يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

استخراج الدم الديناميكي المستمر من قلب الفئران عبر تقنية غسيل الكلى المجهري غير الباضعة

3K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/64531

⸱

سبتمبر 13, 2022

 ,  ,  ,  ,  , 

في هذه المقالة

ملخص

يصف هذا البروتوكول طريقة بسيطة وفعالة لجمع دم قلب الفئران في الوقت الحقيقي والديناميكي باستخدام تقنية غسيل الكلى المجهري.

الملخص

التحليل الديناميكي لمكونات الدم له أهمية كبيرة في فهم أمراض القلب والأوعية الدموية والأمراض المرتبطة بها ، مثل احتشاء عضلة القلب ، وعدم انتظام ضربات القلب ، وتصلب الشرايين ، والوذمة الرئوية القلبية ، والانسداد الرئوي ، والانسداد الدماغي. في الوقت نفسه ، من الضروري اختراق تقنية أخذ عينات الدم المستمرة للقلب في الفئران الحية لتقييم فعالية العلاج الطبي العرقي المميز. في هذه الدراسة ، تم زرع مسبار غسيل الكلى المجهري في الدم في الوريد الوداجي الأيمن للفئران في إجراء جراحي دقيق وغير جراحي. ثم تم جمع عينات دم القلب بمعدل 2.87 نانولتر / دقيقة إلى 2.98 مل / دقيقة عن طريق الاتصال بنظام جمع عينات غسيل الكلى عبر الإنترنت. والأهم من ذلك ، يمكن تخزين عينات الدم المكتسبة مؤقتا في حاويات غسيل الكلى عند 4 درجات مئوية. يضمن برنامج جمع الدم المستمر عبر الإنترنت القائم على غسيل الكلى الدقيق من قلب الفئران إلى حد كبير جودة عينات الدم ، مما يؤدي إلى تقدم وتنشيط العقلانية العلمية للبحث في أمراض القلب والأوعية الدموية الجهازية وتقييم العلاج العرقي من منظور أمراض الدم.

المقدمة

مع تسارع وتيرة الحياة وزيادة الضغط النفسي ، تميل أمراض القلب والأوعية الدموية (CVDs) إلى الحدوث لدى الشباب ومتوسطي العمر وكبار السن 1,2. المراضة والوفيات الناجمة عن الأمراض القلبية الوعائية مرتفعة ، مع خصائص البداية الحادة ، والتقدم السريع ، ومسار طويل من المرض ، مما يؤثر بشكل خطير على سلامة المرضى3. قد يكون حدوث الأمراض القلبية الوعائية مرتبطا ارتباطا وثيقا بالتغيرات في بعض مكونات الدم ، مثل الكوليسترول ودهون الدم وجلوكوز الدم وإنزيمات عضلة القلب وبروتين كيناز K4،5،6. يمكن إدارة حالة المريض ذا....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تمت الموافقة على بروتوكول الحيوان من قبل اللجنة الإدارية لجامعة تشنغدو للطب الصيني التقليدي (رقم السجل: 2021-11). تم تربية ذكور الفئران Sprague Dawley (SD) المحددة الخالية من مسببات الأمراض (8-10 أسابيع ، 260-300 جم) في أقفاص تهوية مستقلة ، مع الحفاظ على بيئة المختبر عند 22 درجة مئوية و 65٪ رطوبة نسبية ، وتم استخدامها في هذه الدراسة. تم الحصول على الحيوانات من مصدر تجاري (انظر جدول المواد). اعتادت جميع الفئران على التغذية التكيفية لمدة 1 أسبوع مع الماء المجاني والنظام الغذائي خلال هذه الفترة.

1. التحضير التجريبي

  1. قم بتجميع المعدات المشاركة في غسيل الكلى الدقيق لأخذ عينات الدم (انظر جدول الم....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

سمح البروتوكول الحالي بالحصول على دم القلب من الفئران الواعية وفقا لمعايير أخذ العينات المحددة في معدات غسيل الكلى الدقيقة. يجب أن تكون عينات الدم الطبيعية حمراء زاهية ، في حين أن الحيوانات المصابة بنقص الأكسجة أو جلطات الدم المحتملة أو مرض فقر الدم قد يكون لها لون أرجواني داكن أو أحمر غامق. العينات التي يتم الحصول عليها من خلال تقنية غسيل الكلى الدقيق في الدم عديمة اللون وواضحة وشفافة ، والتي يمكن استخدامها لتحليل علامات المصل للأمراض المختلفة وتوزيع الدم للأدوية ومستقلباتها من خلال استخدام كروماتوغرافيا سائلة عالية الأ.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

