Name: מעקב מיקרוביאלית זיהום בסביבות קמעונאיות באמצעות פלורסנט אבקה - קמעונאות מעדני סביבת דוגמא (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-03-05T17:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 49 s
Description: למדו מעקב אחר זיהום חוצה של Listeria monocytogenes בסביבות קמעונאיות באמצעות אבקה פלורסנטית. שיטה זו מאפשרת זיהוי וכימות מהיר של מסלולי הדבקה במטבחי דליקטסן לשיפור בטיחות המזון.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מבקשים להודות לכל הסטודנטים במעבדה בטיחות מזון ומתנדבים שסייעו בעבודה זו. מחקר זה מומן על ידי מענק של משרד חקלאות אמריקנית הלאומית משולבת בטיחות מזון היוזמה (NIFSI) (פרס # 10,507,316).

1. עקומת סטנדרט <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שוקל אבקת ניאון 37.5 מ&quot;ג ולהתמוסס ב6 מיליליטר 200 אתנול הוכחה. הפוך דילולים סדרתי פי 2 מפתרון זה ב200 אתנול הוכחה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבולת את כל הדגימות ל10 שניות ולמדוד את הספיגה ב 370 ננומטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחשב את כמות אבקת ניאון לכל 1 מיליליטר 200 אתנול הוכחה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את עקומת הסטנדרט (ריכוז ב/ מיליליטר מ&quot;ג על ציר ה-Y והספיגה ב 370 ננומטר על ציר ה-x) כדי להדגים את הספיגה המבוססת על ריכוז אבקת ניאון. </li></ol> 2. לחסן מעדניית בשר (בולוניה) עם אבקת פלורסנט <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים את הבשר למעדנייה כ 100 מ&quot;מ דגימות עבות בעזרת סכין נקי וקרש חיתוך. הכן שלוש דגימות שכותרתו A, B, ו-C </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדגם מעיל באופן שווה עם אבקת ניאון באמצעות ספוג לח מעט, נקי. מורחים את האבקה על מדגם הבשר באופן שווה. לא לחסן דגימות B ו-C עם אבקת הניאון. </li&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> עטוף את הדגימות בניילון נצמד ותווית המדגם מצופה אבקת ניאון כמו א &#39;ונותר שתי דגימות כB ו-C עם קלטת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את הדגימות במקרה המעדנייה או במקרר שנערך ב 4 ° C במטבח המדומה שבו הניסוי יבוצע. </li></ol> 3. מוק מעדניית מטבח הכנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לספק כפפות נקיות ו70% תרסיס אתנול במטבח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הר אורות פלורסנט קומפקטי שחורים עם 13 נורות W סביב אזור המבצע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן 5 ס&quot;מ X 5 ס&quot;מ חיתוך של נייר אלומיניום, כדי לשמש כתבנית לשטיפה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן 15 מיליליטר צינורות המכילים 6 מיליליטר אתנול 95%. </li></ol> 4. הגדרת וידאו הר שלוש מצלמות וידאו במקומות אסטרטגיים כדי לשמור על כל תחומי המעדנייה מדומה באותו הזמן. הפעל את המצלמות לפני שמדמה את הליך מבצעה (כפי שהוסבר בפרוטוקול 5) ולנתח את התוצאות בו זמנית (כפיהסביר ב -7 לפרוטוקול). 5. מדמה נהלי מעדניית חיתוך כדי לעקוב אחר צלב זיהום על מנת לשפר את גודל מדגם ולשלב וריאציה, לבצע מחקר זה על ידי משתתפי גיוס לאחר אישור הפרוטוקול על ידי דירקטוריון סקירה המוסדית של המוסד המתאים. המשתתף יכול להיות סטודנט אשר עשוי או לא עשוי להיות ניסיון בעבודה בסביבות מעדנייה הקמעונאי. ודא כי כל משתתף לובש כפפות ברגע שהם נכנסים למעדנייה. קח את &quot;לפני&quot; תמונה תחת אור הניאון השחור ואחריו &quot;אחרי&quot; תמונה עם השלמת המחקר. לספק הוראות בכתב ובעל פה ברורה לכל משתתף באופן הבא: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור למקרר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את הבשר שכותרתו &quot;&quot;. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגולל בשר ולשמור בניילון נצמד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים בשר על מגש כרכרה של מבצעה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Secure בשר עם אחיזת בשר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להפעיל מתג הפעלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם SLIידית מדד CER ל&quot; 2 &quot;. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פורסים ולוותר על 5 חתיכות של בשר על גבי נייר מעדנייה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל מתג כיבוי ולשחרר את אחיזת בשר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים פרוסות בשר בשקית ניילון שכותרתו &quot;&quot;. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Rewrap בשר &quot;&quot; ולחזור למקרר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלבי 2-11 עם בשר שכותרתו &quot;B&quot; ו &quot;C&quot;. </li></ol> 6. פלורסנט אבקת כימות לכמת את אבקת הניאון לאחר השלמת החיתוך המדומה (סעיף 5.4) במטבח המעדנייה. לשם כך בצע את הפעולות הבאות: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש x 5 תבנית סטרילי 5 סנטימטר סנטימטר רדיד האלומיניום ומניח אותו על האזורים המסומנים באיור 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש במטלית הכותנה אלגינט סידן סטרילי הספוגה ב95% אתנול, ספוגית באזור, ומקום ב6 אתנול מיליליטר 95% בצינור פוליפרופילן סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מערבולת הצינור ביסודיות והעברה לקובט זכוכית לקרוא את הספיגה ב 370 ננומטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עיין בstandarעקומת ד כדי לקבוע את כמות אבקת ניאון (Y) באמצעות המשוואה הבאה: y = mx + b כאשר x הוא ספיגה, מ &#39;הוא השיפוע של העקומה סטנדרטית, ואילו b הוא ליירט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנורמליזציה של נתונים, לחשב את האחוזים של אבקת ניאון לכל אזור נדגמו באמצעות הנוסחה הבאה: </li></ol><img src="/files/ftp_upload/51402/51402eq1.jpg" alt="פורמולה 1" /> 7. ניתוח וידאו קלטת וידאו את המשתתפים כלהשלים משימות שהם 5.1-5.12. לסנכרן ולשמור את קלטות וידאו לתקליטורי DVD, כך שניתן להציג את כל הזוויות באותו הזמן. צפה בסרטוני הווידאו כדי להקליט את מספר נגיעות יד (את מספר הפעמים מתנדבים לגעת אזורים במעדנייה מדומה) על משטחים שונים בסביבת המעדנייה (4 חוקרים שונים ינתחו את הנתונים מלאים להגדיר באופן עצמאי).

