ここでは、原発性月経困難症のラットを対象に、超高速液体クロマトグラフィー-高分解能タンデム質量分析(UPLC-MS/MS)を使用して、生および処理されたCyperi根腫(CR)サンプルの比較分析を示します。CR処理ラットと酢処理CR(CRV)ラットの血中濃度および試料成分の変化を調べた。
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方法論記事
原発性月経困難症ラットにおける液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法を用いた生および加工されたCyperi根腫サンプルの分析
この記事について
サマリー
要約
サイペリ根腫(CR)は婦人科で広く使用されており、中国の女性の病気を治療するための一般薬です。酢で処理するとCRの鎮痛効果が高まるため、酢で処理したCR(CRV)が臨床で使用されるのが一般的です。しかし、酢加工によって鎮痛効果が高まるメカニズムは不明である。本研究では、超高圧液体クロマトグラフィータンデム質量分析(UPLC-MS/MS)技術を用いて、月経困難症のCR治療ラットとCRV治療ラットの外因性成分および代謝物の血中濃度の変化を調べました。結果は、これらのラットの血液中の15の成分と2つの代謝産物の異なるレベルを明らかにしました。なかでもCRV群の(-)-ミルテノールと[(1R,2S,3R,4R)-3-ヒドロキシ-1,4,7,7-テトラメチルビシクロ[2.2.1]ヘプタ-2-イル]酢酸のレベルはCRV群よりもかなり高かった。CRVは、炎症促進性、血小板凝集性、血管収縮性を有する2系列プロスタノイドおよび4系列ロイコトリエンのレベルを低下させ、アラキドン酸およびリノール酸代謝および不飽和脂肪酸の生合成を調節することにより鎮痛効果をもたらした。本研究により、酢加工がCRの鎮痛効果を高めることが明らかになり、CRVの作用機序の理解に貢献できることが明らかになりました。
概要
原発性月経困難症(PD)は、臨床婦人科で最も一般的な状態です。それは、生殖器系における骨盤病理を伴わない月経前または月経中の腰痛、腫脹、腹痛、または不快感を特徴とする1。その有病率に関する報告は、学生の85.7%がPD2に苦しんでいることを示しました。低用量経口避妊薬が標準治療ですが、深部静脈血栓症などの副作用への悪影響が注目されています3。経口避妊薬使用者の深部静脈血栓症の有病率は女性1,000人あたり>1人であり、リスクは最初の6〜12か月と40歳以上のユーザーで最も高くなります4。
伝統的な漢方薬(TCM)で長い間使用されているCyperi根腫(CR)は、カヤツリグサ科のCyperus rotundus L.の乾燥した根茎に由来します。CRは月経障害を調節し、うつ病や痛みを和らげます5。CRは婦人科で広く使用されており、女性の病気を治療するための一般薬と見なされています6。酢で処理されたCR(CRV)は、通常、臨床的に使用されます。CRと比較して、CRVは月経の調節と痛みの緩和の増強を示します。現代の研究は、....
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プロトコル
すべての動物関連実験は、重慶中医薬研究所の実験倫理委員会の承認を得て実施した。この実験では、8〜10週齢で体重200 g±20 gの24匹の雌のSprague Dawleyラット(SD)を使用しました。
1.抽出の準備
- 計算
- CRまたはCRV抽出物を6匹の治療グループに投与することを計画します スプレイグ・ドーリーラット (10 g /[kg∙日])3日間。1 g / mLのCRまたはCRV抽出物濃度を使用してください(抽出物の1 mLは1 gのハーブから得られます)。
注:CRの投与量は6〜10 gです。この研究では、投与量として最大用量10 gを使用しました。.成人の平均体重は60kgであるため、成人の投与量は0.1667g / kgです。体重変換アルゴリズム24によれば、ヒトとラットとの間の用量変換係数が6.3であるので、ラットに対する投与量は1.05g/kgである。ラットの投与量は10倍の10.5 g / kgに増加しました。.投与量は、計算と実際の実験の便宜のために10 g / kgに設定されました。たとえば、計算では、合計36 gのCRまたはCRVが必要な場合は、漢方薬を少なくとも2回準備する必要があります。したがって、200gのCRが必要であり、CRとして100gのCRを使用し、100gのCRをCRVに加工した。 - 式 (....