الأمراض القلبية الوعائية هي مرض مزمن شائع في العيادات مع زيادة تدريجية في حدوث في الصين ، ويميل عمر البداية إلى أن يكون أصغر سنا ، مما يسبب قلق وذعر معظم المرضى20,21. كونها السبب الرئيسي للوفاة في العالم ، يمكن أن تؤدي الأمراض القلبية الوعائية إلى احتشاء دماغي وأمراض أخرى عالية الوفيات ، مما يهدد بشكل خطير الحياة الصحية للمرضى22. تحدث الأمراض القلبية الوعائية ، بما في ذلك أمراض القلب الإقفارية ، واعتلال عضلة القلب ، وتصلب الشرايين ، وارتفا.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (82104533) ، ومؤسسة علوم ما بعد الدكتوراه الصينية (2020M683273) ، وقسم العلوم والتكنولوجيا في مقاطعة سيتشوان (2021YJ0175) ومشروع البحث والتطوير الرئيسي لخطة العلوم والتكنولوجيا لمقاطعة سيتشوان (2022YFS0438). وفي الوقت نفسه ، يود المؤلفون أن يشكروا السيد Yuncheng Hong، وهو مهندس معدات أول في TRI-ANGELS D&H TRADING PTE. LTD. (مدينة سنغافورة ، سنغافورة) ، لتقديم الخدمات الفنية لتقنيات غسيل الكلى الدقيق.

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
نظام التخدير الحيوانيRayward Life Technology Co.، LtdR500IE
Animal TemperatureCo.، Ltd69020
مسبار غسيل الكلى المجهري للدم  ؛ CMA الغسيل الكلى المجهري ABT55347
قسطرة  CMA الغسيل الكلى المجهري ABT55347
CitrateMerck Chemical Technology (Shanghai) Co.، Ltdماكينة حلاقة كهربائية 251275
Rayward Life Technology Co.، LtdCP-5200
Fep tubing  CMA الغسيل الدقيق AB3409501
خزان الحركة الحرة للحيوانات  CMA الغسيل الدقيق ABCMA120
الجلوكوزميرك للتكنولوجيا الكيميائية (شنغهاي) المحدودةG8270
ملقط مرقئRayward Life Technology Co.، LtdF21020-16
IsofluranRayward Life Technology Co.، LtdR510-22
مقص مايكروBeyotime Biotechnology Co.، LtdFS221
غسيل الكلى المجهري أنبوب التجميع  CMA الغسيل الدقيق AB7431100
جامع غسيل الكلى المجهري  CMA الغسيل المجهري ABCMA4004
غسيل الكلى المجهري في المختبر  CMA الغسيل المجهري ABCMA130
مضخة الحقن المجهري لغسيل الكلىالمجهري  CMA الغسيل الدقيق AB788130
حقنة غسيل الكلى المجهري (1.0 مل)  CMA الغسيل الدقيق AB8309020
محول أنابيب غسيل الكلى المجهري  CMA الغسيل الدقيق AB3409500
غشاء مرشح صغير يسهل اختراقهMerck Millipore Ltd.R0DB36622
خيوط جراحية غير قابلة للامتصاصشنغهاي Tianqing المواد البيولوجية المحدودةS19004
طاولة التشغيلYuyan Scientific Instrument Co.، Ltd30153
ملقط العيونRayward Life Technology Co.، LtdF12016-15
سترات الصوديومMerck Chemical Technology Co.، Ltd1613859
Sprague Dawley  (SD) الفئرانChengdu Dossy Experimental Animals Co.، LtdSYXK (figure-materials-1) 2019-049
مقص جراحيRayward Life Technology Co.، LtdS14014-15
مقص جراحيشنغهاي Bingyu Fluid technology Co.، LtdBY-103
إبرة حقنة  ؛ CMA غسيل الكلى المجهري ABT55347
منظف بالموجات فوق الصوتيةقوانغدونغ Goote بالموجات فوق الصوتية المحدودةKMH1-240W8101

المراجع

  1. van Rensburg, W. J. J. Post-mortem evidence of a diverse distribution pattern of atherosclerosis in the South African population. Scientific Reports. 12 (1), 11366(2022).
  2. Katz, A. J., Chen, R. C., Usinger, D. S., Danus, S. M., Zullig, L. L.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

الدياليز الدقيق للدمأخذ عينات الدم المستمرأمراض القلب والأوعية الدمويةقسطرة الوريد الوداجيتقنية غير بضعيةالمؤشرات الحيوية في الدممسبار الدياليز الدقيقتحليل أمراض الدمتشخيص الأمراض