<ol><li>Sheen, S., Hwang, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mathematical+modeling+the+cross-contamination+of+Escherichia+coli+O157%3A+H7+on+the+surface+of+ready-to-eat+meat+product+while+slicing%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Mathematical modeling the cross-contamination of Escherichia coli O157: H7 on the surface of ready-to-eat meat product while slicing.</a> Food Microbiol. 27, 37-43 (2010).</li>
<li>Crandall, P., Neal, J. Jr, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimizing+the+risk+of+Listeria+monocytogenes+in+retail+delis+by+developing+employee+focused%2C+cost+effective+training%5BTitle%5D)+AND+%22Agric.+Food+Anal.+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Minimizing the risk of Listeria monocytogenes in retail delis by developing employee focused, cost effective training.</a> Agric. Food Anal. Bacteriol. 1, 159-174 (2011).</li>
<li>Koo, O. K., Sirsat, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physical+and+chemical+control+of+Salmonella+in+ready-to-eat+products%5BTitle%5D)+AND+%22Agric.+Food+Anal.+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Physical and chemical control of Salmonella in ready-to-eat products.</a> Agric. Food Anal. Bacteriol. 2, 56-68 (2012).</li>
<li>Hanning, I. B., Johnson, M. G., Ricke, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Precut+prepackaged+lettuce%3A+a+risk+for+listeriosis%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Foodborne+Pathog.+Dis%22%5BJournal%5D)">Precut prepackaged lettuce: a risk for listeriosis?</a> Foodborne Pathog. Dis. 5, 731-746 (2008).</li>
<li>Hanning, I. B., Nutt, J. D., Ricke, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salmonellosis+outbreaks+in+the+United+States+due+to+fresh+produce%3A+sources+and+potential+intervention+measures%5BTitle%5D)+AND+%22Foodborne+Pathog.+Dis%22%5BJournal%5D)">Salmonellosis outbreaks in the United States due to fresh produce: sources and potential intervention measures.</a> Foodborne Pathog. Dis. 6, 635-648 (2008).</li>
<li>Zhu, M., Du, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+Listeria+monocytogenes+contamination+in+ready%E2%80%90to%E2%80%90eat+meat+products%5BTitle%5D)+AND+%22Compr.+Rev.+Food+Sci.+Food+Safety%22%5BJournal%5D)">Control of Listeria monocytogenes contamination in ready‐to‐eat meat products.</a> Compr. Rev. Food Sci. Food Safety. 4, 34-42 (2005).</li>
<li>Lianou, A., Sofos, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+incidence+and+transmission+of+Listeria+monocytogenes+in+ready-to-eat+products+in+retail+and+food+service+environments%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">A review of the incidence and transmission of Listeria monocytogenes in ready-to-eat products in retail and food service environments.</a> J. Food Protect. 70, 2172-2198 (2007).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+risk+assessment+of+relative+risk+to+public+health+from+foodborne+Listeria+monocytogenes+among+selected+categories+of+ready-to-eat+foods%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Quantitative risk assessment of relative risk to public health from foodborne Listeria monocytogenes among selected categories of ready-to-eat foods.</a> , http://www.fda.gov/downloads(2003 Forthcoming.</li>
<li>Endrikat, S., Gallagher, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparative+risk+assessment+for+Listeria+monocytogenes+in+prepackaged+versus+retail-sliced+deli+meat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">A comparative risk assessment for Listeria monocytogenes in prepackaged versus retail-sliced deli meat.</a> J. Food Protect. 73, 612-619 (2010).</li>
<li>Pradhan, A. K., Ivanek, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+public+health+impact+of+Listeria+monocytogenes+product-to-product+and+environment-to-product+contamination+of+deli+meats+at+retail%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">Comparison of public health impact of Listeria monocytogenes product-to-product and environment-to-product contamination of deli meats at retail.</a> J. Food Protect. 74, 1860-1868 (2011).</li>
<li>Jones, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Handwashing+Technique+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Patent+number+5900067%22%5BJournal%5D)">Handwashing Technique Analysis.</a> Patent number 5900067. , (1999).</li>
<li>Gibson, K. E., Koo, O. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Observation+and+relative+quantification+of+cross-contamination+within+a+mock+retail+delicatessen+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Control%22%5BJournal%5D)">Observation and relative quantification of cross-contamination within a mock retail delicatessen environment.</a> Food Control. 31, 116-124 (2013).</li>
<li>Xiao, M., Zheng, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+and+System+for+Fecal+Detection%5BTitle%5D)+AND+%22Patent+number+5821546%22%5BJournal%5D)">Method and System for Fecal Detection.</a> Patent number 5821546. , (1998).</li>
<li>Waldroup, A., Kirby, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+and+System+for+Fecal+Detection%5BTitle%5D)+AND+%22Patent+number+5621215%22%5BJournal%5D)">Method and System for Fecal Detection.</a> Patent number 5621215. , (1997).</li>
<li>Ashby, K. D., Wen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+of+dietary+porphyrins+as+a+basis+for+real-time+detection+of+fecal+contamination+on+meat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Agric.+Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Fluorescence of dietary porphyrins as a basis for real-time detection of fecal contamination on meat.</a> J. Agric. Food Chem. 51, 3502-3507 (2003).</li>
<li>Cabrera-Diaz, E., Moseley, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent+protein+marked+Escherichia+coli+biotype+I+strains+as+surrogates+for+enteric+pathogens+in+validation+of+beef+carcass+interventions%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">Fluorescent protein marked Escherichia coli biotype I strains as surrogates for enteric pathogens in validation of beef carcass interventions.</a> J. Food Protect. 72, 295-303 (2009).</li>
<li>Byrd, J., Hargis, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent+marker+for+the+detection+of+crop+and+upper+gastrointestinal+leakage+in+poultry+processing+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Poult.+Sci%22%5BJournal%5D)">Fluorescent marker for the detection of crop and upper gastrointestinal leakage in poultry processing plants.</a> Poult. Sci. 81, 70-74 (2002).</li>
<li>Vorst, K. L., Todd, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transfer+of+Listeria+monocytogenes+during+mechanical+slicing+of+turkey+breast+bologna%2C+and+salami.%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Food+Protect%22%5BJournal%5D)">Transfer of Listeria monocytogenes during mechanical slicing of turkey breast bologna, and salami.</a> J. Food Protect. 69, 619-626 (2006).</li>
</ol>

