Summary
Detta protokoll visar steg-för-steg-detaljer om hur man extraherar den mandibulära första molaren i musen. Det ger en alternativ metod för forskare som fokuserar på käkbenläkning och regenerering.
Abstract
Denna studie introducerar utvecklingen av en molär extraktionsmodell i murin underkäke för att ge en praktisk modell för att studera alveolär benregenerering och intramembranös benbildning. C57 / J6-möss användes för att extrahera den mandibulära första molaren för att etablera denna modell. De avlivades och de bilaterala mandiblarna skördades vid 1 vecka respektive 4 veckor efter operationen. Efterföljande seriell stereoskopisk skörd, histologisk bedömning och immunofluorescensfärgning utfördes för att visa framgångsrik operation. Omedelbart efter operationen visade de stereoskopiska bilderna ett tomt extraktionsuttag. Hematoxylin och eosin (H&E) vid 1 vecka och Massonfärgning vid 4 veckor efter operationen visade att området för den ursprungliga roten var delvis respektive helt fylld med bentrabeculae. Immunofluorescensfärgningen visade att jämfört med homeostassidan ökade Sp7-uttrycket vid 1 vecka efter operationen, vilket tyder på kraftig osteogenes i den alveolära fossan. Alla dessa resultat visade en praktiskt genomförbar murin tanduttag socket healing modell. Kommande studier som avslöjar mekanismerna för läkning av käkbendefekter eller socketläkning kan anta denna metod.
Introduction
Socketläkning efter tanduttag är ett vanligt kliniskt scenario, vilket kan leda till obehagliga komplikationer som sockelblödning, torr socket eller till och med käkosteomyelit under oönskad läkning 1,2,3. Dessa comorbiditeter kan försämra patienternas livskvalitet och, ännu värre, utmana protesrehabilitering på grund av massiv benförlust4. Även om sockelläkningsstadierna har belysts är de otillräckliga för att styra klinisk vård efter tanduttagskirurgi när de stöter på olika prognosutmaningar4.
Flera studier baserade på djurmodeller har genomförts för att få en bättre förståelse för de underliggande mekanismerna i socketläkningsprocessen och avvärja ovanstående situationer. Sp7 är en huvudregulator inom osteoblastdifferentiering och spelar en viktig roll i skelettutveckling, benhemostas och benregenerering 5,6. Rationella socketläkningsmodeller kan visa redundansen av Sp7 posttraumatisk vid benregenerering. Dessutom, till skillnad från läkning av långa benfrakturer, involverar endast en enda osteogen process, intramembranös benbildning, läkningsprocessen för extraktionsuttaget7. Detta gör djurtanduttagsmodellen optimal för att studera implantatbaserade terapier, eftersom implantatosseointegration följer samma osteogena regel8.
I årtionden har tanduttagsmodellen utförts hos råttor, kaniner och hundar, eftersom dessa arter har stora tänder som är praktiska att använda på 9,10,11. Men med tanke på de blomstrande kraven på genetisk modifiering och som en mer adaptiv genetisk bakgrund för människor används möss alltmer för att etablera en tanduttagsmodell. Därefter kunde forskare avslöja en specifik cellpopulations roll i socketläkningsprocessen med hjälp av genommodifierade möss istället för att observera fenotyper endast12. Bland hylsmodeller för utsugning av murina tänder har tidigare studier visat etablering och läkningsprocess av murina maxillära tand- och framtändextraktionsuttag13,14,15,16. Prognosens läkningsmönster och detektiv- och observativa tidpunkter kan dock skilja sig åt mellan protokoll. Detta vädjar till ett universellt kriterium för forskare att upprätta en murin socket healing modell.
Denna studie syftade till att utgöra en praktiskt genomförbar murin socket healing modell för ovanstående frågor. Mandible molars hos möss har distinkta morfologiska egenskaper jämfört med maxillära molar och snedställningar, vilket ger unika fördelar och nackdelar. Eftersom modellerna som fokuserar på murin underkäke för närvarande är vakuumbaserade, försökte detta protokoll tillhandahålla en fulländad metod för att extrahera den mandibulära första molaren i möss. Vi hoppas att detta protokoll kommer att upplysa grundforskare med nya idéer för att avslöja underliggande mekanismer för socketläkning och indikera klinisk vård.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alla djurförsök i denna studie granskades och godkändes av den etiska kommittén vid West China School of Stomatology, Sichuan University (WCHSIRB-D-2017-041). Vuxna C57BL/6-möss, erhållna från en kommersiell källa (se materialförteckning), användes för den aktuella studien.