- CRまたはCRV抽出物を6匹の治療グループに投与することを計画します スプレイグ・ドーリーラット (10 g /[kg∙日])3日間。1 g / mLのCRまたはCRV抽出物濃度を使用してください(抽出物の1 mLは1 gのハーブから得られます)。
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結果
月経困難症モデル実験の解析
対照群では、これらのラットにオキシトシンと安息香酸エストラジオールを腹腔内注射して痛みを引き起こしなかったため、30分以内に身もだえする反応はありませんでした。.モデル群、CR群、CRV群のラットは、オキシトシン注射後に実質的な身もだえ反応を示した。これらの結果は、月経困難症を誘発するためのエストラジオール安息香酸塩とオキシトシンの組み合わせの有効性を示しています。モデル群と対照群の間のPGF 2α、PGE 2、およびPGF2α/PGE2レベルの差は有意であり(P < 0.001、P < 0.05)、モデルの有効性を実証しました(図1)。
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ディスカッション
TCMの多種多様で性質が異なるため、これらのハーブは臨床診療で機能しないことがあり、これはTCMの不適切な処理とデコッキングが原因である可能性があります。TCMのメカニズムは、現代の科学技術の使用により明らかになりつつあります29,30。この研究は、CRとCRVの両方がPDモデルラットで治療効果があり、CRVの治療効果がより重要であることを示しています。CRVの作用機序は、酢処理が血液に吸収されるCRの成分に影響を与え、リノール酸代謝と不飽和脂肪酸の生合成に関連している可能性があるという事実に関連している可能性があります。図10は、疼痛緩和におけるCRVの作用の潜在的な経路を示しています。
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開示事項
著者は、競合する経済的利益はないと宣言しています。
謝辞
この作業は、重慶市健康家族計画委員会中国医学科学技術プロジェクト(プロジェクト番号:ZY201802297)、重慶自然科学財団の一般プロジェクト(プロジェクト番号:cstc2019jcyj-msxmX065)、重慶近代山岳地域特性高効率農業技術システムイノベーションチーム構築計画2022 [10]、および重慶市衛生健康委員会中国マテリアの主要規律建設プロジェクトによって支援されました。 メディカ処理。
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材料
| 名前 | 会社 | カタログ番号 | コメント |
|---|---|---|---|
| アセトニトリル | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | 197164 | |
| BECKMAN COULTER Microfuge 20 | Beckman コールター株式会社 | ||
| エストラジオール安息香酸 | 上海マックリン生化学Co.、株式会社 | C10042616 | |
| ギ酸 | フィッシャーサイエンティフィック、ピッツバーグ、ペンシルバ | 177799 | |
| LC 30Aシステム | 島津製作所、京都、日本 | 228-45162-46 | |
| オリーブオイル | 上海元業バイオテクノロジー株式会社 | H25A11P111909 | |
| オキシトシン合成 | 浙江省ペプチド生物学有限公司 | ||
| ラットPGF2α ELISAキット | Shanghai lmai Bioengineering Co., Ltd | 202101 ラット | |
| PGFE2 ELISAキット | Shanghai lmai Bioengineering Co., Ltd | EDL202006217 | |
| SPF Sprague-Dawley rats | Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd | 認証番号 SCXK (湖南省) 2019-0004 | |
| Tecan Infinite 200 PRO | Tecan Austria GmbH, Austria | 1510002987 | |
| Triple TOF 4600 system | SCIEX, Framingham, MA, USA | BK20641402 | |
| water | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | 152720 |
参考文献
- Yu, W. Y., et al. Acupuncture for primary dysmenorrhea: A potential mechanism from an anti-inflammatory perspective. Evidence-Based Complementary and Alternative. 2021, 1907009(2021).
- Rafique, N., Al-Sheikh, M. H.
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再版と許可