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

המטרה הכללית של מחקר זה הייתה כדי להדגים כיצד זיהום לחצות חיידקים יכול להתרחש בסביבת מעדנייה הקמעונאי על מנת לפתח אסטרטגיות כדי לשלוט ולהפחית את הסיכון למחלה במזון. יש סביבת המעדנייה הקמעונאי סיכון גבוה במיוחד לL. חיידקי לזיהום. משרד החקלאות-FSIS דיווח כי יש בשר מעדנייה הפרוס בחנות קמעונאית עמותה גבוהה פי שבעה עם ליסטריה כי בשר מעדנייה פרוס וארוז במפעל נבדק פדרלי 9. שיטות מבוססות פלורסנט דווחו...

זיהום צולב של פתוגנים במזון בסביבת הכנת המזון, ובמיוחד בסעיף הקמעונאי, הוא דאגה העיקרית בשל סיכון מוגבר למחלה במזון ממגוון רחב של מקורות, כולל בשרים, כמו גם הירקות 1-5. לרוב, חיידקים פתוגנים להיכנס לסביבה הקמעונאית באמצעות מוצרי מזון מזוהמים 6. מזונות מוכנים לאכילה שהוכנו ברמה הקמעונאית, הם מדאיגים במיוחד כמו בדרך כלל אין שום התערבות או טיפול (כלומר בישול או חימום) עוד לפני הצריכה 7. יתר על כן, לאחר מכן ניתן להעביר פתוגנים הווה על מזון RTE מזוהם למוצרי מזון אחרים או משטחי מגע עם מזון בסביבת קמעונאית. בעוד זיהום לחצות יכול להתרחש בתוך כמעט כל הסוג של סביבת קמעונאות מזון, מעדניות הן בעלי עניין מיוחד דווקא בגלל הקשר של מעדני בשר RTE עם monocytog יסטריה הפתוגןEnes 2. בהתבסס על הערכת סיכוני ניתוחים שנערכו על ידי הרשות האמריקנית למזון והתרופות אמריקניות (FDA) והמחלקה לבטיחות מזון חקלאות ופיקוח שירות (USDA-FSIS) בארה&quot;ב, מעדני בשר מזוהם צפוי אחראי ל90% ממקרים של ליסטריה - נדיר מחלות של בני אדם עדיין חמורות הנגרמות על ידי ל חיידקי - בארצות הברית 8. באופן כללי, מעדני בשר הפרוס במפעלי שירות הקמעונאי ואוכל היה קשור לסיכון גבוה יותר של L. חיידקי בהשוואה למעדני בשר presliced ​​במפעל בדק משרד החקלאות האמריקאי על ידי היצרן 9. זה יכול להיות בגלל הסבירות המוגברת של הקדמה של פתוגנים על ידי מפעיליו מזון, חומרי גלם נכנסים, או מזון מעובד שעשויה להיות מזוהם לאחר טיפול 7. בסך הכל, ליסטריה מהווה כ 28% ממקרי המוות שנגרמו על ידי מחלה המוערכת במזון בשנה בארה&quot;ב בגלל בסיכון מקומט של L. חיידקי לזיהום במעדני הבשר הפרוס ברמה הקמעונאית, מבצעה המעדנייה עצמו זוהה כגורם חשוב להעברת שטח של פתוגנים במזון בסביבה הקמעונאית 2,10. כפי שצוין על ידי 1 שין, חיתוך הוא צעד העיבוד האחרון שלפני הצריכה, ולכן מבצעה המעדנייה צריך להיחשב נקודת בקרה קריטית להבנה ומניעת זיהום צולב 1. המטרה הכללית של מחקר זה הייתה לפתח מתודולוגיה למעקב אחר זיהום בסביבת המעדנייה הקמעונאי באמצעות אבקת ניאון כגון Glo נבט. זהו מתחם ניאון שכבר נעשה שימוש כדי לדמות זיהום לחצות חיידקים ושיטות סניטריות 11,12. מחקר זה תוכנן כדי לעקוב אחר העברת הפתוגן מבשר מזוהם למבצעה, את סביבתו, ומעדני בשר אחר. זה חיוני כדי להבין את המסלולים של המשךamination לפתח שני התערבויות יעילות וחומר חינוכי לעובדים ולמנהלים הקמעונאי. גישה דומה יכולה להיות מועסק כדי לדמות העברת הפתוגן בסביבות אחרות עיבוד (לדוגמא עופות ובקר), חוות ובתי חולים.