1. Prekirurgisk förberedelse
- Förberedelse av instrument
- Förbered olika nålar med engångssprutor (26G, 25G, 23G; se materialtabell) som ska användas som hissar. Böj nålhuvudet ca 20°-40°, såsom visas i figur 1.
- Förbered tandad oftalmisk pincett som pincett. Se till att den passar storleken på mössens kindtänder och kan ta tag i kindtänderna ordentligt. Den ideala pincettstorleken visas i figur 1A, B3.
- Skaffa ett gummiband (som kan rivas från en medicinsk latexhandske) som ska användas som munöppnare, en skumplatta eller korkbräda som kirurgisk plattform, en pannlampa för att lysa upp det kirurgiska området och en värmedyna för postoperativ väckelse. Riv en torr bomullstuss i små bitar och applicera den på operationsområdet om blödning uppstår under proceduren.
- Förberedelse av anestesi
- Musen kan bedövas med något lämpligt bedövningsprotokoll som uppnår generell anestesi bekräftad genom "tåklämman" -metoden. Efter anestesi, applicera veterinärsalva på musens ögon.
OBS: Föredraget narkosprotokoll kan vara: induktion och underhåll med xylazin (10 mg / kg) och ketamin (100 mg / kg) intraperitonealt (IP);
I denna studie användes isofluran och 1% pentobarbitalnatrium (50 mg/kg, IP) för anestesiinduktion och underhåll med ytterligare doser efter behov.
- Musen kan bedövas med något lämpligt bedövningsprotokoll som uppnår generell anestesi bekräftad genom "tåklämman" -metoden. Efter anestesi, applicera veterinärsalva på musens ögon.
- Desinfektions- och steriliseringspreparat
- Desinficera driftplattformen och utomhusluften med en 75% etanolspruta. Före varje musprocedur rekommenderas användning av en ny uppsättning engångsnålar.
OBS: Den tandade pincetten är återanvändbar och kan steriliseras med vilken metod som helst som ångsterilisering.
- Desinficera driftplattformen och utomhusluften med en 75% etanolspruta. Före varje musprocedur rekommenderas användning av en ny uppsättning engångsnålar.
2. Kirurgisk process
- Fixering av musen och dess underkäke
- Bind musen till en kirurgisk plattform i ryggläge med tejp. Fäst två 26 G nålar i linje med orbitalörat och ytterligare två 26 G nålar i lugn och ro under underkäken.
- Applicera gummibandet runt nålarna och korsa framtänderna för att hålla munnen öppen. Dra lätt ut tungan och fixera den under gummibandet mittemot den kirurgiska sidan för att förhindra att den hindrar synfältet (figur 1C).
- Eliminera det distala motståndet
- Håll molaren med pincett mesialt, tvinga in en 23 G nål i det buckala alveolära benet i distala roten och gör ett intervall.
OBS: Detta steg måste tas med stor försiktighet, eftersom en nål som är inbäddad för djupt sannolikt kommer att knäppa roten. - Byt sedan till en 25 G nål för att fortsätta att expandera intervallet och gå försiktigt mot det periapikala området medan du långsamt roterar nålen framåt och lingualt (med musens anatomiska position) för att trycka roten ur den alveolära fossan.
- Håll molaren med pincett mesialt, tvinga in en 23 G nål i det buckala alveolära benet i distala roten och gör ett intervall.
- Eliminera mesialresistensen
- När det finns tillräckligt med utrymme, använd en 23 G nål för att sätta in i rotgaffeln och lyft molaren ocklusalt. Efter att ha hållit molaren tätt, ta ytterligare en 23 G nål och tvinga den in i det linguala mesiala periodontala membranet för att skapa ett intervall.
- Ersätt sedan med en 25 G nål och rotera långsamt framåt och buckalt. Om några underliggande hinder hindrar molarens luxation, använd en 26 G nål för att tränga in i rotspetsen och upprepa operationerna.
