | 1000L / 2000L |
| heptane | Nanjing Cook Biotechnology Co., Ltd. | General Reagent | |
| HPLC | Guangzhou aoyi Technology Trading Co., Ltd | LC-2030C 3D | |
| Large scale rotary evaporators | Guangzhou Xingshuo Instrument Co.,Ltd. | RE-2002 | |
| Low temperature and constant temperature stirring reaction bath | Guangzhou Yuhua Instrument Co., Ltd | XHDHJF-3005 | |
| Low temperature coolant circulating pump | Guangzhou Jincheng Scientific Instrument Co., Ltd | XHDLSB-5/25 | |
| Megafuge 8R | Thermo Scientific | TS-HM8R | |
| N, N-Diisopropyl ethylamine (DIPEA) | Apicci Pharm | General Reagent | |
| N-dimethylformamide (DMF) | Guangzhou bell Biotechnology Co., Ltd | General Reagent | |
| Octanoid acid | Sigma-Aldrich | O3907 | |
| Pd(OAc)2 | Xi'an Catalyst New Materials Co.,ltd. | 200704 | |
| Phosphate buffered saline | Sigma-Aldrich | 1003335620 | |
| Potassium carbonate (K2CO3) | Guangzhou Zhonghua Trade Co.,Ltd. | General Reagent | |
| Tert amyl alcohol | Nanjing Cook Biotechnology Co., Ltd. | General Reagent | |
| tert-Butyl carbamate | Nanjing Cook Biotechnology Co., Ltd. | General Reagent | |
| Thermo Mixer Heat/Cool | KASVI | K80-120R | |
| toluene | Liaoning cook Biotechnology Co., Ltd | General Reagent | |
| Vacuum drying oven | Guangzhou Yuhua Instrument Co., Ltd | DZF-6090 | |
| Water | / | / | |
| Xantphos | Liaoning cook Biotechnology Co., Ltd | Asp20-44892 |
References
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