<table><tbody><tr><td>Glo Germ Powder</td><td>Glo Germ Co</td><td></td><td>נרכש מהספק</td></tr><tr><td>אתנול</td><td>Sigma</td><td>E7023</td><td></td></tr><tr><td>סמנים קבועים</td><td>Sharpie</td><td></td><td>נרכש מחנות נייחת</td></tr><tr><td>כפפות</td><td>VWR</td><td>82026-424</td><td></td></tr><tr><td>Deli Meat</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Bologna Chub מחנות מכולת רגילה</td></tr><tr><td>קרש חיתוך</td><td>NA</td><td>NA</td><td>קרש חיתוך למטבח regukar</td></tr><tr><td>סכין</td><td>NA</td><td>NA</td><td>סכין מטבח רגילה&nbsp;</td></tr><tr><td>תבניות סטריליות בגודל 5 ס"מ על 5 ס"מ</td><td></td><td></td> NA <td>תבניות רדיד אלומיניום חתוכות לתבניות בגודל 5 ס"מ על 5 ס"מ ומעוקרות&nbsp;</td></tr><tr><td>15 מ"ל צינורות צנטריפוגה מפוליפרופילן</td><td>VWR</td><td>89039-664</td><td></td></tr><tr><td>צמר גפן</td><td>פוריטן</td><td>25-806</td><td></td></tr><tr><td>קובטות זכוכית</td><td>VWR</td><td>470019-186</td><td></td></tr><tr><td>מערבולת</td><td>VWR</td><td>58816-121</td><td></td></tr><tr><td>מצלמת Flip</td><td>Ultra HD</td><td>NA</td><td>נרכש באינטרנט</td></tr><tr><td>פורס מעדנייה</td><td>Bizerba</td><td>SE-12</td><td></td></tr><tr><td>מקרר מעדנייה</td><td>True Company</td><td>TDBD-722</td><td></td></tr><tr><td>בקנה מידה</td><td></td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>ספקטרופוטומטר</td><td>Milton Roy Company</td><td>NA</td><td>Spectronic 20D</td></tr></tbody></table>

מעקב מיקרוביאלית זיהום בסביבות קמעונאיות באמצעות פלורסנט אבקה - קמעונאות מעדני סביבת דוגמא

Tracking Microbial Contamination in Retail Environments Using Fluorescent Powder - A Retail Delicatessen Environment Example

זיהום צולב של פתוגנים במזון בסביבה הקמעונאית הוא בעיה משמעותית בבריאות הציבור לתרום לסיכון מוגבר למחלה במזון. מזון מוכן לאכילה (RTE) מעובד כגון מעדני בשר, גבינה, ובמקרים מסוימים תוצרת טרייה, היה מעורב בהתפרצות מחלות במזון עקב זיהום עם פתוגנים כגון חיידקי ליסטריה. עם כל כבוד לL. חיידקי, מכונה לחיתוך בשר מעדנייה הם לעתים קרובות המקור העיקרי של זיהום לחצות. מטרתו של מחקר זה הייתה להשתמש במתחם ניאון כדי לדמות זיהום חיידקים ולעקוב אחר זיהום זה בסביבה קמעונאית. מטבח מעדנייה מדומה שנועד לדמות את סביבת קמעונאית. בשר המעדנייה היה מחוסן עם מתחם הניאון ומתנדבים גויסו כדי להשלים סדרה של משימות דומה לאלה צפויים של עובד קמעונאות מזון. המתנדבים קבלו הוראה לחתוך, חבילה, ולאחסן את הבשר במקרר מעדנייה. הפוטנציאלזיהום לחצות היה במעקב בסביבה הקמעונאית מדומה על ידי ניגוב אזורים ספציפיים ומדידת הצפיפות האופטית של אזור swabbed עם ספקטרופוטומטר. התוצאות הצביעו על כך שאחיזת המקרר (כלומר מעדנייה מקרה) ובאזורים שונים במבצע היו בסיכון הגבוה ביותר לזיהום לחצות. התוצאות של מחקר זה עשויות לשמש לפיתוח חומרי הדרכה ממוקדים יותר לעובדים הקמעונאי. בנוסף, יכולים לשמש גם מתודולוגיות דומות כדי לעקוב אחר זיהום מיקרוביאלי בסביבות ייצור מזון (למשל משקים קטנים), בתי חולים, בתי אבות, ספינות שייט, ובתי מלון.

איור 1 מייצג את תחומי המבצע שחוטאו לאחר המתנדבים השלימו את המשימות שהוקצו. המתנדבים צולמו בוידאו כדי לנתח את התדירות של מגע יד הממוצעת על אלה משטחים שונים. התדירות של מגע יד נותחה על ידי ארבעה משקיפים שונים וממוצעת. תוצאות אלה הראו באיור 2. הנתונים מראה כי אחיזת הבשר, עטיפת בשר מעדנייה, בשר מעדנייה ונייר מעדנייה היה השיעור הגבוה ביותר של מגע יד (ממוצע של 8-14 אנשי קשר). בעקבות זא...