- Slutlig extraktion
- Extrahera tanden och, medan du extraherar, se till att kronan stiger högt över ocklusalplanet och att två intakta rötter tydligt kan ses.
OBS: Luxationen (dislokationen) av tanden anses vara det mest smärtsamma och oroande ögonblicket i proceduren. Innan tanden förskjuts bör bedövningsdjupet omprövas med hjälp av tåklämtestet, och följaktligen bör en måttlig dos av ett bedövningsmedel administreras vid behov.
- Extrahera tanden och, medan du extraherar, se till att kronan stiger högt över ocklusalplanet och att två intakta rötter tydligt kan ses.
- Postoperativ vård
- Efter att ha extraherat tanden, applicera torr bomull för att stoppa blödningen, flytta tungan, administrera karprofen (5 mg / kg) subkutant och sätt musen på en värmedyna med konstant temperatur tills återhämtning från anestesi.
3. Avbildning av musunderkäken och extraktionsuttaget
- Beredning av proverna
- Eutanize musen genom cervikal dislokation. Använd oftalmisk sax för att klippa skelettmusklerna som är fästa vid underkäken och den zygomatiska bågen. Skär från halsen längs underkäkens nedre kant till den stigande grenen och sedan till kondylens baksida och dra sedan underkäken ner och skär längs den nedre snittmittlinjen. På så sätt skördas de två separata mandiblarna.
- Utför fixering, demineralisering och uttorkning enligt standardproceduren17. Vid inbäddning17, se till att ocklusalplanet är parallellt med kassettens kant (se Materialförteckning). Fäst underkäken på kassettens undersida med dess nedre kant fastspänd (figur 2).
OBS: Detta protokoll erbjuder sagittalplanet för underkäkens område.
- Fixering av provet på mikrotomen
- Reglera provklämman i mikrotomen för att skjuta ut kondylen och kronsidan ytterligare 5°-20° för att uppnå en integrerad bild av kronmassa samtidigt med rotmassa (figur 2).
- Förbereda avsnitten
OBS: Kondylen är alltid den första anatomiska strukturen som skärs. När det bleknar bort kan molområdet skäras i flera skivor.- Flytta mikrotomområdet till 5 μm, samla var åttonde skiva och leta efter dentin i den sista skivan. Om krondentinet först visas utan något rotapikalt dentin, justera provklämman så att rotområdet sticker ut och vice versa.
- Samla avsnitten
OBS: Skärvinkeln är lämplig tills dentinet uppnås lika i både kronan och apikalområdet.- Skär längs denna riktning och titta på skivorna under mikroskopet tills tandmassan visas i både kronan och rötterna. Samla sektionerna när en dunkel kontur av molar uppträder på ytan av paraffinprovet17.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
För att belysa den praktiska användningen av denna metod extraherades den högra mandibulära första molaren av två friska C57BL / 6-möss (3 månader gamla, båda kvinnliga) och följdes i 1 vecka respektive 4 veckor. De oskadade vänstra mandiblarna användes som friska kontroller. Figur 1A visar de specifika egenskaperna hos den kirurgiska apparaten, inklusive 26-23 G nålar och en tandad oftalmisk pincett. 26 G-nålen är nålborttagen och böjd. 25 G-nålen är böjd vid cirka 25° vid nålpunkten. 23 G-nålarna är grundbulten för operationen och är böjda vid cirka 25 ° respektive 35 ° vid nålpunkten (figur 1B1, B2). Pincetten har en 1 mm lång tand som passar formen på murina molarer (figur 1B3). Figur 1C visar musens tillstånd före operationen. De viktigaste punkterna är placeringen av de fyra stiften runt huvudet och fixering av tungan under gummibandet till vänster.
