Beurteilung der mutmaßlichen Antikryptokokken-Eigenschaften von rohen und geklärten Extrakten aus Mollusken

Davier Gutierrez-Gongora; Fouad Raouf-Alkadhimi; Ryan S. Prosser; Jennifer Geddes-McAlister

doi:10.3791/64540

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Methodenartikel

Beurteilung der mutmaßlichen Antikryptokokken-Eigenschaften von rohen und geklärten Extrakten aus Mollusken

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DOI:

10.3791/64540

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2. Dezember 2022

Davier Gutierrez-Gongora¹ , Fouad Raouf-Alkadhimi¹ , Ryan S. Prosser² , Jennifer Geddes-McAlister¹

¹Molecular and Cellular Biology Department, University of Guelph, ²School of Environmental Sciences, University of Guelph

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Der humane Pilzpathogen Cryptococcus neoformans produziert eine Vielzahl von Virulenzfaktoren (z.B. Peptidasen), um sein Überleben im Wirt zu fördern. Umweltnischen stellen eine vielversprechende Quelle für neuartige natürliche Peptidase-Inhibitoren dar. Dieses Protokoll beschreibt die Herstellung von Extrakten aus Mollusken und die Bewertung ihrer Wirkung auf die Produktion von Pilzvirulenzfaktoren.

Zusammenfassung

Cryptococcus neoformans ist ein verkapselter humaner Pilzerreger mit einer globalen Verbreitung, der vor allem immungeschwächte Individuen infiziert. Der weit verbreitete Einsatz von Antimykotika im klinischen Umfeld, ihre Verwendung in der Landwirtschaft und die Stammhybridisierung haben zu einer verstärkten Entwicklung der Resistenz geführt. Diese steigende Resistenzrate gegen Antimykotika ist ein wachsendes Problem unter Klinikern und Wissenschaftlern weltweit, und es besteht eine erhöhte Dringlichkeit, neuartige antimykotische Therapien zu entwickeln. Zum Beispiel produziert C. neoformans mehrere Virulenzfaktoren, einschließlich intra- und extrazellulärer Enzyme (z. B. Peptidasen), die beim Gewebeabbau, der zellulären Regulation und der Nährstoffaufnahme eine Rolle spielen. Die Störung einer solchen Peptidaseaktivität durch Inhibitoren stört das Wachstum und die Vermehrung von Pilzen, was darauf hindeutet, dass dies eine wichtige Strategie zur Bekämpfung des Erregers sein könnte. Wichtig ist, dass wirbellose Tiere wie Mollusken Peptidase-Inhibitoren mit biomedizinischen Anwendungen und antimikrobieller Aktivität produzieren, aber sie sind in Bezug auf ihren Einsatz gegen Pilzpathogene noch wenig erforscht. In diesem Protokoll wurde eine globale Extraktion aus Mollusken durchgeführt, um potenzielle Peptidase-Inhibitoren in rohen und geklärten Extrakten zu isolieren, und ihre Auswirkungen gegen klassische Kryptokokken-Virulenzfaktoren wurden bewertet. Diese Methode unterstützt die Priorisierung von Mollusken mit antimykotischen Eigenschaften und bietet Möglichkeiten für die Entdeckung von Antivirulenzmitteln, indem sie die natürlichen Inhibitoren von Mollusken nutzt.

Einleitung

Cryptococcus neoformans ist ein humaner Pilzerreger, der bei immungeschwächten Wirten, wie z. B. Personen mit HIV/AIDS¹, schwere Erkrankungen hervorruft und zu etwa 19 % der AIDS-bedingten Todesfälle führt². Der Pilz ist anfällig für mehrere Klassen von Antimykotika, einschließlich Azolen, Polyenen und Flucytosin, die unter Verwendung unterschiedlicher Mechanismen eine fungizide und fungistatische Aktivität ausüben ^3,4. Der umfangreiche Einsatz von Antimykotika in klinischen und landwirtschaftlichen Umgebungen in Kombination mit der....