המטרה הכללית של מחקר זה הייתה כדי להדגים את מנגנון זיהום לחצות הפוטנציאלי של חיידקי ליסטריה הפתוגן במזון בהגדרת מעדנייה הקמעונאי. מתודולוגיה זו ניתן ליישם במגוון רחב של סביבות שונות כדי לעקוב אחר זיהום הפתוגן.

Cross contamination of foodborne pathogens in the retail environment is a significant public health issue contributing to an increased risk for foodborne ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא להדגים את מנגנון זיהום הצולב הפוטנציאלי של הפתוגן המועבר במזון, *Listeria monocytogenes*, בסביבת דלי קמעונאית. דבר זה מושג תחילה על ידי תכנון מטבח דלי מדמה כדי לסמלץ את הסביבה הקמעונאית.בשלב השני, מזון מעובד (נקניקים) מוחדר בתרכיב פלואורסצנטי, ולאחר מכן מתבקשים מתנדבים לפרוס, לארוז ולאחסן את הבשר המצופה במקרר. בשלב הסופי, מעקב אחר זיהום צולב פוטנציאלי יתבצע באמצעות תצפית על התרכיב הפלואורסצנטי תחת אור שחור. לבסוף, ניתן להשתמש בספקטרומטריה כדי לכמת את התרכיב הפלואורסצנטי, ובכך להדגים כיצד מתרחש זיהום צולב בסביבת מכירת מזון מעובד.היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות המשתמשות במיקרואורגניזמים הוא שבאמצעות טכניקה זו, ניתן לכמת את התרכובת הפלואורסצנטית במהירות באמצעות פוטומטריה ספקטרלית. למרות ששיטה זו יכולה לספק תובנות לגבי קמעונאות, ניתן ליישם את בטיחות המזון גם במערכות אחרות כגון חוות קטנות, מפעלי עיבוד מזון ומפעלי שירותי מזון אחרים. התחילו בהנחת כפפות נקיות ו-70% ethanol על הדלפק לשימוש במהלך הפרוצדורה.לאחר מכן, השתמש בסכין ובקרש חיתוך נקיים כדי לפרוס את נקניקי המזנקים לשלוש דגימות בעובי של כ-100 millimeter. לאחר מכן, השתמש בספוג נקי ולח מעט כדי לצפות באופן אחיד דגימה אחת באבקה פלורסצנטית שהוכנה טרי. לבסוף, עטוף את כל הדגימות בניילון נצמד והשתמש בסרט דביק כדי לסמן את הדגימה המצופה באבקה פלורסצנטית כ-a ואת שתי הדגימות הנותרות כ-b ו-c.לאחר מכן, הניחו את הדגימות בטמפרטורה של 4 °C והתקינו נורות פלורסצנט קומפקטיות שחורות בעלות נורות של 13 watt מסביב לאזור הפרוסה. גזרו ריבוע של 5x5 סנטימטר של נייר אלומיניום שישמש כתבנית לסבבי דגימה, ובשלב זה מלאו גם מבחנות של 1315 milliliter ב-6 mL של 95% ethanol. לאחר מכן, התקינו שלוש מצלמות וידאו במיקומים אסטרטגיים כדי לצפות בכל אזורי הדלי המדומה בו-זמנית.