Figur 3A visar positionen och morfologin för den högra mandibulära första molaren. Figur 3B visar att tanduttaget omedelbart fylls med propp efter extraktion. Vid 1 vecka och 2 veckor avlivades mössen och mandiblarna demineraliserades, inbäddades i paraffin17 och snittades i skivor. Figur 4A visar läkningsprocessen för sockeln vid 1 vecka. Några svampliknande trabekulära ben bildades, men blodproppen kvarstod. I läkningsprocessen vid 2 veckor (figur 4B) var sockeln helt fylld med svampben, vilket innebär att regenereringen var ungefär avslutad. Immunofluorescensfärgningen (IF) bekräftade också resultaten av histopatologisk färgning. I figur 5 uttrycktes Sp7 i stor utsträckning i benmärgscellerna, särskilt i marginalen, som är den benbildande fronten. Under homeostastillståndet var de trabekulära benen konsekventa och sammanflytande, med benmärgscellblock ströda som öar. Men vid 1 vecka efter operationen fyllde många Sp7-uttryckande celler extraktionsuttaget, med nybildat trabekulärt ben strö runt. Vid 4 veckor efter operationen vände tillståndet och vände sig till i stort sett sammanslaget trabekulärt ben igen, och aktiviteten hos Sp7-uttryckande celler minskade till en nivå som närmade sig homeostastillståndet.
Figur 1: Objektbilder av kirurgiska apparater och kirurgiberedda möss . (A) De kirurgiska apparaterna bestod huvudsakligen av 26, 25 och 23 G nålar och en tandad pincett. (B) Nålarna böjdes vid nålpunkten vid 20°-40° (B1,2). Pincettens tand måste vara ungefär 1 mm stor (B3). Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 2: Flödesschemat för proceduren från tanduttag till sektionering. Denna bild visar ett schematiskt flöde från tanduttag till sektionering. Den högra mandibulära första molaren extraherades enligt protokollet, sedan avlivades musen och underkäken skördades. Vid skörd blötläggdes underkäken i 4% POM i 24 timmar och blötläggdes sedan igen i 10% EDTA; Vätskan förnyades varje dag i 14 dagar. Därefter dehydrerades proverna och inbäddades i paraffin enligt ett universellt protokoll. Den buckala eller språkliga sidan måste vara vänd nedåt, eftersom sagittalplanskivor ska vara sektionerade. Slutligen, när provet fixeras på provklämman, måste kondyl- och kronsidorna vara 5°-20° utskjutna. Förkortningar: POM = paraformaldehyd; EDTA = etylendiamintetraättiksyra. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 3: Stereoskopiska bilder av musens underkäke första molar och extraktionsuttaget. (A) Stereoskopisk bild av den högra underkäkens första molar, indikerad med den gula pilen. (B) Extraktionshylsan på den första högra underkäkens molära molar efter operationen, indikerad med den gula pilen. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 4: H&E-färgning. H&E-färgning av extraktionshylsan vid (A) 1 vecka och (B) 4 veckor efter operationen. De gula pilarna indikerar den mandibulära andra molaren i närheten av den första molära extraktionsuttaget. Den streckade rektangellinjen indikerar det helande första molära extraktionsuttagsområdet. Skalstänger: 500 μm. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 5: Detektion av Sp7 via IF-färgning. Denna bild visar fördelningen av Sp7-uttryck i musens benmärgsceller och det omgivande trabekulära benet under ett homeostastillstånd (frisk kontroll), 1 vecka respektive 4 veckor efter operationen. Den vita streckade linjen konturerade den uppskattade skalan av trabekelbenet. De gula pilarna indikerade de typiska Sp7-uttryckande cellerna. Skalstänger: 50 μm. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Murina socket healing modellen är en viktig metod för att avslöja de underliggande mekanismerna i benläkning och regenerering, vilket i slutändan löser kliniska utmaningar. Befintliga studier har visat möjligheten av framtändernas extraktionsmodell och den maxillära molära extraktionsmodellen, medan studier inte har använt den mandibulära första molära modellen13,17,18. Framtänder är dock avgörande för gnagarlivet, och deras nedsättning kan vara dödlig. Dessutom, eftersom benet i maxillan är mer cancelöst än underkäken, kan det finnas viss olikhet i de underliggande mekanismerna under läkningsprocessen. Därför är det nödvändigt att upprätta en genomförbar mandibulär första molära extraktionsmodell.
Det viktigaste övervägandet vid tanduttag är att undvika rotbrott19. Murina molar är små och sårbara, och reströtterna i underkäken kan inte extraheras. I detta protokoll finns dock den rotbrytande risken under hela operationen. Således är det viktigt att hålla molaren tätt och noggrant kontrollera kraften. För att vara specifik, när man eliminerar det distala motståndet, måste man vara försiktig så att man inte krossar kronan; när man eliminerar mesialmotståndet måste man vara försiktig så att nålen inte stiger från rotgaffeln; När man använder nålar för att göra intervall är det viktigt att komma ihåg att intervallen ska mellan roten och den alveolära processen, därför bör man inte tillämpa mycket rotationskraft, eftersom detta kan leda till en hög risk för att roten bryts.