כדי לעקוב אחר זיהום נקניקי הבית של המשתתפים באמצעות אבקה פלואורסצנטית, הפעילו את המצלמות כדי להקליט את המשתתפים במהלך הפרוצדורה וצלמו תמונה של דלגט הבית המדומה תחת תאורה פלואורסצנטית שחורה. לאחר מכן, הנחו כל משתתף לבצע את השלבים הבאים. ראשית, הוציאו את דגימת הבשר המסומנת באות A מהמקרר.בשלב הבא, הסירו את עטיפת הבשר, שמרו את נייר הנצמד, והניחו את הדגימה על מגש ההובלה של הפרוסה. הדקו את הדגימה בעזרת תפס הבשר, לאחר מכן הפעילו את הפרוסה וכוונו את כפתור מדד הפריסה למספר שתיים. כעת, פרסו והניחו חמש פרוסות בשר על נייר הנייר למזון, לאחר מכן כבו את המכשיר ושחררו את תפס הבשר.הניחו את פרוסות הבשר בשקית פלסטיק המסומנת באות A, ולאחר מכן עטפו מחדש את דגימת הבשר והחזירו אותה למקרר, לאחר פריסת דגימות B ו-C כפי שהודגם זה עתה לאחר צילום המטבח המדומה. כדי לכמת את זיהום אבקת הפלואורסצנט, הניחו את תבנית נייר האלומיניום הסטרילית על כל אחד מהאזורים המצוינים בתמונה. לאחר מכן, דגמו כל אזור באמצעות מקלון סיבי כותנה של calcium alginate סטרילי, טבול ב-95%Ethanol, והניחו מקלון אחד בכל אחת מהמבחנות המכילות 95%Ethanol.ערבבו כל מבחנה היטב במערבל Vortex, ולאחר מכן העבירו את התוכן לקוובטות זכוכית נפרדות. מדדו את הבליעה של כל דגימת swab ב-370 nanometers, ולאחר מכן השתמשו בנוסחה כדי לחשב את כמות האבקה הפלורסצנטית שנדגמה מכל אזור. לבסוף, צפו בסרטון כדי לכמת את מספר הפעמים שבהן נגעו במשטחים השונים של דגם השולחן.בניסוי מייצג זה, מתנדבים צולמו בווידאו כדי לנתח את התדירות הממוצעת של מגע ידיים על משטחים שונים של מכשיר פריסת הבשר במהלך הכנת פרוסות הבשר. לאחר מכן, צופים שונים ניתחו את הווידאו ותדירות מגע הידיים חושבה לממוצע. הנתונים מעידים כי כמצופה, לאחיזת הבשר, לעטיפת הבשר, לבשר למאכל ולנייר הבשר היו שיעורי מגע הידיים הגבוהים ביותר, עם ממוצע של שמונה עד 14 מגעים למשתתף.משטחים, כגון המקרר, שולחן האחיזה, תופס הבשר, להב הפרוסה ורכיבים שונים של מגש ההובלה, נדגמו באמצעות מטוש, וכמות האבקה הפלורסצנטית על הרכיבים השונים של הפרוסה ובמטבח המדמה נמדדה כמותית. כפי שהודגם זה עתה, התוצאות היו כמצופה. התוצאות הצביעו על כך שרמות הזיהום הגבוהות ביותר נמצאו במקרר, בתופס, בתופס הבשר ובלוחות האחוריים.בעת ביצוע הליך זה, חשוב לזכור להפעיל את מצלמות הווידאו בו-זמנית כדי להבטיח שצילומי התמונות מסונכרנים. שיטה זו יכולה לסייע במתן מענה לשאלות מפתח בתחום בטיחות המזון, כגון כיצד מתרחשת זיהום צולב, וניתן לפתח שיטות הדרכה יעילות בהתבסס על תוצאותינו.

tracking-microbial-contamination-retail-environments-using

Research

JoVE Journal

Environment

סביבה

פרוטוקול זה מתאר גישה פשוטה דבק, סרט המבוסס על מדגם של עגבניות ושאר משטחים תוצרת טרייה, ואחריו איתור מהיר של כל...

שילוב של הדגימה דבק קלטת מבוססי פלואורסצנטי באתרו הכלאה עבור איתור מהיר של סלמונלה על תוצרת טרייה

אנו מתארים שיטה זמנית לצורך זיהוי של מיקרואורגניזמים בתוך מדגם באמצעות חרוזי ניאון oligonucleotide מצמידים. Amplicon מכל האורגניזמים בתוך מדגם הוא הכלאה בפני פאנל של בדיקה, בשילוב חרוזים. מכשיר Luminex או Bio-Plex משמש עבור כל שאילתת חרוז חרוז סוג האות הכלאה.

Multiplex זיהוי של חיידקים דוגמאות מורכבות קלינית הסביבה באמצעות oligonucleotide מצמידים פלורסנט microspheres

דיווחנו לאחרונה גישה חדשנית להפקת בדיקות DNAzyme fluorogenic כי ניתן להחיל על הקמת פשוט, "תמהיל-and-לקרוא" assay ניאון לגילוי חיידקי. אלו בדיקות דנ"א מיוחד לזרז את המחשוף של מצע ה-DNA-RNA-chromophore שונה chimeric בנוכחות תערובת תאי גולמי (CEM) המיוצר על ידי חיידק מסוים, ובכך לתרגם את גילוי החיידק לדור אותות הקרינה. בדוח זה נתאר את הליכי הניסוי העיקריים שבהם בדיקה DNAzyme מסוים כונה "RFD-EC1" מועסק לצורך זיהוי של החיידק...

זיהוי של חיידקים באמצעות DNAzymes Fluorogenic

סרטון זה מדגים טכניקה לזיהוי מזהמים חיידקיים בדגימות מזון ומים באמצעות ננו-חיישנים. חיידקי המטרה הפתוגניים מזוהים באמצעות שילוב של הרפיה מגנטית ושיטות פליטה פלואורסצנטיות.