Att extrahera murina mandibulära första molar är svårt och behöver tillräcklig utbildning för att behärska. Under operationen kan nödsituationer inklusive men inte begränsat till följande inträffa: (1) tandutdragningsinstrument tenderar att glida och sticka mjuka vävnader runt på grund av rörligheten i underkäken och tungan, vilket kan orsaka mild till svår blödning. I det här fallet kan man deponera en ren torr bomullstuss i munnen, släppa gummibandet och låta det stängas spontant ett tag. Kompression för att stoppa blödning rekommenderas inte, eftersom detta kan orsaka bredare rivsår och blödning. (2) Operatörer konfronteras ofta med ett binärt val på alveolär benplattreservation eller molär rotreservation, eftersom de första molarna är tätt förenade med underkäken. För att lindra denna bindningskraft kan operatören bryta den linguala eller buckala benplattan; Annars leder en våldsam rotationskraft i hylsan till att roten (erna) bryts. Om man väljer att bevara benplattan beror på forskningsmålet. (3) Att extrahera den mandibulära första molaren kan vara mer traumatisk än maxillary första molaren eller framtänderna. Vi föreslår att du tittar med granskning tills musen vaknar efter operationen. (4) Den mesiala roten av den mandibulära andra molaren är sårbar på grund av det begränsade operationsrummet i buccalområdet; Ibland kan även kronan på den andra molaren förstöras. Eftersom frånvaron av den andra molaren inte påverkar observationen av den första molära extraktionsuttagets läkning, kan denna olycka ignoreras. (5) Övervaka musens anestesidjup noga under tanduttaget, eftersom detta är ett smärtsamt förfarande för både människor och gnagare. Administrera anestesimedel efter behov för att upprätthålla ett kirurgiskt anestesiplan tills extraktionen är klar. Dessutom kan långvarigt tryck från gummibandet orsaka syrebrist i tungan, kännetecknad av bleka membran. Operationerna måste stoppas omedelbart i sådana fall, med instrument avlägsnade, så att musen får tid att återhämta sig.
Sammantaget kan okvalificerade aktörer oavsiktligt orsaka oavsiktliga skador på mössen, enligt förteckningen i punkt 1. För att säkerställa säkerheten och välbefinnandet hos alla försöksdjur förespråkas det starkt att riklig övning utförs på murina kadaver innan man behärskar denna färdighet och utför levande procedurer på faktiska möss.
Även om detta protokoll ger en alternativ metod för forskare som fokuserar på käkbenläkning och regenerering, har det flera nackdelar. (1) Underkäken kan inte fixeras och har stor flexibilitet. Som ett resultat är hissar svåra att hålla en stadigt verkande punkt på det alveolära benet, vilket orsakar vissa nödsituationer. (2) Vuxna hanmöss har intensifierade underkäksben, så det kan vara svårt att eliminera mesialresistensen. (3) Detta protokoll är inte tillämpligt på extraktion av vänster underkäke första molar.
Sammanfattningsvis, även om detta protokoll har visat detaljerna för att extrahera den murina mandibulära första molaren, behöver operatörerna fortfarande mycket övning och försiktighet för att utföra en framgångsrik operation.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Alla originaldata och bilder ingår i detta dokument. Författarna förklarar ingen intressekonflikt.