זיהוי זיהום חיידקי באמצעות ננו-חיישנים מגנטו-פלואורסצנטיים

פרוטוקול הכולל ריכוז משולב, העשרה וזיהוי קולורימטרי של נקודת קצה של פתוגנים הנישאים במזון בכמויות גדולות של מים חקלאיים מוצג כאן.  המים מסוננים באמצעות Modified Moore Swabs (MMS), מועשרים במדיה סלקטיבית או לא סלקטיבית, והזיהוי מתבצע באמצעות התקנים אנליטיים מבוססי נייר (μPAD) המשובצים במצעים קולורימטריים אינדיקטיביים חיידקיים.

מבוסס נייר Colorimetric איתור של<em&gt; חיידקי Escherichia</em&gt;,<em&gt; סלמונלה</em&gt; Spp., ו<em&gt; חיידקי ליסטריה</em&gt; מכמויות גדולות של מים לחקלאות

פרוטוקול מבוסס PCR הותאם לאיתור Cronobacter spp., Salmonella enterica ו-Listeria monocytogenes ממשטחי גוף ותעלות עיכול של זבובים בודדים שנלכדו בטבע. מטרת פרוטוקול זה היא לזהות ולבודד פתוגנים חיידקיים מחרקים בודדים שנאספו כחלק מתוכנית דגימה סביבתית במהלך חקירות התפרצויות הנישאות במזון.

איתור של foodborne פתוגנים חיידקיים מזבובי הפרט Filth

תפקידו של מבחר (הפרדה מרחבית) בתרחישים האבולוציונית ניתן לבדוק באמצעות מערכות חיידקים פשוטה במעבדה המאפשרים נשלט התאמת הפריסה המרחבית. על ידי שינוי צפיפות התאים המייסדים, רמות מבחר שונות ניתן מדמיינות באמצעות זני חיידקים שכותרתו fluorescently ב biofilms המושבה של Bacillus subtilis.

ניטור מרחבי הפרדה Surface מיישבים אוכלוסיות מיקרוביאליות

המטרה הכוללת של פרוטוקול זה לסנתז nanosensors תפקודית עבור ניידים, חסכוני, זיהוי מהיר של דווקא בחרו חיידקים פתוגניים באמצעות שילוב של הרפיה מגנטי ואופני פליטת קרינה פלואורסצנטית.

והקאה הפתוגן הקרנה באמצעות מגנטו-פלורסנט ננו-חיישן: איתור מהיר של e. Coli O157:H7

המטרה של פרוטוקול זה היא לזהות שונים Clostridium הפרסטריגנים טוקנוסוגים של מזון מקומי נרכש, במיוחד אפסילון רעלן ייצור סוגי זן B ו-D, ללא שימוש בתאי אנאירובית.

העשרה ואיתור הפרסטרידיום של רעלים בדגימות מזון קמעונאי

פלואור שתייגת אנטיביוטיקה הם כלים רבי-עוצמה שניתן להשתמש בהם כדי ללמוד היבטים מרובים של עמידות מיקרוביאלית. מאמר זה מתאר את הכנת אנטיביוטיקה מתויג fluorescently היישום שלהם כדי ללמוד עמידות לאנטיביוטיקה בחיידקים. רגשים יכולים לשמש כדי לחקור מנגנונים של עמידות חיידקים (למשל, אפלוקס) על ידי ספקטרופוטומטר, זרימה cy try, ו מיקרוסקופ.

ויזואליזציה של עמידות בקטריאלי באמצעות הפלורסנט אנטיביוטי רגשים

הפרוטוקול מסכם את שיטות העבודה המומלצות למזעור העומס הביולוגי המיקרוביאלי בסביבת חדר נקי וכולל אסטרטגיות כגון ניטור סביבתי, ניטור תהליכים ובדיקת סטריליות מוצרים. הוא רלוונטי למתקני ייצור ובדיקה הנדרשים לעמוד בתקני פרקטיקה של רקמות טובות ובתקני שיטות ייצור טובות הנוכחיים.

אסטרטגיות בקרה וניטור מיקרוביאליות עבור סביבות חדרים נקיים וטיפולים תאיים

למדו מעקב אחר זיהום חוצה של Listeria monocytogenes בסביבות קמעונאיות באמצעות אבקה פלורסנטית. שיטה זו מאפשרת זיהוי וכימות מהיר של מסלולי הדבקה במטבחי דליקטסן לשיפור בטיחות המזון.

מעקב מיקרוביאלית זיהום בסביבות קמעונאיות באמצעות פלורסנט אבקה - קמעונאות מעדני סביבת דוגמא

גלה סרטונים נוספים