Acknowledgments
Detta arbete stöds av National Natural Science Foundation of China 81825005 (L.Y.), 82201045 (F.Y.) och 82100982 (F.L.), och av Sichuanprovinsens vetenskaps- och teknikprogram 2021JDRC0144 (F.L.), 2022JDRC0130 (F.Y.).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 23/25/26 G needle | Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD. | SB1-074(IV) | |
| C57/B6J | Gempharmatech Experimental Animals Company, Chengdu, China | C57/B6J | |
| DAPI Staining Solution | Beyotime | Cat#C1005 | |
| Embedding Cassettes | CITOTEST Scientific | 80106-1100-16 | |
| Hematoxylin and Eosin Stain Kit | Biosharp | BL700B | |
| Isoflurane | RWD Life Science Co.,Ltd | R510-22-10 | |
| Masson’s Trichrome Stain Kit | Solarbio | G1340 | |
| Microtome | Leica | RM2235 | |
| Pentobarbital Sodium | Huaxia Chemical Reagent Co., Ltd | 2018042001 | |
| Rabbit polyclonal | anti-Sp7 | Abcam Cat# ab22552 | |
| Tweezers | Chengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD. | SB2-115 |
References
- Mamoun, J. Dry socket etiology, diagnosis, and clinical treatment techniques. Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons. 44 (2), 52-58 (2018).
- Laraki, M., Chbicheb, S., El Wady, W.
- Soundia, A., et al. Osteonecrosis of the jaws (ONJ) in mice after extraction of teeth with periradicular disease. Bone. 90, 133-141 (2016).
- Araújo, M. G., Silva, C. O., Misawa, M., Sukekava, F. Alveolar socket healing: what can we learn. Periodontology 2000. 68 (1), 122-134 (2015).
- Hojo, H., Ohba, S. Sp7 Action in the skeleton: its mode of action, functions, and relevance to skeletal diseases. International Journal of Molecular Sciences. 23 (10), 5647 (2022).
- Zhou, X., et al. Multiple functions of Osterix are required for bone growth and homeostasis in postnatal mice. Proceedings of the National Academy of Sciences. 107 (29), 12919-12924 (2010).
- Ito, S., et al. Pathological differences in the bone healing processes between tooth extraction socket and femoral fracture. Bone Reports. 16, 101522 (2022).
- Vasak, C., et al. Early bone apposition to hydrophilic and hydrophobic titanium implant surfaces: a histologic and histomorphometric study in minipigs. Clinical Oral Implants Research. 25 (12), 1378-1385 (2014).
- Araújo, M. G., Lindhe, J. Dimensional ridge alterations following tooth extraction. An experimental study in the dog. Journal of Clinical Periodontology. 32 (2), 212-218 (2005).
- Kim, I. -S., Ki, H. -C., Lee, W., Kim, H., Park, J. -B. The effect of systemically administered bisphosphonates on bony healing after tooth extraction and osseointegration of dental implants in the rabbit maxilla. The International Journal of Oral & Maxillofacial Implants. 28 (5), 1194-1200 (2013).
- Kanyama, M., et al. Connective tissue growth factor expressed in rat alveolar bone regeneration sites after tooth extraction. Archives of Oral Biology. 48 (10), 723-730 (2003).
- Zhou, S., et al. The role of IFT140 in early bone healing of tooth extraction sockets. Oral Diseases. 28 (4), 1188-1197 (2022).
- Apaza Alccayhuaman, K. A., et al. FasL is required for osseous healing in extraction sockets in mice. Frontiers in Immunology. 12, 678873 (2021).
- Avivi-Arber, L., Avivi, D., Perez, M., Arber, N., Shapira, S. Impaired bone healing at tooth extraction sites in CD24-deficient mice: A pilot study. PLoS One. 13 (2), 0191665 (2018).
- Vieira, A. E., et al. Intramembranous bone healing process subsequent to tooth extraction in mice: micro-computed tomography, histomorphometric and molecular characterization. PLoS One. 10 (5), 0128021 (2015).
- Min, K. -K., et al. Effects of resveratrol on bone-healing capacity in the mouse tooth extraction socket. Journal of Periodontal Research. 55 (2), 247-257 (2020).
- Yu, F., Li, F., Zheng, L., Ye, L. Epigenetic controls of Sonic hedgehog guarantee fidelity of epithelial adult stem cells trajectory in regeneration. Science Advances. 8 (29), (2022).
- Kuroshima, S., et al. Transplantation of noncultured stromal vascular fraction cells of adipose tissue ameliorates osteonecrosis of the jaw-like lesions in mice. Journal of bone and Mineral Research. 33 (1), 154-166 (2018).
- Ahel, V., et al. Forces that fracture teeth during extraction with mandibular premolar and maxillary incisor forceps. The British Journal of Oral & Maxillofacial Surgery. 53 (10), 982-987 (2015).
